血清可溶性Apo-1/Fas水平对监测胃癌生物学行为和预后的临床价值

背景与目的:国内外研究检测发现一些恶性肿瘤血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平明显高于正常人,但有关化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究不多;本课题通过检测胃癌患者血清sApo-1/Fas水平及化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究,探讨其临床价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例胃癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并与30例正常人作对比分析。结果:胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与临床分期、细胞分化程度有关,与患者性别、年龄无关。Ⅳ期胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期(P<0.05～0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。中、高分化胃癌患者血清sApo-1/Fas水平低于低分化胃癌患者(P<0.05～0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前(P<0.01)。结论:血清sApo-1/Fas与胃癌的发生、发展相关,可作为胃癌生物学行为和预后的标记物。sApo-1/Fas有可能成为胃癌治疗的新靶点。

慢性阻塞性肺疾病患者血清Fas/Apo-1及TNF-α与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清可溶性(Fas)及(TNF-α)的变化及相关性。方法30例急性加重期和稳定期COPD患者、25例健康体检者,分别查血常规、测定肺功能,用ELISA法检测血清sFas及TNF-α浓度。结果发现COPD急性加重期组患者外周血中性粒细胞占白细胞总数百分比Neu/Leu%、sFas、TNF-α明显高于COPD稳定期组(P<0.01,P<0.05,P<0.01);COPD急性加重期组患者血清sFas、TNF-α明显高于健康对照组(P<0.05,P<0.01),且在急性加重期组中TNF-α与Neu/Leu%呈正相关(r=0.586,P<0.05)。结论COPD急性加重期及稳定期sFas和TNF-α水平显著升高,提示凋亡参与了COPD的发病,可能是引起肺内炎症细胞浸润及肺实质破坏的主要原因之一。

化疗对肝癌患者血清可溶性Apo-1/Fas水平的影响及其临床意义

目的:评价肝癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平变化的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及58例肝癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并作对比分析。结果:肝癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),Ⅲ期肝癌血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅱ期(P<0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前者(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与肝癌患者性别、年龄均无相关。结论:血清sApo-1/Fas可能参与调控肝癌的发生、发展过程,可作为化疗疗效和判断预后观察指标。

恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性Apo-1/Fas的检测及其临床意义

目的 :研究恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平变化及其临床意义。方法 :用 EL ISA法检测 15 7例恶性肿瘤患者和 2 5例正常对照组血浆以及 12 9例不同性质胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas浓度变化。结果 :恶性血液病中急性白血病、慢性白血病和多发性骨髓瘤 (MM)患者血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平均显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;慢性粒细胞白血病高于急性粒细胞白血病 ,慢性淋巴细胞白血病高于急性淋巴细胞白血病 (P<0 .0 5 ) ;急性白血病和 MM化疗完全缓解时 Apo- 1/ Fas水平显著下降 (P<0 .0 5 ) ,无效和复发病例均为高值。在实体恶性肿瘤中血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平也均显著高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且转移性癌显著高于非转移癌 (P<0 .0 1) ,术后好转或放疗后缓解患者较术前或放疗前明显回落 (P<0 .0 1) ,而术后复发转移患者显著升高 (P<0 .0 1)。恶性肿瘤患者胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显增高 ,并明显高于结核性和漏出性胸腹水 (P<0 .0 1)。结论 :恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显升高 ,并可能与肿瘤的发生、发展有关 ,观察其水平变化 ,有助于了解肿瘤的病理过程 ,鉴别胸腹水的不同性质。

食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的 探讨食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo 1/Fas(sApo 1/Fas)水平及其临床意义。 方法 应用酶联免疫吸附试验法 (ELISA)检测 4 9例食管癌患者化疗前后血清sApo 1/Fas水平 ,并同时检测 30例正常人血清sApo 1/Fas水平作对比分析。结果 食管癌患者血清sApo 1/Fas水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,血清sApo 1/Fas水平与临床分期有关、与食管癌患者性别、年龄、细胞分化程度无相关 ,Ⅳ期食管癌血清sApo 1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,Ⅲ期明显高于Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,化疗后有效 (完全缓解和部分缓解 )患者血清sApo 1/Fas水平明显低于化疗前 (P <0 .0 1)。 结论 血清sApo 1/Fas与食管癌的发生及发展有一定关系 ,检测血清sApo 1/Fas有可能成为食管癌辅助诊断、病情发展及化疗疗效观察的一项有价值的指标。

冬凌草乙素诱导GBC-SD细胞的凋亡及对Bcl-2、p53、Fas/APO-1、C-myc表达的影响

目的 探讨冬凌草乙素对人胆囊癌GBC SD细胞增殖抑制和诱导调亡的机制。方法 不同浓度的冬凌草乙素处理GBC SD细胞后 ,用MTT法检测GBC SD细胞的存活率 ,通过倒置显微镜、扫描电子显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计观察和分析凋亡细胞 ,用免疫组织化学法和流式细胞仪检测细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达。结果 冬凌草乙素浓度依赖性地抑制GBC SD细胞增殖及诱导其凋亡 ;药物作用 2 4h后 ,细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达有不同程度的下调 ;Caspase 3活性与凋亡程度相关。结论 冬凌草乙素抑制GBC SD细胞的增殖和诱导其凋亡与Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C

大骨节病患者血清NO、NOS、sFas/APO-1检测分析

目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、可溶性Fas(sFas)诱导大骨节病发生发展的作用与特点,为大骨节病防治研究提供新的思路。方法选择陕西省永寿县、榆林市榆阳区大骨节病区与咸阳市渭城区非大骨节病区120例调查对象,分为成人、儿童大骨节病组;成人、儿童病区对照组;成人、儿童非病区对照组,每组20例,平均年龄、性别无差别。用酶还原法检测了血清NO,化学比色法检测了血清NOS、iNOS,ELISA法检测了血清sFas水平。结果①大骨节病成人组血清NO、iNOS显著高于病区和非病区成人对照组(P< 0.05);血清NOS、sFas/APO鄄1水平高于非病区成人对照组(P< 0.005)。②大骨节病儿童组血清NO高于非病区儿童对照组(P< 0.05);血清NOS、iNOS均高于病区和非病区儿童对照组(P< 0.005)。结论儿童大骨节病发生发展中NO诱导途径起一定的作用,而Fas途径作用不明显。当疾病发展到成人大骨节病时,二者均起一定作用。

独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1的影响

目的:观察独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1(细胞凋亡抑制因子)的影响,探讨其治疗腰椎间盘突出症的机制。方法:将80例腰椎间盘突出症(肝肾亏虚型)患者随机分为治疗组和对照组各40例。对照组予以卧床休息、腰椎牵引、腰背肌功能锻炼、推拿、中药熏洗治疗。治疗组在对照组的基础上予独活寄生汤口服。治疗2周后观察两组患者Fas/APO-1变化,并评价疗效。结果:治疗2周后,治疗组Fas/APO-1值明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症有较好疗效,可能机制为降低Fas/Apo-l的升高。

bcl-2和Fas/Apo-1基因在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达

目的:观察凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因Fas/Apo-1在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达情况。方法:制备家兔心肌缺血-再灌注损伤(RI)、缺血预适应(IP)、持续缺血(CI)和control模型。实验方法:①采用免疫组织化学方法观察bcl-2基因表达。②采用逆转录扩增(PCR)方法观察Fas/Apo-1表达情况。结果:①免疫组化检测bcl-2基因蛋白标记阳性者,在病变边缘区,IP组为(46.5±11.0)%,CI组为(42.9±9.9)%,两者之间无明显差别(P>0.05),但均明显高于RI组(19.4±5.6)%和对照组(1.92±0.88)%(P<0.01);在病变中心区,IP组为(52.5±8.8)%,均明显高于RI组(32.2±10.2)%和CI组(28.0±10.2)%(P<0.01);而RI组与CI组之间比较则无显著性差异(P>0.05);在正常对照组分别仅为(1.92±0.88)%和(1.92±1.02)%,说明正常心肌中bcl-2无表达或弱表达。从自身不同部位对照来看,RI组在病变中心区bcl-2基因蛋白的表达明显强于边缘区(P<0.01);而IP组2个部位比较无明显差别(P>0.05);CI组则表现出病变边缘区bcl-2基因蛋白的表达增强(P<0.01)。②在RT-PCR方法观察Fas蛋白的表达中,可见凝胶电泳在control和IP组的心肌细胞中Fas基因蛋白的表达水平极低,在RI组和CI组的心肌细胞中则见Fas基因蛋白的表达明显增高(P<0.01);而对照β-actin基因的mRNA表达水平在各组基本一致,无显著性差异(P>0.05)。结论:缺血可诱发凋亡促进基因Fas/Apo-1基因蛋白的表达增强,而再灌注则加重这一过程。

康莱特注射液对肾癌细胞Fas/Apo-1、FasL和PCNA表达的研究

目的探讨康莱特注射液（KLT）对肾癌细胞（GRC－1）Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。材料和方法利用免疫细胞化学法分析KLT对肾癌细胞Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。结果免疫细胞化学证明康莱特注射液组GRC－1细胞Fas／Apo－1基因表达标记指数（LI）为74．6％，而空白乳组为21．2％。空白乳组和0．2mg／ml康莱特组GRC－1细胞无FasL基因表达改变，康莱特组GRC－1细胞PCNA表达的LI为15．2％，空白乳组GRC－1细胞几乎无PCNA表达。结论康莱特注射液的抗肾癌细胞作用可能是通过上调Fas／Apo－1和PCNA基因表达，对FasL基因表达没有明显的影响。

血清IL-8和sApo-1/Fas与乳腺癌患者临床病理学参数的关系

目的:探讨外周血IL-8和sFas在不同绝经状态、不同雌激素受体状态(ER)、不同转移情况的乳腺癌术后复发及转移患者中的表达及其临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法检测94例乳腺癌术后复发及转移患者和30例正常人的血清IL-8和sFas水平,并比较它们与绝经状态、ER状态、不同转移情况的关系以及化疗对其影响。结果:1)乳腺癌患者血清IL-8及sFas水平明显高于正常人(P<0.05)。2)血清IL-8与雌激素受体(ER)状态和骨转移关系密切:ER(-)者高于ER(+)者(P<0.05);有骨转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及肝、肺转移者(P<0.05)。3)血清sFas水平与绝经状态及肝、肺转移关系密切:绝经后患者高于绝经前患者(P<0.05);有肝、肺转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及骨转移者(P<0.05)。4)化疗后血清sFas水平较化疗前下降(P<0.05),而血清IL-8无明显变化。结论:血清IL-8和sFas水平与乳腺癌患者的生物学行为及预后有一定关系,值得进一步研究。

Caspase家族与Fas/APO-1介导凋亡的信号传导

Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导的细胞凋亡在多细胞生物免疫自稳、免疫耐受、免疫调控、免疫赦免（Ｐｒｉｖｉｌｅｇｅ）、免疫防御过程中具有极其重要的作用。对Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导凋亡的信号传导研究表明：一个命名为Ｃａｓｐａｓｅ的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（亦称ＩＬ－１β转化酶相关蛋白酶）家族成员是Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导凋亡信号传导途径的关键效应分子。本文对Ｃａｓｐａｓｅ家族成员与Ｆａｓ死亡受体介导凋亡信号传导的关系加以概述。

bcl-2和Fas/APO-1在宫颈癌的表达及其意义

目的 :探讨bcl 2和Fas/APO 1基因在宫颈癌患者血浆中的表达水平及与宫颈癌发生发展的关系。方法 :用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 2 1例宫颈癌患者血浆中bcl 2和Fas/APO 1基因的表达水平 ,与 18例宫颈正常妇女的表达水平比较。结果 :bcl 2在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (2 2 3.5 6 3± 1.6 19)U/ml(x- ±s) ,显著高于 18例宫颈正常者的 (6 6 .4 2 0± 1.4 0 1)U/ml(x- ±s) ,两者比较经t检验P <0 .0 5 ,差异有显著性 ;Fas/APO 1在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (5 2 0 .116± 1.15 8)ng /L(x- ±s) ,明显低于 18例宫颈正常者 (6 38 2 6 3± 1 2 4 1)ng/L(x- ±s) ,两者比较P <0 .0 5 ,差异有显著性。结论 :在宫颈癌中bcl 2高表达 ,而Fas/APO 1低表达 ,bcl 2和Fas/APO

Fas/APO-1基因真核表达质粒的构建

目的 :构建凋亡信号受体Fas/APO - 1基因真核表达质粒 ,为进一步研究Fas/APO - 1在肿瘤细胞凋亡中的作用提供物质基础。方法 :将质粒pBluscript-FascDNA酶切后 ,回收DNA片段并提纯 ;用连接酶连接到真核表达载体pBK CMV内 ,克隆出重组基因载体pBK FascDNA。结果 :原始质粒pBluscript-FascDNA及重组质粒pBK -FascDNA酶切后 ,凝胶电泳鉴定均含有大小正确的Fas/APO - 1碱基片段。结论 :本实验成功地构建了Fas/APO - 1基因的真核表达质粒。

慢性心力衰竭患者外周血中可溶性Fas/Apo-1、肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ水平的变化及美托洛尔对其影响

目的 :观察慢性心力衰竭 (心衰 )患者外周血中可溶性Fas/Apo 1、肿瘤坏死因子α (TNF α)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的变化及美托洛尔对其影响。 方法 :60例慢性心衰患者随机分为两组 ,常规治疗组 (n =3 0例 ) ,美托洛尔治疗组 (n =3 0例 )。分别采用酶联免疫吸附法及放射免疫法测定心衰患者治疗前后和 3 0例健康体检者 (正常对照组 )外周血中可溶性Fas/Apo 1及TNF α、AngⅡ水平。同时使用彩色超声心动图测定心衰患者左心室舒张末期内径和左心室射血分数。 结果 :心衰患者外周血中可溶性Fas/Apo 1、TNF α及AngⅡ水平较正常对照组显著升高 ,其中可溶性Fas/Apo 1水平与左心室射血分数、TNF α及AngⅡ无关 ,但与左心室舒张末期内径相关。治疗后美托洛尔组外周血中AngⅡ、TNF α及可溶性Fas/Apo 1水平较常规治疗组下降更明显。 结论 :可溶性Fas/Apo 1在慢性心衰的病理生理机制中起着重要作用 ,对心衰患者的左心室具有独立于TNF α及AngⅡ之外的影响。β受体阻滞剂用于治疗心衰除了可纠正内分泌紊乱外 。

凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌中的表达及与生物学特性的关系

目的 研究肿瘤凋亡调控基因Fas/APO 1、bcl 2在胆囊癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化法对 2 8例胆囊癌及其癌旁组织、2 0例胆囊息肉和腺瘤组织检测基因Fas/APO 1、bc1 2的表达 ,并分析它们与胆囊癌生物学特性的关系。结果 胆囊癌组织中bc1 2表达率与癌旁组织、息肉和腺瘤组织相比显著增高 ,而Fas/APO 1表达明显降低 (均P <0 .0 5 ) ;与肿瘤生物学特性的关系 ,bc1 2蛋白表达率在高、中分化组中明显低于低、未分化组 ,NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期低于Ⅳ、Ⅴ期 ,而Fas/APO 1蛋白表达则相反 (均P <0 .0 5 )。结论 bc1 2为胆囊癌细胞凋亡抑制基因 ,而Fas/APO 1则为促进基因 。

APO－1／Fas（CD95）分子研究进展

ＡＰＯ－１／Ｒａｓ为Ｉ型跨膜糖蛋白，分子量４５ＫＤ，属于ＮＧＦ／ＴＮＦ受休家族，广泛分布于多种组织中，与之结合的配体及单克隆抗休均可诱导细胞凋亡。已发现ＡＰＯ－１／Ｆａｓ参与了胸腺细胞选择，ＣＴＬ效应、免疫应答调节等多项生理活动，与自身免疫疾病的发生联系密切，与肿瘤的生长和转移也潜在相关，提示ＡＰＯ－１／Ｆａｓ和相应配体的相互作用可能是机体维持自身稳定的一条重要途径。第五届国际白细胞抗原会议命名ＡＰＯ－１／Ｆａｓ为ＣＤ９５。

充血性心力衰竭sFas/APO-1与心肌重塑的相关性及培哚普利的影响

目的观察充血性心力衰竭(CHF)患者sFas/APO-1与心肌重塑的变化及培哚普利对其的影响,探讨培哚普利改善CHF患者心功能的可能机制。方法选择CHF患者56例,随机分组,A组(26例)为常规治疗组,B组(30例)在常规治疗基础上加用培哚普利(4mg,Qd)治疗共3个月,分别于0、3个月末采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA法)测定血清sFas/APO-1水平,采用超声心动图诊断方法测定左心室收缩末径(LVESD)、左心室舒张末径(LVEDD)、每搏输出量(SV)和左心室射血分数(LVEF)等,另设健康对照组20例。结果心力衰竭患者血清sFas/APO-1水平明显高于健康对照组,培哚普利组治疗3个月后,较常规治疗组血清sFas/APO-1水平明显下降,LVESD、LVEDD明显减低,SV与LVEF明显升高,差异均有统计学意义;sFas/APO-1水平与LVEF呈负相关。结论培哚普利可明显改善CHF患者心肌重塑与心功能,其作用机制可能与降低血清sFas/APO-1水平有关。

外阴营养不良中fas/apol-1表达的生物学意义

目的探讨外阴营养不良组织中fas／apol-1（CD95）表达与其发病机理的关系。方法采用流式细胞仪检测42例外阴营养不良新鲜组织中fas／apol－1的表达，并取10例正常外阴组织作对照。结果硬化性苔癣组织中fas／apol－1的表达明显高于对照组及鳞状细胞增生混合性营养不良组织中的表达（P＜0．01）。磷状细胞增生组织中fas／apol－1的表达和混合性营养不良组织中fas／apol-1的表达相比较无统计学意义。结论fas／apol-1诱导的调亡与外阴营养不良有密切的关系。

培哚普利对充血性心力衰竭患者血清Fas/Apo-1水平的影响

目的 :观察培哚普利对充血性心力衰竭 (CHF)患者细胞凋亡抑制因子Fas/Apo 1的影响 .方法 :酶联免疫方法检测 84例CHF患者 (培哚普利治疗 4 2例、常规治疗 4 2例 )治疗前、后及 30例健康人血清中Fas/Apo 1水平 .结果 :①与健康人相比 ,84例CHF患者Fas/Apo 1水平显著升高 [分别为(0 .10± 0 .0 4 ) μg·L-1和 (0 .2 0± 0 .0 7) μg·L-1,P <0 .0 1],CHF患者Fas/Apo 1水平随着心功能损害加重而升高 ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;②培哚普利组与常规治疗组治疗前Fas/Apo 1水平两组间无显著差异 [分别为(0 .2 0± 0 .0 7)μg·L-1和 (0 .2 1± 0 .0 7) μg·L-1];与常规治疗组相比 ,培哚普利组治疗后血清中Fas/Apo 1降低更为明显 [分别为 (0 .12±0 .0 4 ) μg·L-1和 (0 .15± 0 .0 5 ) μg·L-1,P <0 .0 1].结论 :CHF患者血清中Fas/Apo 1水平可反映心力衰竭的严重程度 ,培哚普利改善CHF患者心脏功能的作用可能与其抑制心肌细胞的凋亡的机制有关 .