中药四性的生物热动力学研究——左金丸与反左金寒热药性的微量热学比较

目的 :从生物物理和生物化学的角度 ,探讨中药药性的客观真实性。方法 :利用微量热法 ,测定了大肠杆菌在左金丸、反左金水煮液作用下的生长热谱曲线 ,得到了相应的生物热动力学参数 ,结合本草文献报道 ,综合分析了左金丸与反左金的药性差异。结果 :左金丸、反左金水煮液均能不同程度地抑制细菌的生长 ,温热药方反左金使细菌指数生长期的生长速率常数显著减小 ,生长代谢过程中热量释放显著增加。寒凉药方左金丸则使细菌指数生长期的生长速率常数减小 ,生长代谢过程中热量释放有所增加 ,两者存在较稳定的差异。结论 :微量热法可作为刻划中药药性的有效的新方法。

左金丸及反左金丸对实验性大肠癌不同时期甲基转移酶表达的影响

目的:探讨左金丸及反左金丸对大肠癌发生、发展的干预作用,及在大肠癌不同时期对甲基转移酶表达的影响.方法:在180只大鼠左肩胛骨侧皮下注射1,2-二甲基酰肼(1,2-DMH)25mg/kg,每周1次,连续注射12wk.随机将大鼠分为3组:左金丸组、反左金丸组和对照组.从第1次注射DMH的第2天开始,左金丸组和反左金丸组每天以中药汤剂1.4g/kg灌胃,对照组灌服同等体积的生理盐水,每日1次,连续34wk.分别在第11、21、34周,每组取部分大鼠脱颈处死,通过病理学观察左金丸和反左金丸对大鼠大肠癌发生发展的干预作用,实时荧光定量PCR法检测不同肿瘤发展时期Dnmt1、Dnmt3a及Dnmt3bmRNA的表达.结果:左金丸和反左金丸均能在肿瘤发生的早期显著抑制癌症的进程,左金丸作用优于反左金丸,但后期(34wk),二者的作用不明显.对照组和中药组Dnmt1、Dnmt3a表达没有明显变化.对照组中Dnmt3b的表达明显高于中药组(4.784vs2.613,P<0.01),且随癌变进程的深入,Dnmt3b表达量增高.结论:左金丸和反左金丸均可以有效阻碍早期大肠癌的发生和发展.Dnmt3b参与了组织恶变的过程,其表达的调控可能是中药干预肿瘤进程的机制之一.

微量量热法研究左金丸与反左金丸对肠道菌群生长代谢的影响

目的从生物热动力学角度研究左金丸、反左金丸对肠道菌群生长代谢的影响,验证其客观差异性,探讨类方研究的新方法。方法采用微量量热法测定小鼠肠道菌群在不同浓度的左金丸、反左金丸作用下的生长代谢热谱曲线,以特征参数生长速率常数(k)、最大发热功率(Pmax)及达峰时间(Tp)、总产热量(Qt)和细菌抑制率(I)为指标,综合评价左金丸与反左金丸的活性差异。结果左金丸与反左金丸作用下的肠道菌群,随着药液浓度的增加,达峰时间Tp均延长;而左金丸与反左金丸对肠道细菌生长速率常数k值的影响却不同,与空白对照组比较,二者作用下的k值均减小,即两者均抑制肠道细菌的生长;由抑制率I可知,左金丸抑菌活性大于反左金丸。结论左金丸与反左金丸的抑菌活性存在客观差异性;微量量热法具有实时、在线、灵敏的特点,可快速、准确地评价类方的活性差异。

微量热法考察“配伍-煎煮”顺序对左金丸与反左金药性的影响

目的从生物物理与生物化学的角度,探讨黄连和吴茱萸"配伍-煎煮"顺序对左金丸和反左金药性的影响。方法采用微量热法,测定大肠埃希菌在黄连和吴茱萸"配伍-合煎"组及"分煎-配伍"组的左金丸和反左金水煎液作用下的生长热谱曲线,获得相应的生物热动力学参数。根据热动力学模型,拟合药物的k^c和I%~c关系,定量计算药物的半抑制浓度(IC50)。结合本草文献报道,分析"配伍-煎煮"顺序对左金丸和反左金药性的影响。结果黄连和吴茱萸"配伍-煎煮"顺序对左金丸和反左金药性有一定影响。反左金对细菌生长有促进作用,而左金药液均能抑制细菌的生长,"分煎-配伍"组左金丸水煎液的IC50(5.63 mg.mL-1)明显小于"配伍-合煎"组左金丸水煎液的IC50(7.40mg.mL-1)。表明"分煎-配伍"组的药物对大肠埃希菌的抑制作用强于"配伍-合煎"组。结论微量热法可用于考察黄连和吴茱萸"配伍-煎煮"顺序对左金丸和反左金药性的影响。

大鼠胃寒证模型造模方法探索

将大鼠分为空白组、模型组、反左金丸组后,模型组及反左金丸组以冰水灌胃3周,之后予冰水灌胃联合凉水泡浴2周,诱导大鼠胃寒模型形成,反左金丸组每日予反左金丸汤剂灌胃,持续5周。第6周,每组抽取12只大鼠麻醉处死后取胃,部分胃体固定后石蜡包埋并切片,进行组织学检查,部分胃组织进行酶联免疫吸附实验,观察IL-2的浓度。剩余存活大鼠用于观察模型持续时间。造模后,大鼠出现明显胃炎病变,大鼠体征和药物反证结果均符合胃寒模型指标,病理检测等结果证明以冰水灌胃结合凉水泡浴的方法可建立大鼠胃寒模型。