FXR2酵母双杂交饵载体的构建及酵母菌转化

目的构建FXR2酵母双杂交系统的“饵”质粒,并转化酵母菌,为筛选FXR2P互作蛋白作基础。方法提取pMD18-T-FXR2,酶切后将FXR2基因连接到MATCHMAKERLexATwo-HybridSystem中的plexA质粒上,得到“诱饵”(Bait)-plexA-FXR2,导入大肠杆菌扩增,筛选阳性克隆并提取重组Bait质粒,再转入酵母菌EGY48(p8op-lacZ)。结果通过遗传学方法筛选得到构建成功的plexA-FXR2;通过营养缺陷筛选,证明Bait重组质粒转入酵母菌中。结论成功构建Bait质粒并使酵母菌转化。

FXR基因家族

FXR基因家族是与脆性X综合征发病相关的一个基因家族。有3个家族成员。在进化上高度保守，氨基酸序列高度相似，有共同的功能结构域：两个KH结构域、RGG盒、NES和NLS。能够与RNA和多聚核糖体结合。通过NES和NLS携带其mRNA在细胞核和细胞质之间穿梭。不同的蛋白亚型其组织分布各异。该家族成员在大脑和神经发育过程中发挥重要作用，影响认知过程和智力发育。

麦柴方抑制FXR/CDX2表达治疗反流性食管炎机制研究

目的研究麦柴方对食管上皮细胞FXR/CDX2表达的影响,以阐释其治疗反流性食管炎的机制。方法将食管上皮细胞暴露于酸性环境中制作反流性食管炎模型,采用Western-Blt法分别测定正常组、模型组和给药组FXR/CDX2水平,并通过统计分析研究各组中上述水平的差异。结果模型组中,FXR/CDX2水平较正常组显著升高(P<0.05);给药组FXR/CDX2水平较模型组显著降低(P<0.05,除低剂量组CDX2表达外),且高剂量组上述数值与正常组没有显著性差异(P>0.05)。结论麦柴方可以通过抑制FXR/CDX2表达治疗反流性食管炎。