液质联用法快速测定人血浆福辛普利拉浓度

目的建立快速测定人血浆福辛普利的活性代谢物福辛普利拉浓度的液质联用法。方法采用LunaC18(2.1mm×150mm,3.0μm);流动相为甲醇-乙腈-0.025%氨水(30:30:40),流速0.2mL.min-1,质谱条件为电喷雾电离源(ESI-),以选择反应离子监测(SRM)方式进行检测,用于定量分析的反应离子为m/z434.3→237.0。结果福辛普利拉在0.25～400.00ng·mL-1范围内线性关系良好。福辛普利拉的日内、日间RSD均<10%。福辛普利拉的最低检测浓度为0.05ng·mL-1。结论该方法分析速度快,专属性强,灵敏度高,测定结果准确,可用于福辛普利的人体药动学研究。

福辛普利拉对脂多糖诱导的单核细胞TLR4表达的抑制作用

目的 研究福辛普利拉（Fos）对人白血病单核细胞系THP1 Toll样受体4（TLR4）表达的抑制作用.方法 培养THP1细胞,并将其浓度调整为1×10~＋/mL,分为8组：对照组（正常THP1细胞）、脂多糖（LPS）刺激组（THP1细胞＋LPS）、DMSO组（THP1细胞＋LPS＋DMSO）及Fos干预组（THP1细胞＋LPS＋Fos,Fos质量浓度分别为0.25、0.5、1、5、10 μmol/L）.分别采用Real-time PCR法检测THP1细胞TLR4 mRNA的表达;Western blotting检测TLR4和NF-kB蛋白的表达;流式细胞仪检测TLR4蛋白的表达.结景LPS刺激组THP1细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达均高于对照组（P〈0.05）;Fos干预组TLR4 mRNA和蛋白的表达均低于LPS刺激组,其中1、0.5 p.mol/L的Fos作用最明显.LPS刺激组NF-kB蛋白表达明显高于各Fos干预组（P〈0.05）.结论 Fos能有效下调LPS诱导的THP1细胞中TLR4的表达,并可有效抑制NF-kB的活性.

福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用。方法取SD新生大鼠（1～3d）120只，培养成心肌细胞，在培养的第4d随机分为5组（每次取20只，每组重复6次）：正常对照组、缺氧／复氧（A／R）组、福辛普利拉剂量1＋A／R（F1＋A／R）组、福辛普利拉剂量2＋A／R（F2＋A／R）组、福辛普利拉剂量3＋A／R（F3＋A／R）组。建立缺氧／复氧损伤模型，以福辛普利拉进行干预，对各组分别观察心肌细胞搏动频率、细胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶活性。结果①细胞搏动频率（beat／min）：A／R组（11．50±3．39）比正常对照组（99．83±4．22）明显减低（P〈0．01）；福辛普利拉各剂量组比A／R组显著加快（P〈0．01），比正常对照组稍慢，但无显著性差异（P〉0．05）。②细胞存活率：A／R（26．78±4．25％）组比正常对照组（87．96±2．58）明显降低（P〈0．01）；福辛普利拉各剂量组比A／R组明显增高（P〈0．01），与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。③LDH活性：A／R组（69．50±7．34）比正常对照组（10．33±2．73）明显升高（P〈0．01）；福辛普利拉各剂量组比A／R组明显降低（P〈0．01），与正常对照组相比虽有升高但无显著性差异（P〉0．05）。结论从细胞水平证实福辛普利拉预处理对心肌细胞对缺氧／复氧损伤具有保护作用。

中国健康志愿者口服福辛普利的药代动力学研究

目的 研究中国健康志愿者 po福辛普利后的药代动力学。 方法 10名男性健康受试者 po福辛普利 2 0mg后 ,用LC/MS/MS法测定不同时间血浆中活性代谢物福辛普利拉浓度 ,SRM方式选择性检测待测物的特征碎片离子 ,full scanms2 方式检测内标物的碎片离子。结果 本法线性良好 ,精密度、准确度、回收率均符合要求。测得的主要药代动力学参数为 :T1/2 =(6 6± 1 2 )h ,Tmax=(3 7± 1 1)h ,Cmax=(45 1 9± 2 5 1 2 )ng·mL-1,AUC0 -∞ =(35 78 4± 2 2 31 2 )h·ng·mL-1。结论 本实验测得的Tmax,Cmax和AUC0 -∞ 均高于文献报道的白人受试者的参数值 ,而T1/2 显著低于文献值。

LC-MS/MS法测定人血浆中福辛普利及其活性代谢物福辛普利拉

目的:建立人血浆中福辛普利及其代谢物福辛普利拉的LC-MS/MS测定方法,研究健康志愿者口服福辛普利片后的药代动力学。方法:血浆样品加入内标扎来普隆,血浆样品酸化后用乙醚-二氯甲烷(3∶1)混合溶剂提取处理,LC-MS/MS分析。流动相为甲醇-10mmol/L醋酸胺水溶液,色谱柱为LichrospherC8,梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温25℃。质谱检测方式:选择性反应检测(SRM),20名健康受试者口服20mg福辛普利钠片,计算主要药代动力学参数。结果:福辛普利在0.1～15.0ng/mL,福辛普利拉1.0～700ng/mL范围内线性关系良好。福辛普利的日内RSD小于3.7%,日间RSD小于6.9%;福辛普利拉的日内RSD小于2.4%,日间RSD小于5.2%。福辛普利与福辛普利拉的t1/2分别为(2.72±1.75)h和(7.25±0.81)h,cmax分别为(4.61±2.34)ng/mL和(409.43±136.28)ng/mL,tmax分别为(1.21±0.42)h和(3.74±0.87)h。结论:本方法灵敏度高,测定结果准确,可用于人体药代动力学及相对生物利用度研究。

HPLC测定血浆中福辛普利的活性代谢物福辛普利拉浓度

目的 :建立人血浆中福辛普利拉HPLC测定法 ,为血药浓度监测和临床合理用药提供方法学基础。方法 :血浆样品酸化后用乙醚 -二氯甲烷混合溶媒提取 ,以双氯芬酸钠为内标 ,流动相为甲醇 - 10mmol·L- 1 磷酸氢二钾溶液 (内含 5mmol·L- 1 氯化四丁基铵 ) (6 8∶32 ) ,磷酸调pH至 7 6 ;流速为 1 0mL·min- 1 ;检测波长 2 10nm。结果 :本法在 10 5～ 1112 0ng·mL- 1 范围内线性良好 ,r=0 9988。高中低浓度的 3个质控样品日内RSD <8 12 % ,日间RSD <8 10 % ,本法的相对误差 <13 4%。血浆最低检测浓度为 10 5ng·mL- 1 。结论 :本法快速、准确、重现性好 ,适用于该药物临床血药浓度监测。

PLC法同时测定福辛普利钠片中福辛普利钠及其降解产物福辛普利拉的含量

目的 :建立同时测定福辛普利钠片中福辛普利钠及其降解产物福辛普利拉的高效液相色谱法。方法 :以 μ BondapakC18( 3 0 0× 4 .6mm ,1 0 μm)为分析柱 ,0 .8%三乙胺溶液 (用磷酸调节pH3 .0 ) 乙腈 ( 3 5∶65)为流动相 ,检测波长 :2 1 5nm ,峰面积内标法。结果 :回收率与线性范围分别为 (n =5) :福辛普利钠 ( 1 0 0 .3 % ,RSD =0 .3 7% ,50～2 50 μg/ml) ;福辛普利拉 ( 1 0 1 .8% ,RSD =0 .67% ,2 .5～ 1 2 .5μg/ml)。 结论 :本法简便 ,适合福辛普利钠片中福辛普利钠及其降解产物福辛普利拉的含量测定。

HPLC法测定福辛普利钠片中福辛普利拉的含量

目的:建立测定福辛普利钠片中福辛普利拉含量的HPLC方法。方法:采用加校正因子主成分自身对照法,选择Waters XBridge C18(5μm 4.6×250 mm)为固定相,乙腈-0.2%磷酸溶液(44︰56)为流动相,流速1.0 m L·min-1,检测波长为215 nm。结果:福辛普利钠和福辛普利拉在浓度4.0~24.0μg·m L-1范围内线性关系良好。福辛普利拉平均回收率为100.4%。结论:该方法专属性强、灵敏度高、操作简单,可用于测定福辛普利钠片中福辛普利拉含量。

福辛普利拉预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的预防作用

目的:探讨福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的预防作用。方法:取SD新生大鼠(1~3 d),培养成心肌细胞,在培养的第4天随机分为5组:①正常对照组,②A/R组,③0.2 mmol/L福辛普利拉预处理组(F1组),④0.6 mmol/L福辛普利拉预处理组(F2组),⑤1.8 mmol/L福辛普利拉预处理组(F3组)。分别观察各组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌细胞肌浆网钙泵(SERCA)mRNA的表达水平和心肌细胞内游离[Ca2+]浓度。结果:①细胞搏动频率:A/R组比正常对照组明显减低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著加快(P<0.01),比正常对照组稍慢(P>0.05)。②细胞存活率:A/R组比正常对照组明显降低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显增高(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。③LDH活性:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),与正常对照组相比虽有升高但差异无统计学意义(P>0.05)。④SER-CA mRNA的表达水平:A/R组比正常对照组mRNA表达下调,为正常对照组的(0.78±0.30)倍(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著上调(P<0.01)。⑤心肌细胞内游离[Ca2+]浓度:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:福辛普利拉预处理后对A/R心肌细胞损伤具有预防作用,其机制可能与SERCA表达上调、减轻细胞内Ca2+超载有关。

福辛普利拉血药浓度的LC-MS/MS法测定及其人体药动学研究

目的:建立福辛普利的活性代谢产物福辛普利拉血药浓度的LC-MS/MS测定方法,考察福辛普利钠片经中国健康受试者口服后的药动学特性。方法:采用甲醇直接沉淀蛋白法处理血浆样本;LC采用WATERS XTerraRP18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温为48℃,流动相为6 mmoL.L-1醋酸铵水溶液(用氨水调节至pH 10.2)-甲醇(57∶43),流速为1.0 mL.min-1,进样量为40μL;MS应用三重四极杆串联质谱仪,采用电喷雾离子源、负离子电离模式及多反应监测,检测离子选择福辛普利拉离子(m/z:434.2→236.9)和内标瑞巴派特离子(m/z:369.0→169.9)。20名受试者口服福辛普利钠片10 mg后,在不同时间点采集血浆样本,采用建立的LC-MS/MS法测定福辛普利拉血药浓度,计算药动学参数。结果:福辛普利拉血药浓度在0.5005～300.3μg.L-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.5μg.L-1。福辛普利拉的Cmax为(148.4±43.9)μg.L-1,Tmax为(4.05±0.76)h,AUC0-48 h为(1 315±342)μg.h.L-1,AUC0-∞为(1 335±341)μg.h.L-1,CL/F为(7.957±1.969)L.h-1,Vd为(103.9±41.2)L,t1/2为(8.94±2.62)h。结论:该法简便、准确、灵敏,适用于福辛普利钠片的临床药动学研究。