鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白IgG/IgM变异性研究

为探究IgG／IgM蛋白的分子特征、理化特性及病理学相关致病机理，对鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白Ig进行了分级分离、纯化及 IgG／IgM 蛋白质结构和功能等生化-分子生物学分析。以 GPVYZ 感染雏鹅，采用（ NH4）2 SO4分级分离鹅血清Ig，将Sephadex G-100凝胶柱在Utro-gel ACA22凝胶柱色谱工作站上串联，分步聚集纯化出鹅血清IgM／G进行SDS-PAGE和生化分析。结果显示，初级沉淀鹅血清Ig，在非还原条件下，感染组（ RD）缺失6个蛋白主带（128，114，69，59，55，48 kDa）；而在还原条件下，RD组缺失7个蛋白主带（139，128，119，113，97，94，61 kDa），新增加3个蛋白主带（64，65，36 kDa），RD组和对照组（CK）的IgM和IgG带分别增加10，7倍和1．5，2倍。表明鹅血清IgM、IgG单体的高度可变性造成了在形状构型上的多态性，其亚基条带的变化是机体抗病潜能的重要标志；纯化鹅血清IgM／G，在非还原条件下，RD组的IgG缺失150 kDa分子和重链（64 kDa），而在还原条件下，鹅血清IgG显示重链（60～70 kDa）特征蛋白带，重链62 kDa特异蛋白带仅出现在CK组的IgM／G中，同时RD的IgG还缺失91 kDa分子、IgG（ΔFc）（43 kDa）、轻链（25 kDa）蛋白带。提示GPV感染与鹅血清Ig发生相互作用，IgG与GPV感染密切相关，62 kDa重链基因可能是GPV的易感基因。试验还表明，RD组的鹅血清Ig含量仅为CK组的37％，IgG含量较IgM高2．56倍，RD组IgM、IgG比活力显著高于CK组，提示GPV拟制鹅血清IgM、IgG基因的表达，促使病毒感染雏鹅。稳定性试验显示，酸碱稳定性：鹅血清IgG＞IgM；热稳定性IgM＞IgG，RD组的IgM、IgG对碱和温度较为敏感。提示随pH值、温度的不同，Ig同时发生许多反应，GPV感染增加了鹅血清Ig的碱和温度敏感性。

灰鹤(Grus grus)消化系统各器官蛋白水解酶的种类和活性研究

目的研究灰鹤(Grus grus)消化系统各器官蛋白水解酶的种类和性质,为探讨野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料。方法采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术。结果1.灰鹤消化系统蛋白水解酶种类多,在各种pH条件下,共计有26种;2.灰鹤消化系统蛋白水解酶的活性受pH值的影响和制约,在中性条件下酶活性最强,酸性条件下最弱,总的酶活性表现为中性>碱性>酸性;3.同一器官在不同的pH条件下,蛋白水解酶的种类和活性有较大的变化,不同器官蛋白水解酶的最适pH条件各不相同;4.在各种pH条件下,19kD酶带普遍存在于除腺胃以外的各器官中,在中性条件下,各消化器官都分布有66和22kD两条酶带。结论灰鹤消化系统蛋白水解酶的最适pH为7.0;66、22、19kD酶带的分布、活性及pH依赖性特点是灰鹤消化系统蛋白水解酶的主要特征。

蒽醌衍生物与G-四联体相互作用方式的研究

应用紫外-可见分光光度法(Ultraviolet and visible spectrophotometry,UV-Vis),圆二色谱法(Circular di-chroism,CD)和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)研究了在不同阳离子溶液中形成G-四联体的构型及其与蒽醌衍生物的相互作用方式。研究发现,不同取代基的蒽醌衍生物在溶液中与G-四联体有不同的相互作用方式及可能的光敏损伤机制,其中AQS2以嵌入的方式与G-四联体相结合而2,7-AQS2则是沟渠结合。

小麦幼叶中小G蛋白的粗分离

对小麦幼苗叶片中的蛋白进行了粗提,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测在20.1 KDa～31 KDa间呈现一条蛋白条带,经分析其分子量约为23.1 KDa,占所提取总蛋白的2.93%,推测其为小G蛋白家族中的成员.采用传统的硫酸铵盐析法对此目的蛋白进行粗分离.结果显示,30%的硫酸铵饱和度可将该蛋白分离,且所含杂蛋白量最少,其纯度和得率分别是22.96%和47.3%,是进一步细分离纯化的较好选择.

低能离子束介导外源DNA转入小麦种胚中对小麦幼苗叶片蛋白水解酶酶谱的影响

利用低能离子束介导法将大豆 DNA导入小麦种子胚中 ,通过复性电泳技术分析了受体小麦幼苗叶片中蛋白水解酶的变化 ,结果表明 :(1)离子束介导大豆 DNA片段的小麦幼苗叶片中的蛋白水解酶酶谱有明显变化 ,出现 45和 2 80 k D两条新的酶带 ;(2 )小麦幼苗叶片中 45和 2 0 5 k D蛋白水解酶的活性受环境影响较大 ;(3) 68和 72k D两条酶带在各处理的不同 p H条件下均具较强活性 ;(4 )不同 p

中国大鲵消化系统13种器官的蛋白水解酶种类和活性分析

Protease activity in 13 doll fish, Andrias davidianus, digestive organs: tongue, esophagus, cardia, stomach, pylorus, duodenum, jejunum, ileum, rectum, cloacal chamber, liver, pancreas, gall bladder were analysed with gelatine polyacrylamide gel-electrophoresis (G-PAGE). Compared to rats and rhesus monkeys (Macaca mullatta tcheliensis), protease activity in the Andrias davidianus digestive system was more varied and stronger. The activity of acid proteases>that of the neutral proteases>that of the alkaline proteases. The kinds and activities of neutral and alkaline proteases in the Andrias davidianus digestive system wereare very different, while the kinds of acid proteases in them were very similar, but their activities are different. Analysing the activities of proteases in these organs shows that protease activity in the duodenum>that in rectum>that in stomach>that in pancreas>that in liver. Experimental results suggest that the function of the rectum and liver in Andrias davidianus may be as important as that of the duodenum and pancreas in food degradation .

金鱼不同组织器官及胚胎发育不同时期蛋白水解酶的种类和活性变化

采用复性电泳方法研究了金鱼组织器官蛋白水解酶及个体发生过程中蛋白水解酶的种类和活性变化，主要结果表明：（1）金鱼各组织器官蛋白水解酶种类差异不大，大多数组织器官都具有113、69、20、16kD四条带，但不同组织器官常具有其特异性蛋白水解酶；肠道蛋白水解酶种类最多、活性最强。（2）蛋白水解酶的活性受pH值影响和制约，大多数组织器官蛋白水解酶活性最适pH值为8．5。（3）在金鱼胚胎发有早期（从卵裂到心跳期）多数种类蛋白水解酶不表达，从孵化期开始表达；幼鱼蛋白水解酶种类相似于成鱼组织器官蛋白水解酶。（4）金鱼组织器官蛋白水解酶发生于胚胎发育后期（孵化期），多数蛋白水解酶在胚后发育阶段（仔鱼、幼鱼）逐渐出现。

大鵟消化系统蛋白水解酶种类和活性分析

采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术对大(Buteo hemilasius)消化系统5种器官腺胃、胰脏、十二指肠、空肠、大肠蛋白水解酶的种类和性质进行了研究,以期为研究野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料,结果表明,①受pH值的影响和制约,大消化系统蛋白水解酶的活性在碱性、中性与酸性条件下递减;②在酸性条件下,45 ku蛋白水解酶存在于除腺胃外的各受检器官;③pH 7.0时,腺胃、胰脏酶谱相似,均含有683、5、342、0 ku的蛋白水解酶;④pH 8.0时,空肠和十二指肠的蛋白水解酶种类最多、活性最强,分别检出8种和7种蛋白水解酶。总之,pH值对蛋白水解酶的活性有明显的制约作用,46、41ku蛋白水解酶随着pH值的增高而失去活性,为酸性蛋白水解酶,250、2064、5 ku蛋白水解酶随着pH值的增高活性逐渐增强,为碱性蛋白水解酶。十二指肠和空肠的蛋白水解酶种类多、活性强,可能为蛋白质消化的主要场所。

猕猴消化系统各器官蛋白水解酶种类和性质研究

目的研究太行山猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔａｔｃｈｅｌｉｅｎｓｉｓ）消化系统各器官蛋白水解酶种类和性质。方法采用单向活性电泳（１Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）和双向活性电泳（２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）技术。结果（１）消化系统各器官的蛋白水解酶在近中性条件下活性最强，其中９４、８６、６４、５９和２５ｋＤ蛋白水解酶在消化系统各器官中普遍存在；（２）消化系统各器官均具有３１、３０、和２９ｋＤ３种酸性蛋白水解酶；（３）ｐＨ７．０时，胃、胰、十二指肠中分别含有１２、３４和１８种不同分子量或等电点的蛋白水解酶；（４）ｐＨ１０．５时，胰、十二指肠中分别检出２１和１２种不同分子量或等电点的蛋白水解酶。结论消化系统中蛋白水解酶的种类和数量比较多，且结构相似、功能相近的器官之间，蛋白水解酶的种类和性质相似。

小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性的变化

采用活性电泳方法对小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性进行了研究。结果发现：（1）出生前，胃和大肠蛋白酶种类少，活性弱；出生后，胃和大肠蛋白酶的种类多，活性增加；（2）胃肠蛋白酶可能与其结构的构建和功能建立有密切关系；（3）食物的刺激可能对胃肠蛋白酶有显著影响。

海带、裙带菜和紫菜蛋白酶谱的研究

采用复性电泳方法对海带（ＬａｍｉｎａｒｉａＬａｍｘ．）、裙带菜（ＵｎｄａｒｉａＳｕｒｉｎｇａｒ）和紫菜（ＰｏｒｐｈｙｒａＣ．Ａｇ．）３个属１１种海藻的蛋白酶进行了研究，分析了海带、裙带菜和紫菜在不同ｐＨ条件下，蛋白酶种类的分布情况和活性差异。结果表明：（１）蛋白酶种类和活性受ｐＨ的影响和制约，其最适ｐＨ为８．０，此条件下蛋白酶的种类最多，活性最强；（２）亲缘关系越近，蛋白酶种类和活性越相似，海带同属不同种之间存在相同的蛋白酶，而不同属的海藻中很难找到相同的蛋白酶带；（３）海带属不同种所共有的两种蛋白酶（分子量１９ｋＤ和１８ｋＤ）是其特征性酶带；（４）蛋白酶谱可作为海藻分类依据之一。

五种黄精属植物的蛋白水解酶谱研究

用蛋白水解酶复性电泳方法 (G- PAGE)分析了 5种黄精属植物根状茎和叶的蛋白水解酶的种类和活性。结果表明 :(1)它们的根状茎均含有 85k D和 55k D的蛋白水解酶 ;叶均含有 82 k D的蛋白水解酶 ;(2 )根状茎和叶的蛋白水解酶种类和活性有很大差异 ,叶的蛋白水解酶活性为根状茎的 10倍 ,它们的活性均受 p H影响 ,其最适 p H为 7;(3)每种植物都含有自己特有蛋白水解酶 ;(4 )

运动训练对小鼠心肌蛋白酶活性的影响

采用活性电泳方法 ,研究了运动训练对小鼠心肌蛋白酶活性的影响。结果表明 :(1 )随着运动强度的增加 ,不同运动训练组小鼠心肌的中性和碱性蛋白酶活性有不同程度的升高。酸性条件下 ,未检测到蛋白酶活性 ;(2 )

东北虎幼体消化系统蛋白水解酶的初步研究

The kinds and activities of proteolytic enzymes in the digestive systems (tongue, esophagus, stomach, duodenum, liver, pancreas and large intestine) of two Amur tiger cubs (Panthera tigris altaica) were investigated using protein detection and SDS-G-PAGE. The results showed:1) the digestive system of Amur tiger cubs had 30 different kinds of proteolytic enzymes ; 2) the mostly optimal pH for these enzymes was a neutral environment, and an acid condition highly restrained their activity; 3) the proteolytic enzymes in the tongue and esophagus were fewer than in other digestive organs and their activities were weak as well; 4) the duodenum had the most kinds of proteolytic enzymes with the strongest activities under various pH conditions; 5) the 16 kD enzyme bands always existed under neutral and alkalescence pH conditions in all digestive organs except the tongue.

猕猴生殖、泌尿、免疫系统各器官蛋白水解酶种类和性质

为了系统研究太行山猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔａｔｃｈｅｌｉｅｎｓｉｓ）生殖、泌尿、免疫系统各器官蛋白水解酶的种类和性质，用活性单向电泳（１Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）和活性双向电泳（２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）方法研究了太行山猕猴生殖系统、泌尿系统和免疫系统中蛋白水解酶种类和酶活性的ｐＨ依赖性。结果表明：（１）同一系统功能相近的器官之间蛋白水解酶非常相似，不同系统的器官之间，中性和碱性蛋白水解酶种类有很大差异；（２）同一器官的酸性蛋白水解酶种类与它的中性和碱性蛋白水解酶种类迥异，而且３个系统中各器官均具有３１、３０和２９ｋＤ３种酸性蛋白水解酶，但它们在不同器官中的活性有较大差异；（３）用２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得在ｐＨ７．０条件下。

小麦苗期叶片中性蛋白水解酶酶谱的动态变化

本试验采用复性电泳技术对小麦苗期蛋白水解酶种类及活性进行了动态研究。结果表明 ,(1)小麦从出苗第 3 d生长到第 87d,15 3、72和 6 8k D三条蛋白水解酶带均存在 ;(2 ) 72和 6 8k D两条蛋白水解酶带在各个时期均表现出很强的活性 ;(3)小麦的生理代谢影响着蛋白水解酶酶谱变化 ;(4)所检到的蛋白水解酶分子量均大于 6 8k D (含 6 8k D)

普通鵟(Buteo buteo)消化系统各器官蛋白水解酶种类和活性分析

目的研究普通(Buteo buteo)消化系统各器官蛋白水解酶的种类和性质,为探讨野生鸟类的分类地位、系统演化提供资料。方法采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术。结果1.普通消化系统蛋白水解酶种类多,达26种;2.普通消化系统蛋白水解酶的活性受pH值的影响和制约,在碱性条件下酶活性最强,酸性条件下最弱,酶活性表现为碱性>中性>酸性;3.不同pH条件下,十二指肠和胰蛋白水解酶种类多且活性强,舌、食道和嗉囊蛋白水解酶种类少且活性弱;4.不同pH条件下,75、70 kD酶带普遍存在于肝脏和胰脏以外的各消化器官中。结论消化系统中结构相似、功能相近的各器官之间,蛋白水解酶的种类和性质相似。75、70 kD蛋白水解酶的pH依赖性不强且分布广。198 kD蛋白水解酶在pH8.5时广泛存在于消化系统各器官。

从全沟硬蜱分离的伯氏疏螺旋体的实验研究

本文报道了从全沟硬蜱分离的一株伯氏疏螺旋体(VL株)实验研究的结果。该株螺旋体同莱姆病螺旋体标准株在超微结构上相近,可以和高稀释度的抗伯氏疏螺旋体抗体发生间接免疫荧光反应。SDS-PAGE电泳结果显示其蛋白组成和标准株的蛋白图谱相同。热变性温度法测定其DNA的G+Cmol％含量为28.1％,和标准株的含量无明显区别,试验结果证实此株螺旋体属伯氏疏螺旋体。

影响SPH大鼠肝蛋白水解酶活性因素分析

用蛋白水解酶复性电泳技术分析了 4 3 6 3 6连续部分肝切除 ( 4 3 6 3 6successivepartialhepatectomy ,4 3 6 3 6SPH)中影响大鼠肝中性蛋白水解酶活性的因素。发现连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH)的时间、SPH中营养条件、取材时间、制样条件和样品的后处理均可对大鼠中性蛋白水解酶活性产生不同程度的影响。

大连湾牡蛎蛋白的分离提取及分子量测定

以大连湾牡蛎为实验材料.首先采用冰醋酸粗提法提取牡蛎蛋白,然后用葡聚糖凝胶(Sephadex-G100)进行柱层析分离,SDS—聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白,Kodak凝胶成像分析仪分析及测定分子量.结果显示大连湾牡蛎中含有分子量为55kd的牡蛎特征蛋白,同时分离出其它4种蛋白质,分子量介于33.0~63.4kd之间.