消瘀泄浊饮对慢性肾衰竭营养不良大鼠残肾组织保护作用机制研究

[目的]观察消瘀泄浊饮对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠残肾组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)的影响。[方法]46只SD雄性大鼠,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用5/6肾切除同时予以低蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察营养不良发生时间,随机分成模型组、复方ɑ-酮酸组(开同组)、消瘀泄浊饮组,每组12只,治疗4周后检测血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、白蛋白(albumin,ALB)水平,应用光学显微镜(HE染色)观察肾组织病理学变化,用免疫组化法检测残肾组织MMP-9、TIMP-1、FN、ColⅣ的表达。[结果]CRF大鼠在术后10周出现营养不良。与治疗后模型组比,消瘀泄浊饮组大鼠血清ALB明显增加(P<0.05),营养状况和肾功能明显改善(P<0.05),消瘀泄浊饮组对于肾功能的改善要优于开同组(P<0.05),消瘀泄浊饮组肾脏病理组织损害轻于开同组;与正常组比,模型组TIMP-1、FN、ColⅣ表达增强,MMP-9表达减少(P<0.05);与模型组比,消瘀泄浊饮组MMP-9的表达明显增强,TIMP-1、FN、ColⅣ表达明显减弱(P<0.05)。[结论]消瘀泄浊饮可通过上调MMP-9、下调TIMP-1表达,减少FN、ColⅣ在肾组织中沉积,从而起到保护CRF营养不良大鼠残肾组织的作用。

链脲佐菌素致糠尿病大鼠心肌结缔组织生长因子及蛋白激酶C表达的实验研究

目的:从基因和蛋白水平阐明结缔组织生长因子(CTGF)在糖尿病大鼠心肌病变形成过程中的表达及其与蛋白激酶C(PKC)、心肌纤维化的关系,探讨CTGF在糖尿病心肌病中的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组(N组)、链脲佐菌素致糖尿病组(D组),在此基础上又分为四周组(N4、D4)和八周组(N8、D8),免疫组化检测心肌纤维连接蛋白(FN)、CTGF、PKC的表达;RT-PCR检测心肌组织中CTGFmRNA水平。结果:与N组相比,糖尿病大鼠心肌CTGF蛋白的表达逐渐增高,与FN、PKC蛋白表达进行性增高相平行;CTGFmRNA表达逐渐增高。结论:在糖尿病早期,心肌中PKC表达随着病程的延长而增多,通过CTGF表达的增多,引起FN表达的改变,从而促进心肌纤维化。

浅谈血小板的生理功能

血小板是维持血液在血管内畅通的重要组成部分，它的主要生理功能是参与止血、凝血与纤溶。因此，阐明血小板的生理机制将有助于对血栓性疾病的研究。

17-β雌二醇对人舌鳞癌细胞侵袭能力的影响及其机制探讨

目的:探讨17-β雌二醇(E2)对人舌鳞癌细胞侵袭能力的影响及ERRα-FN通路在其中的作用。方法:以人舌鳞癌TCA8113细胞为研究模型,E2刺激模型细胞24 h;侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力;ERRα特异性抑制剂XCT-790预处理模型细胞, siRNA转染干扰FN蛋白表达;蛋白质印记法检测FN蛋白表达水平。结果:E2(100 nmol/L)处理24 h能显著诱导TCA8113细胞侵袭率增加,上调FN蛋白表达(P<0.01);XCT-790预处理可降低E2诱导的细胞侵袭及FN蛋白表达(P<0.01);FN siRNA转染可沉默FN蛋白表达(P<0.01),并抑制E2对FN蛋白表达的诱导(P<0.01),抑制E2诱导的细胞侵袭(P<0.01)。结论:E2能诱导人舌鳞癌细胞侵袭能力增强,该作用与ERRα-FN通路信号通路有关。

RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子拮抗肾脏纤维化的发展

目的 研究RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子（CTGF）对高血压大鼠肾脏纤维化指标的影响.方法 本研究于2006-2008年在武汉协和医院心血管病研究所完成,实验以自发性高血压大鼠（SHR）为动物模型,随机（随机数字法）分为未干预的SHR组（n=10）和RNA干扰组（RNAi组,n=10）,并设置WKY大鼠（n=8）为正常对照组.构建并筛选出靶向大鼠CTGF的RNAi质粒重组体,通过升主动脉钳夹冠脉灌注法联合尾静脉注射将质粒转染至大鼠体内,RNA干扰结束后,获取肾脏标本,RT-PCR和Western blotting检测肾脏组织CTGF及纤维连接蛋白（FN）的mRNA和蛋白表达,免疫组化技术分析CTGF及FN在肾脏的空间表达.0.1%天狼星红-饱和苦味酸胶原染色分析肾组织胶原类型及代谢水平（以胶原容积分数CVF表示）,比色法测定肾脏组织羟脯氨酸含量.所有数据以（x-±s）表示,多个均数的组间比较采用单因素方差分析,以P〈0.05为有统计学意义.结果 RNA干扰使高血压大鼠肾脏组织CTGF的mRNA和蛋白表达分别下调66%和62%（P〈0.01）,FN mRNA和蛋白的表达也相应降低达56%和51%（P〈0.01）;免疫组化显示了同样的抑制效应,而且观察到CTGF及FN不同的空间表达,CTGF在肾实质和间质中均可表达,而FN主要在肾脏间质表达.天狼星红染色显示RNA干扰组胶原沉积减少,偏光显微镜下进一步观察到RNA 干扰主要抑制了I型胶原的合成;肾脏组织羟脯氨酸含量在RNA干扰组显著减少[SHR组：（0.596±0.067）μg/mg,RNAi组：（0.368±0.084）μg/mg,P〈0.01].结论 C-CTGF靶向性RNA干扰显著下调肾组织中CTGF的表达并相应抑制细胞外基质在肾间质的沉积,且这种效应独立于降压之外.提示CTGF在肾脏纤维化发生及进展中起着关键作用.

慢性阻塞性肺疾病患者血浆纤维连接蛋白分子的研究

通过８６例慢性阻塞性肺疾病（ｃＯＰＤ）患者及５５例健康老年人血浆纤维连接蛋白（Ｆｎ）含量检测和分子状态分析，探讨ＣＯＰＤ患者血浆Ｆｎ分子降解状态及其临床意义。结果显示ＣＯＰＤ患者血浆Ｆｎ含量降低的同时伴有降解片段生成增多，提示Ｆｎ降解增加是ＣＯＰＤ患者血浆Ｆｎ减少的原因之一，Ｆｎ降解程度与ＣＯＰＤ病程、病情密切相关。鉴于Ｆｎ降解产物对宿主抵抗力的影响（ＯＰＤ患、者血液中Ｆｎ降解片段增多可能是促使机体吞噬调理活性进一步降低和炎症反应恶性循环的又一因素。