老年心力衰竭并发肺炎患者血清FOXM1和IGF2表达水平及与预后价值研究

目的探究血清叉头盒蛋白M1(forkhead box protein M1,FOXM1)和胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)表达对老年心力衰竭合并肺炎患者预后的预测价值。方法将邯郸市中心医院2021年3月~2022年6月收治的126例老年心力衰竭并发肺炎患者设为病例组,并根据随访情况将122例患者分为预后不良组(n=33)和预后良好组(n=89),另选取该院同期126例健康体检者为对照组。检测两组(病例组和对照组)血清FOXM1和IGF2水平,检测病例组用力肺活量(forced vital capacity,FVC)和第一秒用力呼容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)。采用Spearman分析法分析老年心力衰竭并发肺炎患者血清FOXM1和IGF2水平与心功能分级的相关性;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清FOXM1和IGF2水平对老年心力衰竭并发肺炎患者预后的预测价值。结果与对照组比较,病例组血清FOXM1(2.39±0.55 vs 1.06±0.21)和IGF2(71.33±7.96pg/ml vs 47.82±5.14pg/ml)水平明显较高,差异有统计学意义(t=25.358,27.581,均P<0.05);与预后良好组比较,预后不良组血清FOXM1(3.87±1.06 vs 1.95±0.51)和IGF2水平(85.88±9.54pg/ml vs 69.14±8.73pg/ml)明显较高,差异具有统计学意义(t=13.453,9.174,均P<0.05);预后良好组和预后不良组心功能分级比较差异有统计学意义(χ^(2)=7.120,P<0.05),且与预后不良组比较,预后良好组FEV1(1.24±0.32L vs 1.08±0.25L)和FEV1/FVC(55.46%±5.77%vs 52.30%±5.38%)明显较高,差异有统计学意义(t=2.592,2.735,均P<0.05);老年心力衰竭并发肺炎患者血清FOXM1水平和IGF2水平与心功能分级呈显著正相关(r=0.496,0.517,均P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清FOXM1单独预测老年心力衰竭并发肺炎患者预后的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.854(95CI%:0.779~0.912),其敏感度、特异度分别为75.76%,86.52%,最佳截断值为2.75;IGF2单独预测老年心力衰竭并发肺炎患者预后的AUC为0.874(95CI%:0.802~0.927),其敏感度、特异度分别为72.73%,85.39%,最佳截断值为78.30 pg/ml;二者联合预测老年心力衰竭并发肺炎患者预后的AUC显著大于血清FOXM1和IGF2单独诊断的AUC(Z=2.413,2.737,P=0.006,0.016)。结论血清FOXM1和IGF2水平在老年心力衰竭并发肺炎患者中升高,且二者联合检测对患者预后具有较高的预测价值。

miR-21及FOXM1在妊娠期高血压与子痫前期患者血清中的表达

目的探讨微小RNA-21(miR-21)及叉头框蛋白M1(FOXM1)在妊娠期高血压(GHT)与子痫前期(PE)患者中的表达及意义。方法选取妊娠期高血压疾病(HDP)患者150例,其中GHT患者112例作为GHT组、PE患者38例作为PE组,选择年龄及孕周匹配同期产检正常孕妇150例作为对照组;3组均于入组当天采集晨空腹外周静脉血4 mL,检测血清miR-21及FOXM1水平;分析GHT组及PE组患者血清miR-21与FOXM1 mRNA的相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)计算曲线下面积(AUC),评估PE的影响因素;分析miR-21及FOXM1 mRNA对PE的预测价值及对妊娠结局的影响。结果PE组、GHT组血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于对照组,PE组低于GHT组(P<0.05);PE组、GHT组miR-21与FOXM1 mRNA均呈正相关(P<0.05);miR-21及FOXM1 mRNA是PE的独立保护因素(P<0.05);基于miR-21及FOXM1 mRNA构建的风险模型评估PE的AUC值为0.841,高于miR-21及FOXM1 mRNA单独评估的AUC值(P<0.05);PE组不良妊娠结局发生率高于GHT组(χ^(2)=4.053,P=0.044),不良妊娠结局患者血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于正常妊娠者(P<0.05)。结论miR-21表达降低可能会靶向下调FOXM1 mRNA表达,促进GHT与PE的发生、发展,且与不良妊娠结局有关。

circFOXM1作为新型胃癌标志物调控胃癌发生、发展的机制研究

目的分析新型胃癌标志物环状叉头框蛋白M1(circFOXM1)在胃癌发生、发展机制中的调控作用。方法选取2022年1月至2023年4月该院肿瘤科收治的60例胃癌患者作为研究对象,检测其胃癌组织及癌旁组织中circFOXM1的表达水平。根据circFOXM1的表达水平,将60例患者分为circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组。比较circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组的临床病理资料(淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测GES-1、HGC-27、BGC-823、MKN-45、MKN-1细胞中circFOXM1信使RNA(mRNA)、微小RNA(miR)-182-5p mRNA与母亲信号蛋白同源物7(SMAD7)mRNA及SMAD7蛋白的表达水平。体外培养MKN-45细胞,将其随机分为对照组、circFOXM1敲低组[转染circFOXM1小干扰RNA(siRNA)质粒]、circFOXM1过表达组(转染circFOXM1过表达质粒)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-182-5p抑制剂阴性对照)、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组(转染circFOXM1 siRNA质粒和miR-182-5p抑制剂),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组MKN-45细胞circFOXM1 mRNA、miR-182-5p mRNA与SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白的表达水平;采用Transwell侵袭及细胞划痕试验检测各组MKN-45细胞侵袭迁移情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组MKN-45细胞增殖情况。取50只裸鼠随机分为对照小鼠组、circFOXM1敲低小鼠组、circFOXM1过表达小鼠组、共转染阴性对照小鼠组、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,每组10只。将各组MKN-45细胞接种在对应裸鼠右腋附近背部皮下构建胃癌移植瘤模型,饲养4周后检测各组移植瘤裸鼠MKN-45细胞增殖率、肿瘤体积及肿瘤质量。将MKN-45细胞随机分为野生miR-182-5p+空载组、野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组、突变miR-182-5p+空载组、突变miR-182-5p+circFOXM1过表达组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic组,再按照不同方式对各组MKN-45细胞进行转染。采用荧光素酶报告试验检测各组MKN-45细胞circFOXM1对miR-182-5p、SMAD7的靶向调控。结果circFOXM1低表达组有17例患者,circFOXM1高表达组有43例患者。circFOXM1低表达组和circFOXM1高表达组患者淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MKN-45、HGC-27、BGC-823、MKN-1细胞中circFOXM1 mRNA、SMAD7 mRNA、SMAD7蛋白表达水平均高于GES-1细胞,miR-182-5p mRNA表达水平均低于GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组circFOXM1 mRNA表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组和circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1过表达组,低于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平均低于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,均低于circFOXM1过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低小鼠组MKN-45细胞增殖率低于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,肿瘤体积及肿瘤质量均小于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1过表达小鼠组MKN-45细胞增殖率高于对照小鼠组、肿瘤体积及肿瘤质量均大于对照小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组相对荧光素酶活性低于野生miR-182-5p+空载组(P<0.05)。野生SMAD7+miR-182-5p mimic组相对荧光素酶活性低于野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组(P<0.05)。结论敲低circFOXM1可经上调miR-182-5p而抑制表达SMAD7,从而抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及其体内肿瘤生长,可作为胃癌的新型标志物。

FOXM1靶向HMMR对骨肉瘤细胞凋亡和自噬影响

目的探讨叉头盒M1(FOXM1)转录因子通过靶向透明质酸介导的运动受体(HMMR)对骨肉瘤(OS)细胞凋亡和自噬的影响。方法使用慢病毒载体构建敲低FOXM1和过表达HMMR的OS细胞系,将转染空载慢病毒的细胞作为对照组,转染sh-FOXM1慢病毒的细胞作为敲低FOXM1组,转染sh-FOXM1慢病毒和OE-HMMR慢病毒的细胞作为过表达HMMR组。采用Western blot方法检测正常成骨细胞(hFOB1.19)和OS细胞(U-2OS)中FOXM1蛋白的表达;通过流式细胞术检测对照组、敲低FOXM1组和过表达HMMR组U-2OS细胞的凋亡率;采用Western blot方法检测对照组和敲低FOXM1组OS细胞中HMMR蛋白、自噬蛋白(LC3Ⅰ/Ⅱ)、凋亡相关蛋白(Cleaved-Caspase3、Bax)的表达以及过表达HMMR组OS细胞中自噬蛋白(LC3Ⅰ/Ⅱ)的表达。结果FOXM1在U-2OS细胞中的表达明显高于hFOB1.19细胞(t=38.780,P<0.005)。与对照组相比,敲低FOXM1组U-2OS细胞凋亡率显著增加(t=3.517,P<0.05),Cleaved-Caspase3、Bax、LC3Ⅰ/Ⅱ和HMMR蛋白表达显著下降(t=3.155~6.334,P<0.05),而过表达HMMR恢复了敲低FOXM1导致的凋亡率增加和自噬抑制(F=31.00、160.20,P<0.05)。结论FOXM1敲低通过降低HMMR蛋白的表达促进OS细胞凋亡和抑制OS细胞自噬。

食管癌组织中FOXM1和RNF2表达与临床病理参数及预后的相关性分析

目的探讨食管癌组织中叉头盒蛋白M1(FOXM1)和环指蛋白2(RNF2)表达与临床病理参数及预后的相关性。方法选取我院2018年1月至2019年12月期间收治的120例食管癌患者作为研究对象,收集术中切除的食管癌组织标本及癌旁组织标本。另选取45例食管癌患者并收集术中切除的食管癌组织标本作为验证组。检测食管癌组织及癌旁组织中FOXM1和RNF2的表达水平,分析二者相关性及其与患者预后状态的关系,并探讨影响食管癌患者预后状态的影响因素。结果食管癌组织中FOXM1和RNF2表达水平均高于癌旁组织(P<0.05);食管癌组织FOXM1和RNF2表达水平呈正相关(r=0.625,P<0.05);FOXM1高表达组及RNF2高表达组TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、浸润深度为深层的食管癌患者所占比例高于FOXM1低表达组及RNF2低表达组(P<0.05);癌组织中呈现出FOXM1低表达及RNF2低表达的食管癌患者其3年生存率(47.45%、48.33%)明显高于FOXM1高表达和RNF2高表达者(27.87%、26.67%)( χ^(2)=4.302、6.009,P=0.038、0.014);TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、FOXM1及RNF2是食管癌患者死亡的危险因素(P<0.05);验证组中,FOXM1高表达组和RNF2高表达组发生淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、浸润深度为深层的患者所占比例分别高于FOXM1低表达组和RNF2低表达组(P<0.05),而3年生存率则分别低于FOXM1低表达组和RNF2低表达组(P<0.05)。结论FOXM1和RNF2在食管癌患者癌组织中的表达水平与其临床病理特征及3年生存率有关。

SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究

目的:基于剪接因子3B亚单位1(splicing-factor-3B-subunit-1,SF3B1)/叉头框蛋白M1(Forkhead Box M1,FOXM1)轴探讨调控细胞周期宫颈癌进展的作用机制。方法:通过转染SF3B1过表达质粒(SF3B1 overexpression plasmid,pSF3B1)和2个SF3B1特异性短发夹RNA(short hairpin RNA)(shSF3B1-1、shSF3B1-2)过表达HeLa细胞或敲低SiHa细胞SF3B1。通过试验和乙炔基-2'-脱氧尿苷分析细胞的增殖活力和增殖率。流式细胞术分析细胞周期分布。应用细胞周期聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)阵列分析、流式细胞术、染色质免疫共沉淀-定量聚合酶链式反应(chromatin immunoprecipitation-quantitative polymerase chain reaction,ChIP-qPCR)和荧光素酶实验明确SF3B1和FOXM1的靶向关系。结果:SF3B1过表达后,HeLa细胞的生长率和增殖能力均显著增加(P<0.05)。此外,SF3B1敲低后,SiHa细胞的生长率和增殖能力均显著降低(P<0.05)。在HeLa细胞中,与pENTER组相比,pSF3B1组细胞在细胞周期的G_(0)/G_(1)期降低。然而,在SiHa细胞系中,敲低SF3B1提高了G_(0)/G_(1)期比率。此外,SF3B1过表达促进了HeLa细胞中G_(1)期相关蛋白细胞周期蛋白D1表达,而敲低SF3B1抑制了SiHa细胞中周期蛋白D1表达。上调SF3B1表达明显增强FOXM1的表达,而下调SF3B1导致FOXM1的明显抑制。ChIP-qPCR分析进一步显示SF3B1在HeLa细胞系中与FOXM1启动子位点结合。在野生型FOXM1启动子中,与shNC组相比,荧光素酶活性在SF3B1敲低组中受到抑制(1.30±0.08 vs.0.73±0.02、0.70±0.04,均P<0.01),突变型FOXM1启动子不能在SiHa细胞中引发对shSF3B1的应答。HeLa细胞的增殖能力通过SF3B1过表达而增强(shNC+pENTER vs.shNC+pSF3B1:25.1±1.9 vs.61.2±3.8,P<0.01),并被shFOXM1降低(shNC+pSF3B1 vs.shFOXM1+pSF3B1:61.2±3.8 vs.18.5±1.9,P<0.001),并且SF3B1过表达诱导的细胞G_(0)/G_(1)周期降低通过敲低FOXM1而部分逆转(shNC+pSF3B1 vs.shFOXM1+pSF3B1:35.0±1.5 vs.58.0±1.8,P<0.05)。结论:SF3B1可以作为宫颈癌中的潜在肿瘤促进基因,其可能通过上调FOXM1的表达来促进宫颈癌细胞增殖并扰乱细胞周期。

布托啡诺调节FOXO3-FOXM1信号轴对骨肉瘤细胞生物活性和化疗药物耐药性的实验研究

目的探究布托啡诺(BUT)调节叉头框蛋白O3(FOXO3)-叉头框蛋白M1(FOXM1)信号轴对骨肉瘤细胞生物活性和化疗药物耐药性的影响。方法将2.0μmol/L顺铂(CDDP)处理的CDDP耐药MG-63细胞(MG-63/CDDP)分为对照组(MG-63/CDDP细胞用含0.05g/dl DMSO培养液处理)、BUT组(40μg/ml BUT处理MG-63/CDDP细胞)、JY-2组(用100μmol/L FOXO3-FOXM1抑制剂JY-2处理MG-63/CDDP细胞)和BUT+JY-2组(用40μg/ml BUT以及100μmol/L JY-2处理MG-63/CDDP细胞)。CCK8法检测MG-63/CDDP细胞活性;流式细胞术检测MG-63/CDDP细胞凋亡情况;Transwell法检测MG-63/CDDP细胞迁移、侵袭情况;Western blot检测自噬蛋白以及FOXO3-FOXM1信号通路相关蛋白表达。结果与MG-63细胞相比,MG-63/CDDP细胞IC50增加(20.56±2.52μmol/L vs 0.97±0.10μmol/L),差异具有统计学意义(q=19.017,P<0.05),筛选出较适浓度1μmol/L CDDP用于后续实验。与对照组相比,BUT组MG-63/CDDP细胞A值(0.43±0.05 vs 0.68±0.06),细胞迁移数量(63.63±7.58个vs114.56±10.57个)以及侵袭数量(43.38±4.58个vs 79.56±8.48个)、自噬相关蛋白Beclin1(0.31±0.05 vs 0.62±0.07)和微管相关蛋白轻链3(LC3)-II/I蛋白(0.51±0.08 vs 0.98±0.11)水平均下降(q=6.763~9.591,均P<0.05),凋亡率(28.57%±3.14%vs 8.67%±1.46%),FOXO3(0.72±0.08 vs 0.33±0.04),FOXM1(1.22±0.15 vs 0.70±0.08)蛋白水平均上升(q=14.077,10.681,7.493,均P<0.05),而JY-2组MG-63/CDDP细胞A值(0.99±0.13 vs0.68±0.06),细胞迁移数量(147.59±15.37个vs 114.56±10.57个)以及侵袭数量(111.83±12.58个vs 79.56±8.48个),Beclin1(0.94±0.11 vs 0.62±0.07),LC3-II/I蛋白(1.27±0.13 vs 0.98±0.11)水平均升高(q=4.171~6.012,均P<0.05),凋亡率(4.56%±0.86%vs 8.67%±1.46%),FOXO3(0.17±0.01 vs 0.33±0.04),FOXM1(0.46±0.03 vs 0.70±0.08)蛋白水平降低(q=5.941,9.505,6.881,均P<0.05),差异具有统计学意义。JY-2逆转了BUT对MG-63/CDDP细胞活性和化疗耐药性的有利影响。结论BUT可能通过激活FOXO3-FOXM1信号通路调节骨肉瘤细胞的细胞活性和CDDP耐药性。

叉头框蛋白M1和程序性细胞死亡受体1配体在胃癌组织中的表达及其与临床预后的相关性研究

目的 分析叉头框蛋白M1(FOXM1)和程序性细胞死亡受体1配体(PD-L1)在胃癌组织中表达及其与临床预后的相关性。方法 选取2017年7月~2019年7月间本院接受手术治疗的胃癌病人在术中切除的胃癌组织及相应癌旁组织124例;FOXM1和PD-L1 mRNA表达采用qRT-PCR检测;FOXM1和PD-L1蛋白表达采用免疫组化法检测;采用Kaplan-Meier生存曲线分析FOXM1和PD-L1与预后的关系;采用Cox回归分析影响胃癌病人预后的危险因素。结果 胃癌组织中FOXM1和PD-L1 mRNA表达水平和蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中FOXM1和PD-L1表达与TNM分期和浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析表明,胃癌组织FOXM1和PD-L1阳性表达病人3年生存率(39.47%)均低于阴性表达(62.50%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析表明,FOXM1阳性表达和PD-L1阳性表达是影响胃癌病人预后的危险因素(P<0.05)。结论 FOXM1和PD-L1在胃癌组织中表达升高,与病人临床病理特征和预后密切相关,是影响胃癌病人预后的危险因素。

鼻咽癌组织中miR-107、FoxM1的表达及与病理特征和上皮间质转化的关系

目的研究鼻咽癌(NPC)组织中微小RNA(miR)-107、叉头盒蛋白M1(FoxM1)的表达,分析二者表达与上皮间质转化(EMT)基因表达的相关性及与患者临床病理特征的关系。方法选取79例NPC患者,RT-qPCR法检测NPC组织及癌旁组织中miR-107、FoxM1 mRNA、EMT通路基因N钙黏素(N-cad)、E钙黏素(E-cad)及锌指转录因子(Snail)mRNA表达。采用t检验分析两者表达与患者临床病理特征的关系,Pearson线性相关分析miR-107与FoxM1 mRNA表达的相关性及miR-107、FoxM1 mRNA表达与EMT通路基因表达的相关性。结果NPC组织中FoxM1、N-cad、Snail mRNA的相对表达量均高于癌旁组织,而miR-107、E-cad mRNA的相对表达量均低于癌旁组织(P均<0.05)。NPC组织中miR-107、FoxM1表达与TNM分期有关(P均<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、组织分化程度及是否伴有淋巴结转移无关(P均>0.05)。miR-107和FoxM1的表达呈负相关关系(r=-0.603,P<0.05)。NPC组织中miR-107表达与E-cad mRNA表达呈正相关关系(r=0.627,P<0.05),与N-cad、Snail mRNA表达均呈负相关关系(r分别为-0.724、-0.621,P均<0.05)。FoxM1 mRNA表达与E-cad mRNA表达呈负相关关系(r=-0.537,P<0.05),与N-cad、Snail mRNA表达均呈正相关关系(r分别为0.634、0.736,P均<0.05)。结论NPC组织中miR-107表达降低,而FoxM1表达增高,miR-107及FoxM1可能通过促进EMT通路基因表达,促进NPC进展,有可能成为新的NPC肿瘤标志物。

妊娠期高血压患者血清miR-142-3p、FOXM1水平及其对不良妊娠结局的预测价值

目的:分析妊娠期高血压疾病患者血清微小RNA-142-3p(miR-142-3p)、叉头框蛋白M1(FOXM1)的表达情况,并探讨FOXM1、miR-142-3p对不良妊娠结局的预测价值。方法:选取2015年6月至2020年6月在本院接受治疗并分娩的681例妊娠期高血压疾病患者作为研究组,将以上患者根据疾病严重程度划分为3组,分别是妊娠期高血压组(274例)、轻度子痫前期组(218例)、重度子痫前期组(189例);按照患者妊娠结局分为不良妊娠结局组(298例)、正常妊娠结局组(383例);以同期在本院分娩的正常孕妇700例作为对照组;分别对比分析研究组和对照组、不同疾病严重程度、不良妊娠结局组和正常妊娠结局组血清FOXM1、miR-142-3p表达水平差异;影响妊娠期高血压发生的Logistic回归分析;Spearman等级相关分析法分析血清FOXM1、miR-142-3p表达水平与妊娠期高血压患者病情严重程度和不良妊娠结局的相关性;ROC曲线分析血清FOXM1、miR-142-3p联合对妊娠期高血压患者不良妊娠结局的预测价值。结果:与对照组比较,妊娠期高血压患者血清FOXM1表达水平降低(P<0.05),miR-142-3p表达水平升高(P<0.05);24 h尿蛋白、收缩压、FOXM1和miR-142-3p是妊娠期高血压发生的影响因素(P<0.05);随着妊娠期高血压患者病情严重程度加重,血清FOXM1表达水平降低(P<0.05),血清miR-142-3p升高(P<0.05);患者病情严重程度与血清FOXM1负相关关系(P<0.05),与血清miR-142-3p正相关关系(P<0.05);血清FOXM1、miR-142-3p以及二者联合预测妊娠期高血压患者不良妊娠结局的AUC分别为0.714、0.689、0.782。结论:妊娠期高血压患者血清FOXM1、miR-142-3p异常表达,与患者病情严重程度及不良妊娠结局关系密切。

血清FOXM1和PD-L1在老年重症肺炎早期诊断及预后评估中的预测价值

目的探究血清叉头盒蛋白M1(FOXM1)和程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在老年重症肺炎(SP)早期诊断及预后评估中的预测价值。方法回顾性选取2021年1月至2023年1月河北省胸科医院收治的老年重症肺炎患者106例为重症肺炎组,选择同期本院收治的老年普通肺炎患者102例为对照组。在出院28 d对重症肺炎组生存状况进行门诊或电话随访,根据其生存状况分为死亡组36例和存活组70例。使用全自动生化分析仪测量C反应蛋白(CRP)、降钙素原、乳酸盐脱氢酶(LDH)的水平,采用酶联免疫吸附试验测定血清FOXM1和PD-L1的表达水平;Pearson法分析血清中FOXM1和PD-L1表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中FOXM1和PD-L1对老年重症肺炎的诊断及预后预测价值。采用多因素Logistic回归分析分析影响老年重症肺炎患者死亡的因素。结果重症肺炎组血清CRP、降钙素原、LDH、FOXM1和PD-L1水平分别为(82.72±8.61)mg/L、(6.01±0.74)ng/L、(669.21±76.25)U/L、(1.32±0.18)ng/mL、(4.12±0.46)ng/mL,均显著高于对照组[(78.36±7.95)mg/L、(5.02±0.42)ng/L、(625.30±63.48)U/L、(1.13±0.13)ng/mL、(3.52±0.41)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,老年重症肺炎患者血清中FOXM1和PD-L1表达水平呈正相关关系(r=0.649,P<0.05)。FOXM1和PD-L1联合诊断老年重症肺炎的曲线下面积(AUC)高于单独诊断的AUC值(P<0.05)。死亡组血清CRP、降钙素原、LDH、FOXM1和PD-L1水平分别为(88.35±9.10)mg/L、(6.42±0.75)ng/L、(754.42±86.31)U/L、(1.54±0.17)ng/mL、(4.75±0.48)ng/mL,均显著高于存活组[(79.82±8.36)mg/L、(5.80±0.73)ng/L、(625.39±71.08)U/L、(1.20±0.18)ng/mL、(3.80±0.45)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,降钙素原、LDH、FOXM1和PD-L1水平是影响老年重症肺炎患者死亡的因素(P<0.05)。二者联合预测老年重症肺炎患者预后的AUC为0.983,高于FOXM1和PD-L1单独预测的AUC(0.892、0.843)(P<0.05)。结论老年重症肺炎患者血清中FOXM1和PD-L1表达水平显著升高,对老年重症肺炎早期诊断及预后评估具有一定的预测价值。

微小RNA-325-3p和叉头框蛋白M1在胃腺癌中的表达及靶向关系研究

目的:探究微小RNA-325-3p(miR-325-3p)与叉头框蛋白M1(FOXM1)在胃腺癌中的表达,分析miR-325-3p与FOXM1的靶向关系。方法:选择人胃腺癌MGC-803、SGC-7901细胞系,分别构建miR-325-3p mimic组、miR-325-3p inhibitor组,并设立空白对照组,应用Western blot法检测FOXM1蛋白的表达,应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-325-3p与FOXM1的靶向关系。收集确诊为胃腺癌并行根治术的42例患者的肿瘤组织和距肿物边缘>2 cm的癌旁正常胃黏膜组织,应用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测miR-325-3p的表达,应用免疫组化染色(EnVision法)检测组织中FOXM1的表达。结果:胃癌MGC-803和SGC-7901细胞系miR-325-3p mimic组FOXM1蛋白表达明显低于空白对照组,miR-325-3p inhibitor组FOXM1蛋白表达明显高于空白对照组(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-325-3p与FOXM1具有靶向关系。胃腺癌组织中miR-325-3p相对表达量明显低于癌旁正常胃黏膜组织,FOXM1阳性率明显高于癌旁正常胃黏膜组织(均P<0.05)。miR-325-3p和FOXM1在胃腺癌不同肿瘤最大径、浸润深度方面比较差异有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-325-3p与FOXM1呈负相关(r=-0.630,P=0.027)。结论:胃腺癌中miR-325-3p与FOXM1异常表达,参与肿瘤的形成和进展。miR-325-3p与FOXM1具有靶向调控关系。

miR-325-3p通过靶向FOXM1调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及上皮-间质转化的实验研究

目的探讨miR-325-3p通过靶向叉头框蛋白(FOX)M1调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)。方法培养MCF-7细胞,根据转染质粒不同分为NC组(转染miRNA mimic阴性对照)、miR-325-3p组(转染miR-325-3p mimic)、miR-NC组(转染miRNA inhibitor阴性对照)、miR-325-3p inhibitor组(转染miR-325-3p inhibitor)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空质粒)、FOXM1组(转染pcDNA3.1-FOXM1)、si-NC组(转染si-NC无意义序列)、si-FOXM1组(转染si-FOXM1质粒)、miR-325-3p inhibitor+si-FOXM1组(转染miR-325-3p inhibitor+si-FOXM1质粒)及miR-325-3p inhibitor+si-NC组(转染miR-325-3p inhibitor+si-NC无意义序列)。CCK-8检测细胞24、48、72 h增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-qPCR检测细胞miR-325-3p、FOXM1 mRNA水平,Western blot检测细胞FOXM1、E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白水平,萤光素酶实验检测miR-325-3p与FOXM1的靶向关系。结果miR-325-3p组miR-325-3p表达水平高于NC组(P<0.01),miR-325-3p inhibitor组miR-325-3p水平低于miR-NC组(P<0.01)。48、72 h,miR-325-3p组光密度(OD)值、侵袭细胞数及迁移率低于NC组(P<0.01),miR-325-3p inhibitor组OD值,侵袭细胞数及迁移率高于miR-NC组(P<0.01)。miR-325-3p组E-cadherin蛋白表达水平高于NC组,Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平低于NC组(P<0.01);miR-325-3p inhibitor组E-cadherin蛋白表达水平低于miR-NC组,Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平高于miR-NC组(P<0.01)。FOXM1组细胞FOXM1蛋白、mRNA表达水平高于pcDNA3.1组(P<0.01);si-FOXM1组FOXM1蛋白、mRNA表达水平低于si-NC组(P<0.01)。48、72 h,FOXM1组OD值、侵袭细胞数及迁移率高于pcDNA3.1组(P<0.01);si-FOXM1组OD值,侵袭细胞数及迁移率低于si-NC组(P<0.01)。FOXM1组E-cadherin蛋白表达水平低于pcDNA3.1组,Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平高于pcDNA3.1组(P<0.01);si-FOXM1组E-cadherin蛋白表达水平高于si-NC组,Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平低于si-NC组(P<0.01)。48、72 h,miR-325-3p inhibitor+si-FOXM1组OD值、侵袭细胞数及迁移率低于miR-325-3p inhibitor+si-NC组(P<0.01)。miR-325-3p inhibitor+si-FOXM1组E-cadherin蛋白表达水平高于miR-325-3p inhibitor+si-NC组,Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平低于miR-325-3p inhibitor+si-NC组(P<0.01)。miR-325-3p组FOXM1蛋白、mRNA表达水平低于NC组(P<0.01);miR-325-3p inhibitor组FOXM1蛋白、mRNA表达水平高于miR-NC组(P<0.01)。NC+WT-FOXM1组与NC+MUT-FOXM1组萤光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-325-3p+WT-FOXM1组萤光素酶活性低于miR-325-3p+MUT-FOXM1组(P<0.01)。结论miR-325-3p在乳腺癌组织中低表达,过表达miR-325-3p可靶向FOXM1抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移及EMT。

叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中作用的研究进展

胶质瘤是成人中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤。叉头框蛋白M1(FOXM1)是叉头框转录因子家族的成员之一,其可通过调控Wnt/β-catenin、Akt/FOXM1、p53通路及其自身的翻译后修饰过程促进神经胶质瘤的恶性增殖、迁移和侵袭等过程。本文总结叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中的作用,以期为临床脑胶质瘤的治疗提供新的理论依据和治疗靶标。

环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制研究

目的探讨环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制。方法构建克唑替尼耐药肺癌细胞株H2228/CR。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测circ-FOXM1在BEAS-2B、H2228、H2228/CR细胞中的表达。将H2228细胞分为circ-FOXM1过表达组和过表达对照组。将H2228/CR细胞分为circ-FOXM1沉默组和沉默对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的半抑制浓度(IC_(50))。经克唑替尼干预处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,采用Transwell实验检测各组细胞迁移数,采用Western blot实验检测各组细胞磷酸化的磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)的表达水平。结果H2228/CR细胞circ-FOXM1表达水平高于H2228细胞,H2228细胞circ-FOXM1表达水平高于BEAS-2B细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。克唑替尼对过表达组细胞的IC_(50)显著高于过表达对照组细胞(P<0.05)。克唑替尼对沉默组细胞的IC_(50)显著低于沉默对照组细胞(P<0.05)。经克唑替尼干预处理后,过表达组的细胞凋亡率低于过表达对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均高于过表达对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默组的细胞凋亡率高于沉默对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均低于沉默对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circ-FOXM1可能通过激活PI3K/AKT信号通路降低克唑替尼对肺癌细胞的抑制效果。

沉默FoxM1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导口腔鳞癌细胞凋亡

目的:研究沉默叉头框蛋白M1 (FoxM1)基因对口腔鳞癌细胞凋亡影响及机制。方法:口腔鳞癌SCC9细胞感染FoxM1-shRNA慢病毒或阴性对照慢病毒,用RT-qPCR和Western blot测定沉默效果。MTT法测定细胞活力变化,平板克隆实验测定细胞克隆形成能力变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Western blot测定细胞中cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平变化,JC-1法测定细胞线粒体膜电位变化,Western blot测定细胞线粒体和胞浆中细胞色素C(cytochrome C)蛋白水平的变化。结果:FoxM1-shRNA慢病毒感染成功下调口腔鳞癌细胞中FoxM1的表达(P<0.05),阴性对照慢病毒对细胞中FoxM1表达水平没有影响。沉默FoxM1的口腔鳞癌细胞活力降低(P<0.05),细胞克隆形成能力也降低(P<0.05),细胞凋亡率及cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平均升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),胞浆中cytochrome C蛋白水平升高(P<0.05),线粒体中cytochrome C蛋白水平降低(P<0.05)。结论:沉默FoxM1可以通过降低口腔鳞癌细胞线粒体膜电位、促进线粒体释放cytochrome C而诱导细胞凋亡。

下调FoxM1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响

目的探讨下调Fox M1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法分别选用Fox M1 siRNA以及Fox M1特异性抑制剂(硫链丝菌肽)下调Hep-2细胞Fox M1表达。实时定量PCR、Western blot检测siRNA或硫链丝菌肽处理细胞后Fox M1 mRNA、蛋白表达量;MTT法检测下调Fox M1表达后Hep-2细胞的顺铂敏感性;流式细胞术检测下调Fox M1表达后顺铂诱导的凋亡率变化;实时定量PCR、Western blot检测顺铂作用于Fox M1下调组及对照组细胞,其Fox M1 mRNA、蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达变化。结果 siRNA及硫链丝菌肽均能下调Fox M1表达(P<0.05);两种方式均能降低顺铂作用下细胞存活率以及IC50[NC组顺铂IC50=(2.609±0.102)μg/m L,干扰组IC50=(0.771±0.058)μg/m L,P<0.05;对照组顺铂IC50=(2.142±0.198)μg/m L,抑制剂组IC50=(0.773±0.063)μg/m L,P<0.05],siRNA法处理后NC组、干扰组、NC+顺铂组、干扰+顺铂组凋亡率依次为(4.197±0.273)%、(12.553±0.183)%、(37.465±4.305)%、(82.373±7.214)%,干扰+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);抑制剂处理后对照组、抑制剂组、顺铂组、抑制剂+顺铂组凋亡率依次为(2.343±0.194)%、(10.127±0.479)%、(35.075±1.995)%、(62.843±1.824)%,抑制剂+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);下调Fox M1表达,凋亡抑制蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论下调Fox M1表达可提高Hep-2细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2下调、Bax上调相关。

转录因子FOXM1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

FOXM1(Forkhead box protein M1)是调控细胞增殖的重要转录因子,近年来研究表明与肿瘤发生密切相关,但与卵巢癌的关系尚不明确.通过检测68例卵巢癌标本、21例卵巢良性肿瘤标本、24例正常卵巢标本以及3株卵巢癌细胞系(A2780细胞、OVCAR3细胞、SKOV3细胞)中FOXM1的表达情况,分析其与临床参数之间的相关性及临床意义.结果显示卵巢癌中FOXM1表达明显高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,差异极为显著,其中低分化细胞中表达强于中高分化细胞(P=0.013),Ⅲ～Ⅳ期表达强于Ⅰ～Ⅱ期(P=0.011),但与病理类型无关;FOXM1在3株卵巢癌细胞系中均有较强表达.FOXM1在卵巢癌组织及3种卵巢癌细胞系中存在高表达,且与卵巢癌分化程度及临床分期有关.

抑制白血病K562细胞FoxM1表达可增强细胞对高三尖杉酯碱的敏感性

目的:探讨抑制白血病K562细胞叉头框蛋白M1(Fox M1)是否增强细胞对高三尖杉酯碱(HHT)的敏感性。方法:HHT以不同浓度(0、0.015、0.030和0.045μmol/L)和最低起效浓度不同时间(0.015μmol/L,0、24、48和72 h)作用于K562细胞,real-time PCR和Western blot检测Fox M1 mRNA和蛋白表达;以0.015μmol/L HHT作用K562细胞后转染Fox M1 siRNA,观察沉默K562细胞Fox M1后细胞对HHT的敏感性、细胞增殖和凋亡效应以及Fox M1相关靶分子c-Myc和Sp1表达状况。结果:随着HHT浓度增加和时间延长Fox M1表达逐渐降低,说明HHT抑制K562细胞Fox M1表达;HHT处理K562细胞后转染Fox M1 siRNA,细胞生长和克隆形成显著下降,细胞凋亡增加,因此抑制Fox M1可增加K562细胞对HHT的敏感性;Fox M1 siRNA组c-Myc和Sp1表达显著降低,表明Fox M1可正性调控c-Myc和Sp1表达。结论:HHT可以抑制白血病K562细胞Fox M1表达,干扰Fox M1可增强细胞对HHT的敏感性。

琥珀酸盐受体介导Foxm1表达促进肺纤维化

目的:探讨琥珀酸盐受体(succinate receptor,SUCNR1)在肺纤维化发生发展中的作用和机制。方法:用SUCNR1敲除(SUCNR1^(-/-))小鼠构建博来霉素诱导的肺纤维化模型,观察对肺纤维化的影响。组织生长因子β1(tissue growth factorβ1,TGF-β1)刺激SUCNR1^(-/-)原代肺成纤维细胞,MTT检测细胞增殖、Western blot检测细胞外基质(CollagenⅠ和α-SMA)生成。检测各组肺纤维化小鼠肺组织中叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,Foxm1)表达,使用Foxm1抑制剂处理TGF-β1和琥珀酸盐刺激的原代肺成纤维细胞,观察对细胞增殖和细胞外基质生成的影响。结果:SUCNR1^(-/-)小鼠肺纤维化较SUCNR1^(wt)明显减轻。刺激SUCNR1^(-/-)原代肺成纤维细胞增殖能力、CollagenⅠ和α-SMA生成明显降低。Foxm1在博来霉素诱导的肺纤维化模型中明显升高,但在SUCNR1^(-/-)模型中明显减少;抑制Foxm1可减少TGF-β1和琥珀酸盐诱导的肺成纤维细胞增殖、CollagenⅠ和α-SMA生成。结论:SUCNR1参与了肺纤维化的发生发展,其可能机制是通过促进Foxm1表达而启动肺成纤维细胞。