作用于FTase和Raf-1激酶的新型抗肿瘤药物的设计

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路,在肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、转移、代谢等过程中起着重要的作用,本文着眼于Ras/Raf/MEK/ERK信号通路中的关键靶点,以法尼基转移酶(FTase)为主靶点,以Raf-1激酶为次靶点,借助计算机辅助药物设计(CADD),构建法尼基转移酶抑制剂(FTIs)和Raf-1激酶抑制剂的药效团模型,设计出同时与这两个靶点相匹配的多靶点配体药物。所设计的多靶点配体药物以氨甲基苯甲酸为母核结构,具有较好的预测活性。

EBV相关胃癌ras基因突变及法尼基转移酶β-亚单位基因的表达

目的:探讨EBV相关胃癌(EBVaGC)、EBV阴性胃癌(EBVnGC)及相应癌旁组织中ras基因突变和法尼基转移酶(FTase)的表达意义.方法:应用PCR-RFLP技术检测EBVaGCs13例、EBVnGCs45例以及相应癌旁组织58例中H-ras12和K-ras12,13密码子点突变情况;RT-PCR技术检测FTaseβ亚单位mRNA的表达水平.结果:共检测到H-ras12位点突变2例,突变率为3.45%(2/58),均发生在EBVnGCs,未发现K-ras12和13密码子点突变.58例癌组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.93±0.39,癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.78±0.26,两者有显著性差异(t=2.44,P=0.02).EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.80±0.19,EBVnGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.96±0.43,两者无显著性差异(t=1.93,P=0.06);EBVaGCs和癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t=0.54,P=0.60);EBVnGCs和癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平有显著性差异(t=2.39,P=0.02);2例BHRF1阳性和11例BHRF1阴性EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t=0.26,P=0.80);6例BARF1阳性和7例BARF1阴性EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平亦无显著性差异(t=1.59,P=0.14).结论:胃癌组织ras基因突变率较低,胃癌组织中FTaseβ亚单位mRNA明显高于癌旁组织.EBVaGC组织中ras基因突变、FTaseβ亚单位表达与EBV感染无明显相关性.

7-(咪唑-4-烷基酰胺基) -1,3-二氢-1-羧基烷基-5 -苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮——一类新的法呢基蛋白转移酶抑制剂(英文)

目的 设计并合成新结构类型的法呢基蛋白转移酶抑制剂。方法 本文结合法呢基蛋白转移酶(FTase)的作用机理和已有FTase抑制剂结构特征 ,设计了一类以苯并二氮杂为分子骨架 ,一端连接有可与锌离子配位结合的咪唑基 ,另一端连接不同长度的末端含羧基的侧链的化合物。此类化合物模拟了FTase配体之一CAAX四肽片段 ,共合成 10个此类新化合物 (6～ 12 ,16～ 18) ,并对其进行体外生物活性测定。结果所有新目的化合物均经1HNMR和HRMS方法确证结构。结论 对FTase抑制活性测定结果表明其中 5个化合物 (9,10 ,16～ 18)有较强的抑制活性。

游离及固定化果糖基转移酶部分酶学性质的比较研究

从诱变、筛选的米曲霉GX0 0 10菌株所产生的果糖基转移酶 ,经过纯化和固定化操作分别制备游离酶和固定化酶 ,对两者的酶学性质进行了比较研究 .结果表明 ,两者在蔗糖转化为蔗果低聚糖的酶促反应中 ,最适pH为 5 5,在pH5 0～ 7 5之间酶活性相对稳定 .游离酶和固定化酶的适宜温度范围分别是 4 5～ 52℃和 4 0～ 55℃ .在 55℃保温 60min ,酶活性保存率分别是 61 6%和 87 5% .固定化酶的热稳定性提高 .0 1mmol LHg2 +和 1mmol LAg+能完全抑制游离酶的活性 ,但只能部分抑制固定化酶的活性 ,1mmol L的Ti2 +能完全抑制两者的活性 .以蔗糖为底物时 ,游离酶的米氏常数Km=2 15mmol L ,而固定化酶Km =386mmol L .游离酶只能使用一次 ,固定化酶反复使用 54次后 ,剩余活力为 55 2 % .用 55% (W V)蔗糖溶液与固定化酶在pH5 0 ,4 6℃下作用 12h ,可获得61 5% (总低聚糖 总糖 )产物 ,其中蔗果五糖含量达到 7 2 % .

基于分子模拟技术何首乌中蒽醌类法尼基转移酶抑制剂的筛选

目的:以法尼基转移酶(farnesyltransferase,FTase)为载体,阐释何首乌蒽醌类化合物抗肿瘤作用的分子机制并筛选其中具有抑制FTase活性的化合物。方法:利用Common Feature Pharmacophore Generation(Hiphop)模块构建定性药效团,并根据评价参数获得最优药效团,利用最优药效团虚拟筛选何首乌蒽醌类化合物;利用分子对接技术精制筛选结果获得活性化合物并对活性化合物进行分析,以阐释何首乌蒽醌类化合物抗肿瘤作用的分子机制。结果:最优药效团模型包含3个疏水基团、2个氢键受体以及5个排除体积,其有效命中率(HRA)为92.47%、辨识有效性指数(IEI)为2.250、综合评价指数(CAI)为2.080。利用最优药效团筛选何首乌蒽醌类成分,初步获得3个潜在的蒽醌类活性成分;利用分子对接技术进一步筛选,得到大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素-8-O-(6'-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷等3个化合物。结论:大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素-8-O-(6'-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷能够抑制FTase的活性,是何首乌中蒽醌类化合物抗肿瘤的重要组分。