西黄胶囊联合TP方案对晚期非小细胞肺癌患者血清Foxp3、Ang-2水平的影响

目的探讨西黄胶囊联合TP方案治疗晚期非小细胞肺癌患者的临床疗效。方法选取2017年6月—2019年6月期间新乡医学院第一附属医院收治的晚期非小细胞肺癌患者86例,采用随机摸球法分为对照组和治疗组,每组各43例。对照组采用TP方案化疗,治疗组在此基础上加用西黄胶囊治疗。两组患者均连续治疗42 d后,观察两组患者近期疗效及不良反应发生情况,同时观察两组患者治疗前后中医证候症状积分、血清叉头翼状螺旋转录因子3(Forkhead or winged helix transcription,Foxp3)、血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)、美国东部肿瘤协作组体能状况(Eastern cooperative oncology group performance status,ECOGPS)评分变化。结果治疗后治疗组有效率为46.51%、疾病控制率为83.72%,与对照组有效率25.38%、疾病控制率65.12%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者咳嗽、气短、胸闷、出汗、乏力、畏寒肢冷、腰膝酸软积分及总分较治疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清Foxp3、Ang-2水平较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组ECOGPS评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗组发热(30.23%)、恶心呕吐(30.23%)、血小板减少(34.88%)、白细胞减少(41.86%)及肝肾功能损伤(30.23%)发生率与对照组(53.49%、60.47%、55.81%、48.84%、44.19%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论西黄胶囊联合TP方案治疗NSCLC的效果显著,能明显改善患者临床症状及体能状况,减轻化疗毒副反应,并降低血清Foxp3、Ang-2表达水平发挥抗癌作用。

靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响

目的观察青黛及其有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎(UC)小鼠脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响,探讨其治疗UC的作用机制和靶点。方法将50只BABL/c小鼠随机分为正常组、模型组、靛玉红组、青黛组和5-ASA组。除正常组外,其余小鼠采用自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液5天,制备DSS诱导的UC小鼠模型。于造模后第5天开始,予各组小鼠给药治疗7天。观察各组小鼠一般状况及结肠组织病理学改变,同时检测脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达变化。结果与正常组比较,模型组小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达显著减少(P<0.01);各治疗组CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达较模型组升高(P<0.01)。结论青黛及其有效成分靛玉红可通过上调CD4CD25Treg细胞Foxp3表达以防治UC。

FOXP3过表达对HPV感染阳性宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)过表达对人乳头状瘤病毒(HPV)感染阳性宫颈癌细胞增殖、凋亡及细胞免疫的影响。方法:利用脂质体介导转染方法,建立Foxp3过表达HPV感染阳性SiHa细胞株,作为Foxp3过表达阳性细胞,同时利用pcDNA3.1空载体转染SiHa细胞株,作为本研究阴性对照,同时设置空白对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法及Western blot法检测三组Foxp3mRNA及蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SiHa细胞中白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)水平,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测SiH a细胞增殖能力,采用利用流式细胞仪(FCM)检测SiHa细胞周期及凋亡率情况。结果:过表达组Foxp3 mRNA及蛋白表达水平明显高于阴性对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),阴性对照组及空白对照组Foxp3 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组及空白对照组比较,各时间点过表达组IL-8水平明显降低,36 h、48 h IL-10水平明显升高;MTT结果显示,Foxp3过表达可明显促进SiHa细胞增殖,FCM检测显示,Foxp3过表达可明显抑制SiHa细胞凋亡,抑制G_0/G_1期阻滞。结论:Foxp3过表达可促进HPV感染阳性宫颈癌细胞增殖,抑制细胞凋亡。

Foxp3在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的表达及其意义

目的:研究叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)肾组织中的表达及其意义.方法:所有病例经肾组织活检病理诊断.分组:A组为乙型肝炎相关性肾炎组(n=58);B组为非乙型肝炎肾炎组(n=52);C组为HBV感染对照组(n=24),患者血清HBsAg阳性、肾组织中HBsAg阴性,血清肌酐轻度升高经肾组织活检排除肾炎.利用免疫组织化学法检测3组患者肾组织Foxp3、CD4、CD25蛋白表达情况.结果:(1)A、B、C3组患者在年龄(F=1.02,P=0.36)、性别(x2=1.09,P=0.57)、民族构成(x2=0.04,P=0.98)、血清肌酐(F=0.05,P=0.61)、谷丙转氨酶(F=0.06,P=0.76)等方面差异均无统计学意义;但A组与B组尿蛋白(>0.3g/24h)差异有统计学意义(P<0.05);(2)A组和B组病理类型构成比较差异无统计学意义(x2=1.08,P=0.99),但肾小管间质损伤程度比较差异有统计学意义(x2=9.15,P=0.027),且A组肾小管间质损伤程度较B组重;(3)Foxp3、CD4、CD25蛋白主要表达于肾小管间质;在A组与B组肾小管间质中,每高倍镜视野下Foxp3+淋巴细胞、CD4+T细胞、CD25+T细胞数分别为(3.41±1.16)vs(3.52±1.27);(2.78±0.15)vs(3.12±0.17);(2.90±0.20)vs(3.09±0.18),均明显低于C组Foxp3+淋巴细胞数、CD4+T细胞、CD25+T细胞数(均P<0.05);A组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A组中,Foxp3、CD4、CD25的表达低于B组.结论:调节性T细胞Foxp3表达水平的下调可能与乙型肝炎病毒相关性肾炎的发生发展有关.

白斑颗粒Ⅰ号方对白癜风患者Foxp3 mRNA表达的影响

目的观察白斑颗粒Ⅰ号方对白癜风患者Foxp3 m RNA表达的影响,阐明白斑Ⅰ号方治疗白癜风的作用机制。方法白癜风患者60例,随机分为试验组和对照组各30例,健康对照组30例,采用RT-PCR方法检测各组PBMC中Foxp3 m RNA表达变化情况。结果白癜风患者组Foxp3 m RNA水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组治疗3个月后Foxp3 m RNA水平高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);对照组治疗3个月后Foxp3 m RNA水平高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3个月后,实验组治疗前后外周血Foxp3 m RNA升高值高于对照组治疗前后外周血Foxp3 m RNA升高值,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白斑颗粒Ⅰ号可能通过上调调节T细胞功能,使PBMC Foxp3 m RNA恢复或接近正常水平达到治疗白癜风的目的。

高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞Foxp3表达的影响

目的观察高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)对调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)叉头翼状螺旋转录因子(forkhead/winged helix transcription factorp3,Foxp3)基因及蛋白表达的影响,并对其机制进行初步探讨。方法免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏Treg。采用固相包被抗-CD3及可溶性CD28辅助活化,给予HMGB1刺激,观察HMGB1刺激与Foxp3基因及蛋白表达的时间-效应关系及剂量-效应关系。结果经HMGB1刺激后的TregFoxp3蛋白表达于24～72h明显下调(P<0.05,P<0.01),其中以作用48、72h后表达下调尤为显著(P<0.01);给予不同剂量HMGB1刺激72h后,10、100、1000ng/ml的HMGB1均可诱导Foxp3表达减弱(P<0.05,P<0.01),其中HMGB1的浓度在1000ng/ml时Foxp3表达下调最明显。Foxp3mRNA表达呈现出与蛋白表达相同的时间、剂量依赖关系。结论HMGB1通过诱导TregFoxp3mRNA表达下调,进一步影响其蛋白产物合成,从而影响Treg免疫调节活性。

Foxp3基因多态性与广东地区产后抑郁相关性的初步探讨

目的探讨中国广东地区女性叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)-6054(deletion/ATT,rs5902434)、Foxp3-3279(A/C,rs376158)、Foxp3-924(A/G,rs2232365)与产后抑郁症(PPD)发病的相关性。方法用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分析法对69例PPD确诊患者(PPD组)和140例健康产后女性(对照组)的外周血提取DNA样本,进行Foxp3-6054、Foxp3-3279、Foxp3-924点突变分析,比较两群体该基因多态性的差异。结果 Foxp3基因Foxp3-6054位点在PPD组AA基因型频率和对照组间差异有统计学意义(P<0.05),Foxp3-6054位点等位基因频率、Foxp3-3279、Foxp3-924位点单核苷酸多态性基因型频率和等位基因频率在PPD组和对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国广东地区Foxp3-6054与PPD的发病具有一定的相关性,中国广东地区Foxp3-3279、Foxp3-924与PPD的发病未发现相关性。

CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞在急性白血病患者外周血的表达

目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞在急性白血病(AL)患者外周血中的表达及其临床意义。方法流式细胞术分别检测43例AL初诊(A组)、经化疗完全缓解(CR,B组)25例及20例健康志愿者(C组)外周血中CD4+CD25+T细胞所占比例;荧光定量RT-PCR分析各组外周血中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3) mRNA的表达水平,并逐层分析比较。结果B组CD4+CD25+T细胞比例及Foxp3含量均明显高于A、C组(P<0.01)。A组Foxp3表达明显高于C组(P<0.01)。在AL各亚型之间CD4+CD25+T细胞及Foxp3表达均无显著差异。结论CD4+CD25+调节性T细胞在初治AL或CR患者外周血中比例增加,可能是AL免疫抑制的一个重要原因。

Pgp1和FoxP3在结直肠癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨P-糖蛋白1(Pgp1)和核转录因子蛋白3(FoxP3)在结直肠癌中的表达及其与预后的关系。方法选取2012年2月至2015年2月我院保存的结直肠癌标本106例,同时选取癌旁组织标本64例作为对照,采用免疫组化染色法检测Pgp1和FoxP3表达,同时根据Pgp1和FoxP3表达情况将患者分为Pgp1和FoxP3双阴性表达(A组),Pgp1单阳性表达(B组)、FoxP3单阳性表达(C组),Pgp1和FoxP3双阳性表达(D组)。结果结直肠癌组织Pgp1和FoxP3蛋白阳性表达率分别为63.21%和43.40%,明显高于癌旁组织(P<0.05);结肠癌Pgp1蛋白阳性表达率为78.95%,明显高于直肠癌(P<0.05);FoxP3表达与患者临床病理特征以及治疗方案无明显关系(P>0.05);B组中位总体生存时间为52个月(95%CI:40.01～63.99),明显高于A组、D组和C组(P<0.05);A组和D组中位总体生存时间为40个月(95%CI:31.20～48.80)和34个月(95%CI:30.74～37.26),明显高于C组的24个月(95%CI:18.56～29.44),比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Pgp1和FoxP3表达与结直肠癌临床病理特征关系较弱,其中仅Pgp1表达与肿瘤位置有一定相关性;Pgp1和FoxP3表达与结直肠癌患者预后有一定关系,其中Pgp1阳性表达,FoxP3阴性表达者预后较好。

支气管哮喘患者外周血CD_~4+ CD_(25)^+调节性T细胞水平及Foxp3 mRNA表达的分析

目的观察支气管哮喘(哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD2+5调节性T细胞(Treg)水平及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达的变化,探讨CD4+CD2+5Treg在哮喘发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测78例哮喘患者(急性发作期组30例,慢性持续期组25例,缓解期组23例)和29例健康志愿者(正常对照组)PBMCs中CD4+CD2+5Treg的比例;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs中Foxp3mRNA的表达。结果急性发作期组和慢性持续期组PBMCs中CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达明显低于缓解期组和正常对照组(P<0.05);缓解期组CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达虽亦低于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);急性发作期组CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达低于慢性持续期组(P<0.05)。结论哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD2+5Treg数量减少,功能下降,可能参与哮喘的发生和发展。

Foxp3基因多态性与妊娠期高血压的相关性

目的通过对叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)多态性基因位点的序列分析,探讨Foxp3基因多态性分布及基因型变异对妊娠期高血压(HDCP)发病的易感性,以阐明其在DHCP发生中的分子机制。方法选取186例妊娠期高血压患者,设为病例组;另选取同期251例本院住院的正常孕妇,设为对照组。分析两组Foxp3-6054、924位点的基因多态性与HDCP的相关性。结果两组研究对象年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组高血压家族史、孕周、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。Foxp3-924基因多态性检测中两组基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。病例组患者中T/T基因型及T等位基因频率明显少于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);病例组A/A基因型频率明显多于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析提示AT+TT型可减少HDCP的发生风险(OR=0.367,95%CI为0.218,0.617,P<0.05),而联合基因型AA+AT可增加罹患HDCP的风险(OR=2.518,95%CI为1.654,3.832,P<0.05)。结论 Foxp3-6054位点基因型及等位基因频率在HDCP组与正常妊娠组间存在显著性差异,Foxp3-6054位点多态性可能参与HDCP的发生,而Foxp3-924基因多态性可能与HDCP无关。

Foxp3/Treg与RORγt/Th17失衡在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染期间可见到广泛的免疫介导的肝损伤. HBV免疫清除的失败从而导致慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB),并大大增加肝硬化和肝细胞癌的风险. T淋巴细胞在HBV感染中的免疫反应起重要作用,尤其是调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)和辅助性T细胞17(helper T cell 17, Th17)失衡的问题,二者的平衡失调是HBV持续感染与肝脏炎性损伤的重要机制.为了更好地揭示潜在的机制,在本综述中,我们系统地回顾了Treg和Th17,讨论了在HBV感染后Treg与Th17两者之间的关系,并对特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptorγt, RORγt)和叉头/翅膀状螺旋转录因子3(forkhead/winged helix family transcription factor 3, Foxp3)两者之间的变化,随着近几年对HBV免疫靶向治疗研究的不断深入,Foxp3/Treg与RORγt/Th17的平衡似乎对HBV的感染至关重要,以此为契机可以为CHB的治疗提供新的思路.

基于RORγt/FoxP3免疫失衡探讨定喘汤对呼吸道合胞病毒诱导肺炎性损伤幼鼠免疫微环境的影响

目的研究定喘汤对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导肺炎性损伤幼鼠转录因子孤核受体(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子3(FoxP3)及其相关细胞因子表达的影响,揭示定喘汤治疗RSV诱导肺炎性损伤的作用机制。方法将18只幼龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、定喘汤组,每组6只。模型组、定喘汤组采用RSV滴鼻法建立肺炎性损伤模型。定喘汤组在第3天滴鼻2 h后给予定喘汤2 g/(kg·d)灌胃,1次/d,连续7 d。实验第8天取肺组织,观察肺损伤情况,计算肺湿干比,RT-PCR和Western blot法检测肺组织中RORγt、FoxP3 mRNA和蛋白表达情况,ELISA法检测肺泡灌洗液中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)含量。结果模型组幼鼠肺泡壁受损,肺间质大量炎性细胞浸润;定喘汤组幼鼠肺泡壁损伤和肺间质炎性细胞浸润较模型组轻。与正常组比较,模型组肺组织病理损伤评分、湿干比、肺组织中RORγt mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中IL-17、IL-23含量均明显增高(P均<0.05),肺组织中FoxP3 mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中TGF-β、IL-10含量均明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,定喘汤组肺组织病理损伤评分、湿干比、肺组织中RORγt mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中IL-17、IL-23含量均明显降低(P均<0.05),肺组织中FoxP3 mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中TGF-β、IL-10含量均明显升高(P均<0.05)。结论RSV诱导肺炎性损伤时RORγt/FoxP3及相关细胞因子表达异常,定喘汤可通过调控RORγt/FoxP3及相关细胞因子表达调节免疫微环境,减轻RSV诱导肺炎性损伤。

食道癌患者CD4^+、CD25^+、Foxp3^+调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞比例为(10.33±5.72)%,明显高于健康志愿者组(4.56±1.06)%(P<0.01),而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4+、CD25+、Foxp3+调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。

肝细胞癌Treg和FOXP3的表达及其临床意义

目的研究肝细胞癌(HCC)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)和肝癌组织叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)的表达,并分析其与肝细胞癌临床病理的关系。方法采用流式细胞仪对HCC患者和健康志愿者外周血CD4+CD25+Treg细胞进行检测,免疫组化、Western blotting法检测FOXP3蛋白表达水平,并结合HCC患者临床病理特征进行分析。结果 HCC患者外周血CD4+CD25+Treg表达率为(16.76±5.53)%,较健康志愿者的(6.04±2.01)%显著增高(P<0.01)。免疫组化染色肿瘤组织FOXP3阳性细胞数为(103.95±34.31)个/mm2,高于癌旁组织的(29.61±4.65)个/mm2(P<0.05),相应肿瘤组织FOXP3蛋白表达也增高。CD4+CD25+Treg细胞水平与肿瘤多灶性有关。结论 HCC患者的外周血CD4+CD25+Treg细胞表达增高,FOXP3蛋白在肿瘤组织中表达与CD4+CD25+Treg细胞的变化相平行,可能与肿瘤多灶性有关。

核转录因子Foxp3在小鼠黑色素瘤细胞中的表达

目的:检测小鼠黑色素瘤细胞中核转录因子Foxp3的表达。方法:用TRIzol试剂提取小鼠黑色素瘤细胞RNA,通过实时荧光定量PCR检测小鼠黑色素瘤细胞中Foxp3 mRNA的表达,通过Western印迹和流式细胞术检测小鼠黑色素瘤细胞中Foxp3蛋白的表达,通过免疫荧光检测小鼠黑色素瘤细胞中Foxp3分子的表达。结果:在小鼠黑色素瘤细胞中存在Foxp3的mRNA转录和分子表达,免疫荧光显示Foxp3定位于黑色素瘤细胞的胞核及核周部位。结论:证实了小鼠黑色素瘤细胞表达Foxp3,将为临床黑色素瘤的免疫治疗提供新的靶标和治疗策略。

人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA与T细胞CDA^+CD25^+Treg表达相关性探讨

目的探讨人外周血单个核细胞中FOXP3mRNA的表达与CD4+CD25+Treg表达的相关性。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,逆转录成mRNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4+CD25+Treg的比例。结果哮喘患儿组CD4+CD25+Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P<0.01;FOXP3mRNA的表达也显著降低,P<0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3mRNA表达水平简便、经济、可行,哮喘患儿CD4+CD25+Treg明显降低可能参与哮喘发病,FOXP3表达降低可能是导致CD4+CD25+Treg发育障碍的重要因素。

骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值

目的:探究骨髓细胞学及血清可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、叉头状/翅膀状旋转转录因子(Foxp3)水平联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值。方法:回顾性分析2021年4月至2022年5月该院收治的32例再生障碍性贫血患者的临床资料作为研究组,另选择同期32例非再生障碍性贫血患者的临床资料作为对照组。所有患者均行骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平检测,比较两组骨髓细胞学检查结果(细胞内、细胞外铁水平)、sVCAM-1、Foxp3水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析骨髓细胞学、血清sVCAM-1、Foxp3水平单项及联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值。结果:研究组细胞内铁水平低于对照组,细胞外铁水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组sVCAM-1水平高于对照组,Foxp3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,骨髓细胞学、sVCAM-1、Foxp3水平单项及联合检测诊断再生障碍性贫血的曲线下面积分别为0.838、0.714、0.718、0.995,均具有诊断价值,且联合检测诊断价值高于三者单项检测诊断价值。结论:骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平联合检测诊断再生障碍性贫血的价值高于三者单项检测。

CD4^+Foxp3^+调节性T细胞在不足月胎膜早破患者外周血中的表达及意义

目的:检测不足月胎膜早破(pPROM)患者外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达,探讨其在pPROM早产中的作用及意义。方法:选取2013年9月至2014年1月在中国医科大学附属盛京医院住院病例及门诊正常体检病例共60例,其中pPROM患者(孕34~36周)30例(pPROM组),正常妊娠对照组30例(孕34~36周)。采每位受试对象抗凝外周血5 ml,分离外周血单个核细胞。使用流式细胞术检测外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达。结果:pPROM组与正常妊娠对照组相比,外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例降低,差异有统计学意义(P=0.0093);pPROM组中分娩发动≥48小时者CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例高于分娩发动的时间<48小时者(P=0.0246);pPROM组中Apgar评分>7分者和≤7分者CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例差异无统计学意义(P>0.05)。结论:pPROM患者外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达降低,参与pPROM的发病。pPROM患者CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达高低与分娩发动时间有关,而与新生儿出生Apgar评分无明显关系。

实时荧光定量RT-PCR检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的表达

目的:建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(real-time fluorescence quantitative RT-PCR)检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的方法,并研究其与CD4+CD25+Treg细胞活性相关性。方法:提取人外周血单个核细胞总RNA,将mRNA逆转录成cDNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3 mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4+CD25+Treg细胞含量,分析两者相关性。结果:哮喘患儿组CD4+CD25+Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P<0.01;FOXP3 mRNA的表达也显著降低,P<0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论:应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3 mRNA表达水平简便易行、结果稳定可靠。初步结果证实,外周血CD4+CD25+Treg细胞数量和FOXP3 mRNA表达有相同的趋势,存在一定的相关性。