Survivin在子宫内膜癌中的表达及其与Fas/Fas-L表达相关性的研究

目的探讨生存素(Survivin)在子宫内膜癌组织中的表达及其与Fas、Fas-L表达的相关性。方法应用S-P免疫组化染色法检测Survivin、Fas及Fas-L蛋白在46例子宫内膜癌中的表达,同时选9例子宫内膜非典型增生及12例正常子宫内膜组织作为对照。结果Survivin在子宫内膜癌中表达率为65.2%,明显高于正常子宫内膜中的表达率25%(P<0.05)。Fas在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为52.2%和84.6%(P<0.05)。Fas-L在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为78.3%和33.3%(P<0.05)。Fas蛋白表达阳性、阴性者子宫内膜癌组织中,Survivin表达阳性率分别为45.8%、81.8%,两者间具有明显的负相关(P<0.05);而Fas-L表达阳性、阴性者中,Survivin表达率分别为75%、30%,两者之间具有明显的正相关(P<0.05)。结论Survivin引起的细胞凋亡抑制,在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用,Survivin与Fas、Fas-L有关。

Fas/Fas-L介导血管细胞凋亡的研究进展

凋亡是一系列主要以Caspase-8、Caspase-3为主的半胱氨酸蛋白酶激活的程序性死亡过程,Caspase可被Fas等细胞表面死亡受体和细胞内线粒体介导的级联反应这两种基本的信号转导通路激活。随着研究的深入,Fas/Fas-L介导的血管细胞的凋亡越来越受到学者的关注,已经成为血管疾病领域的研究热点之一,

Fas/Fas-L介导热应激诱导的胸腺细胞凋亡

目的 探讨体外热应激诱导小鼠胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L表达的关系。方法 用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas-L表达阳性率。结果 体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas-L表达阳性率均呈时间依赖性增高，体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas-L的表达与凋亡明显相关。结论 Fas与Fas-L是介导体外热应激损伤胸腺细胞凋亡的重要分子。

1类多巴胺受体活性变化对细胞凋亡Fas/Fas-L通路的影响

目的以细胞凋亡的死亡受体(Fas/Fas-L)途径为切入点,探讨1类多巴胺受体(dopamine receptor-1,DR1)活性变化对缺血-再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡的影响及可能机制。方法乳鼠心肌细胞以模拟缺血溶液培养2 h后再正常培养24 h的方法建立心肌细胞缺血-再灌注损伤模型。心肌细胞随机分为4组:正常对照组,缺血-再灌注组(I/R组),10μmol/L SKF-38393(DR1激动剂)组(SKF干预组),10μmol/L SCH-23390(DR1抑制剂)组(SCH干预组)。RT-PCR和Western blot分别检测Fas、Fas-L、Caspase-8、Caspase-3 mR-NA和蛋白质的表达;TUNEL染色和流式细胞仪技术观察心肌细胞的凋亡情况;紫外分光光度计检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;透射电镜观察心肌细胞形态变化。结果与正常对照组比较,I/R组中Fas、Fas-L、caspase-8、caspase-3表达均上调,LDH活性和MDA含量增加,而SOD活性降低,心肌细胞损伤加重;与I/R组比较,10μmol/L SKF-38393使上述指标进一步增加,而10μmol/L SCH-23390对上述指标影响不显著。结论 DR1激活能够促进缺血-再灌注损伤诱导的细胞凋亡,其机制与上调Fas/Fas-L死亡途径有关。

Fas/Fas-L在重型肝炎患者肝组织中的表达及其在肝细胞凋亡中的意义

目的 研究Fas/Fas L系统在重型肝炎患者肝细胞中的表达情况及在肝细胞凋亡中的意义。方法 采用免疫组织化学方法对 2 0例住院的重型肝炎病人之活检肝组织进行了Fas抗原及Fas配体表达的检测 ,并运用末端转移酶标记技术 (TUNEL)同时检测细胞原位凋亡的情况。结果 所检测 2 0例重型肝炎肝组织中 ,Fas抗原在肝细胞中呈强阳性表达 ;浸润的淋巴细胞上大量表达Fas L ,肝细胞中也有散在分布 ;每例标本均见凋亡细胞 ,分布在炎症坏死区及周边和小叶内。结论 Fas/Fas L系统过量表达 ,引起大量肝细胞死亡 ,参与重型肝炎的发病 ,Fas途径引起的细胞凋亡可能是重型肝炎发病过程中的重要机制之一。所检标本中 ,凋亡和坏死同时存在 ,表明这两种不同的死亡方式在重型肝炎的发病上存在着关联性。

Fas/Fas-L信号系统在绝经后骨质疏松症中作用的研究进展

Fas/Fas-L信号系统是外源性凋亡通路的重要组成部分。近年来大量研究发现,Fas/Fas-L信号系统通过诱导细胞凋亡,不仅参与了免疫系统稳态的维持,而且在骨内环境稳态的调节中也发挥了重要的作用。Fas/Fas-L信号系统在不同骨细胞上的表达和分布可能随体内雌激素水平波动而发生变化。当绝经后雌激素分泌不足时,Fas/Fas-L信号系统可通过启动骨细胞外源性凋亡通路,介导成骨和破骨平衡向破骨方向偏移,参与绝经后骨质疏松症的发生发展。通过调节骨细胞上Fas/Fas-L信号系统来平衡破骨细胞骨吸收和成骨细胞骨形成,将为绝经后骨质疏松症的治疗提供新的思路。

FAS/FAS-L蛋白及BCL2蛋白在卵巢癌中的研究进展

凋亡信号通路包括外源性凋亡途径及内源性凋亡途径。Fas及其配体FasL蛋白作为外源性凋亡途径代表,在多种肿瘤中均可表达,其不仅参与机体的免疫监视而且在肿瘤的发生、发展及转移过程中具有重要作用。BCL-2蛋白作为内源性凋亡途径的代表分子,其往往是通过抑制细胞凋亡参与癌症的,BCL-2蛋白在实体组织和淋巴样细胞的恶性转化中起关键作用。FAS/FAS-L蛋白与BCL2蛋白与卵巢癌的发生发展密不可分。本综述通过阅读大量文献,简要阐述了FAS/FAS-L蛋白及BCL2蛋白,并描述了FAS/FAS-L蛋白及BCL2蛋白在恶性卵巢肿瘤中表达状况及其与预后的关系,以及分析FAS/FAS-L蛋白与BCL2蛋白的在卵巢肿瘤表达中的相关性。

二鳖汤对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡相关因子Fas/Fas-L的影响

目的:观察二鳖汤对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡相关因子Fas/Fas-L的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:以腹腔注射猪血清建立大鼠免疫性肝纤维化模型,将48只大鼠随机分成正常组、模型组、干预治疗组[二鳖汤高、中、低剂量组及复方鳖甲软肝片组(阳性对照组)]。适应性喂养1周后,除正常组外,其余各组腹腔注射猪血清,每只每次注射0.5ml,每周2次。从造模第1周开始,除正常组、模型组不给药,其他各组每天灌胃1次。干预治疗9周后,免疫组织化学法观察转化生长因子-β1(TGF-β1)、Fas/Fas-L的表达。结果:模型组TGF-β1及凋亡相关因子Fas/Fas-L较正常组表达明显升高(P<0.05),各干预治疗组TGF-β1、Fas/Fas-L的表达较模型组均有不同程度下调(P<0.05)。结论:二鳖汤抗大鼠肝纤维化的机制可能是通过调节促细胞凋亡因子TGF-β1的水平,进而下调Fas/Fas-L的表达,抑制肝细胞的过度凋亡。

FAP-1与子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡的关系

目的探讨Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)在子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡中的作用。方法应用S-P免疫组织化学方法检测63例子宫内膜癌中FAP-1、Fas及Fas-L的表达,同时检测13例子宫内膜非典型增生及20例正常子宫内膜组织作为对照。结果 FAP-1在子宫内膜癌中表达率为71.4%,明显高于正常子宫内膜中的表达率25.0%(P<0.05)。Fas在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为52.4%和85.0%(P<0.05)。Fas-L在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为76.2%和35.0%(P<0.05)。Fas蛋白表达阳性、阴性者子宫内膜癌组织中,FAP-1表达阳性率分别为51.5%和93.3%,两者间呈明显的负相关(P<0.05);而Fas-L表达阳性、阴性者中,FAP-1表达率分别为81.3%和40.0%,两者之间呈明显的正相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡与肿瘤细胞表达FAP-1有关,FAP-1引起的凋亡抑制在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用。

Fas系统介导的细胞凋亡与冠心病的关系研究进展

细胞凋亡是一种基因调控下的生理死亡方式。本文综述了近年来Fas/Fas鄄L介导的细胞凋亡与动脉粥样硬化、急性冠脉综合征及心肌缺血再灌注损伤的关系,借以更新人们对冠心病的认识,探讨冠心病的一种新的可能发生发展机制。

妊娠高血压综合征患者血清中可溶性Fas水平的测定及其临床意义

目的探讨妊高征孕妇血清中可溶性Fas(sFas)的水平及意义。方法采用ELISA法测定42例妊高征孕妇(轻度7例,中度16例,重度19例)血清sFas水平,并与同期30例正常足月妊娠妇女相比较。结果(1)轻度、中度、重度妊高征组和正常妊娠组血清sFas含量分别为676.264±1.312pg/ml、874.563±1.429pg/ml、1106.587±1.287pg/ml和659.354±1.648pg/ml;(2)轻、中、重度妊高征组与正常妊娠组相比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P.<0.001);(3)妊高征各组间比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P<0.001)。结论随着妊高征病情加重,孕妇血清sFas水平也显著增高。提示妊高征孕妇体内存在Fas/Fas-L介导的淋巴细胞激活诱导的细胞凋亡,导致母体时胚胎的免疫排斥增强或细胞免疫不适当激活,从而导致妊高征的发生。孕妇血清sFas可以作为妊高征的预测指标之一。

瓜蒌薤白汤对心肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的影响

目的:观察瓜蒌薤白汤对异丙肾上腺素(ISO)所致乳鼠心肌细胞凋亡及凋亡调控基因Fas/Fas-L表达的影响。方法:在培养的新生大鼠心肌细胞上建立ISO损伤模型,观察不同浓度瓜蒌薤白汤正丁醇部位(100、20μg/mL)对细胞凋亡及凋亡调控基因Fas/Fas-L水平的影响。结果:与正常对照组比较,模型组心肌细胞凋亡率增加,凋亡调控基因Fas/Fas-L的阳性表达指数(positive expression index,PEI%)显著增加,瓜蒌薤白汤的正丁醇萃取部位能显著降低ISO所致心肌细胞的凋亡率(P<0.01),并显著降低PEI%(P<0.05或P<0.01)。结论:瓜蒌薤白汤的正丁醇部位对ISO所致乳鼠心肌细胞损伤有一定的保护作用,可对抗ISO诱导的心肌细胞凋亡;且发挥这种作用的通道之一是下调Fas/Fas-L的表达。

缺氧环境下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白和mRNA的表达

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在缺氧环境下凋亡相关蛋白和mRNA的表达。方法将接种的P3细胞置于94%N2、1%O2和5%CO2缺氧箱中37℃孵育,分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h和12h取出分别应用Annexin V/PI双染法进行流式细胞仪(FCM)分析MSCs凋亡率(Apoptotic Rate,AR),并同步用免疫细胞化学、western blotting和Rt-PCR等方法检测Bax/Bcl-2,Fas/Fas L和Caspase-3蛋白和mRNA的表达。结果1.缺氧前,免疫细胞化学法未检测到Bcl-2、Bax、Fas、Fas L和Caspase-3蛋白表达,缺氧0.5h后均可较强表达;2.各缺氧时间点Bcl-2、Bax、Fas、Fas L、Caspase-3蛋白和mRNA表达较缺氧前均显著性增高(P均<0.05);随缺氧时间延伸,Bcl-2蛋白和mRNA表达不显著增加(P>0.05),而Bax、Fas、Fas L、Caspase-3蛋白和mRNA表达均显著增加(P均<0.05),但缺氧6-12h时间点之间表达均没有统计学意义(P均>0.05);3.AR和Bcl-2/Bax蛋白(r1=-0.417,P=0.043)及mRNA(r2=-0.435,P=0.040)呈显著负相关,而和Fas(r1=0.639,P=0.025;r2=0.711,P=0.018)、Fas-L(r1=0.581,P=0.022;r2=0.605,P=0.037)、Caspase-3(r1=0.704,P=0.014;r2=0.657,P=0.026)蛋白及mRNA均呈显著正相关。结论在缺氧促进MSCs凋亡的过程中,Bcl-2蛋白和mRNA可能起着保护作用,而Bax、Fas-L、Fas、Caspase-3蛋白和mRNA可能在MSCs凋亡的进程中起着促进作用。

黄芪在幼鼠肠缺血再灌注损伤下对免疫器官凋亡的作用及意义

目的 :探讨黄芪在预防幼鼠肠缺血再灌注下 (ischemia/reperfusion ,I/R)免疫器官凋亡的发生的作用及机制。方法 :在幼鼠肠I/R早期 ,电镜观察免疫器官的细胞凋亡 ,DNA原位末端标记法检测细胞凋亡 ,免疫组化法检测Fas/Fas L蛋白的表达。结果 :黄芪在幼鼠肠I/R早期明显抑制脾、肠系膜淋巴结的淋巴细胞、巨噬细胞凋亡。在脾脏 ,明显下调巨噬细胞Fas蛋白的表达 ;在淋巴结 ,明显下调巨噬细胞Fas L蛋白的表达。结论 :黄芪注射液在幼鼠肠I/R早期 ,可能通过影响外周免疫器官Fas/Fas L蛋白表达 ,引发细胞凋亡减少 ,直接影响免疫功能。

生津润燥颗粒对干燥综合征大鼠模型TNF-α和Fas的影响

目的:观察生津润燥颗粒对干燥综合征模型大鼠的治疗作用;方法:利用免疫诱导法建立干燥综合征大鼠模型,并以ELISA法检测模型大鼠血清IgG、TNF-α、Fas、Fas-L、IL-2R含量;结果:生津润燥颗粒能降低模型大鼠血清IgG、TNF-α、Fas、Fas-L、IL-2R含量。结论:生津润燥颗粒可以通过降低IgG、TNF-α、Fas、Fas-L、IL-2R水平,而减轻模型大鼠的病变。

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：观察具有活血化瘀、软坚散结、补肾益气功效的中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠血尿代谢指标和肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响。 方法：①实验于2002-10／2003-10在潍坊医学院分子免疫实验室完成。选用30只8周龄健康雄性Wistar大鼠。②喂养1周后，随机选用22只大鼠，将其造成糖尿病模型：按50mg／kg腹腔注射链脲佐菌素(溶于0．1mol／L枸橼酸钠缓冲液中，pH4．5)，72h后血糖值达16．7mmol／L者确定为糖尿病模型。将造模成功的16只大鼠分为2组：模型组和中药组各8只。设其余8只为对照组(只注射相同体积的枸橼酸钠缓冲液)。中药组根据每只大鼠体质量(按大鼠体表面积换算成等效剂量21．6g／kg)每日给予五六个蜂贝化瘀胶囊(主要成分：黄芪30g，黄精30g，蜂胶15g，丹参30g葛根15g，生地30g，浙贝母15g，菟丝子30g)中的粉末进行灌胃，喂养10周，自由饮水。正常组及模型组用普通饲料喂服10周，自由饮水。③血糖、血肌酐、尿肌酐、尿素氮、尿蛋白测定采用日立7170A全自动生化分析仪，计算肌酐清除率[尿肌酐浓度(mg／d)×尿量(mL／min)／血肌酐浓度(mL／d)]。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况。采用免疫组化法和流式细胞仪检测Fas和Fas-L表达，以荧光指数[(样品的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)／正常组织平均荧光强度]表示Fas及Fas-L的相对含量。④用t检验比较组间差异。 结果：大鼠30只中因造模失败脱失6只，进入结果分析24只。①血糖、尿素氮、尿蛋白：模型组明显高于对照组和中药组(t=2．25～5．36，P<0．05～0．01)。②内生肌酐清除率：三组相近(P>0．05)。③单个肾小球细胞凋亡率和肾小管细胞凋亡率：模型组均明显高于对照组和中药组[(1．89±0．03)％，(13．85±0．53)％；0，(2．91±0．30)％；(0．65±0．03)％，(9．98±0．81)％，t=2．27～5．15，P<0．05～0．01]。④Fas和Fas-L荧光指数：模型组均明显高于对照组和中药组(1．51±0．07，1．69±0．11；1．00±0．02，1．00±0．02；1．25±0．02，1．31±0．12，t=2．39～4．85，P<0．05～0．01)。 结论：蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡，从而改善大鼠血尿代谢指标，发挥对肾脏的保护作用。

Fas凋亡相关基因在双酚A诱导成年雄性大鼠生殖毒性中的作用

目的探讨Fas凋亡途径相关基因在双酚A(BPA)诱导成年雄性大鼠生殖毒性中的作用。方法 40只成年Wistar雄性大鼠随机等分为4组:溶媒对照组(玉米油)和低、中、高剂量BPA喂养组(10、50、250μg/kg·bw/d)。大鼠在喂养35周后处死,称量睾丸、附睾、肝、肾及心脏重量并计算脏器系数;观察精子形态及计算精子畸形率。采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)测定睾丸组织中自杀相关因子(Fas/Fas-L)、天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA含量。结果高剂量BPA喂养大鼠精子畸形率以及睾丸组织中Fas-L mRNA及Caspase-3 mRNA含量高于对照组,差异均有显著性(P!0.05)。结论在BPA的人体每日容许摄入量水平下(TDI=50μg/kg·bw/d),未观察到生殖细胞损伤的效应;但长期经膳食暴露高剂量BPA(250μg/kg·bw/d)可致成年雄性大鼠生殖细胞损伤,其机制可能与BPA上调Fas-L mRNA和Caspase-3的表达有关。

葛根素对人胰腺癌PANC-1细胞增殖凋亡的影响

目的探讨葛根素对人胰腺癌细胞株PANC-1的作用及其机制。方法取对数生长期的PANC-1细胞,分别用不同浓度的葛根素(0、50、100、200μmol/L)干预48 h后,利用CCK-8检测PANC-1细胞增殖水平;Annexinv-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2、Caspase-7表达水平。结果葛根素对胰腺癌PANC-1细胞增殖的抑制呈浓度依赖性;不同浓度的葛根素干预PANC-1细胞48 h后,细胞凋亡率分别为2.47%±0.64%、6.37%±0.71%、8.33%±0.90%、12.40%±1.01%,实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);Western blot实验表明,葛根素对胰腺癌PANC-1细胞干预48 h后,随着葛根素浓度的增加,细胞中Fas、Fas-L、Caspase-7、Bax蛋白的表达量上调,Bcl-2的表达量下调,实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论葛根素可通过激活Fas/Fas-L信号通路诱导PANC-1细胞增殖抑制和凋亡。

二甲双胍治疗桥本甲状腺炎作用机制的初步探讨

目的 初步探讨二甲双胍治疗桥本甲状腺炎的作用机制。方法 选择健康SD雌性大鼠45只,随机分为空白组、模型组、二甲双胍组,采用高碘水联合甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合免疫注射法模拟桥本甲状腺炎大鼠模型。造模成功后,空白组及模型组予以0.9%氯化钠溶液灌胃,二甲双胍组按300 mg/kg二甲双胍灌胃,连续给药4周,处死各组大鼠并取样。采用ELISA测定血清甲状腺功能指标(TSH、T3、T4、TGAb、TPOAb)及甲状腺组织炎性因子(TNF-α、IL-10、IL-6、IL-12)水平;HE染色观察甲状腺组织病理变化;TUNEL荧光染色检测甲状腺组织细胞凋亡;免疫组化检测甲状腺组织中Fas、Fas-L表达;Western blot测定甲状腺组织中Fas、Fas-L、FADD、cleaved caspase-3蛋白表达;qRT-PCR检测甲状腺组织中Fas、Fas-L、FADD mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组血清中TSH、TGAb、TPOAb水平、阳性细胞比率、甲状腺组织中TNF-α、IL-6含量及Fas、Fas-L、FADD、cleaved caspase-3表达升高,血清FT3、FT4水平及甲状腺组织中IL-10、IL-12含量降低(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组血清中TSH、TGAb、TPOAb水平、阳性细胞比率、甲状腺组织中TNF-α、IL-6含量及Fas、Fas-L、FADD、cleaved caspase-3表达降低,血清FT3、FT4水平及甲状腺组织中IL-10、IL-12含量升高(P<0.05)。结论 二甲双胍抑制桥本甲状腺炎进展,其作用机制可能与抑制Fas/Fas-L介导的细胞凋亡途径有关。

细胞凋亡与子宫肌瘤发生和发展的相关性研究

子宫肌瘤是妇科最常见的良性肿瘤,在育龄期妇女中的发病率呈逐年上升趋势,但对其发病机制尚不清楚.本文从肿瘤细胞凋亡受抑制这个角度,详尽阐述了Bcl-2/Bax 、Fas/Fas-L 、P53基因的表达与子宫肌瘤细胞凋亡异常的关系和机理,并阐述了中医药的治疗机理,旨在应用药物来诱导肿瘤细胞凋亡,开拓多种非手术方法治疗子宫肌瘤的手段.