基于生物信息学数据库分析FOXM1在肝癌中的表达及其临床预后意义

目的 通过挖掘癌症数据库中的数据,分析了FOXM1在肝癌患者中的临床表达作用情况及其临床意义。方法 检索Oncomine、GEPIA和HPA数据库中有关肝癌中FOXM1的数据,结合文献二次综合分析,WB进行相互验证。结果 Oncomine数据库分析FOXM1在所有肿瘤类型中的表达,差异有统计学意义的研究结果共78个,其中肝癌中高表达的研究有4个。Oncomine与GEPIA两个数据库分析结果一致发现FOXM1 m RNA在肝癌组织中地表达显著高于正常组织(P<0.001)。HPA网站分析显示,FOXM1蛋白在正常组织中表达水平较低或不表达,但在肝癌组织中呈显著高表达。该蛋白表达结果与mRNA表达一致。生存分析发现,FOXM1表达水平与总生存期和无瘤生存期显著相关,FOXM1高表达患者临床预后差(均P<0,001)。GEPIA在线分析显示在肿瘤的不同临床阶段,各组之间的FOXM1 mRNA表达差异显著(P<0.001)。进一步相关性分析,发现肝癌中FOXM1与MSH4相关性低,而与MLH1、MSH2、MSH3、MSH5和MSH6基因的表达呈现正相关性(均P<0.001);与PIK3CA、mTOR、AKT1、HIF1A及VEGFA的表达均呈现正相关(均P<0.001)。WB结果显示实验组MLH1、MSH2、MSH3、MSH5、MSH6、PIK3CA、mTOR、AKT1、HIF1A和VEGFA的表达水平在一定程度上有所提高。结论 利用生物信息学的相关性方法分析发现,在肝癌组织中,FOXM1高表达,并且和癌症的临床分期以及预后密切相关。其机制可能与调节PI3K/AKT信号通路及错配修复基因MLH1、MSH2、MSH3、MSH5和MSH6有关,值得进一步深入探究。

FoxM1剪接异构体在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的观察FoxMl剪接异构体在女性上皮性卵巢癌中的表达特征，并探讨其应用价值。方法恶性组50例，为经手术治疗及术中获取病灶组织病理检测确诊的上皮性卵巢癌患者；良性组50例，为影像学及病理诊断为卵巢良性肿瘤者；正常组50例，为其他妇科疾病入院但经临床症状、影像学检查等未见卵巢异常者。均取卵巢病理组织切片免疫组化染色，免疫荧光法检测FoxM1表达阳性情况。结果恶性、良性和正常组卵巢组织FoxM1的表达阳性率比较差异有统计学意义（x2=21．141，P〈0．001），两两比较，恶性组显著高于良性组及正常组（x2=16．284、5．363，P〈0．01），良性组显著高于正常组（X2=10．187，P〈0．01）；统计结果显示FoxM1阳性表达与上皮性卵巢癌FIGO分期、分化程度以及淋巴结转移密切相关，差异有统计学意义（P〈0．05或〈0．01）；经单因素、多因素分析显示，只有FIGO分期、淋巴结转移可作为上皮性卵巢癌患者的独立预后因素。结论FoxM1剪接异构体在上皮性卵巢癌中呈现为高表达，且与上皮性卵巢癌FIGO分期、分化程度、病理分型以及淋巴结转移密切相关；经分析，上皮性卵巢癌患者的独立预后因素为FIGO分期、淋巴结转移和FoxM1表达阳性。

调控FOXM1基因对乳腺癌BT474细胞赫赛汀药物敏感性的影响

目的探究调控叉头框转录因子M1(FOXM1)基因对乳腺癌BT474细胞赫赛汀药物敏感性的影响。方法将FOXM1过表达及特异性靶向FOXM1基因的小干扰RNA(FOXM1-siRNA)转染至乳腺癌BT474细胞,将细胞分为上调FOXM1基因组、下调FOXM1基因组和对照组。Western blot检测FOXM1蛋白以及PI3K/AKT信号通路蛋白的表达。MTT法检测不同浓度赫赛汀药物对BT474细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测不同浓度赫赛汀药物对BT474细胞迁移、侵袭能力的影响。结果下调FOXM1基因后,FOXM1蛋白的相对表达量明显减少(P<0.05)。上调FOXM1基因组BT474细胞的增殖率、迁移数量、侵袭数量显著高于对照组,且随着赫赛汀浓度的增加其增殖率、迁移数量、侵袭数量逐渐增加,上调FOXM1基因可增强BT474细胞对赫赛汀的耐药性,促进增殖、迁移及侵袭。下调FOXM1基因组BT474细胞的增殖率、迁移数量、侵袭数量显著低于对照组,低浓度的赫赛汀对BT474细胞的增殖、迁移及侵袭能力的抑制程度较弱,高浓度的赫赛汀对BT474细胞的增殖、迁移及侵袭能力的抑制过度,而中浓度的赫赛汀抑制能力介于低、高浓度之间,能够有效抑制BT474细胞增殖、迁移及侵袭,但无抑制过度的表现。不同赫赛汀浓度下下调FOXM1基因组细胞的增殖率、迁移数量、侵袭数量显著低于上调FOXM1基因组。下调FOXM1基因组PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组和上调FOXM1基因组(P<0.05)。结论上调FOXM1基因可增强乳腺癌BT474细胞对赫赛汀的耐药性,下调FOXM1基因在中浓度赫赛汀的干预下,可通过作用于PI3K/AKT信号通路,抑制乳腺癌BT474细胞的增殖、迁移及侵袭,从而抑制乳腺癌的发展。

非小细胞肺癌组织FOXM1基因表达和突变情况及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中FOXM1基因表达和突变情况及其临床意义。方法收集我院2014年-2016年的非小细胞肺癌手术切除病例的石蜡标本,采用免疫组织化学方法检测59例肺癌组织中FOXM1蛋白的表达水平,对其中的21例患者采用高通量测序方法检测肺癌组织中基因突变情况,收集病人的临床病例资料,分析FOXM1蛋白的表达水平和突变与病人临床病理例特征之间的相关关系。结果本组共收集非小细胞肺癌病例59个,男性45例,女性14例。在所有患者中FOXM1高表达病例29例,占49.2%;低表达30例,占50.8%;在FOXM1高表达患者中,20例分化程度低,占69.0%;低表达患者中12例分化程度低,占40%,有显著性差异(P<0.05);镜下见脉管内浸润患者,高表达组为9例,低表达组为3例,差异有统计学意义(P<0.05);21例病人中,有13例检测到FOXM1基因突变,其中9例肺癌标本检测到exon8:c.T1882C:p.S628P突变,其存在率达42.86%(9/21),远高于正常人群(<1%)。结论 FOXM1蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平升高,并与肿瘤的低分化程度和脉管内侵袭相关,非小细胞肺癌组织中FOXM1突变率显著升高,可能与肺癌发病存在高度相关性。

短发卡RNA稳定沉默FOXM1对肝癌细胞体外生长的影响

目的探讨短发夹RNA（short hairpinRNA，shRNA）表达载体稳定沉默叉头框M1（forkheadboxM1，FOXMl）基因对人肝癌细胞体外生长的影响。方法构建针对人类FOXMlmRNA的不同干扰靶点的4个shRNA表达载体，选择干扰效果最佳的表达载体和阴性对照质粒转染人肝癌细胞QGY-7703，用新霉素（G418）筛选稳定转染的克隆。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法和平板克隆形成实验检测FOXMl基因沉默前后肝癌细胞体外生长能力的变化。用AnnexinV—APC／PI双染法检测细胞凋亡。结果不同人肝癌细胞株中普遍表达FOXM1蛋白。4个shRNA表达载体中，shRNA-1026表达载体的干扰效果最佳，对FOXM1mRNA和蛋白表达水平的抑制率分别为38．5％和53．2％。用shRNA-1026稳定沉默FOXM1基因后，QGY-7703细胞增殖受到抑制，培养48、72和96h后，沉默组的吸光值均显著低于对照组（分别t=10．830，3．578，5．734，均P〈0．05）；沉默组的克隆形成能力较对照组显著降低（t：5．336，P〈0．05），而细胞凋亡较对照组显著增加（t=6．827，P〈0．05）。结论shRNA表达载体稳定沉默FOXM1基因抑制肝癌细胞的生长。

转录因子FoxM1在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨转录因子FoxM1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其临床意义。方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测FoxM1蛋白在83例ccRCC和30例癌旁肾组织中的表达;应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测FoxM1mRNA在30例ccRCC和对应的癌旁肾组织中的表达,分析其与ccRCC患者临床病理特征及预后的关系。结果:FoxMl蛋白在ccRCC组织和癌旁肾组织中的阳性表达率分别为79.5%(66/83)和10.0%(3/30),差异有统计学意义(P<0.001)。FoxM1蛋白表达与ccRCC患者的年龄、性别无关(P>0.05),而与原发肿瘤T分期(P<0.001)、组织学分级(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)、远处转移(P=0.001)和TNM分期(P<0.001)相关。RT-PCR结果显示FoxM1mRNA在ccRCC和癌旁组织中的相对表达量分别为0.652±0.026和0.327±0.043,差异有统计学意义(P<0.05)。FoxM1mRNA表达与ccRCC患者原发肿瘤T分期(P<0.001)、组织学分级(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.006)、远处转移(P=0.005)和TNM分期(P<0.001)有关。Kaplan-Meier生存分析显示,FoxM1蛋白高表达组患者的总生存时间短于低表达组患者,差异有显著统计学意义(Log-rank=46.117,P<0.001)。Cox多因素风险比例模型显示,原发肿瘤T分期(P=0.009)、远处转移(P=0.006)和FoxM1表达情况(P=0.001)是影响ccRCC患者预后的独立因素。结论:FoxM1在ccRCC组织中高表达,可能与ccRCC的进展有关;其表达状态是ccRCC患者独立预后因素。

妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因的表达及其与胰岛素的关系

目的探讨妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因表达变化以及与胰岛素的关系。方法选择东莞市石碣医院产科门诊行产检的GDM孕妇、正常孕妇各100例作为研究对象,分别为研究组和对照组,采用放射免疫法检测两组孕妇血清胰岛素水平,并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组孕妇血液中FoxM1基因表达。结果确诊GDM时,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平明显高于对照组孕妇(t=12.22,P<0.05);分娩后6 h,两组孕妇的血清胰岛素表达水平均下降,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平仍明显高于对照组孕妇(t=13.67,P<0.05)。确诊GDM时,研究组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平(2.38±0.45)明显高于对照组孕妇(1.25±0.37)(t=19.40,P<0.05);分娩后6 h,两组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平均下降,研究组孕妇的血液FoxM1 mRNA表达水平(1.39±0.27)仍明显高于对照组孕妇(0.74±0.16)(t=20.71,P<0.05)。研究组孕妇血清胰岛素表达水平与其血液FoxM1基因表达呈正相关(r=0.56,P<0.05)。结论 FoxM1基因参与了GDM发病机制,且其表达与GDM孕妇血清胰岛素表达水平呈正相关。