Fas/FasL mRNA在小细胞肺癌石蜡包埋组织中的表达及其临床意义

目的探讨Fas、FasLmRNA在小细胞肺癌石蜡包埋组织中的表达情况及其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测Fas、FasLmRNA在46例小细胞肺癌和相应的癌旁正常肺组织中的表达情况。结果46例小细胞肺癌中FasmRNA阳性表达率为47.8%,明显低于在正常肺组织中的表达率(80.0%)P<0.05,FasLmRNA阳性表达率为58.7%,明显高于在正常肺组织中的表达率(35%)P<0.05,FasLmRNA在淋巴结转移和TNM分期中的表达差异有统计学意义,FasLmRNA表达阳性组患者累计生存率明显低于阴性组患者。结论FasmRNA低表达可能对SCLC发展起促进作用;FasLmRNA高表达可能与SCLC转移和预后相关。

肝癌组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化及其意义

目的 探讨肝癌、癌旁及正常肝组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化与肝癌发生、发展的关系及其意义。方法 应用半定量RT PCR的方法检测肝癌(40例)、癌旁(40例)及正常肝(25 例)组织中Fas及FasLmRNA表达的相对含量。结果 正常肝组织、癌旁及肝癌组织中Fas 和FasL mRNA 表达的相对含量分别为0.792±0.039和0.245±0.043、0.857±0.031和0.429±0.035以及0.473±0.047和0.185±0.041。肝癌组织中Fas mRNA表达的相对含量明显低于正常肝组织和癌旁组织(P<0.05); 肝癌组织中FasL mRNA表达的相对含量亦明显低于正常肝组织(P<0.05)和癌旁组织(P<0.01),但癌旁组织中FasL mRNA表达的相对含量高于正常肝组织中的表达(P<0.05)。结论 肝癌组织不仅通过低表达Fas来逃避机体的免疫监视作用,而且还通过癌旁组织FasL的高表达,使与之接触的淋巴细胞(表达Fas)凋亡,最终使肝癌细胞逃脱机体的免疫杀伤作用,得以增殖和转移。

血脂康预处理对大鼠在体心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasL mRNA表达的影响

目的探讨血脂康对大鼠在体心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasLmRNA表达的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分成5组,每组8只。假手术组,双蒸水灌胃1周;模型对照组,双蒸水2ml灌胃1周;甲羟戊酸组,甲羟戊酸150mg/kg·d溶于2ml双蒸水灌胃1周;血脂康组,血脂康原粉2.8g/kg·d溶于2ml双蒸水配成悬液灌胃1周;血脂康+甲羟戊酸组,血脂康原粉2.8/kg·d联合甲羟戊酸150mg/kg·d溶于2ml双蒸水灌胃1周。1周后应用0000无创丝线结扎左冠脉前降支,结扎30min后松开恢复冠脉血流复制在体心脏急性缺血-再灌注模型,假手术组仅穿线而不结扎前降支,其他手术步骤相同。再灌注120min后用RT-PCR检测各组心肌Fas和FasLmRNA的表达。结果与假手术组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达相比较,其他4组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,血脂康组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达显著减少(P<0.01),血脂康+甲羟戊酸组和甲羟戊酸组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达无差异(P>0.05)。结论血脂康能减少大鼠心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasLmRNA的表达。

诊断超声照射后人早孕绒毛细胞Fasm RNA FasL mRNA表达的改变

目的 探讨诊断超声与人早孕绒毛Fas/FasLmRNA表达的关系。方法 对拟进行人工流产的 2 4例早孕 (4 5～ 6 0d)妇女随机分为 4组 :Ⅰ组 (对照组 )、Ⅱ组 (10min组 )、Ⅲ组 (2 0min组 )和Ⅳ组 (30min组 )。应用HP 85 0 0彩色多普勒超声诊断仪 ,对孕囊进行不同时间的持续照射 ,照射后 2 4h取材。用原位杂交技术检测上述各组绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达情况。结果 超声照射后 10min组绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达率与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,2 0min组和 30min组滋养层细胞表达率明显增加 ,显著大于对照组和10min组 (P <0 0 0 1)。结论 诊断超声持续照射早孕孕囊组织 >10min可引起绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达率增加 。

益心康对感染柯萨奇病毒B_3大鼠体外心肌细胞凋亡相关因子Fas/FasL mRNA表达的影响

目的探讨益心康对体外感染柯萨奇病毒(CV)B3的新生SD大鼠心肌细胞的保护作用,分析其对细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA表达的影响。方法取新生SD大鼠心肌细胞,分成4组并进行不同干预:正常细胞对照组、病毒对照组给予感染病毒,益心康组感染病毒后加入益心康,利巴韦林组感染病毒后加入利巴韦林。用RT-PCR方法检测各组心肌细胞中Fas及Fas L mRNA的表达。结果益心康组给药48h后细胞内Fas及Fas L mRNA的表达较病毒对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。益心康组及利巴韦林组减轻Fas及Fas L mRNA的表达效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论益心康可有效减轻细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA的表达水平,证实该方有抑制心肌细胞凋亡的作用。

血清可溶性Fas-和FasL-mRNA检测方法的建立

目的建立可用于研究工作的血清学检测方法。方法按ＧｅｎＢａｎｋ的Ｆａｓ和ＦａｓＬ序列设计引物，以相应质粒作阳性材料，建立各自的ＲＴ－ＰＣＲ。结果２７例慢性乙型肝炎血清检出ｓＦａｓＬ－ｍＲＮＡ１３例（４８．２％），ｓＦａｓ－ｍＲＮＡ２１例（７７．８％）。结论目前尚无检测血清抗原的试剂、相关研究工作中可应用这一技术。

清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响

目的观察清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响。方法 Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为模型组、清金组、顺铂组、清金加顺铂组,给药10 d后,取肿瘤组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠Fas、FasL mRNA的表达。结果清金加顺铂组瘤体组织Fas mRNA的表达显著高于模型组(P<0.05),各给药组间差异无统计学意义;与模型组比较,清金组、顺铂组、清金加顺铂组瘤体组织FasLmRNA的表达差异均有统计学意义(P<0.05),各给药组间差异无统计学意义。结论清金得生片联合化疗的抗肿瘤作用与调节Fas/FasL系统,从而逆转肿瘤的免疫逃逸有关。

Fas/FasL介导的细胞凋亡在Ⅲ期压疮创面形成中的作用

目的:观察压疮创面边缘组织、中心组织及周围正常组织中的细胞凋亡现象,探索细胞凋亡与压疮形成的关系,及在深度压疮创面愈合中的作用与意义。方法:临床收集Ⅲ期压疮组织样本8例,含正常组织、溃疡边缘及中心组织。通过常规石蜡切片、原位末端标记(TUNEL)技术及原位杂交的检测方法确定细胞凋亡数、Fas/FasL mRNA在溃疡不同部位的定位及表达量的变化规律。结果:正常组织中,Fas/FasL mRNA仅在表皮细胞有极少量表达,在其它细胞均呈阴性表达,TUNEL凋亡阳性细胞极少;从溃疡边缘组织到中心组织,Fas mRNA阳性表达逐渐增加并出现在部分成纤维细胞内,中心组织与正常组织比较,明显差异,P<0.01,与边缘组织相比(P<0.05);并且凋亡阳性细胞数逐渐增多,差异显著,P<0.01。FasL mRNA的表达呈同样的增长趋势,正常组织、边缘组织及中心组织3组组间差异显著,P<0.01。结论:从正常组织到溃疡边缘及中心组织,随着Fas/FasL mRNA的表达量的增加,凋亡细胞明显增多,说明细胞凋亡在压迫性溃疡形成过程中可能起着重要作用。

肺缺血再灌注损伤中Fas/FasL系统的表达及川芎嗪的影响

目的:探讨肺缺血再灌注损伤Fas/FasL系统的表达及其与肺泡上皮细胞凋亡的关系及川芎嗪的影响。方法:采用在体兔单侧肺左肺门持续性阻断1 h,再灌注1、3、5 h缺血-再灌注损伤的动物模型。TMP干预组于缺血前1h静脉滴注川芎嗪60 mg/kg。用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡的发生情况;用原位杂交的方法检测兔肺组织Fas/FasL mRNA的表达。结果:IR组与TMP组在肺缺血再灌注后1、3、5 h发生明显的肺泡上皮细胞凋亡。TMP组各时相细胞凋亡指数明显低于IR组(P<0.01);肺组织Fas/FasL mRNA的表达与肺泡上皮细胞凋亡呈显著正相关(r1=0.900,r2=0.869,均P<0.01)。结论:Fas/FasL系统在肺缺血再灌注诱导的肺泡细胞凋亡中起着重要作用,川芎嗪因抑制Fas/FasL,而减轻由Fas/FasL系统激活导致的细胞凋亡,从而对缺血再灌注肺具有保护作用。

FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴AICD中的作用

目的:探讨FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes,PBLs)活化诱导细胞凋亡(activation induced cell death,AICD)中的作用。方法:分离20例正常人、24例慢性乙型肝炎患者及24例慢性重型乙型肝炎患者的PBLs,体外单独或与植物血凝素(PHA)共同培养48小时,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组化SABC法检测FASL、TRAIL.在慢性乙肝患者PBLs的表达。结果:PHA活化前,FASL.mRNA、TRAIL mRNA在上述3组研究对象外周血淋巴细胞均不表达;PHA活化后;二者表达明显上调,且慢性乙型肝炎组高于正常对照组,慢性重症肝炎组低于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。正常人静息的外周血淋巴细胞不表达FASL和弱表达TRAIL,经PHA活化后,二者表达均明显上调(P<0.01)。结论:FASL、TRAIL参与了乙型肝炎患者外周血淋巴细胞AICD过程,并可能是其重要效应分子。

特发性肺纤维化患者支气管/肺泡上皮细胞凋亡和Fas/FasL基因表达

目的:检测细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白在特发性肺纤维化患者肺泡/支气管上皮细胞的表达,探讨细胞凋亡和促凋亡信号在此疾病中的意义。方法:应用末端原位杂交(TUNEL)、原位杂交、免疫组化技术,对12例特发性肺纤维化患者的肺活检组织(IPF组)及10例正常肺组织(对照组)检测了细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白表达的变化。结果:特发性肺纤维化组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数上调,明显高于对照组(P<0.01);IPF组肺泡/支气管上皮细胞中Fas/FasL mRNA及其蛋白表达上调,高于对照组(P<0.01);IPF组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数与其Fas/FasL mRNA及蛋白表达之间均无明显相关(P>0.05)。结论:肺纤维化时肺泡/支气管上皮细胞凋亡上调,Fas/FasL mRNA及其蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起重要作用。

大肠上皮恶性转化不同阶段中Fas/FasL表达及在凋亡逃逸中的意义

目的 :试图通过对大肠黏膜上皮恶性转化不同阶段中Fas及其配体FasLmRNA的表达及上皮和浸润性淋巴细胞凋亡变化规律的观察 ,探讨大肠癌中Fas反击机制的可能的分子机制。方法 :收集石蜡包埋的大肠腺癌组织37例 ,腺瘤恶变组织26例 ,管状绒毛状腺瘤30例 ,管状腺瘤24例 ,以6例非肿瘤大肠黏膜作为对照。通过原位杂交及TUNEL等技术 ,原位观察不同病变组织大肠上皮中的FasmRNA,FasLmRNA及细胞凋亡的密度及相互关系。结果 :随着病程进展 ,FasmRNA在腺瘤中有上升趋势 ,而在恶性病变中有下降趋势(P<0.001),FasLmRNA有逐渐上升趋势 (P<0.001) ,局部凋亡的浸润性淋巴细胞密度有逐渐上升趋势(P<0.01),凋亡上皮细胞密度在腺瘤中明显升高 ,在非肿瘤黏膜及恶性病变中较低 (P<0.001)。腺癌中FasLmRNA阳性表达细胞密度与局部凋亡的浸润性淋巴细胞密度呈正相关(r=0.672,P<0.001)。结论 :在大肠上皮恶变进程中 ,Fas反击机制是逐步形成的 ,癌细胞表达FasL,并通过Fas -FasL相互作用 ,促使浸润性淋巴细胞凋亡而逃逸机体的免疫监视。而且癌细胞可下调Fas表达 ,抵御免疫效应细胞及癌细胞自身表达FasL所传递的死亡信号 ,形成“Fas抵抗” ,并因此抑制癌细胞凋亡。推测“Fas反击”和与之配合的“Fas抵抗”机制 ,与大肠癌的形成及进展?

四神丸对实验性结肠炎结肠组织Bax/Bcl-2 mRNA,Fas/FasL的调控作用

目的:评价四神丸灌肠给药治疗实验性结肠炎疗效的同时,探讨其对结肠炎结肠黏膜Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mR-NA的调控作用。方法:三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法复制实验性结肠炎,实验动物随机分成正常组、模型组、四神丸高、中、低剂量组(10,5,2.5 g.kg-1)及柳氮磺吡啶(salicylazosulfapyridine,SASP,30 mg.kg-1)组,灌肠给药10 d后,通过体重、结肠湿重、结肠质量指数、病理损伤评分及形态学分析评价其疗效,同时分别采用流式细胞术和RT-PCT技术检测大鼠结肠组织Fas/FasL水平和Bax/Bcl-2 mRNA表达。结果:与模型组比较,四神丸中剂量组可明显降低结肠湿重及结肠指数(P<0.05),且3个剂量组均可明显降低病理损伤评分(P<0.05),同时典型治疗组病理切片分析可见上皮修复,黏膜下纤维结缔组织增生,溃疡浅而小,少量淋巴滤泡增生和炎细胞浸润,而且3个剂量组均可显著降低Fas在结肠黏膜表达(P<0.05),升高Bcl-2/Bax(P<0.05)。结论:四神丸灌肠给药有效治疗溃疡性结肠炎的作用机制之一可能是通过调控结肠组织Fas/FasL,Bax/Bcl-2 mRNA表达,延缓结肠上皮细胞凋亡或促进炎细胞凋亡实现的。

慢性乙型肝炎肝组织表达FasL蛋白、mRNA及Fas的实验研究

目的研究ＦａｓＬ、Ｆａｓ在慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）肝组织中的表达及意义。方法采用ＦａｓＬ多克隆抗体、人工合成ＦａｓＬ寡核苷酸探针对ＣＨＢ及ＨＢＶ慢性携带者肝组织进行免疫组化和原位杂交检测。部分组织同时检测Ｆａｓ抗原。结果肝组织浸润单个核细胞及肝细胞都不同程度检测出ＦａｓＬ蛋白及其ｍＲＮＡ，表达程度随肝脏炎症坏死程度加重而增加。ＦａｓＬ、Ｆａｓ阳性肝细胞分布及表达程度有一致性。结论经ＦａｓＬ、Ｆａｓ介导的细胞凋亡机制在ＣＨ致病中起重要作用，不仅存在ＣＴＬｓ介导的细胞免疫作用。