苯丙烷代谢途径中细胞色素P450的研究

苯丙烷次生代谢途径通过合成木质素、类黄酮等多种次生物质而影响植物的许多重要性状。细胞色素P450超家族参与苯丙烷途径的至少16种关键酶反应。从蛋白特征、功能、编码基因、表达调控等角度,综述了公共苯丙烷和主要分支途径中的细胞色素P450,如肉桂酸-4-羟化酶、类黄酮-3’-羟化酶、类黄酮-3’5’-羟化酶、阿魏酸5-羟化酶等。

沙苑子黄酮对衰老模型小鼠的自由基代谢及免疫力的影响

目的探讨沙苑子黄酮(FAC)对D-半乳糖(D-gal)致衰老模型小鼠的延缓衰老作用及其机制。方法选择ICR小鼠60只,将其随机分为6组:正常对照组(NG组)、模型对照组(MG组)、阳性药对照组(VE组,25mg·kg-1.d-1)、FAC高剂量组(FAC-H组,200mg·kg-1.d-1)、FAC中剂量组(FAC-M组,100mg.kg-1.d-1)及FAC低剂量组(FAC-L组,50mg·kg-1.d-1),各10只。除NG组外,其余5组使用D-gal按120mg·kg-1.d-1于小鼠背部皮下注射,连续30d,造成亚急性衰老模型。从造模的第21天开始,VE组小鼠灌服25mg.kg-1.d-1维生素,MG组小鼠灌服等体积0.9%氯化钠注射液,FAC-H、FAC-M、FAC-L组小鼠分别灌服相应浓度的FAC,连续10d。末次给药后30min从眼眶取血,按照测试盒要求检测并比较6组小鼠的自由基代谢〔超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平〕及免疫力指标〔胸腺指数(SI)、脾脏指数(TI)、碳廓清指数(K)及淋巴细胞转化率(用570nm测得OD值A代替)〕。本实验重复进行3次,所得数据取平均值。结果(1)与NG组比较,MG组小鼠血清SOD活性降低,MDA、NO水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。FAC-H组、FAC-M组、FAC-L组小鼠血清SOD活性较MG组显著提高,血清MDA、NO水平较MG组显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)MG组小鼠的TI、SI、K、A与NG组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。FAC-H、FAC-M、FAC-L组小鼠TI、SI、K、A与MG组比较,差异有统计学意义(P<0.05);K、A与VE组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论FAC具有抗衰老作用,能显著提高衰老小鼠血中SOD活性,降低MDA和NO水平,增加衰老模型鼠的免疫器官湿重指数,提高巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞转化率。其作用可能与增强非特异性免疫功能有关。

橄榄发育过程中风味物质的变化规律

通过对‘长营’橄榄及其芽变品种‘清榄1号’果实发育过程中风味物质含量,包括可溶性固形物、可溶性糖、可滴定酸、单宁、黄酮、多酚的测定,初步探讨橄榄果实风味形成机理。结果表明:(1)供试橄榄果形整齐,品种间糖、酸物质含量变化整体一致,酚类物质差异大。(2)花后50~110 d,橄榄果实体积增大,风味物质积累,其中,‘清榄1号’酚类物质在花后70~90 d出现小幅度降低;(3)花后110~170 d,橄榄果实可溶性固形物与糖含量积累,其他风味物质含量降低。(4)‘长营’花后110 d采收风味较佳,‘清榄1号’花后170 d采收风味佳。研究表明,橄榄果实风味形成与糖酸等物质关系不大,与酚类物质关系密切,花后110 d为研究橄榄风味形成的关键时期。

雪莲黄酮总甙抑制染色体损伤与SOD活性的相关研究

用微量全血培养研究雪莲黄酮总甙对染色体的保护作用与 SOD活性的相关性。结果显示雪莲黄酮总甙抑制丝裂霉素 C(MMC)诱导的淋巴细胞的微核形成和 SCE频率 ,同时促进淋巴细胞 SOD活性的增加。统计分析表明 ,淋巴细胞的微核形成率和 SCE频率与 SOD活性呈负相关 ,雪莲黄酮总甙诱导淋巴细胞

糖基转移酶GTBM的克隆、表达及其在芹菜素糖基化修饰中的应用

以耐有机溶剂菌库中的巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)YZ08为模板,设计相关引物克隆出糖基转移酶基因bmgt,构建工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-bmgt,诱导表达获得了糖基转移酶GT_(BM)。His-tag标签法纯化得到电泳纯的糖基转移酶GT_(BM),考察pH、温度、金属离子对酶活的影响及GT_(BM)对二甲基亚砜(DMSO)的耐受性。建立糖基转移酶GT_(BM)蔗糖合成酶SuSy双酶耦联催化体系,优化pH、温度、DMSO浓度、蔗糖浓度、酶液添加量等参数对双酶耦联糖基化芹菜素的影响。结果发现:GT_(BM)有着较好的DMSO耐受性,在pH 7.5、温度35℃、10%(体积分数)DMSO、20 mmol/L蔗糖、0.1 mmol/L尿苷二磷酸(UDP)、60 mU/mL GT_(BM)和20 mU/mL蔗糖合成酶SuSy条件下,芹菜素糖基化反应的转化率在4 h达到95%,且产物单一。GT_(BM)有着较好的DMSO耐受性、区域选择性和较高的糖基化芹菜素产率。

沙苑子黄酮诱导白血病细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的探讨沙苑子黄酮(FAC)诱导白血病细胞凋亡及其机制。方法采用图像分析术、流式细胞术、形态学观察与免疫细胞化学等方法,研究FAC诱导K562细胞凋亡。结果FAC对K562细胞有增殖明显抑制作用,最高抑制率达96.17%;并可诱导K562细胞凋亡,最大凋亡率达64.24%。同时,FAC可使K562细胞Fas阳性表达升高,阳性率为12.53%。结论FAC抑制K562的增殖可能与FAC诱导细胞凋亡有关;细胞调亡可能与Fas表达升高有关。