长脾脏酪氨酸激酶对乳腺癌细胞中细胞周期蛋白D1、ID1、B-myb和Fral基因表达的抑制作用

目的筛选乳腺癌中长脾脏酪氨酸激酶[Syk(L)]作为转录抑制因子下调的靶基因,探讨 Syk(L)在乳腺癌中的抑癌机制。方法采用 CLONTECH 公司的 Adeno-X^(TM)表达系统构建 Syk的腺病毒载体,感染不表达 Syk 的乳腺癌细胞系 MB231,以腺病毒 LacZ 作为对照,采用 cDNA 微阵列方法筛选 Syk(L)、Syk(S)调节的基因 ID1、Cyclin D1、Fral 和 B-myb 的表达;并采用 Northern 杂交的方法验证 cDNA 微阵列结果。结果在乳腺癌细胞中,转录抑制因子 Syk(L)可下调癌基因 ID1、CyclinD1、Fra1和 B-myb 的表达,Northern 杂交证实了 Syk(L)对它们的调节。结论抑癌基因 Syk(L)通过特异性下调癌基因 Cyclin D1、ID1、B-myb 和 Fra1的表达抑制乳腺癌的发展。

AP-1蛋白c-Jun与Fral形成二聚体促进类多巴能神经细胞SH-SY5Y存活

目的探讨激活蛋白-1（he-1）c-Jun与Fral对类多巴胺能神经细胞存活能力的影响。方法（1）体外培养SH-SY5Y细胞，裂解后进行免疫共沉淀实验，检测c-Jun是否与Fral形成二聚体。（2）将细胞分为4组，分别为对照组[加入二甲基亚砜（DMSO）]、SP600125组、U0126组及SP600125＋U0126组[分别加入c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂SP600125、MEK1／2抑制剂U0126及SP600125＋U0126]。免疫印迹法检测c-Jun或Fral表达，MTT法检测细胞活力。（3）用滴度为100MOI腺病毒（Ad）感染细胞，共分为4组，分别为对照组（转染绿色荧光蛋白）、Ad-c-Jun组、Ad-Fral组、Ad-c-Jun＋Ad-Fral组（后3组分别转染相应Ad），免疫荧光染色检测感染率，MTT法检测细胞活力。结果（11免疫共沉淀结果显示c-Jun和Fral形成二聚体。（2）免疫印迹结果显示SP600125组c-Jun表达减少，U0126组Fral表达减少。MTT结果显示，4组细胞活力差异有统计学意义（F=16．647。P=0．ooo）。其中对照组与SP600125组、U0126组及SP600125＋U0126组差异有统计学意义B0．05）。（3）过表达c-Jun、Fral后，4组细胞活力差异有统计学意义（F=14．543，P=0．000），其中对照组与Ad-c-Jun组差异无统计学意义（P〉0．05），对照组与Ad-Fral组差异有统计学意义（P〈0．05），Ad-Fral组与Ad-c-Jun＋Ad-Fral组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论c-Jun与Fral形成二聚体促进类多巴胺能神经细胞存活。

威布尔型共享脆弱模型的贝叶斯实证研究

本文主要借助MCMC方法,利用Gibbs抽样对威布尔型共享脆弱模型进行贝叶斯分析,利用数据模拟说明了模型的有效性.

小分子抑制剂JQ1抑制小鼠乳腺癌生长及转移

目的探讨FOS相关抗原-1(Fra1)特异性小分子抑制剂JQ1对肿瘤相关巨噬细胞表型以及小鼠乳腺癌生长和转移的影响。方法 CCK8检测JQ1的细胞毒性;Western blot检测RAW264.7细胞Fra1蛋白水平;RT-q PCR和流式细胞术检测JQ1处理巨噬细胞后M1/M2相关表型分子的变化;Transwell细胞迁移实验检测JQ1处理后的RAW264.7细胞对4T1乳腺癌细胞系迁移能力的影响;小鼠荷瘤实验检测JQ1联合紫杉醇对小鼠乳腺癌的治疗效果。结果 JQ1能够抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达和向M2型极化,降低巨噬细胞促进乳腺癌细胞迁移的能力(P<0.05);JQ1联合紫杉醇治疗明显降低小鼠乳腺癌的原位生长和肺转移(P<0.05)。结论 JQ1通过抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达来抑制巨噬细胞向M2型极化,降低肿瘤细胞迁移能力,进而减少小鼠乳腺癌肿瘤原位生长和肺转移。

慢病毒介导的Jab1基因表达干扰在乳腺癌细胞中功能的初步研究

在乳腺癌细胞MDA231中,成功建立了慢病毒介导的Jab1基因表达干扰系统,并通过MTT细胞增殖实验和体外细胞侵袭能力实验证实Jab1基因表达的干扰使得MDA231细胞的增殖和体外侵袭能力发生显著的下降;此外,通过Western blot实验证实Jab1对于Fra1的表达可能存在调控,并且Fra1和Jab1在MDA231细胞中的表达干扰会使细胞形态发生相似的改变,提示Jab1和Fra1在乳腺癌细胞MDA231中可能通过调控共同的信号通路影响细胞的形态.