固相萃取/气相色谱-质谱同时测定猪肉中4种β-激动剂类药物残留量

建立了用气相色谱-质谱同时检测猪肉中克伦特罗、沙丁胺醇、特布它林和非诺特罗残留量的方法。样品经β-葡萄糖苷酸酶水解后，用乙酸铵溶液提取，MCX固相萃取柱进一步净化，再用N，O双（三甲基硅基）三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷（BSTFA＋TMCS，99＋1）衍生化。采用选择离子监控模式（SIM）检测，所选的离子（斜体为定量离子）分别为克伦特罗：86、187、212、262，沙丁胺醇：86、350、369、440，特布它林：86、336、356、357，非诺特罗：236、322、356、412。克伦特罗和沙丁胺醇的检出限为0．5μg/kg，线性范围为0．5～200μg/kg；特布他林和非诺特罗的检出限为5μg／kg，线性范围均为5—200μg／kg；4种组分的线性相关系数均大于0．99。该方法的回收率为68％～128％，相对标准偏差为3％-17％。

高效液相色谱法测定饲料中三种β-兴奋剂

对饲料中三种β-兴奋剂类药物沙丁胺醇、非诺特罗和莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法进行了研究。采用0.1mol/LHCl-甲醇(9/1,V/V)提取药物,旋转蒸发至干,4mL0.3%乙酸复溶,依次用二氯甲烷和正己烷洗涤杂质,再用MCX固相萃取柱进一步净化样品。以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,采用反相高效液相色谱-荧光检测法进行测定,激发波长220nm,发射波长306nm。结果表明,三种β-兴奋剂类药物方法的检测限均为17μg/kg,定量限均为50μg/kg,平均回收率为88.6%～107.1%,变异系数为0.5%～9.7%。

气相色谱-质谱法同时测定动物性食品中8种β-兴奋剂的残留量

目的:应用OasisMCX固相萃取净化、气相色谱-质谱同时测定动物组织样品中8种β-兴奋剂(克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、喷布特罗、心得安、倍他索洛尔、非诺特罗)的残留量。方法:样品粉碎后经β-葡萄糖醛苷酶水解用乙酸钠缓冲溶液提取,MCX固相萃取柱进一步净化,再用N,O双(三甲基硅基)三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷(BSTFA+TMCS,99+1)衍生化,用美托洛尔(metoprolol)为内标。采用选择离子监控模式(SIM)检测,GC/MS测定分析。结果:8种β-兴奋剂不同水平的加标回收率范围为51.9%～101.7%(n=6),相对标准偏差为2.7%～16.0%(n=6)。结论:本方法操作简单,灵敏度高,选择性和重复性好。

美托洛尔联合非诺特罗对心力衰竭大鼠Fas及FasL的影响

目的评价β1肾上腺素受体(AR)阻滞剂美托洛尔联合β2AR激动剂非诺特罗对扩张型心肌病大鼠Fas、FasL表达的影响。方法将异丙基肾上腺素诱导的心力衰竭大鼠32只随机分为美托洛尔组(11只),联合治疗组(11只),安慰剂组(10只)。治疗8周后有创血流动力学评价心功能,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,Westernblot测定Fas及FasL表达。另外随机选取9只雄性Wistar大鼠作为对照组。结果美托洛尔组较安慰剂组左心室收缩末压(PES)、左心室压力最大上升速率(dp/dtmax)明显增高(P<0.05),左心室舒张末压(PED)、凋亡指数明显降低(P<0.01)。美托洛尔组较联合治疗组PES、dp/dtmax、左心室压力最大下降速率(dp/dtmin)进一步增高(P<0.05),PED、凋亡指数进一步降低(P<0.01)。安慰剂组Fas、FasL表达明显高于对照组(P<0.01),美托洛尔组及联合治疗组较安慰剂组Fas、FasL表达明显减低(P<0.01),联合治疗组较美托洛尔组进一步减低(P<0.05)。结论Fas、FasL信号系统的充分抑制很可能是β1AR阻滞剂联合β2AR激动剂使心肌细胞凋亡率进一步降低的重要机制之一。

非诺特罗及异丙托溴铵单用或联用吸入治疗小儿哮喘发作

目的 :观察非诺特罗、异丙托溴铵单用及联合用药治疗小儿哮喘急性发作的疗效。方法 :哮喘急性发作病儿 95例分 3组 :A组 30例 ,给 0 .5%非诺特罗剂量 ,年龄为 2～ 6a ,0 .1mL ,6～ 14a ,0 .2mL ;B组 30例 ,给 0 .0 2 5%异丙托溴铵剂量 ,年龄为 2～ 6a ,0 .5mL ,6～ 14a ,1mL ;C组 35例 ,给非诺特罗 +异丙托溴铵 ,2药剂量同前。 3组药物均加氯化钠注射液稀释至 3mL雾化吸入 ,tid× 2～ 5d。结果 :3组显效率依次为 63 % ,60 % ,86%。A组与B组显效率P >0 .0 5,分别与C组比较显效率P<0 .0 5。 3组均未见不良反应。结论 :非诺特罗、异丙托溴铵治疗小儿哮喘急性发作 ,单独用药疗效相似 。

非诺特罗对内毒素诱导的MyD88表达发挥抑制作用与抗炎效应相关

目的:探讨β2肾上腺素受体激动剂非诺特罗(fenoterol)在单核细胞上抑制内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症的分子机制。方法:选择THP-1单核细胞系,ELISA(酶联免疫吸附剂测定)方法检测在有或无fenoterol预先干预下,LPS刺激的THP-1细胞上清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)分泌及野生型和MyD88-/-(髓样分化因子,myeloid differentiation factor 88)小鼠腹腔巨噬细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-1β(白介素-1β)分泌;western blot方法检测有或无fenoterol预先干预下,LPS刺激的MyD88表达。结果 :fenoterol可以显著抑制THP-1细胞上LPS诱导的MyD88的表达及TNF-α、MCP-1的分泌和小鼠巨噬细胞TNF-α、IL-1β的分泌,MyD88-/-小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的反应显著低于野生型小鼠腹腔巨噬细胞。结论:MyD88在LPS诱导的炎症中发挥重要作用,fenoterol对LPS诱导的MyD88表达发挥抑制作用与其抗炎效应相关。

04048 Berodual Respimat令患者满意

在丹麦哥本哈根举办的第15届欧洲呼吸协会（ERS）年会上公布的一项调查结果显示，哮喘和慢性阻塞性肺病（COPD）患者对Boehringer Ingelheim公司的Berodual Respimat（ipratropium bromide／fenoterol，异丙托溴铵／非诺特罗）软雾吸入剂（Ⅰ）高度满意。

多因素影响下的流行病学研究

1988年4月8日,星期五,上午10:30,当笔者正在新西兰惠灵顿的办公室里工作时,一位不速之客来访,告诉笔者非诺特罗(fenoterol)这种药物很可能在新西兰引起哮喘死亡率的增加。2年后,在流行病学专家的努力下,新西兰严格控制使用非诺特罗,其所致的哮喘死亡率也下降了一半多。该药在澳大利亚、日本的使用也受限。其它国家的非诺特罗生产商也不得不建议药物剂量减半。美国食品药品监督管理局(FDA)也时刻关注着β受体激动剂的安全性,非诺特罗即属于该类的哮喘药物。一些重要的国际医学期刊上也发表了许多有关的评论,希望重新评估非诺特罗这一类药物的安全性。可以说当时那两年流行病学研究的成绩斐然,但是同时也是非常困难的两年。在这个时期,关于该药的流行病学研究是在相当大的压力下进行的,压力来自于非诺特罗的生产商、生产商聘请的流行病学专家、甚至是临床医生,因为临床医生不相信非诺特罗具有安全风险。这是一个非常尖锐的流行病学问题。这仅仅是一个例子,许多同行在进行药物流行病学研究时都曾遇到各种困难和阻力。

UPLC-MS/MS法测定动物源性食品中4个四环素类药物和10个β受体激动剂类药物残留

目的：建立同时测定动物源性食品中4个四环素类药物和10个β受体激动剂类药物残留的新型超高效液相色谱-串联质谱方法。方法：样品用三氯乙酸-乙腈提取并去除蛋白质,然后用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1mm,1.7μm）分离,以0.05%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱（0～10.0 min,3.0%A→90.0%A;10.0～10.1 min,90.0%A→3.0%A;10.1～13.0 min,3.0%A）,将待测药物分为多个时间段进行MRM扫描,四环素采用外标法定量,β受体激动剂类药物采用内标法定量。结果：土霉素、金霉素、四环素及强力霉素在5.0～100.0 ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.990;检出限为2.0 ng·mL^-1,定量限为5.0 ng·mL^-1,10种β受体激动剂在1.0～50.0 ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.990;检出限为0.5 ng·mL^-1,定量限为1.0 ng·mL^-1。结论：本研究前处理方法简单快捷,质谱采用多时间段MRM扫描方法,灵敏度显著提高,能够高效、灵敏地同时检测动物源性食品中的四环素类和β受体激动剂类药物。

GC-MS法测定动物性食品中15种兴奋剂残留量

目的:建立GC-MS法测定动物性食品中15种兴奋剂残留量的新方法。方法:样品粉碎后经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解用乙酸钠缓冲溶液提取,SLW固相萃取柱净化,N,O双(三甲基硅基)三氟乙酰胺+三甲基氯硅烷(BSTFA+TMCS,99+1)衍生化。采用选择离子监控模式(SIM)检测,GC/MS测定测定其含量。结果:15种β-兴奋剂不同水平的加标回收率范围为76.2%～101.4%,相对标准偏差为2.65%～9.53%。结论:本方法选择性和灵敏度高,实用性强。

氘代同位素内标液相色谱-串联质谱法测定猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物残留

目的:建立猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物残留的液相色谱-串联质谱测定方法。方法:样品先用酶水解后,加入沙丁胺醇-D3、克伦特罗-D9混合同位素内标溶液,采用C18和Oasis MCX小柱进行净化,弃去C18柱,用3%氨水甲醇溶液洗脱MCX小柱,收集洗脱液,氮气吹干,加0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95+5)溶解残渣,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,LC/MS/MS测定,内标法定量。结果:在猪肝中8种β受体激动剂类药物浓度在0.25μg/kg～5.0μg/kg范围内呈良好线性关系,平均回收率在78.0%～110.0%之间,最低定量检出限为0.02μg/kg～0.3μg/kg。结论:本方法简便、灵敏、重现性好、干扰少、特异性好,能满足猪肉、猪肝中8种β受体激动剂类药物痕量残留的检测要求。