长期饮酒大鼠缺血脑组织Fas-L抗原表达的动态研究

目的 研究长期饮酒大鼠局灶性脑缺血后 Fas- L 抗原在各时间段的表达与正常大鼠脑缺血同一时间段有何不同。方法 7.2 %酒精代水自由饮用 12周的大鼠用线栓法制备局灶性脑缺血模型 ,用免疫组织化学法测定 Fas- L 抗原表达阳性细胞。结果 长期饮酒组大鼠缺血 1h Fas- L 抗原呈阳性 ,3h达高峰 ,6 h减少 ,而正常组大鼠 Fas- L 阳性表达随缺血时间增加而出现增多的趋势。结论 长期饮酒大鼠在脑缺血后 Fas- L 的表达比正常大鼠脑缺血明显 ,且促使凋亡细胞迅速坏死。

β-榄香烯通过Fas/FasL信号通路调控胶质瘤细胞增殖和凋亡

目的探讨β-榄香烯通过Fas/Fas L信号通路对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法以人胶质母细胞瘤U87细胞系为研究对象,分为空白对照组和β-榄香烯实验组。采用细胞毒性试验分析β-榄香烯对U87胶质瘤细胞的细胞毒性作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测β-榄香烯对胶质瘤的增殖能力的影响;流式细胞仪(FCM)及Caspase活性试剂盒检测细胞凋亡;流式细胞术检测胶质瘤细胞周期;实时定量PCR、Western blot法检测细胞内Fas、Fas L的表达水平。结果胶质瘤细胞系的细胞毒性作用随着β-榄香烯浓度增加而增强,IC50为45.73μg/m L;流式细胞仪分析β-榄香烯作用于U87细胞,阻滞周期于G1/S期;β-榄香烯作用于U87胶质瘤后Fas和Fas L的mRNA和蛋白表达水平上升;β-榄香烯作用于胶质瘤细胞有抑制增殖作用,并呈浓度和时间依赖性。结论β-榄香烯可能通过上调Fas/Fas L通路的表达水平,抑制胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡。

芪丹通脉片对脑缺血-再灌注大鼠神经细胞凋亡及Fas-L蛋白表达的影响

目的观察芪丹通脉片对脑缺血-再灌注大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Fas-L蛋白表达的影响。方法采用Longa报道的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和芪丹通脉片组,并予相应处理以TUNEL法检测各组大鼠脑组织神经细胞凋亡,以免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测各组大鼠脑组织Fas-L蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达增多;与模型组相比,芪丹通脉片组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达减少。结论芪丹通脉片可下调Fas-L蛋白的表达,从而抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,这可能是芪丹通脉片对脑缺血再灌注损伤起神经保护作用的机制之一。

清开灵干预新生大鼠缺氧缺血脑皮质白介素-6及Fas-L蛋白的实验研究

目的探讨缺氧缺血脑损伤对新生大鼠HIBD脑皮质IL-6放射免疫浓度,Fas-L蛋白表达的影响,及清开灵对新生大鼠HIBD的干预治疗作用以及有关分子机制。方法建立HIBD动物模型后分为放射免疫法测定组和免疫组化测定组,每组又分为清开灵干预组、生理盐水对照组、假手术组,根据检测需要,在缺氧缺血后24 h,3 d,7 d作IL-6脑皮质匀浆放射免疫浓度测定、Fas-L蛋白免疫组化SP法测定。结果①脑皮质组织匀浆IL-6放射免疫浓度(pg/ml)假手术组、生理盐水组、清开灵干预组:24 h依次为50.1±6.2,56.3±7.1,51.3±6.8;3 d依次为50.6±6.4,250.3±11.2,78.1±8.3;7 d依次为51.4±6.6,345.7±12.3,81.2±9.2,生理盐水组与另两组分别比较,24 hP均>0.05,无明显变化;3,7d生理盐水组增加明显?P<0.05)清开灵干预组降低明显?P<0.05)。②③④左脑皮质Fas-L蛋白表达阳性率假手术组、生理盐水组、清开灵干预组:24 h依次为8.04±3.50,120.20±6.10,21.10±5.10;3 d依次为8.20±3.10,87.6±5.90,13.40±4.20;7 d依次为8.01±2.80,8.32±2.90,8.26±2.83;生理盐水组与另两组分别比较,7 dP均>0.05,无明显变化;24 h,3 d增多明显(P<0.05),清开灵干预组降低明显(P<0.05)。结论①新生大鼠HIBD后24 h,3 d,7 d脑皮质IL-6含量逐渐增高。②清开灵能降低新生大鼠HIBD脑皮质IL-6的产生量。③新生大鼠HIBD后,结扎侧脑皮质fas-L蛋白表达增高。④清开灵能抑制新生大鼠HIBD结扎侧脑皮质fas-L蛋白的高表达。

长期饮酒大鼠缺血脑组织中Fas-L抗原表达及细胞凋亡的动态研究

目的研究长期饮酒大鼠局灶性脑缺血后Fas-L抗原和细胞凋亡在各时间段的表达。方法7.2%酒精代水自由饮用12周的大鼠用线拴法制备局灶性脑缺血模型,在缺血后不同时间(1,3,6 h)分别以免疫组织化学方法和TUNEL法动态检测Fas-L抗原表达和细胞凋亡情况。结果长期饮酒组大鼠缺血1 h,Fas-L抗原和凋亡细胞呈阳性,3 h达高峰,6 h减少。结论长期饮酒大鼠在脑缺血后Fas-L的阳性表达和细胞凋亡比正常大鼠脑缺血明显,且促使凋亡细胞迅速坏死。

老年原发性干燥综合征患者干扰素-γ、Fas、FasL检测的意义

目的探析干扰素(INF)-γ、Fas、Fas L在原发性干燥综合征(p SS)老年患者中的检测意义。方法确诊的尚未接受治疗的40例初诊p SS患者为PSS组,同期接受口外伤手术的22例女性健康者作为对照组。采用SP法检测INF-γ、Fas、Fas L的表达水平。比较两组唇腺腺泡、唇腺导管的上皮细胞中INF-γ、Fas、Fas L的阳性表达率,并对INF-γ、Fas、Fas L行两两相关性分析。结果 p SS组唇腺腺泡、唇腺导管上皮细胞中INF-γ、Fas、Fas L的阳性表达率均明显比对照组高(P均<0.01)。唇腺腺泡的上皮细胞中,INF-γ与Fas呈正相关(r=0.83,P<0.01);INF-γ与Fas L呈正相关(r=0.46,P<0.05);Fas与Fas L呈正相关(r=0.62,P<0.01)。结论 INF-γ、Fas、Fas L很可能在p SS的整个发生发展过程中扮演了重要的角色,并在唇腺组织中异常表达。

Fas和β-雌二醇受体融合基因在L929细胞中的表达及活性鉴定

利用ＰＣＲ方法将人Ｆａｓ基因的信号肽、跨膜区、胞内区与人β－雌二醇受体的激素结合结构域基因融合，并插入高效真核表达载体ｐｃＤＮＡ３。用脂质体法转染Ｌ９２９细胞，加入Ｇ４１８４周后，筛选出的转化细胞经Ｗｅｓｔ－ｅｒｎｂｌｏｔ检测证明，该融合基因在Ｌ９２９细胞中得到较高表达。ＭＴＴ法检测进一步表明，在培养基中加入β－雌二醇可有效地诱导转化细胞发生凋亡，ＩＣ５０为１０－１０ｍｏｌ／Ｌ。

瘦素对缺氧复氧L02肝细胞凋亡及Fas／FasL表达的影响

目的:观察瘦素(leptin)对缺氧复氧人正常肝细胞(L02)凋亡的影响。方法:将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12 h复氧组(IR组)和缺氧12 h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L和1 600μg/L)干预组,以流式细胞仪分析、DNA缺口末端标记(TUNEL)试验、荧光定量PCR等方法观察leptin对L02肝细胞凋亡、Fas/FasLmRNA表达的影响。结果:(1)与正常对照组相比,IR组细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率增加(P<0.01),加用不同浓度瘦素干预组的细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率与IR组相比明显下降(P<0.05);(2)与正常对照组相比,IR组L02细胞中Fas/FasLmRNA表达明显上调(P<0.01);加用不同浓度瘦素干预组与IR组相比,Fas/FasLmRNA表达下降,以400μg/L瘦素作用明显,结果有显著差异(P<0.05)。结论:瘦素能减轻缺氧复氧培养L02肝细胞的凋亡,其机制可能与其下调细胞中Fas/FasLmRNA的表达有关。

五味子乙素对H_2O_2损伤人肝细胞Fas通路的影响

目的建立H2O2诱导氧化的L02人肝细胞模型,从细胞凋亡调控因子FAS、具有死亡功能区的Fas相关蛋白（fas associateddeath domain protein,FADD）和Caspase-8的表达变化来研究五味子乙素（Sch B）对L02细胞的可能作用机制。方法用实时荧光定量PCR法检测FAS、FADD和Caspase-8 mRNA的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测FAS蛋白含量,Westernblotting检测FADD蛋白变化和分光光度法检测Caspase-8活性。结果在5~15μmol/L剂量范围内,Sch B可剂量依赖性抑制H2O2引起的FAS、FADD的表达和Caspase-8的活化。结论 Sch B可部分抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响了FAS-FADD-Caspase-8通路。

Fas及Fas-L在宫颈腺癌组织中的表达

目的 探讨Fas及Fas L在宫颈腺癌中表达的意义。方法 36例宫颈腺癌组织及其癌旁正常宫颈腺上皮用免疫组织化学方法进行Fas及Fas L检测 ,DNA原位末端标记 (TUNEL)检测凋亡细胞。结果 TUNEL标记指数与肿瘤分化程度呈正相关趋势 ,低分化腺癌明显低于高、中分化腺癌(P <0 .0 5 ) ,高、中分化腺癌间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。Fas在宫颈腺癌组织中的表达阳性率为86 .1% ,在癌旁正常宫颈腺上皮仅 3例有低表达 ,其余均为阴性 ;宫颈腺癌组织Fas表达强度与肿瘤分化程度呈负相关 (P <0 .0 5 )。Fas L在宫颈腺癌组织中的表达阳性率为 10 0 % ,在癌旁正常宫颈腺上皮仅 1例有低表达 ,其余均为阴性 ;Fas L的表达与肿瘤分化程度无显著相关性 (P >0 .0 5 )。结论宫颈腺癌Fas的表达与肿瘤的恶性程度呈正相关 ,Fas L的表达可能与肿瘤逃避免疫监视有关。

5-氟尿嘧啶联合干扰素α对胃癌细胞的影响

目的:探讨化疗药物与细胞因子联合应用对肿瘤细胞增殖的影响。方法:首先MTT法测出不同浓度干扰素α(IFN)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞的抑制率,根据公式求出5-FU的半抑制浓度,然后用此浓度的5-FU与不同浓度的干扰素α配伍作用于胃癌细胞,用MTT法检测抑制率。用免疫细胞化学方法检测干扰素α、5-FU和干扰素α+5-FU作用组的p53、p27、PCNA、Fas-L蛋白的表达情况。结果:MTT检测结果未发现干扰素α明显抑制肿瘤细胞增殖作用;5-FU有抑制肿瘤增殖作用,且有浓度相关性;与5-FU作用组相比干扰素α+5-FU作用组的抑制率大于单纯5-FU组,且与配伍的干扰素浓度呈正相关性。之后的免疫组化试验发现IFNα+5FU组p53、p27、Fas-L蛋白表达的阳性率高于单纯的5-FU组的阳性率,更明显高于IFN组的阳性率,而PCNA蛋白则相反。结论:5-FU对SGC7901胃癌细胞有明显的抗增殖作用,IFNα未见明显的抗增殖作用,但这两药物联合应用时,IFNα明显增强5一FU的抗增殖作用;联合用药组的凋亡相关蛋白表达阳性率与5-FU组明显不同,IFNα增强5-FU的抗肿瘤增殖作用可能是由凋亡途径参与作用的。

白细胞介素-17在破骨细胞凋亡中的作用研究进展

Th17细胞在炎症状态下特征性分泌白细胞介素-17(IL-17),在不同机体环境下表现不同生物学特征。IL-17协同多种细胞因子通过上调Fas/Fas L,参与细胞凋亡。本文就IL-17细胞因子与破骨细胞凋亡相关关系的研究进展进行综述。

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对GC-2 spd细胞FasL蛋白及mRNA表达的影响

目的研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对GC-2 spd细胞FasL蛋白和mRNA表达的影响。方法将处于对数生长期的GC-2spd细胞,分别暴露于含终浓度为0(溶剂对照)、50、100、200μmol/L DEHP的培养液培养24 h。分别用q RT-PCR及Western blotting检测GC-2 spd细胞FasL mRNA和蛋白的表达。结果 100、200μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞FasL mRNA和蛋白的表达水平均高于溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且随着DEHP染毒浓度的升高,GC-2 spd细胞FasL mRNA和蛋白的表达水平呈上升趋势。结论 DEHP可能通过增强生精细胞FasL mRNA及蛋白表达,激活Fas/FasL信号通路,最终导致生精细胞凋亡。

中医药防治肺纤维化实验研究不同信号转导通路研究概述

肺纤维化是一种病因不清的慢性复杂性肺疾病,纤维化的过程是由多种细胞因子和多条细胞信号转导通路共同参与的慢性复杂性全身病理过程。中医药通过对肺纤维化的过程中所涉及的多条细胞信号转导通路的干预,进而起到相应作用。主要干预的细胞信号转导通路有Wnt信号转导通路、转化生长因子-β信号转导通路、胰岛素样生长因子信号转导通路、Fas/Fas L信号转导通路等。

遗传性共济失调的遗传及生化研究

文献报道遗传性共济失调已有60多种类型,通常为家族遗传性。近年研究发现本病可能有HLA 相关和非相关两型,并发现病人的神经递质和酶在量及代谢方面都发生改变。把症状学、病理发现和脑尸检的生化改变结合起来,将可进一步了解本病的异型和分类,并对患者的预后作出更准确的估计。

银屑病患者皮损中细胞凋亡情况的评价

目的 探讨细胞凋亡与银屑病的关系。方法 用免疫组化 SP法检测银屑病皮损与非皮损中 Bax、 Fas、 Fas－ L的表达，并用 TUNEL（末端脱氧核苷酰转移酶介导的 d－ UTP－生物素缺口末端标记）技术检测细胞凋亡情况。 结果 与正常人相比，银屑病表皮角质形成细胞，真皮炎症细胞及血管内皮均存在不同程度的上述蛋白的过度表达，伴细胞凋亡增多，部分在治疗后未完全恢复正常。 结论 推测银屑病皮损中角质形成细胞凋亡增多是针对细胞过度增殖的一种内在稳态机制，可能与 Bax , Fas及 Fas－ L等凋亡相关分子的异常表达有关，而 Fas系统还可能参与银屑病的局部免疫异常。