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赤霉素诱导甘蔗GA20-Oxidase基因实时荧光定量PCR分析 被引量:7
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作者 吴建明 李杨瑞 +3 位作者 王爱勤 杨柳 杨丽涛 甘崇琨 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第5期922-927,共6页
本研究以喷清水甘蔗幼茎作为对照(即未处理),经过赤霉素处理后6h、12h、24h和48h的甘蔗幼茎为处理,分别进行取样并提取RNA,反转录获得cDNA作模板,利用SYBR GreenⅠ成功构建了目的基因(GA20-oxidase)和内参基因(GAPDH)的标准品和标准曲... 本研究以喷清水甘蔗幼茎作为对照(即未处理),经过赤霉素处理后6h、12h、24h和48h的甘蔗幼茎为处理,分别进行取样并提取RNA,反转录获得cDNA作模板,利用SYBR GreenⅠ成功构建了目的基因(GA20-oxidase)和内参基因(GAPDH)的标准品和标准曲线。结果表明:内参基因与目的基因的起始模板浓度与Ct之间呈良好线性关系,决定系数分别为r2=0.998、r2=0.995;溶解曲线均显单峰型,证明扩增的特异性比较好,可对基因表达进行相对定量。定量结果表明:目的基因未处理的表达量最大,赤霉素处理后表达量持续下降,在6h达到最低值,12h后逐渐上升,但到48h又明显下降,且所有处理的表达量均低于未处理,6h、12h、24h和48h比对照的表达量分别下降了24.75%、13.18%、10.23%和20.34%。本实验研究GA20-oxidase基因在赤霉素处理后的表达情况,为进一步克隆甘蔗GA20氧化酶基因全长序列、研究该基因在甘蔗节间伸长过程中的表达调控及甘蔗茎间伸长中的作用机理提供理论依据。 展开更多
关键词 甘蔗 ga20-氧化酶 赤霉素 定量PCR 基因表达
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RNAi Plasmid Construction of PttGA 20-oxidase Gene 被引量:3
2
作者 周冰彬 陈晓阳 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第4期56-59,77,共5页
[Objective] Genetic Engineering technology was used to regulate the expression of PttGA20-oxidase gene thus restrained plant height growth and internode elongation for cultivating dwarfed plant.[Method] Based on the R... [Objective] Genetic Engineering technology was used to regulate the expression of PttGA20-oxidase gene thus restrained plant height growth and internode elongation for cultivating dwarfed plant.[Method] Based on the RNAi principle,the gene specific sequences of PttGA20-oxidase in the antisense and sense orientations interrupted by a gene sequence from GUS were cloned into a binary vector pBI121.The selection marker gene npt Ⅱ was replaced with bar gene to RNAi plasmid.[Result] After undergone different endonuclease restrictions,the constructed constraint vector released different segments whose sizes were similar to that of target segment,which demonstrated that the RNAi plasmid of PttGA20-oxidase gene was successfully constructed.[Conclusion] The experiment provided a new way for culturing dwarfed plant. 展开更多
关键词 GIBBERELLINS Pttga 20-oxidase GENE RNAI VECTOR construction
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GA2-oxidase氧化酶基因的研究进展
3
作者 郭姗姗 《农业与技术》 2023年第6期18-20,共3页
GA2-oxidase氧化酶(GA2ox)是影响赤霉素合成和代谢的关键酶之一,其可以将具有生物活性的赤霉素或前体分解成没有生物活性的物质,在植物的生长发育中起着重要的作用。目前已经在拟南芥、杨树、水稻和葡萄等多种植物中克隆表达,其功能在... GA2-oxidase氧化酶(GA2ox)是影响赤霉素合成和代谢的关键酶之一,其可以将具有生物活性的赤霉素或前体分解成没有生物活性的物质,在植物的生长发育中起着重要的作用。目前已经在拟南芥、杨树、水稻和葡萄等多种植物中克隆表达,其功能在不同物种之间也存在着差异。本研究主要从GA2ox基因的表达模式和基因功能进行阐述,重点阐述了GA2ox基因的时空表达情况,环境和激素对GA2ox基因的表达影响;GA2ox基因对植物的株高、花、果实和种子性状的改变,及与抗性的相互作用,更好地为了解GA2ox基因的作用机制提供参考。 展开更多
关键词 赤霉素氧化酶 ga2-oxidase氧化酶 基因表达 功能分析
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Status and Advances of Researches on GA 20-oxidases 被引量:2
4
作者 Li Wei Chen Xiaoyang Li Hui Guo HaiCollege of Biological Sciences and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, P. R. China 《Forestry Studies in China》 CAS 2003年第1期49-54,共6页
GA 20-oxidase, the most important limiting enzyme, can catalyze a series of oxidization of GA biosynthesis pathway from GA12 to GA9 and from GA53 to GA20 in the higher plants. This paper reviews the studies on the cha... GA 20-oxidase, the most important limiting enzyme, can catalyze a series of oxidization of GA biosynthesis pathway from GA12 to GA9 and from GA53 to GA20 in the higher plants. This paper reviews the studies on the characters of GA 20-oxidase, the gene and the protein of GA 20-oxidase and the regulation of GA 20-oxidase gene expression in recent years. At the same time, the prospects for the gene transformation of GA 20-oxidase in agriculture, forestry and horticulture are also discussed. 展开更多
关键词 higher plants ga 20-oxidase gene transformation
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干扰烟草GA 20-氧化酶siRNA植物表达载体的构建及矮化烟草的产生 被引量:16
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作者 谈心 杨宏 +1 位作者 乔定君 马欣荣 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期48-52,共5页
根据烟草(Nicotiana tabacum)GA 20-氧化酶基因序列,设计2对分别含有特定酶切位点的特异引物,以烟草基因组DNA为模板,扩增目的基因(约250bp)片段.将正、反向目的片段分别插入中间载体的内含子两侧,再经BamHI和SacI双酶切回收约700bp的... 根据烟草(Nicotiana tabacum)GA 20-氧化酶基因序列,设计2对分别含有特定酶切位点的特异引物,以烟草基因组DNA为模板,扩增目的基因(约250bp)片段.将正、反向目的片段分别插入中间载体的内含子两侧,再经BamHI和SacI双酶切回收约700bp的目的片段,插入到双元载体质粒p2355中,成功构建了含GA20-氧化酶基因片段的反向重复序列植物表达载体p23700,其转录产物能形成发夹RNA(hpRNA),产生小分子干扰RNA,干扰目的基因的表达.将p23700质粒导入根癌农杆菌EHA105中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得表型矮化的转基因烟草. 展开更多
关键词 烟草 赤霉素 ga 20-氧化酶 RNA干扰 重组载体构建 矮化突变体
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棉花GA 20-氧化酶基因转毛白杨的研究 被引量:10
6
作者 邓伟 吕立堂 +1 位作者 罗克明 李义 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1095-1100,共6页
以毛白杨为材料,研究了超量表达赤霉素合成酶基因(GA20-氧化酶基因)对毛白杨根、茎和叶的生长以及组织结构的影响,结果显示,表达GA20-氧化酶基因能显著提高毛白杨茎的生长,但是对根系的生长带来负面影响.同时,超量表达GA20-氧化酶基因... 以毛白杨为材料,研究了超量表达赤霉素合成酶基因(GA20-氧化酶基因)对毛白杨根、茎和叶的生长以及组织结构的影响,结果显示,表达GA20-氧化酶基因能显著提高毛白杨茎的生长,但是对根系的生长带来负面影响.同时,超量表达GA20-氧化酶基因促进了毛白杨茎木质部的生长,抑制了韧皮部和皮层的生长.研究结果表明GA20-氧化酶基因在毛白杨遗传改良中具有一定的应用价值. 展开更多
关键词 杨树 超量表达 赤霉素 ga20-氧化酶
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棉花赤霉素氧化酶同源基因GhGA20ox1在烟草中的功能表达(英文) 被引量:7
7
作者 肖月华 叶应福 +6 位作者 冯怡 李先碧 罗明 侯磊 罗小英 李德谋 裴炎 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期563-569,共7页
为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(N.benthamiana)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉... 为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(N.benthamiana)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉素过量的表型出现。转基因本明烟的表型变化程度与GhGA20ox1基因的表达水平和GA4+7的含量一致。这些结果表明,GhGA20ox1基因编码一个有功能的GA20-氧化酶,能够在转基因烟草中促进活性GA(GA4+7)的合成。 展开更多
关键词 赤霉素 ga 20-氧化酶 棉花ga 20-氧化酶基因 ga合成 基因工程
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GA20-氧化酶基因转化豆科牧草百脉根的研究 被引量:13
8
作者 张振霞 储成才 符义坤 《草业学报》 CSCD 2002年第3期97-100,共4页
以豆科植物百脉根子叶为转化受体,通过根癌农杆菌介导方法将外源目的基因GA20-氧化酶(GA20-oxidase)和NPTII基因导入,经筛选分化、再生,得到具有卡那霉素抗性的转基因植物。在卡那霉素筛选浓度的选择中,25mg/L是百脉根较为适宜的筛选浓... 以豆科植物百脉根子叶为转化受体,通过根癌农杆菌介导方法将外源目的基因GA20-氧化酶(GA20-oxidase)和NPTII基因导入,经筛选分化、再生,得到具有卡那霉素抗性的转基因植物。在卡那霉素筛选浓度的选择中,25mg/L是百脉根较为适宜的筛选浓度。头孢霉素对农杆菌的抑制作用好于羧卞霉素。转基因植物移栽大田后生长良好。PCR检测证明外源目的基因已整合到百脉根基因组中。 展开更多
关键词 ga20-氧化酶 基因转化 豆科牧草 百脉根 根癌农杆菌 植物再生
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高等植物GA 20-氧化酶研究进展 被引量:13
9
作者 李伟 陈晓阳 丁霞 《生命科学》 CSCD 2003年第1期42-45,35,共5页
GA 20-氧化酶(GA 20-oxidase)是高等植物体内GA生物合成途径中最重要的限速酶,它能够催化从GA12到GA9及GA53到GA20一系列的氧化反应。作者对近年来有关GA 20-氧化酶的特征、GA 20-氧化酶基因及编码蛋白、GA 20-氧化酶基因表达调控进行... GA 20-氧化酶(GA 20-oxidase)是高等植物体内GA生物合成途径中最重要的限速酶,它能够催化从GA12到GA9及GA53到GA20一系列的氧化反应。作者对近年来有关GA 20-氧化酶的特征、GA 20-氧化酶基因及编码蛋白、GA 20-氧化酶基因表达调控进行了综合评述,并对GA20-氧化酶基因转化在农业、林业、园艺业方面的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 高等植物 ga20-氧化酶 基因转化
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小麦TaGA20ox2基因的克隆及分析 被引量:8
10
作者 武晶 孔秀英 +2 位作者 高丽峰 任正隆 贾继增 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期3405-3412,共8页
【目的】克隆小麦中的GA20-氧化酶基因并进行遗传定位,为深入研究小麦中的GA20-氧化酶基因作用机理奠定基础,同时为改良小麦的重要农艺性状提供理论依据。【方法】采用同源克隆结合BAC文库筛选的方法克隆基因,利用中国春缺失体以及国际... 【目的】克隆小麦中的GA20-氧化酶基因并进行遗传定位,为深入研究小麦中的GA20-氧化酶基因作用机理奠定基础,同时为改良小麦的重要农艺性状提供理论依据。【方法】采用同源克隆结合BAC文库筛选的方法克隆基因,利用中国春缺失体以及国际作图群体对该基因进行遗传定位。【结果】从普通小麦中国春中分离得到TaGA20ox2的gDNA与cDNA序列,利用中国春缺失体材料将TaGA20ox2定位于3A、3B、3D染色体上,序列分析表明分别位于3A、3B、3D染色体上的TaGA20ox2-A1、TaGA20ox2-B1和TaGA20ox2-D1与水稻GA20ox2为直向同源基因,具有GA20ox2家族保守结构域;利用国际作图群体W7984×Opata85将位于3D上的基因TaGA20ox2-3定位于xfba330与xgwm664标记之间。【结论】分离获得小麦中分布于第三同源群的GA20ox2;分子标记结果结合QTL作图信息可以初步推测TaGA20ox2-3在小麦中可能是控制株高的基因。 展开更多
关键词 小麦 ga20-氧化酶 基因克隆 遗传作图
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梨矮化砧木中矮1号GA20-氧化酶基因克隆与表达分析 被引量:12
11
作者 宣利利 欧春青 +4 位作者 王斐 王志刚 程飞飞 李振茹 姜淑苓 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期883-887,共5页
中矮1号是中国农业科学院果树研究所选育的梨优良矮化砧木,为研究其矮化机理,利用RT-PCR结合RACE方法克隆了梨矮化砧木中矮1号的1个GA20-氧化酶基因,并对该基因及其氨基酸序列以及该基因在不同生长类型梨品种中不同时期新梢叶片中的表... 中矮1号是中国农业科学院果树研究所选育的梨优良矮化砧木,为研究其矮化机理,利用RT-PCR结合RACE方法克隆了梨矮化砧木中矮1号的1个GA20-氧化酶基因,并对该基因及其氨基酸序列以及该基因在不同生长类型梨品种中不同时期新梢叶片中的表达进行了分析。结果表明,该基因全长1 179 bp,推导编码392个氨基酸,其编码的蛋白质具有GA20-氧化酶基因家族所具有的功能活性位点和特征保守单元,该基因与苹果GA20-氧化酶基因氨基酸序列一致性达91.58%,因此确定该基因为中矮1号GA20-氧化酶基因,将其命名为PcGA20ox1(Gen-Bank登录号为HQ833589)。PcGA20ox1基因在中矮1号、亲本锦香和对照早酥3个品种不同发育阶段新梢叶片中的表达强度均为中矮1号<锦香<早酥,与植株高矮表现一致,表明PcGA20ox1基因的表达强弱与植株高矮相关。 展开更多
关键词 矮化砧木 赤霉素 ga20-氧化酶基因 基因表达
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甘蔗GA20氧化酶基因片段克隆及序列分析 被引量:10
12
作者 吴建明 李杨瑞 +2 位作者 王爱勤 杨丽涛 杨柳 《热带作物学报》 CSCD 2009年第6期817-821,共5页
以甘蔗茎尖为材料,根据其它植物的GA20氧化酶基因(GA20-oxidase)氨基酸保守区,设计一对简并引物。通过RT-PCR扩增得出1条约740bp大小的DNA片段,将其克隆至pMD18-T载体上,而后对重组克隆进行测序,结果表明所获得的甘蔗GA20氧化酶基因片段... 以甘蔗茎尖为材料,根据其它植物的GA20氧化酶基因(GA20-oxidase)氨基酸保守区,设计一对简并引物。通过RT-PCR扩增得出1条约740bp大小的DNA片段,将其克隆至pMD18-T载体上,而后对重组克隆进行测序,结果表明所获得的甘蔗GA20氧化酶基因片段由740碱基组成,编码246个氨基酸。该基因片段具有其它植物GA20氧化酶基因中存在的保守区;同时,与多种单子叶植物的GA20氧化酶基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性在80%和75%以上。聚类分析显示,甘蔗和玉米最先聚类,推测在进化上具有较近的亲缘关系,其次与高粱、结缕草聚类,然后再与水稻聚类,其中进化关系最远的是簇毛麦和小麦。 展开更多
关键词 ga20氧化酶 基因克隆 序列分析 甘蔗
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荔波连蕊茶GA20氧化酶基因的克隆及表达分析 被引量:3
13
作者 肖政 李纪元 +1 位作者 范正琪 殷恒福 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期678-686,共9页
根据植物GA20ox基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶幼嫩茎段为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 567 bp的GA20氧化酶基因全长cDNA序列,命名为ClGA20ox2(GenBank登录号KF823787)。序列分析表明,ClGA20ox... 根据植物GA20ox基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶幼嫩茎段为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 567 bp的GA20氧化酶基因全长cDNA序列,命名为ClGA20ox2(GenBank登录号KF823787)。序列分析表明,ClGA20ox2开放阅读框(ORF)为1 146 bp,编码382个氨基酸,5'非编码区115 bp,3'非编码区303 bp。预测的蛋白质分子量为43.56 kD,等电点为7.02,所推导的蛋白氨基酸序列与夹竹桃和杨树GA20ox蛋白的同源性分别为73%和72%。ClGA20ox2与其它植物GA20ox蛋白比较,构建系统进化树,结果显示山茶GA20ox蛋白与夹竹桃和杨树的GA20ox蛋白的亲缘关系最为密切。实时定量PCR结果显示,该基因在荔波连蕊茶的根、茎、叶和种子中均有表达,其表达模式却不同:ClGA20ox2基因在二年生茎段中的表达丰度最高,在顶端分生组织中表达丰度最低,在嫩叶和根中表达丰度较高,成熟叶片和种子表达丰度较低。 展开更多
关键词 荔波连蕊茶 ga20氧化酶 序列分析 克隆
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簇毛麦(Dasypyrum villosum)GA20ox基因的分离和鉴定 被引量:2
14
作者 刘英华 赵桃 +3 位作者 龙海 邓光兵 潘志芬 余懋群 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期479-482,共4页
通过RT-PCR技术克隆了簇毛麦(Dasypyrum villosum)赤霉素生物合成关键酶GA20ox基因的全长序列,命名为DvGA20ox,GenBank登录号为EU142949.该基因全长1080bp,推测编码359个氨基酸的蛋白质,具有植物GA20ox基因的典型保守结构域LPWKET和NYYP... 通过RT-PCR技术克隆了簇毛麦(Dasypyrum villosum)赤霉素生物合成关键酶GA20ox基因的全长序列,命名为DvGA20ox,GenBank登录号为EU142949.该基因全长1080bp,推测编码359个氨基酸的蛋白质,具有植物GA20ox基因的典型保守结构域LPWKET和NYYPXCQKP.该基因推导编码蛋白质与小麦、大麦和黑麦草GA20ox蛋白的同源性分别为98%、97%和91%.该序列重组到原核表达载体pET-32a(+)获得的重组子pET-32a(+)-DvGA20ox转化大肠杆菌BL21pLysS后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,DvGA20ox基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为55×103,与理论值相符.结果为深入研究DvGA20ox蛋白的结构与功能以及该基因与株高发育的关系奠定了基础. 展开更多
关键词 簇毛麦 赤霉素 ga20ox RT-PCR 原核表达
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拟南芥GA20氧化酶家族的生物信息学分析 被引量:4
15
作者 石永春 邓晓旭 刘卫群 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期453-455,461,共4页
采用生物信息学的方法对拟南芥中多个GA20氧化酶(GA20ox)氨基酸序列的理化性质、亚细胞定位、进化关系、基序和磷酸化修饰位点进行了预测和分析.结果表明,拟南芥中的GA20ox可被划分为2个亚类,1个亚类被预测定位于细胞质,另1个亚类被预... 采用生物信息学的方法对拟南芥中多个GA20氧化酶(GA20ox)氨基酸序列的理化性质、亚细胞定位、进化关系、基序和磷酸化修饰位点进行了预测和分析.结果表明,拟南芥中的GA20ox可被划分为2个亚类,1个亚类被预测定位于细胞质,另1个亚类被预测定位于叶绿体. 展开更多
关键词 拟南芥 ga20氧化酶 生物信息学
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转基因枳橙中GA20ox1与rol基因互作关系的研究 被引量:3
16
作者 袁飞荣 李芳 +3 位作者 蒋巧巧 Alessandra Gentile 严佳文 邓子牛 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第19期214-221,共8页
为分析转rolABC基因枳橙GA20ox1基因与rol基因表达的互作关系,进一步阐释其矮化性状形成的分子机制。以转rol基因枳橙实生苗为试验材料,研究其对赤霉素的敏感反应,用荧光定量RT-PCR分析GA20ox1基因和rol基因的表达,并检测幼芽中过氧化... 为分析转rolABC基因枳橙GA20ox1基因与rol基因表达的互作关系,进一步阐释其矮化性状形成的分子机制。以转rol基因枳橙实生苗为试验材料,研究其对赤霉素的敏感反应,用荧光定量RT-PCR分析GA20ox1基因和rol基因的表达,并检测幼芽中过氧化物酶活性和植物内源激素含量的变化。结果表明转rol基因枳橙既不属于GA缺陷型,也不属于GA不敏感型,喷施GA3能促进其茎伸长生长,但恢复不到野生型水平,幼芽中IAA(P<0.01)、GA1和GA4(P<0.05)显著降低,POD酶活性显著提高(P<0.01)。转rol基因枳橙幼芽中GA20ox1基因mRNA水平相比对照显著下调(P<0.01)。B、D系与野生型嫩茎中无明显差异,B、D系老叶中明显降低,E系中嫩茎和老叶中均明显增加。B、D和E系嫩叶中GA20ox1基因转录表达均较野生型高。在幼芽、嫩茎中,rolC基因与GA20ox1表达负相关。rol基因通过在幼芽中的高表达下调了GA20ox1基因转录表达,进而抑制了活性GAs在幼芽中的合成,顶端分生组织较低量的活性GAs限制植物茎伸长,在转rolABC基因枳橙矮化性状建成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 枳橙 rolABC基因 ga20ox1基因 基因表达 植物激素 矮化机理
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混合尖晶石型Zn_6Ga_8TiO_(20):Cr^(3+)荧光粉的合成、结构表征与发光性能 被引量:5
17
作者 郑遗凡 张露露 +1 位作者 王锴 潘再法 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期9-13,共5页
采用高温固相法合成新型红色荧光粉Zn_6Ga_(8-x)TiO_(20):xCr^(3+)。用XRD、XRF和TEM对样品的成分和晶体结构进行表征,发现所合成的荧光粉为单一的混合尖晶石结构,Cr^(3+)能有效地掺杂进入基质Zn_6Ga_8TiO_(20)中,并占据八面体格位。荧... 采用高温固相法合成新型红色荧光粉Zn_6Ga_(8-x)TiO_(20):xCr^(3+)。用XRD、XRF和TEM对样品的成分和晶体结构进行表征,发现所合成的荧光粉为单一的混合尖晶石结构,Cr^(3+)能有效地掺杂进入基质Zn_6Ga_8TiO_(20)中,并占据八面体格位。荧光光谱分析表明,激发谱由四个峰组成,峰值分别为281、337、420和555 nm,其中281 nm对应Cr^(3+)离子的~4A_2→~4T_1(4P)跃迁,337 nm来自O^(2-)的2p轨道电子向Ga^(3+)的4s4p轨道迁移跃迁,420和555 nm分别对应Cr^(3+)离子的~4A_2→~4T_1和~4A_2→~4T_(2g)的跃迁。发射光谱是由~2E→~4A_2的跃迁辐射零声子线(689 nm,R锐线)、处于畸变的环境中Cr^(3+)发射的N线(696 nm)以及由晶格振动导致的声子伴随发射峰组成。这种荧光粉是一种可能应用在白光LED上的红色荧光粉。 展开更多
关键词 Zn6ga8-xTiO20 xCr 红色荧光粉 微结构 荧光
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梨品种中矮1号GA20-氧化酶基因正义和反义表达载体的构建 被引量:1
18
作者 宣利利 欧春青 +3 位作者 王斐 王志刚 姜淑苓 郭晓雷 《中国果树》 北大核心 2011年第3期11-13,共3页
通过对已获得的中矮1号GA20-氧化酶基因的cDNA序列全长进行分析,选取Spe I/Bst EⅡ双酶切位点、以pCAMBIA1305为载体构建质粒。成功构建了GA20-氧化酶基因的植物正义和反义表达载体pCAMBIA1305-GAF和pCAMBIA1305-GAR,并成功转入到了农杆... 通过对已获得的中矮1号GA20-氧化酶基因的cDNA序列全长进行分析,选取Spe I/Bst EⅡ双酶切位点、以pCAMBIA1305为载体构建质粒。成功构建了GA20-氧化酶基因的植物正义和反义表达载体pCAMBIA1305-GAF和pCAMBIA1305-GAR,并成功转入到了农杆菌EHA105菌株中;为GA20-氧化酶基因的遗传转化和梨品种中矮1号矮化机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 品种 中矮1号 ga20-氧化酶基因 表达载体 构建
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基于SVM的含缺陷20钢弯管爆破压力预测 被引量:3
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作者 郄彦辉 郭涛 +1 位作者 周凌志 王昱 《中国安全科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期89-95,共7页
为快速、精确预测含局部减薄缺陷的弯管爆破压力,首先验证显式非线性有限元模型的模拟精确性,然后以168组不同缺陷尺寸下20钢弯管爆破压力的有限元模拟数据作为学习样本,建立含局部减薄缺陷20钢弯管爆破压力预测的支持向量机(SVM)模型;... 为快速、精确预测含局部减薄缺陷的弯管爆破压力,首先验证显式非线性有限元模型的模拟精确性,然后以168组不同缺陷尺寸下20钢弯管爆破压力的有限元模拟数据作为学习样本,建立含局部减薄缺陷20钢弯管爆破压力预测的支持向量机(SVM)模型;其次利用交叉验证(CV)、遗传算法(GA)、粒子群算法(PSO)分别优化SVM模型;最后分析对比用于预测弯管爆破压力的3种优化SVM模型与ASME B31G-2009、DNV RP-F101、SHELL 92等3种通用规范的计算误差。结果表明:CV-SVM、GA-SVM、PSO-SVM等3种模型的预测误差均小于3种规范的计算误差,其最大相对误差分别为-2.33%、-3.4%和1.94%;说明SVM模型用于预测弯管爆破压力时操作简单、计算时间短、预测精度高、工程实用性好。 展开更多
关键词 支持向量机(SVM) 局部减薄缺陷 20钢弯管 爆破压力 交叉验证(CV) 遗传算法(ga) 粒子群算法(PSO)
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苹果矮化砧木GA20氧化酶基因的克隆及其表达分析 被引量:6
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作者 郑伶杰 马宏 +3 位作者 张媛 张学英 李中勇 徐继忠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期53-59,共7页
为了研究GA20氧化酶基因在苹果矮化砧木中的分子特征和表达特征,利用RT-PCR方法从苹果矮化砧木2号和36号c DNA中克隆了GA20氧化酶基因(GA20ox1),并对该基因及其编码氨基酸序列以及在不同时期砧木及嫁接品种中的表达分别进行了分析。结... 为了研究GA20氧化酶基因在苹果矮化砧木中的分子特征和表达特征,利用RT-PCR方法从苹果矮化砧木2号和36号c DNA中克隆了GA20氧化酶基因(GA20ox1),并对该基因及其编码氨基酸序列以及在不同时期砧木及嫁接品种中的表达分别进行了分析。结果表明,GA20ox1基因c DNA编码序列长1 179 bp,推导编码393个氨基酸(包括终止密码子),预测蛋白相对分子质量44.3 k Da,理论等电点5.89,编码的蛋白质包含GA20ox1基因家族所具有的特征保守结构域,系统进化分析表明该蛋白序列与苹果SH40的同源性达到96.9%。实时荧光定量PCR分析显示:36号砧木在6月份GA20ox1基因表达强度显著低于八棱海棠对照,而7-8月份的均显著高于对照,其上嫁接的品种7月份表达强度显著低于对照。在7-8月份2号砧木及嫁接品种GA20ox1基因的表达强度均显著低于对照。 展开更多
关键词 苹果矮化砧木 ga20氧化酶 克隆 表达分析
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