PICK1对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的检测蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICKl)在肝癌、癌旁组织中的表达,初步探讨PICK1对人肝癌细胞HepG2增殖的作用及其可能机制。方法应用qRT-PCR、Western blot、HE和免疫组织化学染色法分析比较人肝癌和癌旁组织中PICK1蛋白的表达;培养HepG2细胞,体外给予不同浓度的FSC-231(PICK1的PDZ结构域小分子抑制剂),通过MTT法检测HepG2细胞的活力;采用流式细胞术检测HepG2细胞周期变化;进一步采用Western blot法检测G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)、原癌基因C-myc和Notch信号通路蛋白表达。结果肝脏病理组织学检测提示肝癌组织病变明显。免疫组化结果显示,肝癌组织中相比癌旁组织中的PICKl抗原阳性细胞显著增多(P<0.05),且多分布在肝实质细胞质区域;qRT-PCR和Western blot结果显示肝癌组织中PICK1 mRNA及蛋白水平与癌旁组相比显著升高(P<0.05);体外实验证明,与阴性对照组相比,FSC-231能够抑制HepG2细胞的增殖,并且明显抑制CyclinD1、C-myc和Notch1同源蛋白1(Notch1)、Hes-1蛋白表达(P<0.05)。结论提示PICK1可能参与肝癌的发生发展,PICK1的PDZ结构域抑制剂可以抑制肝癌细胞的增殖,此作用可能与Notch信号通路相关。