注射用全氟丁烷微球超声造影联合血清αL-岩藻糖苷酶和叉头框蛋白A1及簇集蛋白对小肝癌和肝脏局灶性结节增生的鉴别价值

目的探讨注射用全氟丁烷微球超声造影联合血清αL-岩藻糖苷酶(AFU)、叉头框蛋白A1(FOXA1)、簇集蛋白对小肝癌和肝脏局灶性结节增生(FNH)的鉴别价值。方法选取2021年3月至2024年3月新疆维吾尔自治区人民医院收治的264例小肝癌或FNH可疑患者,根据病理检查结果分为小肝癌组(87例)和FNH组(177例)。采用注射用全氟丁烷微球超声造影检查比较相关参数。采用酶联免疫吸附法检测和比较血清AFU、FOXA1、簇集蛋白表达。绘制受试者工作特征曲线分析血清AFU、FOXA1、簇集蛋白对小肝癌及FNH的诊断价值。采用四格表分析注射用全氟丁烷微球超声造影联合血清AFU、FOXA1、簇集蛋白对小肝癌及FNH的鉴别价值。结果小肝癌组对比剂早于周围到达、对比剂灌注缺损、动脉期增强后扩大>10%占比均高于FNH组,Kupffer相有高增强环占比低于FNH组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。小肝癌组血清AFU、FOXA1、簇集蛋白水平均高于FNH组[(64±6)U/L比(36±5)U/L,(18.4±2.5)μg/L比(13.3±2.2)μg/L,(120±16)μg/L比(84±14)μg/L],差异均有统计学意义(t=38.944、16.829、18.925,均P<0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示血清AFU、FOXA1、簇集蛋白诊断小肝癌和FNH的曲线下面积为0.895(95%置信区间:0.857~0.934)、0.900(95%置信区间:0.861~0.940)、0.866(95%置信区间:0.820~0.913),三者联合诊断小肝癌和FNH的曲线下面积为0.979(95%置信区间:0.965~0.994)。注射用全氟丁烷微球超声造影检测小肝癌和FNH的准确度高于AFU、FOXA1、簇集蛋白单独检测,略低于四者联合检测。结论注射用全氟丁烷微球超声造影联合血清AFU、FOXA1、簇集蛋白可提高对小肝癌和FNH的鉴别价值。

食管鳞状细胞癌中FOXA1蛋白表达及预后意义

目的观察叉头盒蛋白A1(forkhead box protein A1,FOXA1)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测532例ESCC芯片组织中FOXA1蛋白表达,分析FOXA1蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性。结果532例ESCC组织中183例呈FOXA1高表达(34.4%)。FOXA1高表达与ESCC脉管内癌栓(P=0.032)、肿瘤低分化程度(P=0.032)和肿瘤大小(P<0.001)相关。Ⅰ+Ⅱ期ESCC FOXA1高表达患者的总生存期(overall survival,OS)和无瘤生存期(disease free survival,DFS)均有缩短趋势(OS:P=0.094;DFS:P=0.107)。生存期≥24个月的ESCC患者,FOXA1高表达组OS和DFS显著缩短(OS:P=0.048;DFS:P=0.047)。多因素生存分析显示,肿瘤浸润深度是影响ESCC患者预后的独立危险因素。结论FOXA1在ESCC中高表达,其高表达与肿瘤大小、脉管内癌栓和低分化程度相关。FOXA1高表达组OS和DFS有预后较差的趋势,当患者的OS和DFS≥24个月时,FOXA1高表达可能作为ESCC患者预后不良的参考指标。

血清组蛋白去乙酰化酶2、叉头框蛋白A1在子痫前期诊断及妊娠结局评估中的价值

目的探究血清组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)、叉头框蛋白A1(FOXA1)表达在子痫前期(PE)诊断、严重程度及妊娠结局评估中的价值。方法以分娩的150例PE孕妇(PE组)和100例健康孕妇(对照组)为研究对象,将PE组分为轻度PE(MPE组,n=81),重度PE(SPE组,n=69)。比较不同组别孕妇血清HDAC2、FOXA1水平,然后根据其HDAC2、FDXA1水平把PE孕妇分为HDAC2高表达组(n=72)和HDAC2低表达组(n=78),FOXA1高表达组(n=74)和FOXA1低表达组(n=76)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HDAC2、FOXA1对PE及不良妊娠结局的预测效能。Spearman相关性分析HDAC2、FOXA1与PE病情的关系。结果PE组血清HDAC2、FOXA1水平均明显低于对照组(P<0.05)。血清HDAC2、FOXA1及联合诊断PE的ROC曲线下面积(AUC)为0.863、0.843、0.912。MPE组血清HDAC2、FOXA1水平明显高于SPE组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,HDAC2、FOXA1均与PE严重程度呈负相关(r=-0.667、-0.712,均P=0.000)。对照组血清HDAC2、FOXA1水平明显高于PE组(P<0.05)。HDAC2低表达组早产儿、肝脏损害、新生儿窒息比例高于HDAC2高表达组(P<0.05)。FOXA1高表达组肝脏损害、早产儿、胸腹腔积液、新生儿窒息比例低于FOXA1低表达组(P<0.05)。血清HDAC2、FOXA1及联合预测PE孕妇不良妊娠结局的AUC为0.788、0.799、0.885。结论PE孕妇血清HDAC2、FOXA1水平与PE病情具有明显负相关性,低水平HDAC2、FOXA1的PE患者不良妊娠结局风险较高,临床可监测HDAC2、FOXA1来辅助诊断PE及预测妊娠结局。

FOXA1表达与子宫内膜癌患者肌层浸润和预后的相关性

目的 探讨叉头框蛋白A1(FOXA1)表达水平与子宫内膜癌(EC)患者肌层浸润和预后的相关性。方法 选取EC患者100例作为研究对象,采用免疫组织化学方法,检测FOXA1表达水平情况,并根据FOXA1表达水平分为高表达组和低表达组;随访观察12个月,评估患者预后情况,绘制Kaplan-Meier曲线,采用log-rankχ^(2)检验对比FOXA1表达水平与患者预后的相关性。结果 两组FIGO分期、肌层浸润深度对比差异具有统计学意义(P<0.05);随访观察24个月,因各种原因失访4例(高表达组1例,低表达组3例),最终纳入96例,其中高表达组41例,低表达组55例,Kaplan-Meier生存曲线显示,高表达组生存率显著高于低表达组(log-rankχ^(2)=4.136,P=0.042)。结论 FOXA1表达水平与EC肌层浸润和预后相关,FOXA1高表达水平EC患者肌层浸润程度较轻,预后较好。

苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1中miR-584-5p/miR-211-5p/叉头框蛋白A1轴参与IDH1和HSPB1转录调控

目的探索苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)中微RNA(miRNA)调控叉头框蛋白A1(FOXA1)表达上调的机制,并筛选和验证FOXA1的潜在靶基因。方法利用TargetScan,ENCORI数据库和THBEc1细胞与非转化细胞16HBE间miRNA的二代测序(NGS)结果,综合预测靶向调控FOXA1的miRNA,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进一步筛选预测的miRNA。采用miRNA模拟物(mimics)转染THBEc1细胞,Western印迹法测定FOXA1蛋白表达水平,对靶向调控FOXA1的miRNA进行鉴定。利用hTF,JASPAR和ENCODE数据库结合FOXA1敲除细胞THBEc1-ΔFOXA1-c34和对照细胞THBEc1-ctrl间mRNA的NGS结果,综合预测FOXA1的潜在靶基因。利用RT-qPCR进一步对预测的靶基因[跨膜蛋白98(TMEM98)、IKAROS家族锌指2(IKZF2)、异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)、肿瘤坏死因子受体相关因子5(TRAF5)、骨形态发生蛋白2型受体(BMPR2)、热休克蛋白B1(HSPB1)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、golgin A7家族成员B(GOLGA7B)和维甲酸相关孤核受体A(RORA)]进行筛选。通过转染过表达质粒构建稳定表达FOXA1的细胞模型THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe,即FOXA1功能回补,并利用RT-qPCR和Western印迹法验证FOXA1的潜在靶基因。结果TargetScan和ENCORI数据库分别预测到213和145个可能靶向调控FOXA1的miRNA。NGS共发现351个miRNA在THBEc1细胞中表达下调(差异倍数<0.5,且错误发现率<0.05),其中hsa-miR-584-5p(miR-584-5p),hsa-miR-142-5p(miR-142-5p)和hsa-miR-211-5p(miR-211-5p)在上述2个数据库中均被预测可靶向调控FOXA1。RT-qPCR结果证实,THBEc1细胞中miR-584-5p,miR-142-5p和miR-211-5p表达水平显著低于16HBE细胞(P<0.01)。转染miR-584-5p模拟物或miR-211-5p模拟物均可显著下调THBEc1细胞FOXA1蛋白表达水平(P<0.01),而转染miR-142-5p模拟物对THBEc1细胞FOXA1蛋白表达水平无明显影响。THBEc1-ΔFOXA1-c34和THBEc1-ctrl细胞间的20个差异表达基因(差异倍数<0.5或>2,且错误发现率<0.05)被hTF,JASPAR和ENCODE数据库均预测为FOXA1的潜在靶基因。RT-qPCR结果显示,在THBEc1-ΔFOXA1-c34中,TMEM98,IKZF2,IDH1,TRAF5,BMPR2,HSPB1和RUNX2 mRNA表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01),GOLGA7B和RORA mRNA表达水平显著上调(P<0.05,P<0.01);在THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe中,IDH1和HSPB1的mRNA表达水平显著上调(P<0.01),余7个基因mRNA表达水平未见改变。Western印迹结果显示,THBEc1-ΔFOXA1-c34细胞中IDH1和HSPB1表达水平较THBEc1-ctrl均显著下调(P<0.01);而恢复FOXA1表达的THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe细胞中IDH1和HSPB1表达水平较对照细胞THBEc1-ΔFOXA1-c34-ctrl均显著上调(P<0.01)。结论BaP恶性转化细胞THBEc1中miR-584-5p/miR-211-5p/FOXA1轴参与IDH1和HSPB1转录调控。

乳腺癌组织中AR、FOXA1表达与临床病理参数的相关性

目的:探讨乳腺癌(BC)组织中雄激素受体(AR)、叉头框蛋白A1(FOXA1)表达与临床病理特征的关系。方法:收集德州市第二人民医院2022年5月至2022年11月手术切除的120例乳腺癌标本,采用免疫组织化学方法检测AR、FOXA1的表达情况,采用χ^(2)检验分析AR、FOXA1的表达与临床病理特征的关系。结果:AR、FOXA1在乳腺癌组织、癌旁组织和良性乳腺肿瘤组织中的表达差异有统计学意义(χ^(2)=15.442、11.011,均P<0.005);AR、FOXA1的表达与组织分级(χ^(2)=25.424、15.130,均P<0.005)、组织是否存在坏死(χ^(2)=4.320、6.430,均P<0.05)、分子分型(χ^(2)=25.998、16.680,均P<0.005)、雌激素受体(ER)(χ^(2)=26.619、17.761,均P<0.001)、PR(χ^(2)=17.531、5.607,均P<0.005)、Ki67(χ^(2)=16.954、10.606,均P<0.005)的表达相关;AR、FOXA1的表达与组织分级(rs=0.453、0.349,均P<0.001)、分子分型(rs=0.405、0.323,均P<0.001)、ER(rs=0.471、0.385,均P<0.001)、PR(rs=0.382、0.261,均P<0.005)、Ki67(rs=0.376、0.297,均P<0.005)的表达呈正相关,与组织坏死(rs=-0.190、-0.231,均P<0.05)呈负相关。结论:AR、FOXA1的表达与乳腺癌患者的组织分级、组织坏死以及分子分型等临床病理参数具有相关性。

FOXA1蛋白和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的分析上皮性卵巢癌(EOC)组织中叉头框蛋白A1(FOXA1)与Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-联环素(β-catenin)的表达情况,并探讨其临床意义。方法收集60例EOC癌组织标本(EOC组),42例上皮性卵巢良性肿瘤组织标本(良性组),以及30例正常卵巢上皮组织标本(对照组),采用免疫组织化学法检测标本中FOXA1与β-catenin蛋白表达;分析FOXA1与β-catenin蛋白表达与EOC临床病理特征、预后的关系。结果EOC组患者癌组织中FOXA1阳性表达率明显高于良性组和对照组,β-catenin阳性表达率低于良性组和对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)分别=19.59、21.37、11.78、25.70,P均<0.05);EOC患者癌组织FOXA1阳性表达率与FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移相关(χ^(2)分别=7.25、7.55、8.16,P均<0.05);β-catenin阳性表达率与FIGO分期、淋巴结转移、病理分级相关(χ^(2)分别=27.80、5.71、6.17,P均<0.05);FOXA1阳性组总生存率低于FOXA1阴性组,β-catenin阳性组总生存率高于β-catenin阴性组,差异均有统计学意义(χ^(2)分别=5.98、4.75,P均<0.05);FIGO分期Ⅲ/Ⅳ期、合并淋巴结转移、病理分级G3、FOXA1阳性是EOC患者总生存率的危险因素,β-catenin阳性是保护因素(HR分别=2.39、2.13、1.51、3.40、0.68,P均<0.05)。结论EOC患者癌组织中FOXA1阳性表达、β-catenin阴性表达可能预示着卵巢癌分期晚、存在淋巴结转移以及预后不良。

FOXA1和YAP在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中FOXA1蛋白和YAP蛋白的表达及其与胃癌患者临床病理特征的关系。方法收集西安交通大学医学部第二附属医院2009年1月至2013年12月间临床资料保存完整的胃癌组织80例和相应癌旁正常组织80例。应用免疫组化染色测定FOXA1和YAP1在胃癌及癌旁组织中的表达,分析两者表达与胃癌临床病理特征的关系;并进一步检测两者在胃癌中表达水平的相关性。结果 FOXA1蛋白和YAP蛋白在胃癌组织中的免疫组化评分显著高于其在癌旁组织中的免疫组化评分(FOXA1:3.50±0.20 vs.1.13±0.11,P<0.01;YAP:3.40±0.20vs.1.55±0.14,P<0.01);FOXA1蛋白的阳性表达与肿瘤大小、浸润深度、有无淋巴结转移及TNM分期有显著相关性(P<0.01);YAP蛋白的阳性表达与胃癌的分化程度以及淋巴结转移有显著相关性(P<0.01);FOXA1和YAP蛋白在胃癌组织中的表达具有显著相关性(P<0.01)。结论FOXA1和YAP在胃癌组织中存在显著高表达;FOXA1和YAP的阳性表达与胃癌患者的临床病理特征密切相关,两者在胃癌的发生发展可能有协同促进作用,联合检测这两种蛋白的表达对胃癌的临床诊断及预后判断有一定的指导意义。

三阴型乳腺癌FOXA1和BRCA1的表达及其对预后的意义

目的:研究三阴型和非三阴型乳腺癌中叉头框蛋白A1(FOXA1)、BRCA1蛋白、P53和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况和预后意义。方法:收集暨南大学附属第一医院乳腺癌的标本113例,根据免疫组化检测雌激素受体、孕激素受体和HER-2的表达情况分为三阴型(A组)、luminal型(B组)及HER-2过表达型(C组)乳腺癌。应用免疫组化EnVision两步法检测3组样本FOXA1、BRCA1、P53和VEGF的表达情况。结果:FOXA1总的阳性表达率为63.7%(72/113),A组阳性表达率为45.2%(19/42),B组为88.0%(44/50),C组为42.9%(9/21),FOXA1在3组中的表达存在显著差异(P<0.01);BRCA1总的阳性表达率为47.8%(54/113),A组阳性表达率为66.7%(28/42),B组为44.0%(22/50),C组为19.0%(4/21),BRCA1在3组中的表达存在显著差异(P<0.01);FOXA1阳性表达率在Ⅰ～Ⅱ期临床分期和组织学1～2级中高于阴性表达组(P<0.05),FOXA1阳性表达率与P53、VEGF表达和复发率呈负相关(P<0.05);BRCA1阳性表达率在Ⅲ期临床分期和组织学3级中高于阴性表达组(P<0.05),BRCA1阳性表达率与P53、VEGF表达和复发率呈正相关(P<0.05)。结论:FOXA1和BRCA1在乳腺癌中表达存在差异。BRCA1可作为三阴型乳腺癌预后不良的指标。

子痫前期患者血清VEGF、PAPP-A水平与妊娠结局的相关性研究

目的探讨子痫前期(PE)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、妊娠相关蛋白A(PAPP-A)水平与妊娠结局的相关性。方法选取2020年3月—2023年3月海南现代妇女儿童医院收治的100例PE患者,根据病情程度分为PE组(68例)和重度PE组(32例),另取该院同期体检无妊娠期高血压疾病的孕妇40例作为对照组。收集资料和检测血清VEGF、PAPP-A、CC趋化因子配体17(CCL17)水平和叉头盒蛋白A1(FOXA1)、HIPK3相对表达量;采用多因素逐步Logistic回归模型分析影响PE患者妊娠结局的危险因素。结果根据不同妊娠结局将100例PE患者分为结局不良组(38例)和结局良好组(62例)。对照组血清VEGF、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3均高于PE组和重度PE组(P<0.05),PAPP-A水平低于PE组和重度PE组(P<0.05);PE组血清VEGF、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3高于重度PE组(P<0.05),PAPP-A水平低于重度PE组(P<0.05)。结局良好组血清VEGF、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3均高于结局不良组(P<0.05),PAPP-A水平低于结局不良组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,VEGF水平[OR=1.942(95%CI:1.376,2.741)]、PAPP-A水平[OR=2.073(95%CI:1.405,3.059)]、CCL17水平[OR=2.145(95%CI:1.432,3.213)]、FOXA1 mRNA[OR=1.878(95%CI:1.352,2.609)]和HIPK3[OR=1.793(95%CI:1.284,2.504)]是影响PE患者妊娠结局的独立因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清VEGF、PAPP-A、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3预测PE患者妊娠结局的临界值分别为260.050 pg/mL、735.250μg/mL、426.505 ng/L、0.655和0.415,敏感性分别为67.7%(95%CI:0.593,0.726)、69.4%(95%CI:0.631,0.743)、62.9%(95%CI:0.584,0.695)、75.8%(95%CI:0.714,0.803)和88.7%(95%CI:0.815,0.911),特异性分别为86.8%(95%CI:0.822,0.913)、63.2%(95%CI:0.575,0.695)、86.8%(95%CI:0.823,0.927)、94.1%(95%CI:0.908,0.981)和97.4%(95%CI:0.943,0.994)。Spearman相关性分析结果显示,血清VEGF、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3与PE患者病情程度均呈负相关(r_(s)=-0.374、-0.512、-0.435和-0.511,均P<0.05),血清VEGF、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3与PE患者妊娠结局均呈负相关(r_(s)=-0.412、-0.446、-0.463和-0.492,均P<0.05),血清PAPP-A水平与PE患者病情程度、妊娠结局均呈正相关(r_(s)=0.487和0.503,均P<0.05)。结论PE患者血清VEGF、PAPP-A、CCL17、FOXA1 mRNA、HIPK3均呈异常表达,并与病情程度、妊娠结局相关,且对妊娠结局有一定预测价值。

FOXA1在宫颈癌组织中的表达及对肿瘤细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨人叉头框蛋白A1(FOXA1)在浸润性宫颈鳞癌中的表达情况及FOXA1低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:收集2014年10月~2019年10月于都江堰市中医医院和绵阳市中心医院行手术治疗后经病理科确诊为浸润性宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤样病变患者的石蜡组织标本114例,并分为宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ-Ⅱ级(CINⅠ-Ⅱ)、宫颈上皮内瘤样病变Ⅲ级(CINⅢ)及宫颈癌3组,另收集同期因子宫肌瘤行子宫切除术的正常宫颈组织40例作为对照组,采用免疫组化法检测4组标本中FOXA1的表达情况。选择HeLa细胞并分为空白对照组、干扰组和阴性对照组,应用RT-PCR和Western印迹检测各组细胞中FOXA1、MMP-9 mRNA及蛋白的表达,细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果:免疫组化染色中,FOXA1表达定位于肿瘤细胞的胞浆和胞核内,主要以胞浆内为主,FOXA1在宫颈鳞癌中的染色阳性率高于CIN各级组织及对照组(χ^2=120.346,P<0.05);抑制FOXA1表达后其mRNA及蛋白的表达均明显降低(F=45.344、207.074,均P<0.05);干扰组细胞的迁移和侵袭能力较其他2组均明显减弱(F=120.901、16.952,均P<0.05),且MMP-9 mRNA及蛋白表达均降低(F=5477.500、377.625,均P<0.05)。结论:FOXA1在宫颈鳞癌中表达增高,抑制FOXA1的表达可降低HeLa细胞的迁移和侵袭能力,其可作为宫颈癌诊断和治疗的新的分子生物学靶点。

甲状腺髓样癌中FOXA1表达及临床意义

目的 探讨甲状腺髓样癌(MTC)组织中叉头盒A1(FOXA1)的表达,及其与临床病理特征和预后的关系。方法 收集2012年2月至2021年7月23例MTC手术患者标本。采用免疫组化染色和实时荧光定量PCR法(q PCR)检测MTC组织中FOXA1蛋白和mRNA表达。分析FOXA1表达与MTC临床病理特征以及预后的关系。结果 FOXA1蛋白表达主要定位于细胞质,19例(82.61%)阳性,其中5例(26.32%)降钙素受体(CTR)蛋白表达阴性。仅1例(4.35%) FOXA1蛋白和CTR蛋白表达均为阴性。FOXA1蛋白表达与年龄、性别、促结缔组织性增生、淀粉样沉积、肿瘤侵袭、甲状腺外延伸、RET基因状态无关(P>0.05);与肿瘤直径、TNM分期、Ras基因、PTEN蛋白表达有关(P<0.05)。MTC组织中FOXA1蛋白表达与术前血清CEA(r_(s)=0.291,P=0.704)、CT(r_(s)=0.373,P=0.805)水平均无关。MTC组织中FOXA1 mRNA相对表达量与FOXA1蛋白表达呈正相关(r_(s)=0.843,P<0.001)。4例FOXA1蛋白阴性表达患者全部获得生化治愈。8例死亡患者FOXA1蛋白免疫组化评分为5.0(4.0,10.0),明显高于其他15例存活患者[3.0(2.0,6.0)],差异具有统计学意义(P=0.019)。结论 FOXA1在MTC中呈阳性表达,且FOXA1蛋白高表达与疾病侵袭性进展及不良预后有关。

FOXA1、GATA-3与ER在乳腺癌中的表达及预后意义

目的:研究原发性浸润性乳腺癌(非特指)中GATA结合蛋白3(GATA-3)、叉头框架蛋白A1(FOXA1)及雌激素受体(ER)的表达、相互关系及其预后意义.方法:收集乳腺癌改良根治标本138例,依据ER、孕激素受体(PR)、Ki-67及HER-2表达,分为Luminal A型、Luminal B型、Her-2过表达型及三阴型乳腺癌.采用免疫组化EnVision法检测138例非特殊型原发性浸润性乳腺癌组织中GATA-3、FOXA1和ER的蛋白表达.结果:GATA-3的总体阳性表达率为66.7%(92/138),其中Luminal A型阳性率90.0%(45/50)、Luminal B型阳性率74.1%(43/58)、Her-2过表达型阳性率30.0%(3/10)、三阴型阳性率5.0%(1/20);FOXA1的总体阳性表达率为40.6%(56/138),其中Luminal A型阳性率78.0%(39/50)、Luminal B型阳性率27.6%(16/58)、Her-2过表达型阳性率10.0%(1/10)、三阴型阳性率0(0/20).GATA-3与FOXA1在Luminal A型组的表达率显著高于其他亚型(P<0.01).GATA-3与FOXA1的表达均与肿瘤大小、Nottingham预后指数、组织学分级呈负相关(P<0.01).GATA-3和FOXA1的阳性表达率与基底样表型标记(CK5/6)及表皮生长因子受体(EGFR)的表达率均具有很强的负相关(P<0.01).GATA-3与FOXA1在ER/PR阳性乳腺癌中的阳性率明显高于ER/PR阴性乳腺癌中的阳性率(P<0.01),而且GATA-3和FOXA1的表达均与ER、PR直接相关(P<0.01).结论:GATA-3与FOXA1在乳腺癌中与ER表达密切相关,可以作为乳腺癌预后良好的指标;另外对于GATA-3表达的乳腺癌,FOXA1可用于危险度分层.

敲降长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录因子1调控微小RNA-194-5p/叉头框蛋白A1通路对脂多糖诱导的人肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的观察敲降长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录因子1(lncRNA-MALAT1)调控微小RNA-194-5p(miR-194-5p)/叉头框蛋白A1(FOXA1)通路对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)凋亡的影响.方法采用1 mg/L LPS处理HPAEpiC复制脓毒症急性肺损伤(ALI)体外模型.采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测HPAEpiC细胞中MALAT1、miR-194-5p的表达水平,构建MALAT1敲降载体、miR-194-5p抑制剂及FOXA1抑制剂转染HPAEpiC,将细胞分为空白对照组、LPS模型组、LPS+生理盐水组、LPS+MALAT1抑制剂组、LPS+MALAT1抑制剂+生理盐水组、LPS+MALAT1抑制剂+miR-194-5p抑制剂组和LPS+FOXA1抑制剂组.采用CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒、流式细胞术、蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测MALAT1或其敲降后对LPS诱导的HPAEpiC增殖及凋亡和FOXA1表达的影响;采用双荧光素酶报告基因检测lncRNA-MALAT1、miR-194-5p及FOXA1的靶向调控关系.结果与空白对照组比较,LPS可上调HPAEpiC-MALAT1的表达,促进HPAEpiC凋亡并抑制其增殖〔MALAT1(2^(-ΔΔCt)):0.83±0.09比0.15±0.02,HPAEpiC凋亡率:(21.31±2.31)%比(5.41±0.42)%,24 h HPAEpiC增殖活性(A值):0.42±0.03比0.54±0.02,均P<0.05〕;与LPS+生理盐水组比较,敲降MALAT1可抑制LPS诱导的HPAEpiC凋亡并促进其增殖〔细胞凋亡率:(6.40±0.40)%比(21.38±2.31)%,24 h HPAEpiC增殖活性(A值):0.53±0.03比0.40±0.02,均P<0.05〕,降低MALAT1的表达(2-ΔΔCt:0.20±0.03比1.02±0.09,P<0.05).双荧光素酶报告基因及Western Blot证实,敲降MALAT1通过靶向上调miR-194-5p从而抑制FOXA1在LPS诱导的HPAEpiC中的表达〔miR-194-5p(2^(-ΔΔCt)):5.27±0.15比1.21±0.09,FOXA1蛋白表达(灰度值):0.36±0.05比1.00±0.07,均P<0.05〕,miR-194-5p抑制剂能逆转MALAT1敲降在LPS诱导的HPAEpiC中对FOXA1的作用〔FOXA1蛋白表达(灰度值):2.76±0.20比1.00±0.07,P<0.05〕,抑制FOXA1表达能减轻LPS诱导的HPAEpiC凋亡并促进其增殖〔FOXA1蛋白表达(灰度值):0.28±0.03比1.00±0.03,HPAEpiC凋亡率:(6.78±0.38)%比(19.21±0.70)%,24 h HPAEpiC增殖活性(A值):0.59±0.20比0.41±0.02,均P<0.05〕.结论敲降MALAT1通过靶向上调miR-194-5p抑制FOXA1的表达,进而抑制LPS诱导的HPAEpiC凋亡,为脓毒症ALI的诊断和治疗提供了潜在的分子靶点.

FOXA1对人乳头状甲状腺癌细胞增殖与细胞周期的影响及其机制探讨

目的观察叉头框蛋白A1(FOXA1)对人乳头状甲状腺癌TPC1细胞增殖及细胞周期的影响,并探讨其机制。方法培养TPC1细胞,分为两组,分别转染Flag-vector(空载体组)及Flag-FOXA1(FOXA1组)。转染12、24、36 h时,采用MTT法检测两组细胞增殖活性。转染24 h后,采用流式单染细胞术检测细胞周期,采用Real-time PCR法检测细胞周期调控蛋白27(p27 Kip1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA的表达,采用Western blot法检测p27 Kip1、CDK2、Cyclin D1蛋白的表达。结果与空载体组比较,FOXA1组细胞增殖率增加,G1期细胞比例减少,而S期细胞比例增加(P均<0.05)。与空载体组比较,FOXA1组p27Kip1 mRNA及蛋白表达降低,CDK2、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达增加(P均<0.05)。结论 FOXA1可促进TPC1细胞增殖,使S期细胞增加,其机制可能与下调p27 Kip1及上调CDK2、Cyclin D1表达有关。

叉头框蛋白A1基因敲除对苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1转录组的影响

目的 研究叉头框蛋白A1(FOXA1)基因敲除对苯并[a]芘(BaP)恶性转化细胞THBEc1转录组的影响,探讨FOXA1在BaP致癌作用中的可能机制。方法 以FOXA1敲除细胞THBEc1-ΔFOXA1-c34和对照细胞THBEc1-ctrl为研究模型,采用Western印迹法测定FOXA1蛋白表达水平,分别采用克隆形成实验和Transwell实验测定细胞增殖和迁移能力。采用二代测序技术检测THBEc1-ΔFOXA1-c34与THBEc1-ctrl细胞间差异表达基因,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对转录组测序结果进行验证。采用DAVID数据库对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路富集分析。采用STRING 11.5数据库和Cytoscape 3.8.2对差异基因编码蛋白进行网络分析。结果 THBEc1-ΔFOXA1-c34细胞未检出FOXA1表达,且增殖和迁移能力均低于THBEc1-ctrl(P<0.01)。转录组差异分析共检出1332个基因在THBEc1-ΔFOXA1-c34与THBEc1-ctrl细胞间的表达差异倍数>2或<0.5(错误发现率<0.05),其中691个基因在THBEc1-ΔFOXA1-c34中表达高于THBEc1-ctrl,641个基因在THBEc1-ΔFOXA1-c34中表达低于THBEc1-ctrl。RT-qPCR验证的47个基因的表达差异和统计学P值与转录组测序结果一致。差异表达基因涉及多种生物学过程,主要包括血管生成、细胞增殖、迁移、黏附、炎症反应、免疫应答、信号转导[包括肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B和转化生长因子β(TGF-β)等通路]和代谢等。在349个差异表达基因所编码的蛋白质形成的相互作用网络中,共发现分别以C-C趋化因子配体3(CCL3)、O-聚糖合酶葡糖胺基(N-乙酰基)转移酶3(GCNT3)、基质金属蛋白酶3(MMP3)和卷曲蛋白8(FZD8)为种子节点的4个核心功能模块。核心功能模块主要参与免疫应答和炎症反应、O-聚糖加工、胶原分解代谢过程以及典型WNT通路等。结论 敲除FOXA1后BaP恶性转化细胞THBEc1转录组明显改变,增殖和迁移能力明显降低。FOXA1敲除可能通过直接或间接影响TNF,MAPK和WNT等通路抑制细胞增殖和迁移。FOXA1可能作为BaP致癌的潜在生物标志物和肺癌的潜在治疗靶点。

机械性创伤致继发性肺损伤大鼠肺组织中叉头盒转录因子A1表达的变化及意义

目的 研究机械性创伤致继发性肺损伤大鼠肺组织中叉头盒转录因子（Fox）A1表达的变化及意义。方法将雄性Wistar大鼠40只完全随机分为伪创伤组和创伤组，每组20只。利用Noble-Collip创伤仪制备机械性创伤模型。全部大鼠均于造模后6h腹主动脉采血处死，提取肺组织的总RNA和总蛋白。逆转录聚合酶链反应检测FoxAlmRNA的表达，蛋白质印迹检测FoxAl蛋白的表达。结果创伤组FoxAlmRNA表达水平高于伪创伤组（P〈0．01），是伪创伤组的9．25倍；FoxAl蛋白表达：伪创伤组（0．59±0．04），创伤组（0．91±0．03），创伤组FoxAl蛋白表达水平高于伪创伤组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论FoxAl在机械性创伤致继发性肺损伤中起着重要的作用。

子痫前期患者血清FOXA1、TRAF6水平及预测不良妊娠结局价值

目的:探讨子痫前期(PE)患者血清叉头盒蛋白A1(FOXA1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)水平及其对不良妊娠结局的预测价值。方法:选取2019年1月-2022年1月于本院就诊并分娩的PE患者164例临床资料,根据疾病严重程度分为轻度PE组和重度PE组,根据患者是否发生不良妊娠结局分为不良组和良好组;另选取同期产前检查并分娩的健康孕妇60例作为对照组。分析各组临床资料、血清FOXA1 mRNA、TRAF6 mRNA、肌钙蛋白I(cTnI)、抗心磷脂抗体(ACA)-IgM、ACA-IgG水平;Pearson相关分析指标间相关性;受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清FOXA1 mRNA、TRAF6 mRNA对PE患者不良妊娠结局的预测价值;多因素logistic回归分析影响PE患者不良妊娠结局的因素。结果:对照组、轻度PE组、重度PE组收缩压、舒张压、24 h尿蛋白及TRAF6 mRNA(0.99±0.10、1.58±0.22、1.97±0.26)、cTnI、ACA-IgM、ACA-IgG水平依次升高,血清FOXA1 mRNA(1.02±0.11、0.69±0.09、0.56±0.08)依次降低(均P<0.05);轻度PE患者、重度PE患者cTnI、ACA-IgM、ACA-IgG、收缩压、舒张压、24 h尿蛋白与FOXA1 mRNA水平呈负相关,与TRAF6 mRNA水平呈正相关(P<0.05);不良组收缩压、舒张压、24 h尿蛋白及血清TRAF6 mRNA、cTnI、ACA-IgM、ACA-IgG水平均高于良好组,血清FOXA1 mRNA水平低于良好组(P<0.05);血清FOXA1 mRNA、TRAF6 mRNA水平及二者联合预测PE患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.824、0.766、0.889;24 h尿蛋白、TRAF6 mRNA、ACA-IgG升高,FOXA1 mRNA降低是PE患者发生不良妊娠结局的独立影响因素(P<0.05)。结论:PE患者血清FOXA1 mRNA、TRAF6 mRNA水平发生异常,且均与疾病严重程度及不良妊娠结局有关,具有预测不良妊娠结局价值且二者联合预测价值更高。

细胞分裂周期相关蛋白5和叉头框蛋白A1在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测宫颈癌组织中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)和叉头框蛋白A1(FOXA1)的表达,分析两者在宫颈癌患者中的临床意义。方法选取2016年2月—2018年11月在丽水市人民医院确诊为宫颈癌的患者80例,利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测宫颈癌组织和癌旁组织中CDCA5和FOXA1的相对表达量。分析宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1表达与患者临床病理参数之间的关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析CDCA5和FOXA1与宫颈癌患者预后的关系。分析宫颈癌组织中CDCA5与FOXA1表达的相关性。结果癌旁组织中CDCA5和FOXA1相对表达量分别为(1.00±0.00)和(1.00±0.00),宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1相对表达量分别为(1.53±0.29)和(1.58±0.34),差异均有统计学意义(t=16.346、15.258,均P<0.05)。CDCA5和FOXA1相对表达量与宫颈癌患者的肿瘤直径、FIGO分期、肌层浸润深度之间关系密切(均P<0.05)。CDCA5和FOXA1高表达组患者的生存率低于低表达组患者(均P<0.05)。宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1相对表达量呈正相关(r=0.548,P<0.05)。结论CDCA5、FOXA1在宫颈癌组织中表达上调,两者关系密切,可能共同参与宫颈癌的发病机制和病情进展,并且与患者预后有关。

miR-30a对人乳腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 :探讨miR-30a在人乳腺癌细胞系中的表达,及其对乳腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的影响,并寻找作用靶基因。方法:用q RT-PCR法检测miR-30a在人乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR3、MDA-MB-468、MDA-MB-453、T47D)和人乳腺正常上皮细胞(HBL-100)中的表达。构建miR-30a过表达的人乳腺癌细胞系MCF-7-miR-30a、MDA-MB-231-miR-30a,分别用CCK8法、transwell法检测过表达miR-30a对于乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。通过Western印迹法检测靶蛋白的表达,并通过Luciferase双荧光素酶报告系统验证其抑制作用。结果:与乳腺正常上皮细胞相比,miR-30a在人乳腺癌细胞系中均呈低表达(P<0.05)。在MCF-7、MDA-MB-231乳腺癌细胞系中过表达miR-30a后,乳腺癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力均有不同程度的抑制(P<0.05)。Western印迹法和双荧光素酶报告系统检测均提示,叉头盒蛋白A1(forkhead-box A1,FOXA1)为miR-30a的下游靶基因,miR-30a可靶向抑制其表达。结论:miR-30a在人乳腺癌细胞系中低表达,过表达miR-30a可不同程度抑制乳腺癌细胞系的增殖、迁移和侵袭能力。FOXA1是miR-30a的下游靶基因。