转录因子FOXR2对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨下调或过表达FOXR2对脑胶质瘤细胞增殖能力的影响。方法以正常脑组织标本为模板,PCR法克隆FOXR2基因,并构建FOXR2过表达质粒;Western blot法检测FOXR2在胶质瘤细胞系中的表达水平。用慢病毒系统构建稳定下调及过表达FOXR2的脑胶质瘤细胞株;CCK8实验检测下调或过表达FOXR2对胶质瘤细胞增殖速率的影响。结果成功克隆FOXR2基因;WB检测结果显示稳定下调FOXR2的U251细胞株及过表达FOXR2的U87细胞株构建成功。CCK8实验结果表明,与对照组相比,96 h后下调FOXR2的胶质瘤细胞增殖速率减少45.13%;相反,过表达FOXR2后,胶质瘤细胞的增殖速率可增加43.98%。结论转录因子FOXR2可促进胶质瘤细胞的增殖。

HOTAIR通过靶向抑制miR-152上调FOXR2调控前列腺癌细胞的增殖和凋亡

目的观察明确FOXR2对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其潜在作用机制。方法通过实时定量荧光PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western印迹)检测FOXR2在前列腺癌临床样本中的表达水平。运用CCK8增殖试剂盒和Annexin V-FITC凋亡试剂盒,流式细胞术检测FOXR2敲低前后前列腺癌细胞增殖和凋亡的变化。结合微小RNA(microRNA)芯片结果预测与FOXR2相互作用的miR-152,并通过荧光素酶报告基因检测miR-152对FOXR2基因的靶向性调控作用。利用软件预测,qRT-PCR技术明确HOTAIR与miR-152的相关性。结果FOXR2在前列腺癌组织中高表达,其mRNA表达水平是癌旁组织的4.9倍(4.94±0.51比1,00±0.24);蛋白水平也明显上调。在PC3细胞系中,特异性敲低FOXR2会抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡。芯片结果及荧光素酶报告基因检测显示,miR-152能够调控FOXR2的表达;FOXR2 3' UTR有两个miR-152的结合位点,且都能调控FOXR2的表达。LNCediting及qRT-PCR技术提示HOTAIR与miR-152表达呈负相关,在前列腺癌中参与调控miR-152的表达水平。结论HOTAIR通过靶向抑制miR-152上调FOXR2促进前列腺癌细胞增殖并抑制其凋亡。