福林酚法高通量测定牛奶中蛋白酶活力的优化

[目的]优化福林酚法测定牛奶中蛋白酶活力的试验条件,解决检测结果重复性差、检测效率不高等问题。[方法]用酶标仪测定牛奶中蛋白酶活力,同步对比各试验条件对测定结果的影响。[结果]酶标仪测定时,显色保温时间15 min以上、取样350μL、福林试剂浓度0.33~0.5 mol/L时,牛奶中蛋白酶活力测定结果重复性好,检测效率高。[结论]酶标仪测定牛奶中蛋白酶活力是一种检测效率高、结果重复性好的方法,更适合乳品企业大批量筛查牛奶中蛋白酶活力。

Accuracy Enhancement of the Folin-Ciocalteu Method for Propolis

This study presents an optimization of the Folin-Ciocalteu spectrophotometric method for the determination of total phenol content. Multivariate optimization using factorial planning 22 with a central point and central composite planning was constructed to evaluate the influence of variables in the process and maximize radiation absorption with minimal radiation scattering caused by solid formation. X-ray fluorescence and X-ray diffraction spectrometry were used to evaluate the chemical composition of solids formed and nephelometric and spectrophotometric studies were also used to evaluate whether the type, origin, dilution and dry extract contents of commercial propolis extracts would significantly influence the increase in radiation scattering and absorption. The optimized methodology added several advantages, such as reduction of reagents, time analysis, and higher accuracy.

不同采收期北冰红葡萄中总酚含量变化规律研究

为综合评价北冰红葡萄品种特性,以3个采样点(阳坡、阴坡、半阴半阳坡)5个不同采收期(T1、T2、T3、T4、T5)的北冰红葡萄为研究对象,测定单粒果重、可溶性固形物等指标,以福林肖卡法重点考察了果实不同部位(果皮和果籽)总酚含量的变化,旨在研究不同采收期北冰红葡萄果实酚类物质的积累规律.结果表明,3个采样点在T5时期的北冰红葡萄果实中总酚含量分别为88.48 mg/g、88.06 mg/g、78.34 mg/g,均显著(p<0.05)高于其他时期的总酚含量,且单粒果重和可溶性固形物含量随采收期的延长而增长,确定了北冰红葡萄的最适采收期为T5.该研究结果将为实际生产中进一步调控酿酒葡萄总酚物质积累和果实品质提供一定的理论依据.

热处理香榧种子油中美拉德产物的生成及其对两种总酚测定方法的影响

通过测定香榧种子油褐变指数与3-脱氧葡萄糖醛酮、丙酮醛及5-羟甲基糠醛3种美拉德产物的含量验证美拉德反应的发生并进一步考察3种产物对福林-酚法与固蓝BB盐法测定总酚的影响。结果表明:香榧籽在150℃热处理90~120 min时,福林-酚法测得的油脂总酚含量上升,而固蓝BB盐法的测定结果与之相反。低温长时热处理及高温处理皆会引起香榧种子油在294 nm波长处吸光度上升,且在经高温(150℃)处理的油样中检出了3-脱氧葡萄糖醛酮(0.21~0.47μg/g)与5-羟甲基糠醛(0.06~0.40μg/g),在各加热条件的油样中皆检出丙酮醛(0.67~1.73μg/g)。福林-酚法测定中,3-脱氧葡萄糖醛酮、丙酮醛在765 nm波长处的吸光度皆随浓度增大呈线性升高,同浓度3种美拉德产物在此波长处的响应排序为3-脱氧葡萄糖醛酮>丙酮醛>5-羟甲基糠醛;3-脱氧葡萄糖醛酮的存在会造成福林-酚法测定结果偏大且干扰程度与样品总酚含量无关,而与其本身浓度呈正相关。固蓝BB盐法测定中,3种美拉德中间产物在420 nm波长处的吸光度变化皆不显著。因此,针对加工过程中易形成3-脱氧葡萄糖醛酮、丙酮醛的食品基质,选择固蓝BB盐法替代福林-酚法测定总酚含量可降低这两种物质对定量的干扰。

武当山区民间药材毛连菜不同生长部位总酚酸含量比较研究

目的:比较毛连菜不同生长部位酚酸类成分富集情况,为毛连菜后续研究提供参考。方法:采用福林酚比色法,以没食子酸为对照品,在732 nm波长处测定毛连菜不同生长部位总酚酸含量。结果:毛连菜植株不同生长部位总酚酸分布有一定差异,花序中含量最高,各部位含量由高到低依次为:花序>叶>茎>根,含量分别为3.8415%、2.6092%、1.3445%、0.9632%。结论:毛连菜植株不同生长部位酚酸类成分分布存在明显差异,因此可根据总酚酸含量的差异,选择采收部位。

自建Lowry法测定B型肉毒神经毒素蛋白质含量

目的:探究适宜的B型肉毒神经毒素中蛋白质含量测定方法。方法:分别应用《中国药典》四部(2020版)中蛋白质测定法项下福林酚法(药典方法)和自建的Lowry法(本方法)测定3批B型肉毒神经毒素中的蛋白质含量,比较两种方法的线性关系、精密度和准确度。结果:两种方法的线性都具有良好的相关性,药典方法和本方法线性绝对系数R2分别为0.9972和0.9987;两种方法都具有良好的精密度和重复性,但本方法的相对标准偏差更低。结论:自建的Lowry法更适合B型肉毒神经毒素中蛋白质含量的测定。

粉葛与野葛中异黄酮的HPLC指纹对照和比色测定

目的：建立粉葛与野葛药材异黄酮的HPLC指纹对照测定法、定性和定量相似性评价指标、以及粉葛与野葛总异黄酮含量的比色测定法。方法：采用C18色谱柱,甲醇-0.1%甲酸溶液梯度程序洗脱测定粉葛与野葛药材异黄酮的HPLC指纹图谱,统计分析确定共有模式;以最接近共有模式的粉葛与野葛药材为指纹对照,采用夹角余弦法和相对欧氏距离法,分别从化学成分定性和含量2个方面对不同产地粉葛与野葛药材的HPLC指纹图谱进行定性与定量相似性评价。以葛根素为对照,Folin-phenol试剂为显色剂,未加供试品的溶液为空白,70℃水浴显色后,在750 nm下比色法测定粉葛与野葛药材的异黄酮总量。结果：建立的粉葛与野葛异黄酮成分HPLC指纹图谱分离好、专属性强,野葛色谱图中有20个特征指纹峰,粉葛色谱图中有11个特征指纹峰。比色法测定异黄酮总量的线性范围为12-40 mg·L^-1（r=0.999 5）,平均回收率101.1%（n=6）。结论：粉葛与野葛异黄酮指纹图谱以指纹对照品为参照,同时进行夹角余弦法定性和相对欧氏距离法定量相似性评价,重复性和耐用性良好,并且更全面和实用。Folin-phenol试剂比色法测定粉葛与野葛异黄酮总量准确灵敏。

4种鳞毛蕨科植物中总酚含量的分析

对 4种鳞毛蕨科常见植物中酚类物质进行了分析及含量测定 .样品经乙醇—三氯乙酸的混合液提取 ,以 Folin-酚法于波长 5 0 0 nm下测定 ,以没食子酸为标准计算样品中总酚物质的含量 .结果表明 4种鳞毛蕨科植物中的总酚含量较高 ,以 Folin-酚法测定蕨类植物中酚类物质的含量是可行的 ,且在 90 min内显色稳定性好 ,平均回归率为 1 1 2 .85± 3.4 5 % 。

橄榄多酚含量测定方法的比较

采用酒石酸铁法、福林酚试剂法和紫外分光光度法3种方法测定橄榄多酚类物质含量。结果表明:3种方法检出限及定量限的顺序为:紫外分光光度法<福林酚试剂法<酒石酸铁法,且3者存在显著性差异(P<0.05)。3种方法回收率顺序为:酒石酸铁法>福林酚试剂法>紫外分光光度法,但差异不显著(P>0.05),这3种方法都具有良好的重复性。利用福林酚试剂法与紫外分光光度法测得的多酚含量显著高于酒石酸铁法(P<0.01),其中福林酚试剂法测得的多酚含量略高于紫外分光光度法,但差异不显著(P>0.05)。同时,各方法测得的多酚含量存在良好的线性关系。实验证明紫外分光光度法灵敏度高、重复性好,且操作简单、快速、经济,是一种较理想的测定橄榄多酚的方法。

福林法测定猕猴桃多酚含量的研究

研究了以没食子酸为标准品,采用福林法测定猕猴桃多酚含量的适宜条件。结果表明,当福林试剂与10%Na2CO3之比为1:2(V:V),福林试剂体积为4ml,反应温度为25℃,反应时间为120min时,多酚含量在1～6μg/ml范围内与吸光值呈良好的线性关系。测定方法的RSD为0.81%,平均回收率为98.8%,有较好的精密度和准确度。

福林酚比色法测定优泌嘉胶囊中多肽

目的采用福林酚比色（Lowry）法测定优泌嘉胶囊（五谷虫）中多肽含有量。方法优泌嘉胶囊水提液中加入碱性铜试液和福林酚溶液后,紫外-可见分光光度法在750 nm波长处测定吸光度。结果优泌嘉胶囊中多肽平均含有量为15.12%,即49.90 mg/粒（以每粒胶囊0.33 g计）。多肽检测质量浓度的线性范围为40.4~404μg/m L（r=0.999 0）,精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2%,平均回收率为99.6%（RSD为0.96%,n=9）。结论建立的多肽定量测定方法简单易行,结果准确可靠。

贮藏温度和时间对蜂王浆水溶性蛋白质的影响

采用SDS-PAGE和Folin-酚试剂法,对贮存不同温度和时间下的蜂王浆水溶性蛋白进行了初步研究。结果表明:-20℃时,蜂王浆水溶性蛋白相对稳定,40 d后蛋白质中相对分子质量为88 000(P1)的谱带才开始降解,且降解较慢;4℃时,蜂王浆水溶性蛋白中相对分子质量为88 000(P1)的谱带在5 d内降解迅速,水溶性蛋白中相对分子质量80 000(P2)的谱带在40 d时候已经降解;在20℃时蜂王浆水溶性蛋白中P1谱带迅速降解,P2谱带在28 d至40 d降解较快。水溶性蛋白中P1谱带的变化在一定程度上能够代表蜂王浆的新鲜度的变化。

藕节中总酚含量的福林法测定

采用福林法测定了藕节中总酚的含量 ,确定了以没食子酸为标准品福林法测定藕节中总酚的适宜方法。结果表明 ,没食子酸在福林试剂与 10 %Na2 CO3 之比为 1∶1(v∶v) ,体积为 3ml,反应温度为 2 5℃ ,反应时间为 30min ,浓度为 2～ 10 μg/ml时与其吸光值呈良好的线性关系。测定方法的回收率为 89.5 %～ 96 .5 % ,变异系数为 2 .14 % ,有较好的精确度和准确度。

茶叶中蛋白质含量的测定

[目的]了解茶叶中蛋白质的含量。[方法]研究了Folin-酚检测方法测定蛋白质的基本原理、试剂的制备及配制,以绿茶的嫩叶粉、老叶粉和茶叶提取物为检测样品,选用Folin-酚的检测方法对茶叶中的蛋白质含量进行了检测。[结果]Folin-酚法测定茶叶中蛋白质含量的线性方程为y=0.637 6x+0.043 5,线性相关系数为0.999 4,绿茶中蛋白质的含量分别为嫩叶粉9 234.8 mg/kg、老叶粉4 125.6 mg/kg、茶叶提取物26 508.8 mg/kg。[结论]研究表明,Folin-酚法测定茶叶中蛋白质含量的原理科学、方法成熟,茶叶中蛋白质含量丰富,可以进行有效的应用。

福林-酚法测定蜂毒口服结肠定位释药微丸含量

目的建立天然蜂毒多肽口服结肠定位释药微丸的含量测定方法。方法采用福林 酚试剂法。结果蜂毒多肽质量浓度在 2 5～ 2 5 0mg/L内线性关系良好 ,相关系数为 0 9994。测定微丸样品的平均回收率为 1 0 0 5 % ,平均相对标准差为 1 1 % (n =9)。

响应面设计试验法优化复方药茶饮料提取工艺参数

目的优选复方药茶饮料的最佳提取工艺,为工业化生产提供依据。方法采用福林酚法测定药茶中茶多酚的含量并作为评价工艺的指标,响应面设计试验法优选复方药茶饮料最优提取工艺参数,单因素考察提取次数。结果药茶粉碎成20目,92℃热浸法提取2次,第1次加水量为药茶量的16倍,提取时间25 min;第2次加水量为药茶量的12倍,提取时间25 min。结论按此工艺制备复方药茶饮料可最大限度的保存茶香,提取工艺科学、合理、可行。

燕麦分离蛋白提取工艺研究

[目的]优化燕麦分离蛋白提取工艺。[方法]以河北省高寒作物研究所提供的燕麦为试材，采用国标中经典方法测定粉状燕麦的成分，用超临界二氧化碳萃取技术对粉状燕麦进行脱脂，通过正交试验研究了碱提酸沉法制取燕麦分离蛋白的最佳工艺条件。[结果]燕麦的水分、灰分、脂肪、蛋白质及淀粉含量分别为4．99％、1．93％、8．38％、12．21％和50．23％。正交试验结果表明，采用碱提酸沉法提取燕麦分离蛋白的最佳工艺条件为：浸提液料比为9，浸提pH值为10，浸提温度为50℃，浸提时间为90min；在该条件下燕麦分离蛋白提取率达60．37％。用SDS—PAGE法测定的燕麦蛋白的分子量范围在20～43kDa。[结论]用该工艺提取燕麦分离蛋白简便、准确且提取率高。

脱病毒半夏中半夏蛋白的含量测定

目的测定脱病毒半夏块茎及种植半夏中总蛋白的含量。方法采用Folin-酚法测定半夏块茎中总蛋白含量。结果于波长750 nm处比色,标准曲线线性良好,线性方程为Y=0.001 47 X+0.011 08r,=0.999 4,脱病毒半夏蛋白含量为2.86%。结论 Folin-酚法简便、快速、灵敏度高,可以用于半夏块茎中总蛋白含量的测定。

CHE饲料发酵过程中蛋白酶活力的在线监测

蛋白酶(包括酸性蛋白酶、碱性蛋白酶及中性蛋白酶)是饲料复合酶制剂中最主要的酶之一。此文对CHE饲料中的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶进行了提取并进行了活性测定。结果表明各个酶的活性并不相同,其中酸性蛋白酶的活性最大,碱性蛋白酶最小,并且酸性蛋白的最适温度是40℃左右活性,最大值为5.203μg/min,中性蛋白酶的最适温度是30℃左右性,最大值为2.9754μg/min,而碱性蛋白酶的最适温度是22℃左右性,最大值为0.4482μg/min。

用福林法测定烟叶中总酚含量的探讨

用福林法测定烟叶中总酚的含量是一种既正确又快速的方法。样品回收率为96.4%～102.2%,变异系数约3%。与常用的醋酸铅沉淀法相比,测定结果虽稍高一点,但更接近烟叶中多酚的实际含量。