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题名FOXN1基因敲除兔嵌合体的建立
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作者
刘天平
黎桂玲
刘科
陈傍柱
王刚
顾为望
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机构
五邑大学药学与食品工程学院
广东省医学实验动物中心
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2024年第4期35-40,共6页
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基金
国家自然科学基金(82101937)
广东省科技计划项目(2019A030317012,2021B1212040016)
广东省医学科研基金项目(B2024069)。
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文摘
目的建立F0代FOXN1基因敲除兔嵌合体,以探究普通饲养环境免疫缺陷兔活体保种的方法。方法首先,利用CRISPR/Cas9技术,将构建好的sgRNA和Cas9蛋白注入兔二细胞期胚胎的一个细胞中,以获得FOXN1基因编辑嵌合体胚胎。然后,胚胎移植至代孕母兔。最后,通过PCR技术以及Sanger测序方法鉴定F0代仔兔基因型,并观察其在普通饲养环境生长发育的情况。结果PCR结合Sanger测序结果表明FOXN1基因敲除兔嵌合体构建成功。经观察,嵌合体在普通环境下生长发育良好,无免疫缺陷表型。结论本研究初步建立了在普通环境下可正常生长发育的FOXN1基因敲除兔嵌合体,为后续进一步繁育FOXN1免疫缺陷兔奠定了研究基础。
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关键词
foxn1
基因敲除兔
免疫缺陷
嵌合体
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Keywords
foxn1
gene knockout rabbit
immune deficiency
chimera
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分类号
R-33
[医药卫生]
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题名猪FoxN1基因转录变异体亚细胞定位研究
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作者
张冬杰
李苓
汪亮
刘娣
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机构
黑龙江省农业科学院畜牧研究所
东北农业大学动物科学技术学院
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出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期55-59,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(31301955)
国家生猪产业体系岗位科学家项目(CARS-36)
黑龙江省自然科学基金项目(C201312)
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文摘
Fox N1基因主要表达于胸腺上皮细胞和皮肤角质细胞,在胸腺发育、T细胞增殖、毛发生长、指甲发育等方面发挥重要作用。Fox N1基因存在多种转录变异体,人类Fox N1基因已发现18种转录变异体。转录变异体的存在使基因差异表达和蛋白质多样性存在可能。为深入研究转录变异体生物学功能,研究将前期发现的猪Fox N1基因3种转录变异体分别连入p EGFP-N1载体内,构建各自融合蛋白,转入猪PK15细胞,利用荧光显微镜观察转录变异体亚细胞定位情况。结果表明,p EGFP-N1空载体转染表达绿色荧光蛋白在PK15细胞核和细胞质均匀分布,而重组载体p EGFP-N1-Fox N1(a/b/c)表达的融合蛋白仅在细胞核内均匀分布。结果可为3种转录变异体后续功能研究奠定基础。
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关键词
猪
foxn1基因
转录变异体
细胞定位
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Keywords
pig
foxn1 gene
transcript variant
cellular localization
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
Q343.17
[生物学—遗传学]
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题名民猪FoxN1基因的克隆及生物信息学分析
被引量:3
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作者
李苓
张冬杰
汪亮
王鑫鑫
曹越
刘娣
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机构
东北农业大学动物科技学院
黑龙江省农业科学院畜牧研究所
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出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第4期928-933,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(31301955)
黑龙江省自然科学基金项目(C201312)
国家生猪产业体系岗位科学家(CARS-36)
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文摘
试验旨在对民猪FoxN1基因的结构和功能进行初步探索。利用常规PCR技术对民猪FoxN1基因进行克隆,利用生物信息学手段对所获得FoxN1基因完整编码区序列进行分析,对民猪和大白猪的FoxN1基因序列进行比对,并构建分子进化树。结果显示,民猪FoxN1基因完整编码区长1 941bp,编码646个氨基酸,分子质量为68.64ku,理论等电点为5.81。FoxN1蛋白位于细胞核内,不存在信号肽,不是分泌性蛋白,不存在跨膜区,在第269—347氨基酸处有1个叉头结构域,该蛋白在不同的物种间有高度的保守性。克隆发现了3种转录剪切变异体,与变异体1相比,变异体2在第124—387核苷酸位置处发生缺失,变异体3在581—582处发生GCA插入。民猪与大白猪的FoxN1基因序列相比,存在4个突变位点,其中3个是同义突变,1个是错义突变,导致第108位的氨基酸发生了改变。由分子进化树得知,民猪与偶蹄目动物亲缘关系较近。上述结果表明FoxN1基因结构复杂,对其生物信息特性的探究将为进一步揭示民猪FoxN1基因的功能提供依据。
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关键词
民猪
foxn1基因
基因克隆
生物信息学分析
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Keywords
Min pig
foxn1 gene
gene cloing
bioinformatics analysis
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分类号
S828
[农业科学—畜牧学]
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题名民猪FoxN1基因的表达规律及对低温应答反应
被引量:2
- 4
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作者
张冬杰
李苓
王鑫鑫
汪亮
杨国伟
刘娣
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机构
黑龙江省农业科学院畜牧研究所
东北农业大学动物科学技术学院
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出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期1589-1593,1604,共6页
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基金
国家自然科学基金资助项目(31301955)
黑龙江省自然科学基金资助项目(C201312)
国家生猪产业体系资助项目(CARS-36)
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文摘
胸腺是哺乳动物的一个重要免疫器官,FoxN1在调节胸腺上皮细胞发育中起着重要作用。猪既是一种肉用型家养动物,同时也是一种新型的实验动物模型。为了更好的了解和掌握猪自身免疫的发展特点,本试验采用Realtime PCR结合Western blot技术对2,4,6,8月龄民猪胸腺内FoxN1的表达变化进行了检测,同时也分析了冷应激后FoxN1基因在耐冷型民猪和非耐冷型大白猪胸腺内的表达变化情况。结果表明,FoxN1基因在4月龄民猪胸腺内的表达水平最高,从6月龄开始出现下降,与已知人、小鼠的FoxN1表达变化趋于一致。冷应激会促进民猪胸腺FoxN1基因的转录与表达,但对大白猪无效。
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关键词
民猪
大白猪
胸腺
foxn1基因
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Keywords
Minzhu
large white pig
thymus
foxn1 gene
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分类号
S852.2
[农业科学—基础兽医学]
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