克罗恩病中过表达的hsa_circRNA_103124下调FGF18抑制巨噬细胞样M2极化

背景:克罗恩病(CD)作为炎症性肠病的类型之一,慢性反复发作,严重影响患者生命质量,其发病机制目前并不明确。目的:通过研究CD中过表达的hsa_circ RNA_103124对下游基因表达的影响,比较hsa_circ RNA_103124及其下游基因在CD与健康对照组中的表达差异,探讨hsa_circ RNA_103124在CD发生、发展中的作用机制。方法:通过转录组测序,发现佛波酯(PMA)诱导巨噬细胞样极化hsa_circ RNA_103124过表达的THP1细胞株中差异表达的基因。以白细胞介素(IL)-4诱导hsa_circ RNA_103124过表达的THP1细胞巨噬细胞样M2极化,流式细胞术检测M2极化标志物CD206和CD163水平,q PCR检测hsa_circ RNA_103124及其下游基因表达。q PCR检测30例CD患者和30名健康对照者外周血单个核细胞中hsa_circ RNA_103124及其下游基因m RNA表达。结果:Hsa_circ RNA_103124过表达且PMA诱导极化的THP1细胞株中,成纤维细胞生长因子18(FGF18)低表达(P<0.01)。Hsa_circ RNA_103124抑制巨噬细胞样M2极化,CD206和CD163表达下调(P<0.05,P<0.01)。Hsa_circ RNA_103124过表达且M2极化的THP1细胞中,FGF18和CC趋化因子配体2(CCL2)表达下调(P<0.05,P<0.01)。CD患者外周血单个核细胞中hsa_circ RNA_103124表达上调(P<0.05),FGF18和CCL2表达下调(P<0.01,P<0.05)。结论:CD患者外周血中过表达的hsa_circ RNA_103124通过下调FGF18和CCL2表达,抑制巨噬细胞样M2极化,可能在CD发生、发展中起促进炎症的作用。

HDAC抑制剂对脉络膜黑色素瘤细胞系C918细胞增殖的影响及相关机制

目的:阐明组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对脉络膜黑色素瘤(CM)细胞系C918细胞增殖的影响并探讨相关机制。方法:使用倒置荧光显微镜观察不同浓度SAHA(0.625、1.25、2.5μmol/L)对C918细胞形态的影响;CCK-8法观察C918细胞活力的变化;细胞平板克隆形成实验和EdU染色法观察SAHA对C918细胞增殖的影响;同时,Western blot检测细胞增殖相关蛋白c-Myc、细胞周期蛋白CyclinA2和CDK2以及HDAC7和成纤维细胞生长因子18(FGF18)的表达。结果:与空白对照组比较,光镜下见SAHA可减小C918的细胞密度,促进细胞皱缩,且随着SAHA浓度的增加对细胞的抑制作用也增强;CCK-8法检测结果显示SAHA浓度依赖性抑制C918细胞活力,2.5μmol/L浓度时抑制率达80%;Western blot结果表明SAHA可呈浓度依赖地降低C918细胞中的增殖蛋白c-Myc、细胞周期蛋白CyclinA2和CDK2的表达;另外,1.25μmol/L SAHA显著降低EdU染色阳性细胞数和细胞克隆数。更为重要的是,与空白对照组相比,SAHA能浓度依赖地降低HDAC7和FGF18的表达。结论:SAHA能够通过抑制HDAC7/FGF18信号通路抑制CM细胞系C918细胞的增殖。

干扰成纤维细胞生长因子-18对结肠癌细胞的抗肿瘤研究

目的初步探讨干扰成纤维生长因子18(fibroblast growth factor-18,FGF-18)在结肠癌中的抗肿瘤作用。方法体外培养结肠癌细胞株SW480,分为Control组、shRNA-NC组和sh-FGF-18组;克隆实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Hoechst观察凋亡后细胞形态变化;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell检测细胞侵袭能力;HE染色观察小鼠肝和肺组织转移情况;Western印迹检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标记物E-钙粘蛋白(E cadherin,E-cad),N-钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad),纤维连接蛋白(fibronectin,FN)水平;裸鼠成瘤实验检测肿瘤体积及大小;免疫组化检测小鼠肿瘤组织E-cad、N-cad、FN在结肠癌组织中的阳性表达。结果与shRNA-NC组比较,FGF-18-shRNA组细胞FGF-18 mRNA和蛋白水平相对表达水平降低,克隆细胞和侵袭细胞减少,划痕距离增加,凋亡细胞增多,E-cad蛋白水平增加,N-cad和FN蛋白水平减少;E-cad在sh-FGF-18组中的阳性表达高于shRNA-NC组,N-cad和FN的表达低于shRNA-NC组(P<0.05)。与shRNA-NC组比较,sh-FGF-18组中原发灶瘤体重量变轻,体积变小(P<0.05),肝和肺组织表面转移灶较少(P<0.05)。结论干扰FGF-18基因表达抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,抑制裸鼠移植瘤生长能力,可能通过抑制EMT途径影响肿瘤转移。

非酒精性脂肪性肝病大鼠血清细胞因子CK 18-M30及FGF 21的表达及意义

目的检测非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清细胞角蛋白18 M30片段(CK 18-M30)及成纤维细胞生长因子21(FGF 21)的水平,探讨其与NAFLD的相关性。方法成年雄性SD大鼠18只,随机分为对照组(8只)和模型组(10只)。分别用基础饲料喂养和高脂饲料喂养,第8周时取大鼠血液检测血清肝功能、血脂等生化指标及细胞因子CK 18-M30和FGF 21,肝脏组织采用HE染色观察脂肪变性情况并计算NAFLD活动度(NAS)积分。结果与对照组比较,模型组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、CK 18-M30及FGF 21水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);NAS量化积分显示模型组大鼠肝脏脂肪变性程度较对照组严重(P<0.01)。模型组大鼠血清CK 18-M30与总胆固醇及NAS积分呈正相关(分别为r=11.27,P<0.001;r=3.370,P=0.003),血清FGF 21与天门冬氨酸氨基转移酶及TG呈正相关(分别为r=0.248,P=0.031;r=61.35,P<0.001)。结论 NAFLD大鼠细胞因子CK 18-M30水平明显升高且与肝脏NAS积分呈正相关,提示细胞因子CK 18-M30对于诊断NAFLD具有一定的价值。

初级纤毛参与成纤维细胞生长因子18介导的软骨细胞增殖和表型调控的机制研究

目的探究初级纤毛在成纤维细胞生长因子18(fibroblast growth factor 18, FGF 18)介导的软骨细胞增殖和表型调控中的作用及机制。方法通过CCK8法和免疫荧光染色检测不同浓度FGF18对大鼠软骨细胞增殖和初级纤毛表达的影响;设置对照组、FGF18组、水合氯醛组和FGF18+水合氯醛组,通过免疫荧光染色检测初级纤毛表达,甲苯胺蓝染色检测细胞外基质分泌,Live/dead实验检测细胞活性,qPCR检测成软骨相关基因COL Ⅱ和SOX9的表达变化,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、表型蛋白COL Ⅱ和细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)通路蛋白表达。结果不同浓度FGF18对软骨细胞增殖均有促进作用,20 ng/ml时效应最明显;FGF18能下调初级纤毛的发生率(0 ng/ml,77.91%±5.53%;5 ng/ml,52.91%±5.61%;10 ng/ml,42.12%±5.20%;20 ng/ml,36.53%±4.88%;40 ng/ml,33.44%±5.98%),但上调其平均长度[0 ng/ml,(1.63±0.67)μm;5 ng/ml,(2.67±0.90)μm;10 ng/ml,(2.71±0.97)μm;20 ng/ml,(2.76±1.37)μm;40 ng/ml,(2.79±1.13)μm];FGF18能维持细胞活性并促进细胞外基质分泌,上调COL Ⅱ和SOX9基因表达;但水合氯醛破坏初级纤毛结构后,纤毛发生率为(9.10±2.44)%,活细胞占比为72.86%±2.95%,水合氯醛+FGF18组纤毛发生率为(10.01±2.23)%,活细胞占比为(76.94±5.62)%,相比对照组[纤毛发生率为(77.91±5.53)%,活细胞占比为(96.81±1.38)%]和FGF18组[纤毛发生率为(36.53%±4.88)%,活细胞占比为(96.29±2.17)%]均明显降低,同时,FGF18的促增殖和促基质分泌作用受到抑制,COL Ⅱ和SOX9基因表达下调;FGF18能促进CyclinD1、COL Ⅱ蛋白表达,并上调P-ERK/T-ERK的比值,破坏纤毛结构则抑制FGF18对相关蛋白的促表达效应。结论 FGF18能促进软骨细胞增殖和维持软骨表型,并且初级纤毛参与FGF18介导的软骨细胞生长发育调控。

细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建

目的构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞。方法分别克隆FGF18基因启动子区域的5'同源臂和3'同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒。提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区。结果经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC。结论成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产。

FGF18在脊椎动物胚胎发育中的表达和调控作用

成纤维细胞生长因子18(FGF18)是成纤维细胞生长因子家族的成员之一,参与调控一系列重要的生长发育过程,包括脑的发育、肢体和躯干的形成、骨骼生长发育和胚胎发育等。就FGF18在脊椎动物胚胎发育时期的神经系统、呼吸系统、骨骼、肢体及不对称发育等组织、器官中的表达和调控作用进行了综述,以期为药物开发提供理论依据。

非酒精性脂肪性肝炎患者血清CK18和FGF-21水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者血清细胞角蛋白18片段M30(CK18-M30)和成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)水平变化及其临床意义。方法2018年10月~2020年10月我院收治的85例NASH患者和45例同期体检的健康人,NASH患者接受肝活检。采用ELISA法检测血清CK18-M30和FGF-21水平,使用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG)、胰岛素(FIN)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和三酰甘油(TG),用稳态模型评价胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果NASH患者血清FIN、FPG、TC、TG、HOMA-IR、LDL-C、CK18-M30和FGF-21水平分别为(17.1±4.9)mIU/L、(5.4±1.4)mmol/L、(5.4±0.9)mmol/L、(2.0±0.6)mmol/L、(1.4±0.2)、(3.6±0.6)mmol/L、(96.4±14.6)U/L和(283.6±79.2)pg/mL,均显著高于健康人【分别为(13.1±1.1)mIU/L、(4.9±0.9)mmol/L、(4.8±0.7)mmol/L、(1.5±0.2)mmol/L、(1.3±0.1)、(2.6±0.5)mmol/L、(70.3±8.7)U/L和(155.3±60.4)pg/mL,均P<0.05】;48例中重度NASH患者血清FIN、FPG、TC、TG、CK18-M30和FGF-21水平分别为(18.4±43.9)mIU/L、(5.7±1.3)mmol/L、(5.6±0.9)mmol/L、(2.1±0.5)mmol/L、(101.9±13.9)U/L和(299.5±77.4)pg/mL,均显著高于37例轻度NASH患者【分别为(15.3±4.2)mIU/L、(5.1±1.2)mmol/L、(4.9±0.8)mmol/L、(1.8±0.6)mmol/L、(89.3±12.5)U/L和(263.0±69.8)pg/mL,均P<0.05】;35例有合并症(高血脂、糖尿病、高血压)的NASH患者血清TC、TG、HOMA-IR、CK18-M30和FGF-21水平分别为(5.8±0.9)mmol/L、(2.2±0.5)mmol/L、(1.5±0.6)、(101.7±14.3)U/L和(306.9±63.1)pg/mL,均显著高于无合并症患者【分别为(5.1±0.8)mmol/L、(1.9±0.6)mmol/L、(1.3±0.5)、(92.6±13.1)U/L和(267.2±77.9)pg/mL,均P<0.05】。结论NASH患者血清CK18-M30和FGF-21水平显著升高,在中重度肝脂肪变及有合并高血脂、高血压和糖尿病的NASH患者,这些指标的升高更显著,检测血清CK18-M30和FGF-21水平,可能有助于评估NASH病情。

肝硬化腹水患者血清CK18 FGF-21水平与食管静脉曲张破裂出血及肝功能分级间的关系

目的:分析肝硬化腹水患者血清细胞角蛋白18(CK18)、成纤维细胞生长因子21(FGF-21)、表达水平与食管静脉曲张(EV)破裂出血及肝功能分级的关系。方法:选取本院245例肝硬化腹水患者,检测血清CK18、FGF-21水平,比较不同肝功能Chid-Pugh分级患者血清CK18、FGF-21水平,进行相关性分析;按照EV是否破裂出血分为出血组与未出血组,分析EV破裂出血影响因素。结果:肝功能A级患者CK18水平明显低于B级与C级,B级明显低于C级(P<0.05);肝功能A级患者FGF-21水平明显高于B级与C级,B级明显高于C级(P<0.05);肝功能分级与CK18呈正相关(P<0.05),与FGF-21呈负相关(P<0.05);出血组与未出血组在EV程度、肝功能Chid-Pugh分级、CK18、FGF-21表达水平差异具有统计学意义(P<0.05);Logistic分析显示,肝功能Chid-Pugh分级、CK18属于EV破裂出血危险因素(P<0.05),FGF-21属于保护因素(P<0.05)。结论:肝硬化腹水患者血清CK18、FGF-21表达水平与EV破裂出血及肝功能分级密切相关。

FGF18与骨性关节炎患者血清炎症细胞因子、脂肪细胞因子及骨关节严重程度的相关性

目的探究成纤维细胞生长因子18(FGF18)与骨性关节炎(OA)患者血清炎症细胞因子、脂肪细胞因子及骨关节严重程度的相关性。方法选取于本院进行诊断和治疗的120例OA患者,根据Kellgren⁃Lawrence(K⁃L)分级至少2级,并分为KL2组(n=53)、KL3组(n=39)、KL4组(n=28),并选取同期健康志愿者30例作为对照组,对比各组血清FGF18、炎症细胞因子[肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素⁃1β(IL⁃1β)、IL⁃6、IL⁃17、IL⁃23]、脂肪细胞因子[瘦素(Leptin)、脂联素(APN)、内脂素(visfatin)]水平,Spearman相关性分析各指标见的相关性。结果OA患者各组FGF18水平显著低于对照组,且K⁃L分级越高,FGF18水平越低,各组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。OA患者相比于对照组炎症细胞因子TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、IL⁃17、IL⁃23水平均显著升高,且K⁃L分级各组各指标比较差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,OA患者Leptin、visfatin水平显著升高,APN水平显著降低,且K⁃L分级各组各指标比较差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,FGF18与K⁃L分级、TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、IL⁃17、IL⁃23、Leptin、visfatin存在显著负相关性,与APN存在显著正相关性(P<0.05)。结论随着OA患者骨关节疾病严重程度增加,FGF18水平随之降低,这可能与OA患者血清炎症细胞因子和脂肪细胞因子异常表达有关,检测相关指标对于OA患者病情评估及治疗具有重要意义。

强力霉素对骨关节炎大鼠膝关节软骨成纤维细胞生长因子-18表达的影响

目的探讨强力霉素对骨关节炎大鼠膝关节软骨成纤维细胞生长因子-18(FGF-18)表达的影响。方法32只SD大鼠通过膝关节前交叉韧带离断建立骨关节炎模型,随机分为A、B、C、D组,分别每日1次腹膜腔注射0.9%氯化钠溶液1 mL及3、6、9 mg/(kg·d)强力霉素溶液,共8周;免疫组化染色检测股骨髁FGF-18表达。结果强力霉素处理组FGF-18表达低于对照组(P<0.05),而不同剂量强力霉素组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论强力霉素可减少骨关节炎大鼠膝关节软骨FGF-18表达。

FGF家族对鼠类毛发生长作用的研究

为了研究成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factors,FGF)家族各因子对毛囊生长的影响,试验就FGF家族在毛囊中表达量较多的几个因子进行总结,并充分了解这几个因子在毛囊发育周期的功能与表达。结果表明:FGF18成为治疗脱发的新靶点,FGF7,10,22对于损伤皮肤修复具有重要影响,同时FGF10已经成为治疗伤口的药物。中国成为世界上唯一一个将FGF10药物用于临床应用的国家。

成纤维细胞生长因子18对骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化的影响及其机制

目的探讨成纤维细胞生长因子18(FGF18)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、成骨分化的影响及其机制。方法SD大鼠长骨提取BMSCs,用含不同浓度FGF18的成骨诱导分化培养基培养,采用细胞试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖。设定空白对照组,碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色和ALP活性检测评估BMSCs的成骨分化能力;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测核心结合蛋白因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白4(BMP4)和Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)基因的mRNA表达;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测成骨相关蛋白(Runx2、COLⅠ、OCN)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白[细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化(p)-ERK1/2、p38、p-p38]的表达。两组间比较采用t检验。结果CCK结果显示,FGF18对BMSCs的促增殖效应随浓度升高和时间延长而递增。干预7 d和14 d后,FGF18组ALP染色和茜素红染色的着色程度均明显高于对照组。ALP活性随FGF18浓度升高和时间延长而递增。干预3 d时,FGF18组Runx2、BMP4基因的mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(1.891±0.327比1.103±0.331,2.115±0.403比1.134±0.327,t=2.933、3.274,P<0.05)。干预7 d时,FGF18组Runx2、BMP4和COLⅠ基因的mRNA表达均较对照组明显上升,差异均有统计学意义(5.852±0.525比1.903±0.451,5.115±0.633比1.734±0.527,4.451±0.553比1.525±0.483,t=9.883、7.110、6.902,P<0.05)。干预3 d和7 d时,FGF18组Runx2、COLⅠ、p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量均高于对照组,差异有统计学意义(Runx2为0.927±0.108比0.647±0.087,1.257±0.188比0.825±0.103,t=3.497、3.490,P<0.05;COLⅠ为0.538±0.062比0.405±0.047,0.729±0.106比0.513±0.074,t=2.961、2.894,P<0.05;p-ERK1/2为0.908±0.113比0.614±0.072,0.968±0.142比0.686±0.086,t=3.800、2.942,P<0.05;p-p38为1.203±0.194比0.826±0.082,1.135±0.186比0.803±0.076,t=3.100、2.862,P<0.05)。结论FGF18可以通过MAPK信号通路来实现对BMSCs细胞增殖以及早期成骨分化的调控,且具有良好的诱导成骨分化的生物活性。

姜黄素通过微小RNA-122-5p/成纤维细胞生长因子18通路促进骨髓间充质干细胞骨向分化的研究

目的探讨姜黄素对骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化的调控机制。方法2018年2月至2019年10月,采用15μmol/L浓度姜黄素处理BMSCs细胞(购自中国科学院上海细胞库),细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡,蛋白印迹法(Western blot)检测聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)、SRY-盒转录因子9(Sox9)和成纤维细胞生长因子18(FGF18)表达。将微小RNA(miRNA,miR)-NC组(转染miR-NC)、miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)、姜黄素+miR-NC组(转染miR-NC)、姜黄素+miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、姜黄素+pcDNA组(转染pcDNA)、姜黄素+pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)转染至BMSCs细胞,对照组仅加入培养基。检测并比较不同组增殖、凋亡和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测miR-122-5p与FGF18间的结合。两组间比较采用t检验,多组间均值比较采用SNK-q法分别比较组间差异。结果姜黄素组BMSCs细胞增殖率、Aggrecan、ColⅡ和Sox9蛋白表达显著高于对照组(t=18.275、12.001、8.598、10.124,P<0.05),凋亡率显著低于对照组(t=18.056,P<0.05),差异均有统计学意义。姜黄素组BMSCs中miR-122-5p表达显著低于对照组(0.47±0.03比1.01±0.07,t=21.272,P<0.05),FGF18的mRNA和蛋白表达显著高于对照组(mRNA为2.78±0.17比0.99±0.05,蛋白为1.56±0.13比1.01±0.09,t=30.305、10.436,P<0.05),差异均有统计学意义。过表达miR-122-5p可抑制BMSCs细胞增殖和Aggrecan、ColⅡ、Sox9蛋白表达并促进凋亡,过表达FGF18则有相反的作用。过表达miR-122-5p可显著减弱姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的调控作用,而过表达FGF18则可明显增强姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的作用。结论姜黄素可促进BMSCs细胞增殖和成骨分化并抑制凋亡,其机制可能与调控miR-122-5p/FGF18信号通路有关。

全段成纤维细胞生长因子-23、-klotho蛋白、单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素-18在糖尿病肾病中的变化及其意义

目的探讨血清全段成纤维细胞生长因子-23（full-length fibroblast growth factor，iFGF-23）、-klotho蛋白、单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractant protein 1，MCP-1）和白细胞介素（interleukin，IL）-18的水平在糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）中的变化及其临床意义。方法选取湖北省中西医结合医院确诊的DN患者162例（DN组），收治时间2014年8月至2016年10月，根据尿微量白蛋白排泄率（urinary albumin ejection rate, UAER），将DN患者分为三个亚组：UAER〈20 g/min为A组（52例）、UAER 20～200 g/min为B组（81例）和UAER〉20 g/min为C组（29例）。另选80例健康体检患者作为对照组，采用酶联免疫吸附法（enyme-linked immunosorbent asscy，ELISA）测定血清中iFGF-23、MCP-1和IL-18含量，采用胶体金法检测-klotho蛋白水平，采用全自动生化仪检测血中的尿微量白蛋白、血肌酐（serum creatinine, Scr）和尿素氮（blood urea nitrogen, BUN），肾小球率过滤估计值（estimated glomerular filtration rate, EGFR）采用中国人改良的肾脏膳食实验进行计算。比较分析三组患者各指标变化情况。结果DN组患者的血清iFGF-23、MCP-1和IL-18高于对照组（P〈0.05）；-klotho蛋白低于对照组（P〈0.05）；且-klotho蛋白水平在A、B和C三组间逐渐降低（P〈0.05），iFGF-23、MCP-1和IL-18水平在A、B和C三组间组间依次增高（P〈0.05）。结论血清iFGF-23、MCP-1和IL-18在DN患者中增高，klotho蛋白降低，与患者UAER变化水平有关。

非酒精性脂肪性肝炎患者血清CK18和FGF-21水平变化及临床意义探讨

目的探讨血清细胞角蛋白18(CK18)、成纤维细胞因子21(FGF-21)水平对非酒精性脂肪性肝炎的诊断价值。方法选取2019-01-01-2021-01-31朝阳市第四医院收治的120例非酒精性脂肪性肝炎患者作为研究对象,为观察组。另选取同院同期60位健康志愿者为对照组。比较2组CK18、FGF-21表达水平以及各生化指标水平。结果观察组CK18水平为(124.18±18.44)U/L,高于对照组的(73.27±12.46)U/L,F=19.284,P<0.001;FGF-21水平为(287.29±89.72)pg/mL,高于对照组的(137.65±54.81)pg/mL,F=11.851,P<0.001;随着病情的加重非酒精性脂肪性肝炎患者CK18、FGF-21水平逐渐升高,且差异有统计学意义,P<0.05。观察组AST水平为(38.48±8.73)U/L,高于对照组的(23.15±6.44)U/L,F=12.053,P<0.001;ALT水平为(45.28±8.77)U/L,高于对照组的(13.06±3.01)U/L,F=27.622,P<0.001;TC水平为(2.04±0.61)mmol/L,高于对照组的(0.95±0.21)mmol/L,F=13.432,P<0.001;TG水平为(4.78±0.74)mmol/L,与对照组的(4.67±0.82)mmol/L比较,差异无统计学意义,F=0.906,P=0.365;LDL水平为(2.91±0.74)mmol/L,与对照组的(2.87±0.63)mmol/L比较,差异无统计学意义,F=0.358,P=0.720;HDL水平为(1.01±0.42)mmol/L,低于对照组的(1.64±0.51)mmol/L,F=8.818,P<0.001。CK18和FGF-21水平与患者病情严重程度成正相关,r=0.879,P<0.001。结论CK18、FGF-21水平在非酒精性脂肪性肝炎患者血清中显著上升,且随着病情加重水平不断上升,这对非酒精性脂肪性肝炎的诊断具有一定参考价值。

心脏神经脊衍生物表达转录因子2基因在子宫内膜癌中的研究进展

心脏神经脊衍生物表达转录因子2（Hand2）基因是碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）蛋白家族中最重要的转录因子之一，其在多种脏器组织中表达，能够调节多种干细胞向终末细胞分化。子宫内膜癌作为严重威胁女性健康的生殖系统肿瘤，其发病机制尚未明确。最新研究表明，Hand2基因是子宫内膜癌中的一种甲基化热点，与子宫内膜癌的发生、发展有密切联系。文章阐述了Hand2基因在子宫内膜癌中的研究进展。

黄芩素抑制血管平滑肌细胞增殖作用及其机制研究

目的探索黄芩素抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用以及可能机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),经黄芩素处理。以异硫氰酸荧光素(FITC)染色法和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)观察HA-VSMC增殖情况,采用流式细胞术观察细胞凋亡情况。微阵列分析成纤维细胞生长因子(FGF)18基因及长链非编码核糖核酸(LncRNA)AK021954基因,实时定量聚合酶链反应(RTQ-PCR)及免疫印迹法检测FGF18 mRNA和蛋白表达量。结果黄芩素可抑制HA-VSMC的增殖并促进其凋亡。微阵列分析显示,黄芩素处理的HA-VSMC的下游靶基因中FGF 18下调最明显,而LncRNA AK021954为显著上调基因。干扰LncRNA AK021954可促进HA-VSMC的增殖并抑制凋亡。结论黄芩素可抑制VSMC的增殖并促进其凋亡,其机制可能是过表达LncRNA AK021954基因以剂量依赖方式抑制VSMC增殖,并降低FGF18的表达水平。