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应用rhBMP-2行脊柱后侧方固定的研究
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作者 李仙锋 唐英翰 林欣 《伤残医学杂志》 2000年第2期1-2,共2页
目的:探讨应用rhBMP-2(重组人骨形态发生蛋白-2)行脊柱后侧方固定的可能性.方法:用rhBMP-2与PVP(聚乙烯吡咯烷酮)制成复合物,注入28只白兔右L4/5水平横突间肌肉中,对侧单独注入PVP作为对照,分别... 目的:探讨应用rhBMP-2(重组人骨形态发生蛋白-2)行脊柱后侧方固定的可能性.方法:用rhBMP-2与PVP(聚乙烯吡咯烷酮)制成复合物,注入28只白兔右L4/5水平横突间肌肉中,对侧单独注入PVP作为对照,分别在2、4、6和8周取材,作X线、组织形态学、碱性磷酸酶(ALP)及电镜检测.结果:rhBMP-2PVP复合物具有良好的骨诱导活性,新生骨在横空间可完全愈合.结论:作者认为应用rhBMP-2能够完成脊柱后侧方固定,复合物可望在临床上应用于脊柱后侧方固定. 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白 脊柱固定 载体
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丙型肝炎病毒Core与NS3基因的不同融合方式及其表达 被引量:1
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作者 李暐东 梁布锋 祁自柏 《中国病毒学》 CSCD 2000年第2期204-207,共4页
The gene encoding the core and NS3 proteins of hepatitis C virus was amplified by PCR, respectirely. Two genes were fused and formed the recombinant plamid pHCV CN (Core+NS3) and pHCV NC (NS3+Core). The fused plasmid ... The gene encoding the core and NS3 proteins of hepatitis C virus was amplified by PCR, respectirely. Two genes were fused and formed the recombinant plamid pHCV CN (Core+NS3) and pHCV NC (NS3+Core). The fused plasmid were expressed in E.coli 06. The pHC CN plasmid expressed fussion protein was shown by a major band with a expected molecular weight about 68 kD on SDS PAGE. However, the pHCV NC plasmid expressed fussion protein was 66 kD in molecular weight. The results indicate that the pHCV NC fussion protein differs from the pHCV CN fussion protein in mulecular weight. It suggests that the fusion way is important for the structure of recombinant proteins. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 Core基因 NS3基因 基因融合 表达
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具有抗血管新生活性的K5突变体GST-K5M5基因的构建、表达及纯化 被引量:1
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作者 黄莉钧 石丁波 +5 位作者 姚亚超 李磊 戴智育 张婷 高国全 杨霞 《热带医学杂志》 CAS 2013年第2期133-139,161,共8页
目的构建可溶性的人纤溶酶原Kringle 5(K5)突变体GST-K5M5基因,并在单位体积的原核系统中获得高表达、高纯度、可水溶的融合GST-K5M5蛋白粉针剂。方法 K5M5突变体基因(模板已经对K5N端5个带负电的酸性氨基酸进行中性氨基酸丝氨酸的中性... 目的构建可溶性的人纤溶酶原Kringle 5(K5)突变体GST-K5M5基因,并在单位体积的原核系统中获得高表达、高纯度、可水溶的融合GST-K5M5蛋白粉针剂。方法 K5M5突变体基因(模板已经对K5N端5个带负电的酸性氨基酸进行中性氨基酸丝氨酸的中性突变),通过PCR从本实验室保存的pET22b(+)/K5mut5 cDNA模板中扩增得到,再克隆到pGEX-4T-1/BL21(DE3)原核表达系统中。用自动诱导培养系统诱导其表达,提高产量。通过GST树脂亲和层析柱分离,双蒸水透析纯化,再制成冻干粉剂保存。结果该重组GST-K5M5蛋白的分子量为37000Mr,通过SDS-PAGE和Western-blot可以检测到其存在。冻干粉复溶的GST-K5M5呈剂量依赖抑制内皮细胞的增殖。结论在以前的研究基础上设计并用自动诱导培养的方法在大肠杆菌中表达纯化出了GST-K5M5融合蛋白,得到的GST-K5M5蛋白产量高、纯度高、可溶性好、生物学效应强,且方法简便、经济,为工业大规模发酵提供了基本参数。 展开更多
关键词 K5突变体 融合蛋白GST—K5M5 自动诱导培养 水溶性 冻干粉
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