携带flk1的重组减毒沙门氏菌的构建及其抗肿瘤血管生成的研究

目的:观察携带鼠血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,flk1)的重组减毒鼠伤寒沙 门氏菌诱导的flk1特异性免疫应答及抗肿瘤血管生成作用。方法:构建真核表达载体pcDNA3.1.-flk1,并将其转化到减毒鼠 伤寒沙门氏菌SL7207中,体外感染小鼠巨噬细胞,用Western印迹对表达产物进行鉴定,将重组菌口服免疫小鼠,分析免疫后 小鼠体内的特异性CTL应答。采用藻酸盐微囊实验观察其对体内肿瘤血管生成的影响。结果:免疫印迹试验表明携带poD NA3.1-flk1表达载体的重组菌感染的小鼠巨噬细胞能表达flk1蛋白,免疫小鼠脾淋巴细胞产生针对flk1的特异性CTL活性。 重组疫苗菌的免疫能够明显抑制小鼠体内肿瘤血管的形成。结论:携带flk1的重组减毒沙门氏菌经口服免疫,诱导小鼠产生 抗flk1的特异性免疫反应,且能明显产生抗肿瘤血管生成作用。

脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化的研究

目的:诱导脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化。方法:胶原酶法分离培养脐带华通胶间充质干细胞,第3代细胞以含2-巯基乙醇的分化培养基培养,应用RT-PCR和流式细胞仪从mRNA和蛋白水平检测Flk1阳性细胞分化水平。结果:脐带华通胶间充质干细胞Flk1mRNA及蛋白表达极低,分化培养基培养后表达上调,48h达高峰(P<0.05),之后表达降低。结论:2-巯基乙醇可诱导脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化,为从中分选Flk1阳性细胞进行进一步研究提供了依据。