不同基因型烤烟对镰刀菌根腐病的抗性鉴定与评价

为明确不同基因型烤烟对烟草镰刀菌根腐病的抗性,利用10个烟草品种(系),采用粗毒素幼芽接种、带菌菌谷接种、孢子悬浮液培养等方法进行抗性鉴定。结果表明,供试品种对尖孢镰刀菌抗性表现出显著差异;对尖孢镰刀菌表现出抗的品种(系)有4个,分别是‘Y2001’、‘Y2002’、‘长脖黄’、‘664-01’;对尖孢镰刀菌表现出感的品种(系)有6个,分别是‘7710’‘、7713’‘、Y2007’‘、Y2008’‘、中烟100’、‘小黄金1025’。3种接种方法鉴定结果基本一致,共筛选出4个抗性品种(系)。

非洲菊应答尖孢镰刀菌侵染的转录组分析

[目的]探明尖孢镰刀菌胁迫下非洲菊根系基因表达的变化,挖掘非洲菊根系抗病菌胁迫的相关基因及信号通路等分子机制,为非洲菊根腐病防治提供理论参考。[方法]以健康非洲菊根系和被尖孢镰刀菌侵染96 h感病的非洲菊根系为材料,采用转录组测序技术对其进行转录组测序,筛选差异表达基因(DEGs),并进行GO功能注释和KEGG代谢通路富集分析,再通过实时荧光定量PCR验证转录组测序结果的可靠性。[结果]从尖孢镰刀菌侵染非洲菊根系获得10 218个DEGs,其中上调基因7273个,下调基因2945个。有3401个DEGs隶属于72个转录因子家族,其中,数量最多的转录因子为MYB和AP2/EFR家族,其次为C2H2、bHLH、NAC和C3H等家族。GO富集结果显示,DEGs共注释到53个功能组,其中氧化还原过程、胞质溶胶、细胞分裂位点、膜组成成分、金属离子结合等的DEGs较多。KEGG代谢通路富集结果表明,DEGs显著富集在碳水化合物代谢、能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢等生物合成途径。3条碳水化合物代谢途径多数DEGs上调。光合作用途径和光合作用-天线蛋白途径中多数DEGs表现下调。在α-亚麻酸代谢途径中,共有49个差异表达基因被富集,其中4个脂氧合酶(LOX2S)基因和2个氢过氧化物脱水酶(AOS)基因均下调表达。[结论]MYB、AP2/EFR、C2H2、bHLH、NAC和C3H等转录因子家族成员以及调控光合作用、碳水化合物代谢、脂质代谢等相关差异表达基因,可能在参与响应非洲菊抗根腐病胁迫应答中发挥重要作用。

兰花根腐病病原菌分离鉴定及室内药剂筛选

【目的】为探究引发兰花根腐病的病原菌种类,及室内不同化学药剂与生物菌剂对兰花根腐病的防治效果。【方法】研究以三明市农业科学研究院兰花种质圃的3株墨兰病株为样本,采用组织分离技术、菌落形态观察、分子生物学鉴定以及柯赫氏法则的病原菌致病性检测分离鉴定病原菌。同时,测定平板抑制率分析7种化学药剂和2种生物菌剂对分离菌株的抑制效果。【结果】从典型的兰花根腐病病株分离纯化后获得3株培养性状一致的菌株,其菌落形状均为圆形,正面灰白色,边缘整齐呈放射状,气生菌丝白色或灰白,稀薄棉絮状,背面呈淡黄色或紫红色;ITS、cal分子标记序列比对均与NCBI数据库中尖孢镰刀菌(登入号为:ON960618.1)的序列同源性为100%,系统进化表明二者在遗传上紧密相关,致病性测定结果表明其发病症状与田间表现一致,符合柯赫氏法则,综合形态学与遗传学特征,鉴定出兰花根腐病病原菌为尖孢镰刀菌。室内药剂筛选表明,3种化学药剂多菌灵、代森锰锌、喹啉酮和2种生物菌剂哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌对分离菌株的抑制效果较弱或者无效果;4种化学药剂精甲·恶霉灵、精甲·嘧菌酯、克菌丹、咪鲜胺锰盐对分离菌株的抑制效果较好,抑菌效果依次为咪鲜胺锰盐>精甲·恶霉灵>精甲·嘧菌酯>克菌丹。【结论】本研究分离鉴定出一种引发兰花根腐病的病原菌尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum,筛选出对兰花根腐病室内防治效果最佳的药剂为咪鲜胺锰盐,然后依次为精甲·恶霉灵、精甲·嘧菌酯、克菌丹,为兰花根腐病的防治提供了技术参考。

兰花枯萎病拮抗细菌的筛选与鉴定

为筛选对兰花枯萎病病原菌尖孢镰刀菌具有拮抗作用的芽孢细菌,从各地采集的土样中分离获得的237株芽孢杆菌进行初筛、复筛,最终从衡水饶阳县棉田的土样中筛选出的芽孢杆菌3A3-15,对病原菌有较强的抑菌活性,且抑菌谱广。结合形态学观察、生理生化试验,根据16S rDNA序列相似性分析,此菌株与Bacillus velezensis标准菌株CR-502的16S rDNA序列相似度达99.92%,因此,鉴定拮抗菌株3A3-15为Bacillus velezensis。

安徽省棉花枯萎病菌生物学特性及酯酶同工酶分析

研究温度、pH值以及碳源、氮源对棉花枯萎病菌菌丝生长速率、菌丝干重和分生孢子产生量的影响,并对不同棉花枯萎病菌菌株进行了酯酶同工酶分析.结果表明,该病菌在10～35℃下都可生长,最适生长温度为25℃;在pH4～10范围的PDA培养基上均能生长,最适pH值为6～7.蔗糖作碳源时,该病菌在PDA平板上生长最快,分生孢子产生量最大,但菌丝干重略低于可溶性淀粉处理;氮源以脲最佳,其次为硝酸钠和硝酸铵.酯酶同工酶分析结果表明,供试的15株棉枯萎病菌株的酯酶同工酶主酶带有明显不同,可将其分为4种类型,酯酶同工酶酶谱类型和致病力有较密切的相关性.

百合种质资源对枯萎病的抗性鉴定

采用鳞片接种法对收集、保存的40个百合种质资源进行镰刀菌枯萎病的抗性鉴定.结果表明:高抗品种(种)有12个,中抗品种(种)17个;中感品种(种)7个,高感品种(种)4个.鳞片接种法可作为百合枯萎病抗性鉴定的基本方法.

尖孢镰刀菌毒素对大豆胚根组织影响的超微结构研究

用2个浓度的尖孢镰刀菌毒素处理大豆胚根,来研究毒素对组织超微结构的影响。结果表明:毒素处理后,胚根细胞质壁分离;质膜、线粒体膜、核膜、液泡膜局部断裂;线粒体肿胀、变形、内部电子透明化、空泡化;细胞壁变形、断裂、有的细胞解体。损害发生最早的是线粒体和质膜。低浓度条件下,抗病品种比感病品种受害轻。

不同生防放线菌组合防治枯、黄萎病研究

【目的】探讨优良放线菌及其组合对西瓜枯萎病和茄子黄萎病的生物防效,筛选出具有良好防效和促生作用的复合菌株。【方法】采用离体抑菌作用测定法和温室人工接菌法,研究不同生防放线菌及其组合对西瓜枯萎病和茄子黄萎病的防效和促生效果。【结果】离体抑菌作用测定结果表明,菌株SC11和SE2的菌体、发酵液和发酵滤液对大丽轮枝菌和西瓜枯萎菌均表现出显著的抑制作用,孢子萌发抑制率高;盆栽试验表明,菌株SC11和SC1复配的C2组合对西瓜枯萎病和茄子黄萎病防效显著,防效分别达到84.93%和71.48%,且高于各菌株单一使用的效果;C3组合的发酵液对西瓜的株高、叶面积和叶绿素含量等生理指标影响突出,经C3处理后的西瓜根系还原强度值最大,对茄子的促生作用仅次于菌株SF6。【结论】生防放线菌组合的防病促生作用优于单个菌株,组合菌株间通过协同作用可达到优势互补,只有全面考虑各菌株的习性并进行合适的组合,才能充分发挥其生防效果。

部分糖类及化感物质对白术白绢病菌与根腐病菌的影响

研究了部分糖类、氨基酸、酚类、有机酸类、白术汁和白术粉对白术白绢病菌及根腐病菌生长与繁殖的影响。结果表明,蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖和甘露糖对白绢病菌和根腐病菌菌丝的生长都具有明显的促进作用,而乳糖、D-果糖、木糖对菌丝的生长有抑制作用。L-组氨酸、L-异亮氨酸、酪氨酸、精氨酸、丝氨酸、脯氨酸和硝酸钾能明显促进白绢病菌和根腐病菌的菌落生长,而天门冬氨酸和半胱氨酸对2种菌均有较强的抑制作用。咖啡酸乙酯和香兰素对白绢病菌和根腐病菌有很强的抑制作用,儿茶素和咖啡酸对白绢病菌却有促进生长的作用,但是多数化感物质对2种菌的生长影响较小。几种浓度的白术汁和白术粉培养基对白绢病菌和根腐病菌的生长有促进作用,其效果与10%和5%的马铃薯培养基相近。不同的碳源、氮源和化感物质对白术白绢病菌和根腐病菌生长的影响是不同的。

4种植物源复配杀菌剂对瓜类枯萎病菌的抑制效果

利用超声波辅助提取法从木香、丁香、肉桂、大黄4种药用植物中提取活性物质,以黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Niveum)为供试真菌,采用生长速率法对4种药用植物提取物及其复配剂进行离体活性测定。结果表明:木香、丁香、肉桂和大黄等4种植物提取物对黄瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌丝生长均具有明显的抑制作用,且随着植物提取物浓度的增加,菌丝生长抑制率明显提高。4种植物提取物按适当比例混合复配可明显降低最低抑菌浓度,增强抑菌效果,抑菌作用较强的为3∶1的木香∶肉桂复配剂、1∶2的肉桂∶丁香复配剂和2∶1的木香∶大黄复配剂。

根腐病对党参细胞结构和生理特性的影响

为明确党参(Codonpsis pliosula)被尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporiums)侵染后其叶片细胞结构和生理特性的变化,本试验以‘渭党1号’为研究材料,通过田间自然发病测定病原菌侵染后党参根部细胞结构以及生理特性的变化特征。叶片显微镜观察结果表明,健康党参叶片呈深绿色,发病叶片呈黄绿或黄白交替症状,透光性增强;根部徒手切片光学显微镜观察结果表明,发病部位细胞受到严重破坏;发病党参叶片叶绿素含量降低,电解质渗漏电导率升高。镰孢菌侵染后,发病党参叶片的净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率降低;发病党参的最大净光合速率、光饱和点和暗呼吸速率均降低,而光补偿点升高;发病党参CO2饱和点降低,而CO2补偿点和光呼吸速率升高。发病党参植株叶片氮、磷、钾和锌、锰、铜、铁、钙、镁等一些微量元素的含量也降低。本研究从宏观和微观角度分析了镰孢菌侵染后党参细胞结构和生理特性的变化,为阐明党参根腐病的发病机制提供了理论依据。

西芹种子浸提液处理后黄瓜叶片内生理指标变化的研究

为探讨西芹种子浸提液灌根处理后黄瓜产生抗枯萎病的生理机制,采用蒸馏水、乙醇、丙酮作为浸提剂,获得西芹种子的浸提液,在黄瓜第一真叶横宽5 cm时进行两次灌根处理,然后于不同时期对其叶片内丙二醛含量、电导率、可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量进行测定.结果表明,在各取样时期丙二醛含量、电导率较对照降低,丙二醛含量降低的范围为蒸馏水处理8.65%～23.89%、乙醇处理0.68%～13.89%、丙酮处理7.50%～21.69%;电导率降低的范围为蒸馏水处理0.62%～9.47%、乙醇处理0.40%～11.35%、丙酮处理1.86%～19.80%.可溶性糖、可溶性蛋白质含量在各取样时期均较对照升高,可溶性糖含量升高的范围为蒸馏水处理12.21%～41.50%、乙醇处理6.28%～62.25%、丙酮处理23.43%～54.38%;可溶性蛋白质含量升高的范围为蒸馏水处理0.08%～25.87%、乙醇处理0.93%～23.08%、丙酮处理2.20%～37.67%.各指标的变化幅度均是丙酮处理大于乙醇处理,乙醇处理大于蒸馏水处理.

黄瓜枯萎病菌AFLP分析体系的建立

对影响黄瓜枯萎病菌AFLP技术体系的多种因素作了探讨,得到了1种适合于黄瓜枯萎病菌AFLP分析的优化体系。结果表明,用于酶切的基因组DNA以100 ng(25μL体系)为宜,预扩增产物的稀释倍数以20倍为宜。采用优化好的体系,以21个不同地区的黄瓜枯萎病菌菌株为试材,引物组合E15/M65在21个菌株中共扩增出稳定清晰的带纹452条,各菌株扩增带分布较均匀,扩增带最少的为13条,最多的32条。

黄瓜枯萎病生防芽孢杆菌的定向筛选及其抑菌活性物质特性分析

研究拟从北京郊区黄瓜根际土壤中定向筛选黄瓜枯萎病菌生防芽孢杆菌,并研究其抑菌活性物质的基本特性。采用热处理和形态观察结合平板对峙法定向筛选黄瓜枯萎病菌拮抗菌。从北京郊区黄瓜根际土壤中定向分离到63株产芽胞的菌株,从中筛选到2株对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumarinum Owen.)具有较好拮抗作用的菌株,命名为j-28和j-50。拮抗菌j-28对黄瓜枯萎病菌的抑菌带达到11.0 mm。此外,拮抗菌j-28有较广的抑菌谱,对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、马铃薯干腐病菌(Fusarium sulphureum)和茄子黄萎病菌(Verticilllium albo-atrum)等具有很强的拮抗作用。经过形态观察、理化分析和分子鉴定,j-28和j-50鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。研究还发现拮抗菌j-28的发酵液经过高温和强酸碱处理后抑菌效果会明显减弱,说明拮抗菌j-28产生的主要抑菌活性物质可能是蛋白类。笔者定向筛选到针对北京郊区多发的黄瓜枯萎病菌拮抗菌枯草芽孢杆菌j-28,具有潜在的应用价值,为今后北京郊区黄瓜枯萎病菌的防治提供新的生物防治资源。

大蒜鳞茎粗提物对西瓜枯萎病菌的抑杀效应

采用菌丝生长速率法及孢子萌发法,研究了大蒜鳞茎粗提物对西瓜枯萎病(Fusarium oxysporiumf.niveum Snyder et Heansen)病菌的抑杀效应。结果表明,随大蒜鳞茎粗提物质量浓度的增加,对西瓜枯萎病菌的抑制作用增强,大蒜鳞茎粗提物的最低抑菌质量浓度(MIC)为0.156 25 mg/mL;当大蒜鳞茎粗提物的质量浓度达到10 mg/mL时,对病菌孢子萌发的抑制率达100%;质量浓度达到20 mg/mL时,抑菌圈直径最大,为5.7 mm,对病菌菌丝生长的抑制率达到100%,与对照差异达极显著水平。说明大蒜鳞茎粗提物可有效抑杀西瓜枯萎病菌。

金龟子绿僵菌对棉花枯萎病菌的拮抗作用研究

在实验室条件下,研究了虫生真菌金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对棉花枯萎病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium f.sp.vasinfectum)的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,金龟子绿僵菌的3个供试菌株对3株枯萎病菌均有抑制作用,其中以Ma55抑制效果最好。在培养基中加入Ma55不同浓度的孢子悬浮液,当浓度为3.25×106 cfu.mL-1时,5 d后,对3株枯萎病菌菌丝生长的抑制率均超过70%。Ma55液体振荡培养20 d获得的无菌发酵液对3个枯萎病菌菌株菌丝生长的抑制率分别达到59.86%、56.99%和57.09%,对它们的分生孢子产生及分生孢子萌发也都具有显著的抑制作用。显微镜观察未发现金龟子绿僵菌与棉花枯萎病菌菌丝间有重寄生现象。上述结果显示,金龟子绿僵菌对供试棉花枯萎病菌的拮抗机制主要是营养竞争、空间竞争及抗生作用。

三种植物提取物对黄瓜枯萎病菌的离体抑菌活性测定

选用甲醇、氯仿、石油醚3种不同溶剂提取了问荆、甘草、藜芦3种不同药用植物的活性成分,同时测定了提取物对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)的离体抑菌活性。结果表明,96 h后,3种植物中以甘草甲醇提取物的抑菌活性最高,达64.20%,而3种溶剂中,甲醇提取物的抑菌活性最高。同时,问荆、甘草、藜芦甲醇提取物的抑制中浓度(M IC)分别为0.913,1.070,1.121 mg/m l。

拮抗链霉菌S-5对棉花病害的防治作用

通过室内和田间试验测定了从小麦根际筛选的一株链霉菌 (Streptomycesspp .)S - 5对棉花苗期病害根腐病、红腐病、炭疽病和棉花枯、黄萎病菌的防病效果。抑菌作用测定结果表明 ,链霉菌S - 5具有广谱抑菌作用 ,对棉花枯黄萎病菌抑菌作用明显。生物测定 ,链霉菌S - 5促进棉花幼苗生长 ,降低枯黄萎病的发病率。在自然发病的棉田 ,链霉菌S - 5拌种 ,对棉花苗期的防治效果为 6 5 5 % ,明显高于多菌灵的防效 4 0 %。不同使用量 ,防病差别明显。使用量 37 5kg/hm2 穴施 ,对棉花枯、黄萎病的防病效果分别为 81 80 %和 10 0 %。

几种杀菌剂对香蕉枯萎病菌的抑制作用

研究了5种杀菌剂对香蕉枯萎病菌生长速率和孢子萌发的抑制作用。结果表明,多菌灵、世浩、安克和翠贝对病原菌孢子萌发的抑制效果明显,分别为83.6%,71.4%,73.1%和56.2%,其中多菌灵1 000倍液的抑制效果最好,为86.1%;多菌灵、世浩、安克和翠贝对病原菌生长的抑制效果亦明显,其菌落生长抑制率分别为82.9%,70.6%,71.1%和55.9%,其中多菌灵1 000倍液的抑制效果最好,为83.8%。