外源性L-抗坏血酸对斑玉蕈子实体发育过程中氧化还原体系的影响

[目的]在不同培养时期的斑玉蕈菌丝中添加外源L-抗坏血酸,探究外源L-抗坏血酸对斑玉蕈产量和子实体发育阶段的氧化还原体系(抗氧化物质、活性氧和抗氧化酶)的影响。[方法]以工厂化生产的斑玉蕈菌株作为研究材料,将培养时间为40和120 d的菌丝搔菌后,处理组分别添加15 mL 400 mg·L^(-1) L-抗坏血酸(AsA)。空白对照组则添加15 mL蒸馏水。测量斑玉蕈子实体的产量和斑玉蕈恢复期(H-M)、转色期(H-V)、原基期(H-P)和成熟子实体期(H-F)的抗氧化物质、活性氧含量,分析抗氧化相关酶活性的变化规律。[结果]培养40 d时,外源添加400 mg·L^(^(-1)) AsA处理组斑玉蕈产量为每瓶104.01 g,比对照组增加10%;培养120 d时,处理组斑玉蕈产量为每瓶278.49 g,比对照组增加5%。外源添加AsA能调控斑玉蕈内源AsA和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,培养40 d H-V的内源AsA和GSH含量与120 d的H-M内源AsA和GSH含量均显著提高;培养120 d氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量比40 d高。培养120 d菌丝中丙二醛和活性氧含量比40 d高。外源添加的AsA在调控40和120 d的作用时期也不一致,其对40 d的子实体在发育后期(H-P和H-F)作用显著,而对120 d的子实体则在发育早期(H-M和H-V)作用显著;其对抗氧化酶的作用时期和活性变化也不同,其中谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性差异最大,即在40 d GPX活性呈逐渐上升趋势,在120 d GPX活性呈逐渐下降趋势。[结论]外源添加AsA能调控斑玉蕈内源AsA的分泌规律,提高抗氧化酶活性,减少活性氧累积和脂质过氧化,从而增加子实体产量。

松乳菇菌丝体固体平板培养的研究

由松乳菇子实体经组织分离得到纯化菌丝体,对其在固体平板培养基上进行培养,结果表明松乳菇菌丝体生长的适宜条件是PDA培养基、温度28℃、培养基pH5、无光照培养。研究发现添加马尾松不同组织的提取液对菌丝生长无明显影响。

蛹虫草子实体和蛹虫草根醇提物抗氧化活性的对比

蛹虫草根作为人工蛹虫草的副产品未得到有效利用。本试验以10 mL体积分数70%乙醇分别提取1 g蛹虫草子实体和蛹虫草根,分析了二者的醇溶性总糖、还原力和清除自由基的能力。结果表明:蛹虫草子实体的醇溶性总糖含量为蛹虫草根部2倍;蛹虫草根部醇提物还原力和清除DPPH自由基能力要明显高于蛹虫草孢子头子实体醇提物;后者清除羟自由基的能力稍强于前者。说明人工蛹虫草根有潜在的开发利用价值。

松乳菇子实体多糖提取工艺及其组分的研究

以多糖得率为指标,对松乳菇子实体预处理方式、乙醇沉淀浓度和提取次数进行比较,并选择对松乳菇多糖提取影响较大的三个因素(时间、料水比、温度)设计正交试验优化多糖提取条件,结果表明,松乳菇子实体粗多糖提取较好的条件是:干燥子实体粉碎后过40目筛,乙醇沉淀浓度为80%;提取2次可得到7.42%的粗多糖;正交试验表明,提取时间2.5h,料水比1∶25(w/v),温度85℃为松乳菇多糖提取的最佳组合。用纸层析法分析松乳菇多糖,表明其含有葡萄糖、果糖、半乳糖和甘露糖等单糖。

类胡萝卜素对蛹虫草子实体形成的影响

类胡萝卜素对蛹虫草子实体形成有很大影响。为了探讨类胡萝卜素与蛹虫草子实体形成的关系,选取三种典型菌落形态的蛹虫草菌株,研究其在光照黑暗交替条件下不同菌落形态和类胡萝卜素含量对子实体形成的影响。采用酸热法和吸收光谱法提取测定类胡萝卜素含量。结果表明三类蛹虫草在沙氏平板上均有可形成子实体的菌株,说明形态与子实体形成无直接关系。类胡萝卜素含量在3000μg/g以下的菌株在沙氏培养基上无子实体形成,3000~3500μg/g有子实体形成平均为2个/cm2,3500~6500μg/g菌株子实体形成能力较强平均为7个/cm2,含量在6500μg/g以上菌株形成子实体平均在5个/cm2,全黑暗培养菌株未检测到类胡萝卜素,也无子实体形成。

角孢离褶伞菌丝最佳生长条件研究

本试验研究了角孢离褶伞(Lyophyllum transforme)菌丝生长所需要的最适碳源、氮源、碳氮比、无机盐、pH值以及离褶伞浸出液对角孢离褶伞菌丝生长的影响。试验范围内角孢离褶伞菌丝生长最适碳源是葡萄糖,最适氮源是蛋白胨,0.1%的氯化纳或磷酸二氢钾能促进菌丝生长;菌丝在pH值5～9都能生长.但在酸性环境下生长较好;玉蕈离褶伞(Lyophyllum shimeji)子实体浸出液对角孢离褶伞菌丝生长有明显促进作用。

桑黄的属性考证

为明确什么是“桑黄”,对桑树桑黄生长环境、菌丝体及子实体的属性进行了考证。在所考察的时间与地域范围内,仅发现桑树桑黄寄生蒙桑(Morus mongolica Schneid.)和鬼桑(Morus mongolica var.diabolica Koidz.)两种桑种,未发现桑树桑黄寄生于当地其他树种。野外的桑树桑黄子实体形状多变,无柄,质地异常坚硬;子实层腹部金黄色,表面菌孔较少。桑树桑黄菌丝体适应在PDA培养基上生长,具有异常牢固、不易变性、不易老化的特点。桑树桑黄菌丝呈簇状生长,分枝众多,分隔稀少,具绳状的菌丝束,无锁状联合,常见囊泡状结构和异常粗大的金黄色菌丝(直径达4.68~7.23μm)。与供试的近缘黄色无柄蕈类相比,桑树桑黄的菌丝体和培养的子实体最为致密;桑树桑黄菌丝适应桑叶为基质的培养基,并可在蚕沙培养基长期保存,pH 6.0~8.8的培养基均适合其正常生长,但对蔗糖及麦麸的利用效率不佳。基于引物ITSl/ITS4扩增rDNA ITS序列的进化分析发现,桑树桑黄和杨树黄、栎树黄、暴马黄等近缘种类之间仍存在一定的遗传距离;转录组测序分析发现,相对于杨树黄、栎树黄、暴马黄的子实体,桑树桑黄特异性表达的基因达62个。本研究是对桑黄部分属性的全新揭示,可为“桑黄”(桑树桑黄)正名,有助于桑黄这一珍稀药用真菌的后续研究和应用。