大麦花药快速培养法及不同基因型对花药培养的影响

大麦花药培养是单倍体育种的基本技术之一,也是进行大麦转基因研究的技术基础。研究使用甘露醇预处理大麦花药,再在相应的诱导培养基和再生成苗培养基上培养,获得了大量分化绿苗。利用该方法比较了10个大麦杂交组合花药预处理4和5 d的效果,结果表明花药预处理4或5 d对培养效果没有显著影响,均能达到较高的绿苗产率。同时利用该方法比较了25个杂交组合的花药培养效果,发现组合间存在显著差异,而且绿苗产率和花药反应率及绿苗分化率呈极显著正相关。

大麦花药培养反应迟钝基因型的胚状体诱导和绿苗再生

用5份在历年大麦花药离体培养中反应值低的基因型作供试材料,比较了早、晚播,培养主茎穗或分蘖穗中花药和诱导培养基中加高、低浓度生长素的花培反应值,结果表明:早播,用主茎穗花药和诱导培养基中加高浓度生长素,可以提高迟钝基因型的反应花药率和绿苗率。

大麦幼穗和油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响

以4个大麦品系为供试材料,比较了诱导培养基中添加不同发育时期和不同添加量的大麦幼穗提取液以及添加油菜花蕾提取液对大麦花药培养反应的影响,摸索促进诱导分化率提高的最佳方案。结果表明,诱导培养基中添加大麦幼穗提取液对花药反应率及绿苗分化率有明显的促进效果,单核期大麦幼穗提取液的效果优于二核期幼穗提取液的效果;添加油菜花蕾提取液对花培反应的影响优于单核期大麦幼穗提取液的影响。供试材料"SD"在添加单核期幼穗提取液的诱导培养基上的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.6和1.7倍;材料"93T"的花药反应率和绿苗分化率分别是对照的1.7和3.0倍;诱导培养基中添加60g/L的油菜花蕾提取液的促进作用又优于添加60g/L的大麦幼穗提取液。

大麦离体培养花药对低温预处理及NaCl胁迫的反应

以 3份大麦基因型作供试材料 ,探讨了离体麦穗低温预处理对花药离体培养愈伤组织诱导、绿苗分化及NaCl胁迫对花药培养愈伤组织分化形成绿苗的可能原因。依据研究结果 ,推测 :不同供体基因型的花药对低温预处理首先是一个冷胁迫反应 ,其次才是培养反应。认为制定适宜的低温预处理时间 。

提高迟钝型大麦花培反应率的因素

研究了影响大麦花药离体培养反应的一些因素。结果表明 :供体穗子经 3℃预处理可以促进花药离体培养反应 ,迟钝基因型的最佳处理时间比敏感基因型的短 ,以 10～ 15d为宜。诱导培养基中添加 80 0mg/LCH能够较大幅度提高花药反应率和绿苗率 ,在含CH的培养基内添加 50 0mg/L脯氨酸或 10 0mg/L精胺 ,均能进一步提高迟钝基因型的反应花药率 ,特别是绿苗率。