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Chk1与Chk2高表达对DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期的影响 被引量:3
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作者 王莉 曾颖 +5 位作者 夏红 刘芳 苏波 曾希 凌晖 苏琦 《中国医药导刊》 2019年第2期99-103,共5页
目的:在建立Chk1/2基因高表达人胃癌BGC823细胞的基础上,探讨Chk1/2基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用流式细胞术检测DADS作用于Chk1/2高表达BGC823细胞周期分布情况。Western blot检测Chk1、... 目的:在建立Chk1/2基因高表达人胃癌BGC823细胞的基础上,探讨Chk1/2基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用流式细胞术检测DADS作用于Chk1/2高表达BGC823细胞周期分布情况。Western blot检测Chk1、p-Chk1、Chk2、p-Chk2、Cdc25C与Cyclin B1表达变化。结果:流式细胞术显示,Chk1高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组增加(P<0.05)。而15 mg·L^(-1) DADS处理后,各组G2/M期细胞较处理前增加,Chk1高表达组较空载体组差异有统计学意义(P<0.05)。Chk2高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组差异无统计学意义(P>0.05)。而DADS处理Chk2高表达组后,G2/M期细胞较对照组与空载体组差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot显示,Chk1/2蛋白及p-Chk2表达水平不受DADS的影响,但p-Chk1呈时间依赖性上调(P<0.05)。DADS处理Chk1高表达BGC823细胞12、24、36、48 h后,Cdc25C磷酸酶与Cyclin B1表达较对照组呈时间依赖性下降(P<0.05)。结论:DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期与激活Chk1/Cdc25C/Cyclin B1通路有关。Chk1高表达可增强DADS阻滞G2/M期细胞的作用,而Chk2高表达对DADS无影响。 展开更多
关键词 人胃癌BGC823细胞 二烯丙基二硫 Chk1/Chk2高表达 g2/M期
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Studies on RNA Transcription Activity in Interphase Nuclei in Physarum polycephalum 被引量:1
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作者 焦明大 毕晓辉 +1 位作者 曾庆华 王玉红 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第3期227-231,共5页
Using BrUTP incorporation and statistical analysis, the authors investigated RNA transcription in the interphase nuclei in Physarum polycephalum Schw. The rRNA synthesis in the nucleolus continued actively throughout ... Using BrUTP incorporation and statistical analysis, the authors investigated RNA transcription in the interphase nuclei in Physarum polycephalum Schw. The rRNA synthesis in the nucleolus continued actively throughout the interphase, while in nucleoplasm hnRNA was transcribed at law levels in S phase and actively in G(2) phase. The rate of nucleoplasm RNA transcription was doubled between early S phase and late S phase, and a 5-6 folds increase was detected between the early S phase and G(2) phase. 展开更多
关键词 RRNA hnRNA TRANSCRIPTION BrUTP S phase G(2) phase Physarum polycephalum
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PM2.5降尘诱导A549细胞G2/M期阻滞的机制研究 被引量:3
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作者 杨洁 霍婷婷 +3 位作者 王玉琳 董发勤 曾娅莉 邓建军 《岩石矿物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期894-902,共9页
PM_(2.5)降尘作用于A549细胞后,MTT法检测细胞存活率,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期改变,RT-PCR检测周期阻滞相关基因p53、p21、CDK1、c-myc和lncRNA H19的表达水平,Western-blot检测周期蛋白cyclin B1表达。通过转染H19... PM_(2.5)降尘作用于A549细胞后,MTT法检测细胞存活率,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期改变,RT-PCR检测周期阻滞相关基因p53、p21、CDK1、c-myc和lncRNA H19的表达水平,Western-blot检测周期蛋白cyclin B1表达。通过转染H19 siRNA干扰H19的表达,RT-PCR检测其对p53、c-myc及CDK1表达的影响,以探讨PM2.5降尘诱导A549细胞周期阻滞的作用机制。结果显示,PM2.5降尘暴露可降低A549细胞存活率,随作用浓度及时间增加呈递减趋势,并可观察到细胞形态破坏,细胞膜表面吸附聚集大量粉尘颗粒。PM2.5作用于细胞24 h后,A549细胞增殖阻滞在G2/M期,周期阻滞相关基因p53、p21及H19表达增加,CDK1及cyclin B1表达降低。此外,转染H19 siRNA后成功干扰H19的表达,并调控CDK1表达进一步降低。综合以上结果,PM2.5降尘处理A549细胞后可通过激活p53及p21活性,抑制CDK1和cyclin B1表达水平,诱导G2/M期阻滞从而抑制细胞增殖。短期暴露于PM2.5后,lncRNA H19在染毒细胞中可能发挥特异性癌基因的作用,通过与p53及c-myc结合参与调控细胞周期,干扰H19低表达使细胞G2/M期阻滞更加明显。 展开更多
关键词 PM2 5降尘 A549细胞 g2/M期阻滞 毒性机制
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AtCDC5 regulates the G2 to M transition of the cell cycle and is critical for the function of Arabidopsis shoot apical meristem 被引量:13
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作者 Zhiqiang Lin Kangquan Yin +3 位作者 Danling Zhu Zhangliang Chen Hongya Gu Li-Jia Qu 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2007年第9期815-828,共14页
As a cell cycle regulator, the Myb-related CDC5 protein was reported to be essential for the G2 phase of the cell cycle in yeast and animals, but little is known about its function in plants. Here we report the functi... As a cell cycle regulator, the Myb-related CDC5 protein was reported to be essential for the G2 phase of the cell cycle in yeast and animals, but little is known about its function in plants. Here we report the functional characterization of the CDC5 gene in Arabidopsis thaliana. Arabidopsis CDC5 (AtCDC5) is mainly expressed in tissues with high cell division activity, and is expressed throughout the entire process of embryo formation. The AtCDC5 loss-of-function mutant is embryonic lethal. In order to investigate the function of AtCDC5 in vivo, we generated AtCDC5-RNAi plants in which the expression of AtCDC5 was reduced by RNA interference. We found that the G2 to M (G2/M) phase transition was affected in the AtCDC5-RNAi plants, and that endoreduplication was increased. Additionally, the maintenance of shoot apical meristem (SAM) function was disturbed in the AtCDC5-RNAi plants, in which both the WUSCHEL (WUS)- CLAVATA (CLV) and the SHOOT MERISTEMLESS (STM) pathways were impaired. In situ hybridization analysis showed that the expression of STMwas greatly reduced in the shoot apical cells of the AtCDC5-RNAi plants. Moreover, cyclinB1 or Histone4 was found to be expressed in some of these cells when the transcript of STM was undetectable. These results suggest that AtCDC5 is essential for the G2/M phase transition and may regulate the function of SAM by controlling the expression ofSTMand WUS. 展开更多
关键词 AtCDC5 g2/M phase transition shoot apical meristems WUS STM
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芒果苷对白血病HL-60细胞周期及CDC2/CyclinB1表达的影响 被引量:19
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作者 姚奕斌 彭志刚 +2 位作者 刘振芳 杨杰 罗军 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期81-85,共5页
目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(F... 目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测芒果苷对细胞周期的影响;用RT-PCR技术检测CyclinB1及CDC2 mRNA表达水平。结果:芒果苷呈剂量及时间依赖性抑制HL-60细胞的生长,作用24 h后,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞;CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达随药物质量浓度的增加而逐渐增强,在芒果苷质量浓度80μmol/L时表达达到峰值。结论:芒果苷可抑制HL-60细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,显著上调HL-60细胞CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达水平。芒果苷诱导HL-60细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。 展开更多
关键词 芒果苷 HL-60细胞 g2/M期阻滞 CDC2 CYCLINB1
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氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究 被引量:11
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作者 李丹妮 刘华钢 +2 位作者 刘丽敏 刘林 梁霜 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期40-43,共4页
目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,... 目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的生长,作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(19.5±1.8)、(3.8±0.2)、(2.8±0.1)mg/L;Hoechst33258染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,氯化两面针碱处理后凋亡细胞比例增加;流式细胞仪检测到G2/M细胞比例增加,G0/G1、S期细胞比例下降。药物作用于SMMC-7721细胞后,随浓度增加细胞凋亡率增加。结论氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用,可能与改变细胞周期并诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 SMMC-7721细胞 g2/M期阻滞 细胞凋亡 肝癌
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不同浓度Nocodazole对Hela细胞G_2/M期同步化的调节作用 被引量:5
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作者 徐秋芳 余克花 +6 位作者 易婷 黎帆 刘发娣 应颖 邹伟文 何平 黄孝天 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期284-287,共4页
目的观察不同浓度有丝分裂阻滞剂Nocodazole对Hela细胞株G_2/M期同步化的调节作用及其对纺锤体结构的影响。方法分别以3.0、1.0、0.3μmol/L Nocodazole处理Hela细胞(Nocodazole 3.0、1.0、0.3μmol/L处理组)18 h。于Nocodazole撤除后0... 目的观察不同浓度有丝分裂阻滞剂Nocodazole对Hela细胞株G_2/M期同步化的调节作用及其对纺锤体结构的影响。方法分别以3.0、1.0、0.3μmol/L Nocodazole处理Hela细胞(Nocodazole 3.0、1.0、0.3μmol/L处理组)18 h。于Nocodazole撤除后0(处理18 h)、3、6、9 h时间点收集细胞,流式细胞仪检测G_2/M期细胞百分比;间接免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察细胞有丝分裂器纺锤体α-微管蛋白(α-tubulin)排列。以不添加Nocodazole处理的Hela细胞作为对照组。结果Nocodazole处理18 h,Nocodazole 3.0、1.0、0.3μmol/L处理组Hela细胞G_2/M期细胞百分比分别为55.95%、51.09%和47.81%,均显著高于对照组的9.54%(P<0.05)。在Nocodazole撤除后3、6、9 h时间点,Nocodazole 3.0μmol/L和1.0μmol/L处理组G_2/M期细胞百分比无明显变化;而Nocodazole 0.3μmol/L处理组G_2/M期细胞百分比下降明显(30.43%、12.91%、10.23%),撤除后6 h时间点的G_2/M期细胞百分比与对照组比较差异已无统计学意义(P>0.05)。α-tubulin荧光染色激光共聚焦显微镜观察显示,Nocodazole撤除后Nocodazole 0.3μmol/L处理组G_2/M期细胞微管迅速再聚合形成两极纺锤体且纺锤丝结构清晰。结论Nocodazole对Hela细胞G_2/M期同步化具有调节作用;药物撤离后,0.3μmol/L Nocodazole处理组细胞周期恢复迅速且对纺锤体结构影响最小。 展开更多
关键词 NOCODAZOLE HELA细胞 细胞周期 纺锤体 g2/M期
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大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G_2/M期的阻滞调节机制 被引量:9
8
作者 柳星 马锐 +2 位作者 陈威 白雪蕾 袁媛 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第20期2409-2412,共4页
目的:研究大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G2/M期阻滞作用及其调节机制.方法:应用MTT法测定大蒜素对人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823细胞增殖抑制率及72h的IC50.通过流式细胞仪检测IC50浓度的大蒜素对SGC-7901和BGC-823细胞周期的影... 目的:研究大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G2/M期阻滞作用及其调节机制.方法:应用MTT法测定大蒜素对人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823细胞增殖抑制率及72h的IC50.通过流式细胞仪检测IC50浓度的大蒜素对SGC-7901和BGC-823细胞周期的影响.应用免疫组化染色检测大蒜素作用前后SGC-7901和BGC-823细胞CDC2和CyclinB蛋白表达.结果:不同浓度的大蒜素可以抑制人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823的增殖,且随着大蒜素浓度的增大,抑制率逐渐增高.大蒜素抑制SGC-7901细胞增殖50%的药物浓度(IC50):72h为23mg/L;大蒜素抑制BGC-823细胞增殖50%的药物浓度(IC50):72h为35mg/L.大蒜素作用于两种细胞,其细胞周期均发生了明显的变化,主要表现为G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增多(SGC-7901细胞24,48hvs对照:26.47±2.54%,28.88±2.75%vs24.30±2.74%,P<0.01;BGC-823细胞24,48hvs对照:22.78±1.45%,24.87±1.61%vs20.32±1.34%,P<0.01),S期细胞无明显变化.未经大蒜素处理的两种细胞,CDC2和CyclinB蛋白表达均为阳性,大蒜素处理后,CDC2和CyclinB蛋白表达下降.SGC-7901细胞经23mg/L大蒜素处理后,CDC2蛋白相对阳性表达率为87.2%;CyclinB蛋白相对阳性表达率为59.3%.BGC-823细胞CDC2蛋白在35mg/L大蒜素作用后,相对阳性表达率为84.4%;CyclinB蛋白相对阳性表达率为62.8%,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).结论:大蒜素使人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823停滞于G2/M期,其机制是通过CDC2和CyclinB蛋白表达下降实现的. 展开更多
关键词 大蒜素 SGC-7901 BGC-823 g2/M期阻滞 CDC2 CyclinB 人胃癌细胞SGC-7901 BGC-823细胞 阻滞作用 M期
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人参皂苷Rb1、Rg1、Re对白血病细胞株KG1α增殖的影响 被引量:11
9
作者 王红宁 左国伟 +7 位作者 陈地龙 官涛 李春莉 姜蓉 李静 雷翠蓉 顾恒伟 王建伟 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期56-58,共3页
目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响。方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KGIα细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC50值,以此... 目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响。方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KGIα细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC50值,以此浓度为工作浓度,设常规培养组和处理组,台盼蓝计数法观察对KG1α细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果:MTT、台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1、Rg1可抑制KG1α细胞增殖,呈浓度依赖性,以Rb1抑制效应最佳,于作用48h抑制率最高。台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1-120μmol/L作用48h时抑制率达50.22%;流式细胞术结果提示,与对照组比较,Rbl-120μmol/L组G2/M期KG1α细胞比例增加(P<0.05)。结论:Rb1可抑制KG1α细胞体外增殖,其增殖抑制作用与将KG1α细胞阻滞于G2/M期有关。 展开更多
关键词 人参皂苷单体Rb1、Rg1、Re KG1α细胞 g2/M期阻滞 增殖抑制
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钙调素对细胞周期的调节 被引量:8
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作者 金珊 尹力 +1 位作者 王端顺 柳惠图 《实验生物学报》 CSCD 1995年第2期121-129,共9页
RC3细胞是一种用真核表达载体1^(CaM)转染NIH 3T3细胞建成的可调钙凋素(Calmodulin,CaM)高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松(Dexamethasome,DXM)作用下,RC3细胞可高表达CaM。CaM的过表达使G_1期细胞减少,S... RC3细胞是一种用真核表达载体1^(CaM)转染NIH 3T3细胞建成的可调钙凋素(Calmodulin,CaM)高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松(Dexamethasome,DXM)作用下,RC3细胞可高表达CaM。CaM的过表达使G_1期细胞减少,S期细胞增加;CaM拮抗剂三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP)则使G_1期细胞增加,S期细胞减少。高表达CaM使细胞分裂指数提高,G_2期细胞减少,有丝分裂前期细胞增加,M中期细胞比例下降。而TFP处理则使分裂指数下降,G_2期细胞增加,M前期细胞减少,M中期细胞增加。实验结果表明CaM在G_1/S、G_2/M和M中期/M后期3个位点上对细胞周期进行调控;通过加速G_1至S期,G_2至M期和M中期至M后期的进程,使细胞倍增时间缩短,促进细胞增殖。本工作表明,RC3细胞作为CaM表达可调细胞模型,是研究细胞周期调控的有力工具。 展开更多
关键词 有丝分裂周期 调节 调钙蛋白
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紫杉醇对小鼠T细胞的影响 被引量:3
11
作者 彭桉平 曾耀英 +3 位作者 王青 肇静娴 俞瑜 狄静芳 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期113-116,130,共5页
为研究抗癌药紫杉醇(PTX)对T细胞行为的影响及其分子机制,利用流式细胞术分析多克隆刺激剂ConA刺激下T细胞行为:羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记技术分析T细胞增殖相关指数;碘化丙锭染色分析细胞周期分布;AnnexinV-PI染色检测... 为研究抗癌药紫杉醇(PTX)对T细胞行为的影响及其分子机制,利用流式细胞术分析多克隆刺激剂ConA刺激下T细胞行为:羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记技术分析T细胞增殖相关指数;碘化丙锭染色分析细胞周期分布;AnnexinV-PI染色检测T细胞凋亡;荧光标记的单克隆抗体染色检测T细胞活化表达CD25的百分率。结果显示.PTX对ConA刺激下小鼠T细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。该浓度范围PTX阻滞T细胞于G2/M期,诱导凋亡及抑制CD25表达。25nmol/L的PTX与10nmol/L的环孢素A(CsA)具有明显的协同抑制效应。以上结果表明PTX可明显抑制多克隆刺激剂ConA诱导的T细胞体外增殖,是G2/M期阻滞、凋亡诱导和CD25表达抑制等多种机制共同作用的结果。 展开更多
关键词 紫杉醇 T淋巴细胞 增殖 g2/M期 凋亡 CD25
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三氧化二砷联合化疗药物对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系杀伤作用的研究 被引量:5
12
作者 亓凯 黎阳 +5 位作者 熊稀霖 张驰 黄科 方建培 郭海霞 翁文骏 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2016年第5期252-256,共5页
目的观察三氧化二砷(As_2O_3)联合化疗药物对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系的毒性作用和细胞周期的影响,为临床寻找新的治疗手段和合理用药提供依据。方法采用流式细胞术检测单药,即As_2O_3、长春瑞滨、多西他赛、依托泊苷(VP16)或顺铂(DD... 目的观察三氧化二砷(As_2O_3)联合化疗药物对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系的毒性作用和细胞周期的影响,为临床寻找新的治疗手段和合理用药提供依据。方法采用流式细胞术检测单药,即As_2O_3、长春瑞滨、多西他赛、依托泊苷(VP16)或顺铂(DDP),或As_2O_3分别与另一种药物双药联合(同步给予As_2O_3和另一种药物;先予As_2O_3使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期后再予另一种药物)作用于SK-N-SH细胞24 h、48 h后不同处理组的凋亡率和细胞周期分布的差异。结果同步给药双药组的凋亡率均高于相应的单药组的凋亡率;As_2O_3与M期特异性化疗药物(长春瑞滨或多西他赛)联合用药时,非同步给药组即先予As_2O_3使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期后再加用长春瑞滨或多西他赛组的凋亡率高于相应单药组的凋亡率,As_2O_3与非M期特异性化疗药物(VP16或DDP)联合用药时,同步给药组即As_2O_3与VP16或DDP同步给药组的凋亡率高于相应单药组的凋亡率。联合用药组随着细胞凋亡率的变化,细胞周期的分布也发生了显著的变化,表现为随着SK-N-SH细胞凋亡率的增高,处于G2/M期的细胞比例减少。结论 As_2O_3与化疗药物联合用药或许能提高它们对SK-N-SH细胞的杀伤效果;当As_2O_3与M期特异性化疗药物(长春瑞滨或多西他赛)联合用药时,宜先采用As_2O_3的周期阻滞作用将NB细胞周期阻滞在G2/M期后再加M期特异性化疗药物的非同步给药方式;而当As_2O_3与非M期特异性化疗药物(VP16或DDP)联合用药时,宜采用同步给药的方式以提高杀伤效果。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 三氧化二砷 细胞毒 g2/M期
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天佛参口服液对体外人癌细胞抑制效应及其对细胞动力学影响的实验研究 被引量:3
13
作者 杜秀平 李新民 杨峰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第3期190-192,197,共4页
本实验采用人癌细胞体外培养的方法,证明了天佛参口服液(HRD)可抑制人癌细胞集落的形成,直接杀伤癌细胞,抑制人癌细胞的生长,降低其生长率,生长率和药物浓度呈负相关。对MGC_(803)、SMMC_(7721)、Hela细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为... 本实验采用人癌细胞体外培养的方法,证明了天佛参口服液(HRD)可抑制人癌细胞集落的形成,直接杀伤癌细胞,抑制人癌细胞的生长,降低其生长率,生长率和药物浓度呈负相关。对MGC_(803)、SMMC_(7721)、Hela细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为10.42μl/ml 12.55μl/ml和9.30μl/ml。显微分光光度计检测MGC_(803)细胞小鼠S_(180)腹水细胞核DNA显示:低浓度时使细胞相对DNA含量直方图明显右移,说明低浓度时即可影响癌细胞的代谢,阻滞细胞增殖于G_2+M期,高浓度时虽有右移,但不明显说明高浓度时的主要机制是直接杀伤作用。 展开更多
关键词 天佛参口服液 抗癌作用 g2+M期
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选择性COX-2抑制剂对放射所致DNA损伤修复的影响 被引量:2
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作者 徐慧婷 于世英 +2 位作者 夏曙 熊华 庄亮 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期538-542,共5页
目的选择性COX-2抑制剂celecoxib对放射引起的DNA损伤修复的影响。方法流式细胞仪Sub-G1法检测凋亡率和细胞周期;单细胞凝胶电泳技术检测DNA的损伤及修复。RT-PCR和Western blot检测DNA修复基因ku70、ku80的表达。结果celecoxib对HeLa... 目的选择性COX-2抑制剂celecoxib对放射引起的DNA损伤修复的影响。方法流式细胞仪Sub-G1法检测凋亡率和细胞周期;单细胞凝胶电泳技术检测DNA的损伤及修复。RT-PCR和Western blot检测DNA修复基因ku70、ku80的表达。结果celecoxib对HeLa细胞的周期分布无明显改变,但可引起剂量依赖性凋亡。celecoxib可明显提高放射引起的凋亡率,剂量增强比(DEF)在60、80、100μmol/L时分别为3.18、4.16、6.96。同时celecoxib对6Gy X线引起的G2/M期阻滞有明显的减弱作用(放射组:G2/M32.35%,药放组:G2/M5.95%);celecoxib不明显增加放射引起的DNA损伤,但可明显延缓放射引起的SSB和DSB的修复(P<0.05);celecoxib明显抑制HeLa细胞ku70、ku80的表达(P<0.05)。结论COX-2选择性抑制剂celecoxib对肿瘤细胞的放射增敏机制可能与抑制DNA损伤修复有关,其作用可能通过减弱辐射诱导的G2/M期阻滞和抑制DSB重组修复酶DNA-PK成分ku的表达得以实现。 展开更多
关键词 CELECOXIB HELA细胞 放射增敏机制 细胞周期 DNA损伤修复
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P53、P21^(WAF1)和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义 被引量:8
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作者 史惠蓉 张瑞涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期882-885,共4页
背景与目的:P53、P21WAF1和CDK1是细胞周期中G2/M期DNA损伤检验点"P53通路"的关键因子,本研究拟探讨P53、P21WAF1和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上... 背景与目的:P53、P21WAF1和CDK1是细胞周期中G2/M期DNA损伤检验点"P53通路"的关键因子,本研究拟探讨P53、P21WAF1和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、76例卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白的表达,并分析卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白表达与其临床病理特征的关系以及各蛋白表达之间的相关性。结果:P53、P21WAF1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌中的阳性率与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤相比其差异均有统计学意义(P<0.05),而在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤之间其阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。在卵巢上皮性癌中,临床分期越晚、组织分化越差,P53蛋白表达越高;随着临床分期的增加,P21WAF1蛋白表达逐渐降低;CDK1蛋白的表达与各临床病理特征无相关性。卵巢上皮性癌中P53蛋白和P21WAF1蛋白的表达与CDK1蛋白的表达呈负相关(r=-0.388,P=0.001;r=-0.282,P=0.014),P53蛋白与CDK1蛋白表达呈正相关(r=0.263,P=0.022)。结论:P53蛋白与卵巢上皮性癌的恶性程度相关,P53和P21WAF1蛋白可能与卵巢上皮性癌的恶性进展有关。检测CDK1可能有助于卵巢癌的早期诊断。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 上皮性癌 g2/M期DNA损伤检验点 P53 P21^WAF1 CDK1 免疫组织化学
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莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G_2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 邹翔 曲中原 +2 位作者 高鹏 孙胜男 季宇彬 《中医药学报》 CAS 2010年第2期8-12,共5页
目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对H... 目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1(Thr14)和CyclinB1蛋白表达的影响。结果:SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),同时p-Cdk1(Thr14)的表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。 展开更多
关键词 莱菔硫烷 人肝癌HEPG-2细胞 g2/M阻滞 CDK1 p-Cdk1(Thr14) CYCLINB1
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miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制 被引量:2
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作者 信瑞 李冬 +3 位作者 徐慧英 王春宇 曲丹华 孙海峰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期772-778,共7页
目的:观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA... 目的:观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA-21表达水平。T47D和MDA-MB-361细胞分别转染anti-miRNA-21序列(anti-miRNA-21组)和阴性对照序列(阴性对照组),并设置未转染细胞为空白对照组,实时定量PCR法检测各组细胞中miRNA-21表达水平;经0.0和5.0 Gy γ射线照射后,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程。结果:经5.0 Gy γ射线照射后,T47D细胞存活率明显高于MDA-MB-361细胞(P<0.05);与0.0 Gy照射组比较,5.0 Gy 照射组T47D和MDA-MB-361细胞G 2/M期细胞百分率均明显升高(P<0.05),miRNA-21表达水平均明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞中miRNA-21表达水平均明显降低(P<0.05或 P<0.01);给予5.0 Gy γ射线照射后,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞存活率均明显降低(P<0.05或 P<0.01),T47D细胞G 2/M期细胞百分率明显降低(P<0.05),而sub G 1期细胞百分率明显升高(P<0.05)。结论: miRNA-21表达下调能够增强乳腺癌细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞周期G 2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 MIRNA-21 乳腺肿瘤 放射敏感性 细胞存活率 g2/M期阻滞
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毛蚶抗癌蛋白对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用 被引量:4
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作者 付莹 赵晨 +2 位作者 常振战 林华英 孙震晓 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第6期415-420,共6页
目的:从毛蚶软体部位中分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,研究其对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:以新鲜毛蚶软体部分为原材料,分离获得毛蚶抗癌蛋白组分(命名为NS);倒置相差显微镜观察不同浓度(50、100、200、400μg/mL... 目的:从毛蚶软体部位中分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,研究其对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:以新鲜毛蚶软体部分为原材料,分离获得毛蚶抗癌蛋白组分(命名为NS);倒置相差显微镜观察不同浓度(50、100、200、400μg/mL)NS组分对MCF-7癌细胞生长的影响,将200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞不同时间(12、24、48 h)后,Giemsa染色观察癌细胞及核形态的变化,流式细胞术检测NS组分对MCF-7细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,各浓度NS组分对人乳腺癌MCF-7细胞生长均具有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01);倒置相差显微镜下可见200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞12 h后,部分细胞收缩变圆、脱落,24、48 h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12 h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测发现NS组分主要引起细胞G2-M期阻滞;NS处理组凋亡率均较对照组明显升高(P均<0.01),且随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增加。Western blot检测发现NS组分作用MCF-7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调。结论:毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调。 展开更多
关键词 毛蚶 乳腺癌 MCF-7细胞 g2-M期阻滞 细胞凋亡
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药物诱导肿瘤细胞有丝分裂灾难机制研究 被引量:3
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作者 曲中原 邹翔 +3 位作者 龙丽莉 王超 王雨蒙 王嘉琪 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第5期522-524,528,共4页
有丝分裂灾难是一种发生在细胞有丝分裂期,由于细胞分裂出现异常而造成的细胞死亡的现象,它通常伴随着细胞周期检查点异常或纺锤体结构的损伤而发生.近年来诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难成为开发抗肿瘤药物的新分子靶向目标,为对传统化... 有丝分裂灾难是一种发生在细胞有丝分裂期,由于细胞分裂出现异常而造成的细胞死亡的现象,它通常伴随着细胞周期检查点异常或纺锤体结构的损伤而发生.近年来诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难成为开发抗肿瘤药物的新分子靶向目标,为对传统化疗药物具有耐药性的肿瘤治疗开辟新的途径.对近年来有关有丝分裂灾难的特征以及药物诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难机制的研究进展进行全面综述,为发现抗肿瘤新靶点和抗肿瘤新药提供参考依据. 展开更多
关键词 有丝分裂灾难 有丝分裂灾难相关激酶 g2/M期检查点 纺锤体结构破坏 药物诱导
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纳米银对人肺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 潘晓芳 尹红英 《实用肿瘤杂志》 CAS 2014年第2期148-152,共5页
目的探讨纳米银对人肺癌A549细胞毒性的影响及其作用机制。方法通过显微镜观察纳米银对A549细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度纳米银对A549细胞增殖的影响。流式细胞仪检测纳米银对A549细胞周期阻滞的影响。Western blot和免疫组织化... 目的探讨纳米银对人肺癌A549细胞毒性的影响及其作用机制。方法通过显微镜观察纳米银对A549细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度纳米银对A549细胞增殖的影响。流式细胞仪检测纳米银对A549细胞周期阻滞的影响。Western blot和免疫组织化学法检测纳米银对A549细胞凋亡蛋白表达的影响。结果与对照组比较,随着纳米银药物浓度的增加,A549细胞抑制率显著增加,其半数抑制率为(74.23±4.17)mg/L。纳米银作用于A549细胞G2/M期,纳米银中、高浓度明显上调细胞周期调控p21、p53基因的表达;纳米银可抑制Bcl-2蛋白的表达,对caspase-3有活化作用。结论体外细胞实验证实,纳米银通过抑制A549细胞G2/M期,使p21、p53基因表达紊乱,诱导凋亡因子表达,通过多靶点作用抑制细胞生长。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 病理学 纳米结构 治疗应用 治疗应用 细胞增殖 药物作用 细胞凋亡 g2
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