Fas/Apo-1(CD95)系统与细胞凋亡研究新进展

Ｆａｓ／Ａｐｏ－１（ＣＤ９５）系统与机体免疫功能和细胞凋亡的关系十分密切，近几年来一直是免疫学家和临床医师关注的热点。本文综述了Ｆａｓ／Ａｐｏ－１ 在Ｉｐｒ突变小鼠和在胸腺Ｔ 细胞发育中研究的新进展，重点阐述了Ｆａｓ／Ａｐｏ－１ 系统诱导凋亡的分子机理。

肾病综合征患者血清sAPO-1/Fas(CD95)和IL-2检测的临床意义

目的 检测肾病综合征患者血清sAPO 1/Fas (CD95 )和IL 2。方法 采用双抗体夹心ELISA法。结果 肾病综合征患者血清中的sAPO 1/Fas(CD95 )明显高于正常对照组 ,而IL 2明显低于正常对照组。结论 提示肾病综合征患者除免疫功能低下外 ,血清sAPO 1/Fas含量较高 ,可能阻止APO 1/Fas配体诱导的细胞凋亡。

尼古丁对人牙周膜成纤维细胞中Fas/Apo-1(CD95)表达的影响

目的:研究尼古丁(nicotine)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)中Fas/Apo-1(CD95)表达的影响。方法:采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞并传代取处于对数生长期的第6代细胞用于实验,采用浓度为2mg/L的尼古丁处理第6代牙周膜成纤维细胞72h,通过免疫组织化学染色法检测尼古丁对人牙周膜成纤维细胞中Fas表达的情况。结果:证实尼古丁作用于人牙周膜成纤维细胞后,胞膜中Fas/Apo-1(CD95)抗原呈阳性表达。结论:提示尼古丁可通过Fas系统这一途径导致人牙周膜成纤维细胞的凋亡,从而加重牙周组织破坏的程度和影响牙周组织的再生。

APO－1／Fas（CD95）分子研究进展

ＡＰＯ－１／Ｒａｓ为Ｉ型跨膜糖蛋白，分子量４５ＫＤ，属于ＮＧＦ／ＴＮＦ受休家族，广泛分布于多种组织中，与之结合的配体及单克隆抗休均可诱导细胞凋亡。已发现ＡＰＯ－１／Ｆａｓ参与了胸腺细胞选择，ＣＴＬ效应、免疫应答调节等多项生理活动，与自身免疫疾病的发生联系密切，与肿瘤的生长和转移也潜在相关，提示ＡＰＯ－１／Ｆａｓ和相应配体的相互作用可能是机体维持自身稳定的一条重要途径。第五届国际白细胞抗原会议命名ＡＰＯ－１／Ｆａｓ为ＣＤ９５。

Fas/Apo—1(CD95)系统与大肠癌

Fas/Apo-1(CD95)系统与机体免疫和细胞凋亡(apontosis)关系十分密切,其诱导细胞凋亡的作用早在1991年就已被肯定.细胞凋亡是多细胞机体为调控机体发育,维护内环境稳定,由基因调控的细胞主动死亡过程.目前发现细胞凋亡不仅调节着细胞生长与更新的平衡稳定,而且在相关基因参与下与大肠癌的发生发展密切相关.现对Fas/FasL诱导细胞凋亡功能以及其与大肠癌的关系综述如下.

在非小细胞肺癌中Fas(APO-1/CD95)基因的改变及与P53的关系

Fas(APO-1/CD95)家族具有在生理和病理方面调节细胞死亡的作用。Fas配体通过和细胞膜表面的Fas受体结合诱导细胞凋亡。目前主要在免疫系统研究Fas家族的重要作用。Fas突变可能是阻止凋亡的机制之一,也可能与非淋巴系统恶性疾病发病有关。为更好地研究Fas家族在非小细胞肺癌(NSCLC)中的作用,作者选取102例NSCLC肿瘤组织和44例周围正常组织,通过多聚酶链反应表达Fas和Fas配体mRNA。

hFIST/HIPK2在Fas/FasL和TNF/TNFR1介导的凋亡信号转导途径中的作用

目的 探讨hFIST/HIPK2在Fas/FasL介导的凋亡信号转导途经中的作用。方法 应用瞬时转染技术 ,将全长序列hFIST/HIPK2、Fas(CD95 /Apo 1)、TNFR1、FADD、TRADD、caspase 8cDNAs转染入 2 93T细胞中 ,应用免疫沉淀技术、WesternBlotting技术检测hFIST/HIPK2与以上凋亡相关蛋白的相互作用。结果 hFIST/HIPK2与Fas、TNFR1、FADD、caspase 8无相互作用 ,与TRADD有相互作用 ,且Fas、TNFR1竞争性抑制这种相互作用。在有FasL存在及无FasL存在时 ,Fas均可与FADD相互作用 ;Fas与TRADD有相互作用。结论 hFIST/HIPK2与TRADD有相互作用 ,Fas与TRADD有相互作用 ,hFIST/HIPK2可能间接参与了Fas/FasL。

寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞Fas和FasL的表达

目的:检测寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞Fas和FasL的表达。方法:随机采集30例寻常型进展期白癜风患者(实验组)外周血3mL,分离T淋巴细胞后进行细胞涂片,使用免疫组化和原位杂交方法检测Fas和FasL蛋白和FasLmRNA水平的表达。并以30例静止期患者(对照组A)和20例健康志愿者(对照组B)作对照。结果:3组间Fas的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与两组对照组相比,实验组FasL的表达明显增加(P<0.001)。与对照组B相比,对照组AFasL的表达显著增加(P<0.001)。结论:寻常型进展期白癜风患者外周血T淋巴细胞FasL的表达显著增加。

牛Fas基因的组织表达分析及其功能预测

采用RT-PCR技术从中国西门塔尔牛睾丸组织总RNA中反转录FascDNA,将其克隆于pMD19-Tvector后进行测序分析,并对其表达的蛋白结构功能进行预测、分析。结果表明:牛的FascDNA序列为1109bp,编码323个氨基酸残基,在氨基酸序列上与羊、猪、人、小鼠的相似性分别为90.5%、65.3%、56.7%和48.6%。Fas蛋白的胞外区有2个糖基化位点和3个富含半胱氨酸残基的结构亚域,对Fas蛋白的定位及凋亡信号识别有重要作用。牛与羊、猪、人、小鼠Fas的死亡结构域(Death domain,DD)氨基酸序列的相似性分别为94.3%、68.5%、59.6%和70.8%,体现了该结构在各物种间较强的保守性及接受凋亡信号诱导靶细胞凋亡的重要性。组织表达谱发现,Fas不仅表达于牛的淋巴、脾等淋巴系统,而且高表达于牛生殖系统的睾丸中,这对于进一步阐明Fas在公牛精子发生过程中的调控作用奠定基础。

Fas/FasL在宫颈癌组织中的表达及意义

肿瘤不仅是增殖和分化异常的疾病,同时也是凋亡异常的疾病,肿瘤常表现出细胞增生亢进及凋亡减少。Fas/FasL系统是凋亡相关基因[1,2]。Fas,又名CD95或APO-1,属于肿瘤坏死因子受体（TN-FR）和神经生长因子受体（NGFR）家族。人Fas基因定位于第10号染色体长臂2区（10q24.1）,包含8个内含子和9个外显子。Fas配体（Fasl）,又称CD95L,

虎纹蜘蛛毒素-I对全脑缺血再灌注大鼠海马神经元Fas凋亡通路的抑制作用

目的:探讨虎纹蜘蛛毒素-I(HWTX-I)与由Fas分子启动的死亡信号转导通路之间的关系及可能的神经保护作用分子机制。方法:48只SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组及用药组三组,每组16只,采用改良的Pulsinelli"四血管阻断法"并结合蛛网膜下腔置管术构建全脑缺血再灌注损伤大鼠模型。免疫组织化学法检测海马组织CA1区Fas、FasL、FADD蛋白水平表达,RT-PCR法检测海马组织死亡信号转导通路相关因子Fas、FasL、FADD核酸水平表达。结果:免疫组化法检测结果显示,生理盐水组、用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达高于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);RT-PCR检测结果显示,假手术组Fas、FasL、FADDmRNA表达低于生理盐水组和用药组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL、FADDmRNA表达均低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:HWTX-I蛛网膜下腔用药对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织具有一定的神经保护作用,其机制可能是通过抑制Fas分子启动的死亡信号转导通路激活而发挥作用。

抗APO-1单克隆抗体诱导HL-60抗药株细胞凋亡

肿瘤细胞对化疗药物的抗性，包括抵制药物诱导的凋亡，是临床肿瘤化疗效果差的主要原因之一。Fas／APO-1(CD95)是一个接收特异细胞凋亡信号(apoptotic signal）的受体分子。位于细胞膜表面。属于TNFR／NGFR家族，国外学者报道Fas／APO-1的天然配体FasL和识别Fas／APO-1的单克隆抗体均可激发表达该分子的正常T、B细胞和多种肿瘤细胞凋亡(apoptosis)，

Fas抗原分子

Fas抗原，又称APO-1或CD95，是一种319个氨基酸组成的Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子和神经生长因子受体超家庭成员。Fas抗原表达于各种细胞，如活化的T，B细胞，NK细胞，胸腺细胞，恶性的T、B细胞，成纤维细胞等。人与小鼠的Fas基因分别定位于第10号及第19号染色体。Fas抗原的天然配体是一种Ⅱ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子家族成员，其主要分布于活化的T细胞。Fas抗原及配体系统异常的两种小鼠Lpr与gld表现自身免疫病理变化。抗Fas抗体或表达Fas配体的细胞交联Fas抗原，可诱导细胞凋亡，提示Fas／Apo──1抗原是细胞凋亡过程中重要信号传递分子。Fas抗原诱导的细胞凋亡在调控免疫细胞的发育，增殖及免疫应答中起主导作用。已经证实Fas系统在T细胞的发育，细胞毒作用及细胞毒性T介导自身免疫病中发挥重要作用。而且抗Fas抗体或Fas配体可诱导肿瘤细胞凋亡。Fas抗原系统的研究将有助于阐明自身免疫病发病机制，开辟肿瘤治疗的新途径。

Fas/FasL系统、杀伤性DC与免疫耐受

免疫应答不仅受到细胞增殖和分化的调节 ,而且受到程序性细胞死亡 (凋亡 )的调节。有研究认为 ,Fas FasL系统可能在调节DC的凋亡中起作用。然而现在大多数研究者持相反的观点 ,认为刺激DC表面的Fas即触发DC表面的Fas信号可以使DC发生表型成熟和功能活化 ,因而在FasL转染的DC(杀伤性DC)对它本身的影响和诱导免疫耐受的作用方面也存在争议。本文就Fas FasL系统的免疫学特点、Fas FasL系统与DC的关系和杀伤性DC诱导免疫耐受的研究等方面作一综述。

LMP1调控的细胞生存与死亡程序及其在抗肿瘤免疫中的意义(英文)

EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)基因组编码数种恶性转化必需的蛋白质,如潜伏期膜蛋白1(latent membraneprote in1,LMP1)。LMP1能上调抗凋亡的蛋白质以支持病毒的复制,同时也能增强细胞凋亡,提示一种病毒的蛋白质既能支持病毒的生存,亦能刺激宿主的防御机制,导致受感染的细胞裂解。病灶浸润的CD8阳性T淋巴细胞通过合成Fas配体等效应分子发挥抗肿瘤免疫功能。作为一种核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)依赖性的分子,Fas可被LMP1诱导。根据我们报道的LMP1对刺激物依赖性的细胞凋亡调节模型,LMP1能增强Fas诱导的细胞凋亡。有结果显示,Fas配体介导的细胞毒性对于EBV相关的鼻咽癌具有明显的治疗效果。近来也有报道提示,影响Fas介导细胞凋亡的基因突变可显著地降低个体对肿瘤的易感性。我们认为,在肿瘤细胞精确地调控Fas水平的细胞因子疗法,仍有可能增强癌症患者的抗肿瘤免疫。

乐尔脉对脑缺血再灌注损伤后期大鼠海马神经细胞凋亡的作用

目的:探讨乐尔脉胶囊(LEM)对脑缺血再灌注损伤后期大鼠海马神经细胞凋亡的作用与机制。方法:采用大鼠左侧大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)造成局灶性脑缺血再灌注模型。缺血2h再灌注30d后,应用原位末端标记法(TUNEL)检测海马神经细胞凋亡,免疫组化、RT-PCR法检测海马神经细胞Fas、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白及mRNA的表达,并进行阳性细胞计数及Mias图像程序分析结果。结果:大鼠缺血再灌注30d后,模型组缺血侧海马CA1、CA2区凋亡细胞显著高于假手术组(P<0.05),Fas、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达明显增加,fas、bax、caspase-3、caspase-9mRNA的表达上调(P<0.05)。LEM2.00g/kg、0.87g/kg和氟桂利嗪可显著减少海马神经细胞凋亡数,降低Fas、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达,fas、bax、caspase-3、caspase-9mRNA的表达下调,LEM0.87g/kg作用次于2.00g/kg。LEM对baxmRNA有显著抑制作用。结论:LEM抑制海马神经细胞的凋亡,明显地减轻缺血再灌注后期大鼠海马神经细胞的损伤,其作用机制与调节细胞凋亡信号转导通路及相关蛋白有关。

人Fas抗原及其变异体的结构与功能

Fas(Apo- 1/CD95 )属 TNFR/NGFR家族 ,为“死亡受体”,因为其介导凋亡的作用倍受人们关注。目前对 Fas抗原及其基因的结构与功能研究已较为清楚 ,Fas的变异体及 Fas基因突变的形成和功能研究也取得一定的进展。