Changes of expression of Fas and FasL protein in rats after renal ischemia/reperfusion injury

AIM：To study the relationship between the expression of Fas/FasL protein and apoptosis in rats after renal ischemia/reperfusion.METHODS:Establish the models of renal ischemia/reperfusion injury in rat and SABC immunohistochemical methods were used to detect the changes of expression of Fas/FasL protein.Pathomorphological changes in renal ischemia/reparfusion injury were observed.RESULTS:The expression of Fas/FasL proteins was negative in the sham operated group.Fas/FasL proteins were increased in renal in ischemia/reperfusion group,and gradually upregulated with the duration of ischemia or reperfusion and peaked at 72h of reperfusion.The expression of Fas/FasL proteins was stronger in 60min ischemia group than 30min ischemia group and they were mainly expressed in renal tubule.We observed local necrosis and inflammatory cells infiltration around infracted areain ischemia/reperfusion group by HE dyeing methods.And the necrosis area was mainly occurred around proximal convoluted tubule.CONCLUSIONS:These findings suggested that Fas/FasL proteins were over expressed after ischemia/reperfusion injury in rats renal.And Fas/FasL system was involved in the process of renal ischemia/reperfusion injury.

未足月胎膜早破合并宫内感染产妇胎盘NLRP3、IL-1β、Fasl表达及其临床意义

目的 研究未足月胎膜早破合并宫内感染产妇胎盘NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、Fasl的表达及其临床意义。方法 选择未足月胎膜早破产妇118例,根据是否合并宫内感染分为感染组36例和无感染组82例。比较两组胎盘NLRP3阳性检出率、IL-1β、Fasl表达及血清β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平,并分析其诊断合并宫内感染的临床价值。结果 感染组胎盘NLRP3阳性检出率、IL-1β、Fasl mRNA、血清β-HCG、PCT、CRP水平高于无感染组(P<0.05)。NLRP3、IL-1β、Fasl与β-HCG、PCT、CRP均呈正相关(P<0.05)。NLRP3、IL-1β、Fasl诊断未足月胎膜早破合并宫内感染的效能均较高,其中Fasl效能最高。结论 未足月胎膜早破合并宫内感染产妇胎盘NLRP3阳性检出率、IL-1β、Fasl表达均较高,此3指标对诊断胎膜早破合并宫内感染有较高的临床价值。

复方丹参滴丸对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL蛋白表达的影响

探讨复方丹参滴丸 (DanShenPill,DSP)对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧 /复氧时凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法 :按常规培养新生 4d乳鼠心肌细胞 ,于培养 2 4h后进行缺氧及缺氧 /复氧实验 ,以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas/FasL蛋白表达的变化。结果 :缺氧 4 5h及 10 5h后 ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的阳性表达指数 (positiveexpressionindex ,PEI %)均显著高于对照。 10 5h组与 4 5h组无明显差异。复方丹参滴丸组PEI明显低于缺氧组 (P <0 0 5 )。缺氧 30min后再给氧 4h与 10h ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的PEI显著高于对照 ,复氧 10h组与 4h组无明显差异 ,复方丹参滴丸组PEI低于缺氧复氧组 (P <0 0 5 )。结论 :缺氧及缺氧 /复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强 ,复方丹参滴丸可通过下调Fas/FasL蛋白表达以减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧 /复氧损伤。

参附注射液对心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL表达的影响

目的探讨参附注射液(SF)对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法按常规培养新生4 d乳鼠心肌细胞,于培养24 h后进行缺氧及缺氧/复氧实验,以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas/FasL蛋白表达的变化。结果缺氧4.5 h及10.5 h后,心肌细胞Fas/FasL蛋白的阳性表达指数(positive expression index,PEI)均显著高于对照。10.5 h组与4.5 h组无明显差异。参附注射液组PEI明显低于缺氧组(P<0.05)。缺氧30 min后再给氧4 h与10 h,心肌细胞Fas/FasL蛋白的PEI显著高于对照,复氧10 h组与4 h组无明显差异,参附注射液组PEI低于无SF组(P<0.05)。结论缺氧及缺氧/复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强,参附注射液可通过下调Fas/FasL蛋白表达,减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧/复氧损伤。

中药异位宁对子宫内膜异位症模型大鼠Fas/FasL基因表达影响的实验研究

目的:通过研究异位宁对Fas/FasL蛋白表达的影响来阐述异位宁治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法:取雌性Wistar大鼠,随机分为5组,正常对照组、模型对照组、异位宁高、低剂量组及西药丹那唑对照组;造模成功后各给药组灌胃给药1个月后,观察各组子宫内膜局部组织中Fas及FasL蛋白的表达情况。结果:治疗后异位宁高、低剂量组以及西药对照组Fas、FasL表达增多,染色较深,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:异位宁具有诱导Fas、FasL基因表达,提高异位内膜凋亡能力,使异位病灶得以萎缩、消失的作用。

绞股蓝总黄酮对缺氧/复氧心肌细胞TNF-α浓度，Fas/FasL蛋白表达的影响

目的:探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对培养的缺氧/复氧(H/R)乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度,凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法:利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌细胞H/R模型,实验分6组:①对照组;②H/R组;③15mg·L^(-1)TFG+H/R组;④45mg·L^(-1)TFG+H/R组;⑤105mg·L^(-1) TFG+H/R组;⑥105mg·L^(-1)TFG对照组。用ELISA法测定心肌细胞TNF-α,免疫组化法检测Fas/FasL蛋白表达。结果:H/R后,心肌细胞Fas/FasL蛋白阳性表达指数(PEI)显著高于对照,TFG组PEI低于(H/R)组;TFG能抑制心肌细胞产生TNF-α。结论:H/R时凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达增强,TFG对H/R心肌具有保护作用,其机制与减少TNF-α的生成,下调Fas/FasL蛋白表达,减少凋亡有关。

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。

大肠癌组织中Fas/FasL系统、nm23表达与转移的关系

目的 :探讨Fas、FasL和nm2 3蛋白在大肠癌组织中表达与淋巴结转移和远处肝转移的关系及临床意义。方法 :应用S P免疫组化法检测 80例大肠癌组织和 2 0例正常肠黏膜组织中Fas、FasL及nm2 3的表达情况。结果 :5 5 %大肠癌有不同程度的Fas表达 ,低于正常肠黏膜组织中的表达 ,其表达与Dukes分期密切相关。分期越高 ,Fas表达率越低 ,有淋巴结转移的C期和有远处肝转移的D期Fas阳性表达率低于无转移的A期和B期 ,其中D期显著低于AB期 ,但C期与AB期、C期与D期的表达差异无显著性。大肠癌组织FasL和nm2 3的表达率分别为 6 8 75 %和 5 7 5 0 % ,高于正常组织中的表达 ,表达与有无淋巴结转移或肝转移均无相关性。Fas/FasL系统与nm2 3表达亦无相关性。结论 :Fas/FasL系统中Fas可作为反映大肠癌生物学行为和判断预后的重要指征 ,nm2 3表达增加可能在大肠癌进展早期而不是在进展播散期起重要作用 ,与其转移与预后无关。

大肠癌中Fas、FasL、bcl-2蛋白的表达及意义

目的 探讨Fas、FasL、bcl 2在大肠癌中表达及意义。方法 用免疫组化S P法检测 15例大肠腺瘤、4 0例大肠腺癌及 15例大肠正常组织Fas、FasL、bcl 2蛋白表达 ,以TUNEL法测定细胞凋亡。结果 腺瘤和腺癌凋亡指数高于正常组织 ,腺瘤组高于腺癌组 (P <0 .0 5 )。在大肠正常组织、腺瘤、腺癌中Fas阳性率下降 ,FasL阳性率上升 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。腺瘤组和腺癌组bcl 2表达高于正常组 (P <0 .0 5 )。bcl 2阳性组FasL阳性率高于bcl 2阴性组 (P <0 .0 5 )。结论 瘤细胞Fas FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击 ,促使肿瘤的发生、发展 ,对预测大肠癌的预后有重要参考价值。bcl 2高表达是癌变过程中的早期事件 ,有利肿瘤的早期诊断。

人FasL分子的克隆、表达及多抗制备

目的获得人 Fas L蛋白 ,并对其功能进行初步研究。方法用 DNA重组法构建了 Fas L c DNA和谷胱甘肽转硫酶融合原核表达质粒 p GEX- KG- h FL。将重组质粒转入大肠杆菌 JM10 9,经 0 .2 mm ol/ L IPTG在 37°C条件下诱导 3h,SDS- PAGE检测。用 8m ol/ L尿素溶解的包涵体作为免疫原免疫家兔制备多抗。结果融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的2 0 %。多抗效价达 1∶ 10 2 40 0 ,此多抗可以与重组蛋白发生很好的抗原抗体反应。结论 h FL 在大肠杆菌中得到高效表达 ,为深入研究 Fas L

胎儿角膜深低温保存对FAS/FASL蛋白表达的影响

目的:研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子FasL在新鲜及深低温保存后胎儿角膜的表达情况。方法:应用免疫组织化学SABC法对33例不同胎龄(5mo至足月)胎儿角膜石蜡标本切片后,分别进行了Fas和FasL蛋白染色。结果:胎儿角膜细胞Fas蛋白及FasL蛋白全为胞质和/或胞膜着色。33/33例角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异。33/33角膜上皮细胞及内皮细胞FasL蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异,角膜基质细胞FasL蛋白的表达为0/33。新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas,FasL蛋白阳性表达量经统计学分析无差别。结论:新鲜和深低温保存后的5mo至足月龄胎儿角膜均可见Fas,FasL蛋白的表达。其中Fas在角膜上皮、基质和内皮细胞均表达,FasL在角膜上皮、内皮细胞表达,而基质细胞不表达。深低温保存对胎儿角膜Fas/FasL蛋白表达无影响。

VEGF和Fas/FasL蛋白在妊娠高血压患者胎盘的表达及意义

目的研究VEGF和Fas/FasL蛋白在妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达及其意义。方法收集妊娠期高血压疾病孕产妇74例为病例组,同期住院的正常孕妇70例为对照组,采用免疫组化染色SP法测定胎盘组织中VEGF和Fas/FasL的表达。结果病例组胎盘组织VEGF蛋白、FasL蛋的表达低于对照组,Fas蛋白表达高于对照组,且三者之间存在相关性。结论 VEGF和Fas/FasL共同参与了妊娠期高血压疾病的发生和发展。

非小细胞肺癌Fas/FasL基因蛋白的表达及其临床意义

目的 :研究Fas/FasL基因蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)的表达及其临床意义。 方法 :应用链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法染色技术测定 6 5例NSCLC组织标本Fas/FasL基因蛋白的表达水平 ,并分析其与病理类型、区域淋巴结转移、病理分级及TNM分期之间的关系。 结果 :NSCLC组织中Fas基因蛋白表达率显著低于正常肺组织 (46 .15 %vs 80 .0 0 % ,P <0 .0 5 ) ,而FasL基因蛋白表达率显著高于正常肺组织 (49.2 3%vs13.33% ,P <0 .0 5 ) ;FasL的表达与肺癌区域淋巴结转移有关 ,但Fas/FasL与肿瘤病理类型、病理分级及TNM分期无关。 结论 :Fas/FasL基因蛋白可能参与了非小细胞肺癌细胞凋亡的调节 ;检测FasL基因蛋白的表达有可能为临床判断NSCLC区域淋巴结转移。

氯氨酮对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas/FasL蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮对大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Fas蛋白配体(FasLi-gand,FasL)表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机平均分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮再灌注组(缺血30 min、再灌注4 h)及高剂量氯胺酮再灌注组(缺血30 min、再灌注4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与FasL蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注前心肌细胞凋亡指数、Fas蛋白阳性染色指数与炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为4.25±2.04、1.06±0.25和0,心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数、Fas蛋白阳性染色指数和炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为12.58±1.35,11.05±3.02和8.12±3.54,低剂量氯氨酮作用组心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为7.36±1.30,7.61±3.41和3.69±3.13;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与炎性细胞的FasL蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和FasL蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。

凋亡调节蛋白FasL,Fas和P53在乳腺癌的表达及其意义

目的观察人乳腺癌组织、癌旁相对正常乳腺组织中凋亡调节蛋白FasL,Fas、P53的表达,探讨FasL,Fas及P53与乳腺癌发生发展的关系。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌周相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法对21例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中Fas蛋白表达的阳性率明显低于癌周正常乳腺组织(P<0.01),有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(P<0.05)。乳腺癌组织中FasL、P53蛋白表达的阳性率均明显高于癌周正常乳腺组织(P<0.01),有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。结论乳腺癌组织中Fas/FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击,促使肿瘤的发生发展,对预测乳腺癌的预后有重要参考价值。突变型P53在乳腺癌中过表达,可能抑制肿瘤凋亡的发生,促进肿瘤生长。

胃癌组织FasL表达上调与肿瘤浸润性淋巴细胞凋亡的关系

目的 探讨胃癌FasL表达上调与肿瘤浸润性淋巴细胞 (TIL)凋亡的关系。方法 采用免疫组织化学S -P法 ,检测5 0例胃癌组织中FasL表达及TIL的数量 ,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术 (TUNEL) ,对 40例胃癌组织中凋亡的TIL及肿瘤细胞进行观察。结果 5 0例胃癌组织FasL蛋白表达程度不等 ,FasL表达程度高的组织的TIL计数低于FasL表达低的组织 (P <0 .0 5 ) ,同时其TIL凋亡指数高于FasL表达低的组织 ,而胃癌细胞的凋亡指数低于FasL表达程度低的组织 (P <0 .0 1) ,TIL凋亡指数与胃癌细胞的凋亡指数呈负相关 (γ =-0 .5 2 ,P <0 .0 1)。结论 人类胃腺癌有不同程度的FasL表达 ,其表达程度与TIL的浸润程度和凋亡相关 ,可能是胃癌免疫逃避的重要机制之一。

参杞强精胶囊对弱精症大鼠能量代谢及Fas、FasL蛋白表达的影响

目的:探讨参杞强精胶囊对弱精症大鼠能量代谢及Fas、Fas L蛋白表达的影响。方法:将40只SD健康雄性大鼠分为正常组、模型组、参杞强精胶囊组和生精胶囊组,采用奥硝唑(ORN)灌胃诱导形成大鼠生精功能障碍模型。参杞强精胶囊组予参杞强精胶囊灌胃,生精胶囊组予生精胶囊灌胃,正常组予生理盐水灌胃,连续给药4周。检测大鼠附睾组织α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、果糖(Fructose)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)的浓度,免疫组织化学法检测Fas、Fas L蛋白在大鼠睾丸实质组织中的表达。结果:模型组α-glucosidase、Fructose、LDH浓度明显低于正常组(P<0.05),MDA浓度明显高于正常组(P<0.05);参杞强精胶囊组、生精胶囊组α-glucosidase、Fructose及LDH浓度明显高于模型组,MDA浓度明显低于模型组(P<0.05);正常组、参杞强精胶囊组和生精胶囊组睾丸Fas、Fas L蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:参杞强精胶囊可改善弱精症大鼠能量代谢,抑制Fas、Fas L蛋白表达;改善能量代谢和凋亡蛋白表达可能是参杞强精胶囊治疗弱精症的主要机制。

大肠癌组织中凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl-2的表达及其意义

目的 探讨凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl -2在大肠癌组织中的表达及其意义。方法 应用S -P免疫组化法检测80例大肠癌组织及 2 0例正常大肠黏膜组织中Fas、FasL和bcl-2蛋白的表达情况。结果 大肠癌组织Fas蛋白阳性表达率显著低于正常大肠黏膜组织 ,淋巴结转移和肝转移者Fas蛋白阳性表达率低于无转移者 ,Ⅱ、Ⅲ级者低于Ⅰ级者 (P <0 .0 5 ) ,其表达与临床分期、组织学类型及病理分级相关 (P <0 .0 5 )。大肠癌组织中FasL、bcl -2蛋白阳性表达率均显著高于正常大肠黏膜组织 ,其表达与临床分期、组织学类型及病理分级均无关 (P >0 .0 5 )。大肠癌组织中Fas、FasL蛋白表达与bcl -2蛋白表达无关 (P >0 .0 5 )。结论 细胞凋亡是多因素共同调控的结果 ,在大肠癌发生、发展中 ,Fas FasL系统与bcl -2可能起协调抑制肿瘤细胞凋亡的作用。

戊地昔布对人食管癌Eca109细胞凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响

目的：探讨环氧化酶-2特异性抑制剂戊地昔布对人食管癌Eca109细胞凋亡及凋亡基因Fas／FasL表达的影响。方法：采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的抑制作用；流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测细胞凋亡和细胞周期分布；电子显微镜检测细胞凋亡形态结构改变；流式细胞术检测凋亡基因Fas和FasL蛋白的表达。结果：戊地昔布（25～400μmol／L）抑制人食管癌Eca109细胞的生长呈时间浓度依赖性；作用72h后，浓度为400μmol／L的戊地昔布对细胞生长的抑制率可达85．95%，凋亡率由（2.38±0．42）％增加到（48．46±0.73）%；50～400μmol／L时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低，G0／G1期的细胞比例增加；同时，流式细胞术显示，50～400μmol／L的戊地昔布可上调人食管癌Eca109细胞Fas及FasL蛋白的表达。结论：戊地昔布可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡，诱导凋亡的机制可能部分与其上调Fas及FasL的表达有关。

益气活血方对气虚血瘀证脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响

目的 :探讨益气活血方对气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响。方法 :采用气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型 ,用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉复制局部脑缺血再灌注模型 ,缺血 2h后再灌注 1 ,3,7d。用免疫组化染色法分别检测缺血皮质Fas、FasL蛋白表达。结果 :与模型组比较 ,益气活血方组Fas、FasL蛋白表达显著降低。结论 :益气活血方可能通过抑制Fas、FasL蛋白表达 ,减轻气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤。