黄俊山关于中医阴阳寤寐与GABA/Glu关系理论探讨与临床实践

中医睡眠医学与现代睡眠医学关于睡眠的理论有许多相通之处,阴阳寤寐学说是基于阴阳学说产生的,与睡眠与觉醒系统理论如出一辙,GABA/Glu是非常重要的睡眠物质,黄俊山将中西医关于睡眠理论结合起来,用于临床实践,优势互补,取得较好疗效。

失眠患者血清钙调蛋白及GABA/Glu水平检测及其意义

目的检测血清钙调蛋白(CaM)及γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、GABA/Glu在失眠患者血清中的水平,探讨其与失眠的相关性。方法采用病例对照研究,收集符合入选标准的119例失眠患者作为研究组,收集122例健康体检者作为健康对照组。运用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测所有入组者血清CaM、GABA、Glu、GABA/Glu水平,并分析CaM水平与GABA/Glu的相关性。结果(1)失眠组患者与对健康照组相比,血清CaM、GABA、GABA/Glu水平降低,Glu水平升高,有统计学意义(P<0.05)。(2)失眠患者血清CaM水平与GABA/Glu水平呈正相关(r=0.475,P<0.01)。结论CaM下调增加失眠的风险,其机制可能与下调GABA/Glu水平有关。

方氏头针结合子午流注纳子法对失眠患者血清GABA、Glu及睡眠质量的影响

目的:探索方氏头针结合子午流注纳子法治疗失眠症的疗效,并探讨其可能的机制。方法:选择60例失眠症患者随机分为观察组(30例)和对照组(30例,脱落1例)。对照组给予常规针刺,观察组给予方氏头针结合子午流注纳子法针刺治疗。两组患者1次/d,每周5次,连续2周。分别于治疗前后评定匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分、血清γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(Glu)的变化情况。结果:治疗2周,两组患者PSQI均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后血清GABA水平较治疗前比较均有所上升,Glu水平较治疗前比较均有所下降。方氏头针联合子午流注纳子法组在血清GABA水平上与常规针刺组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:方氏头针结合子午流注纳子法治疗失眠确有疗效,能够明显地改善患者的临床症状,其机制可能与调节血清GABA、Glu水平有关。

三焦针法对原发性失眠大鼠Glu、GABA表达平衡的影响

目的:观察三焦针法对原发性失眠大鼠下丘脑组织谷氨酸(glutamic acid,Glu)、γ-氨基丁酸能神经元(gamma-aminobutyric acid,GABA)表达的影响,探讨三焦针法治疗PI的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、地西泮组和三焦组,每组6只。除正常组外,其余各组采用“PCPA腹腔注射方式”建立PI大鼠模型。地西泮组予地西泮灌胃(0.9 mg/kg),三焦组针刺膻中、中脘、气海、血海(双侧)及足三里(双侧),诸穴行捻转补法30 s,1次/d,均治疗14 d。观察大鼠一般状态;测定大鼠体质量;Elisa法检测下丘脑组织Glu、GABA表达。结果:与空白组相比,PI模型大鼠一般状态较差,体质量显著降低(P<0.01),下丘脑组织中Glu表达水平显著升高(P<0.01)、GABA表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,地西泮组、三焦组大鼠体质量显著升高(P<0.01,P<0.05),下丘脑组织中Glu表达水平显著降低(P<0.01)、GABA表达水平显著升高(P<0.01),地西泮组与三焦组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:三焦针法可改善PI大鼠失眠症状,这可能与调节下丘脑组织中Glu、GABA表达水平有关。

宁神安脏饮对失眠大鼠模型行为学和下丘脑GABA及GLU表达的影响

目的探讨宁神安脏饮对肝郁脾虚型失眠大鼠行为学变化和下丘脑伽γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(GLU)表达的影响。方法采用夹尾刺激+饮食失联+PCPA多因素制备肝郁脾虚型失眠大鼠模型。将80只大鼠随机分为正常组、模型组、宁神安脏饮组和艾司唑仑组,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,宁神安脏饮组大鼠按每次2.28 g/kg灌胃给药,艾司唑仑组大鼠每次按剂量0.18 mg/kg灌胃给药,分别于实验第0、7、14、21天检测各组大鼠的体重,于第21天进行各组大鼠糖水偏好实验、旷场实验及Morris水迷宫实验,测试各组大鼠的行为学表现;应用透射电镜观察下丘脑组织结构的变化,免疫组织化学方法观察失眠21d后各组大鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(GLU)阳性细胞数。结果与正常组比较,模型组大鼠一般状态、体重、糖水消耗和糖水偏好率、旷场活动能力明显降低,水迷宫平均逃避潜伏期明显升高(P<0.05),透射电镜观察脑组织线粒体、内质网水肿;经给药干预后,与模型组比较,宁神安脏饮组和艾司唑仑组可改善大鼠的一般状态、体重、糖水消耗和糖水偏好率、旷场活动能力,降低水迷宫平均逃避潜伏期(P<0.05),透射电镜观察下丘脑组织结构明显改善。免疫组化结果表明,与正常组比较,模型组下丘脑GABA和GLU的阳性细胞数降低(P<0.05);与模型组比,宁神安脏饮组和艾司唑仑组GABA和GLU的阳性细胞数均升高(P<0.05)。结论宁神安脏饮可明显改善肝郁脾虚型大鼠的行为学,激发大鼠自发活动能力和探究能力,改善脑组织超微结构,其作用机制可能与调节失眠大鼠下丘脑GABA和GLU的含量有关。

针刺三阴交、神门、内关对失眠大鼠下丘脑5-HT含量及Glu/GABA比值影响机制的探究

目的以西药地西泮作为对照,探求针刺三阴交、神门、内关对失眠SD大鼠下丘脑5羟色胺(5-HT)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)递质含量及Glu/GABA比值影响的研究;以期探索针刺治疗失眠机制的作用及有效性,为今后治疗失眠提供更多科学依据。方法48只雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、西药组(地西泮)、针刺组,每组12只。采用对氯苯丙氨酸诱导构建失眠大鼠模型。针刺组施以电针三阴交、神门、内关,频率60 Hz,强度1 mA,10 min/次,西药组施以地西泮灌胃治疗(0.92 mg/kg),空白组、模型组不予任何治疗,仅予相同时间的捉抓刺激。干预6 d后,采取酶联免疫法测量5-HT、GABA含量,葡萄糖测定法测量Glu含量。结果实验结果显示,针刺组与西药组对失眠均有疗效;模型组与空白组相比,大鼠下丘脑5-HT含量明显减少(P<0.01);Glu增长显著;GABA含量明显减少;相比模型组,针刺组下丘脑5-HT、GABA含量显著增多,Glu含量减少,呈显著差异(P<0.01),西药组提升5-HT、GABA水平而减少了Glu水平,使各指标切近于正常水平,差异有统计学意义(P<0.01);与西药组相比,针刺组更有效于西药组差异存在统计学意义(P<0.05);相比模型组,针刺组、西药组Glu/GABA比值明显降低,差异存在统计学意义(P<0.01)。结论针刺三阴交、神门、内关在治疗失眠时,可能通过调节Glu/GABA-Gln代谢通路,提升失眠大鼠下丘脑5-HT、GABA的水平,并降低Glu水平来发挥治疗作用,揭示针刺是通过升高抑制性神经元水平来调节兴奋/抑制的动态平衡,从而优化睡眠结构。

地龙有效成分对戊四氮慢性点燃大鼠海马区Glu、GABA含量的影响

目的:通过观察地龙有效成分对戊四氮(PTZ)慢性点燃大鼠海马区谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,探讨其可能存在的抗癫痫作用机制。方法:48只Wistar大鼠随机分成空白组,模型组,阳性对照组,地龙有效成分高、中、低剂量组,除空白组注射生理盐水外,其余5组均连续腹腔注射亚致痉量戊四氮3周进行模型制备,造模同时观察大鼠行为学变化。造模成功后记录大鼠癫痫发作潜伏时间、持续时间,采用高效液相色谱法检测海马区Glu、GABA含量。结果:癫痫发作潜伏时间和持续时间同模型组比较,地龙各剂量组、阳性对照组均明显延长潜伏时间和缩短发作持续时间;海马区Glu和GABA含量同模型组比较,阳性对照组Glu含量降低,GABA含量明显增加,地龙有效成分高剂量组Glu含量明显减少,GABA含量明显增加,中、低剂量组仅GABA含量明显增加。结论:地龙有效成分对PTZ慢性点燃大鼠存在抗癫痫作用,其机制可能与降低海马区Glu含量、增加GABA含量有关,且高剂量组疗效显著。

参知健脑胶囊对拟血管性痴呆大鼠模型皮层和海马中Glu和GABA的影响

目的:观察参知健脑胶囊对拟血管性痴呆大鼠皮层和海马中Glu和GABA的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、安理申组、金纳多组以及参知健脑胶囊低、中、高剂量组,每组10只,采用2VO法建立拟血管性痴呆大鼠模型。除假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃外,其余各组分别给予安理申1 mg/kg、金纳多20mg/kg以及参知健脑胶囊40 mg/kg、120 mg/kg、360 mg/kg灌胃。各组于造模后7 d开始给药,每日1次,连续灌胃8周。本别在术后第5、8周以Morris水迷宫检测其学习记忆能力;给药8周后大鼠统一处死后取皮层、海马,用H&E、Nissl's染色法观察皮层海马的组织形态学改变和神经元存活状况,用高效液相色谱法分别检测其内Glu、GABA的含量。结果:与假手术组相比:模型组大鼠皮层Glu和GABA均升高,其中GABA更为显著(P<0.01);其余各组皮层的Glu、GABA则均略有降低,但均无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比:安理申组、金纳多组以及参知健脑胶囊低、中、高剂量组鼠脑皮层Glu、GABA均有降低,其中参知健脑胶囊高剂量组的Glu和GABA、安理申组的GABA降低幅度更为明显(P<0.05)。参知健脑胶囊高剂量组大鼠皮层GABA降低较安理申组明显,但组间比较无统计学差异(P>0.05)。与假手术组相比:双侧颈总动脉永久结扎大鼠海马Glu和GABA略有升高或降低,但均无统计学差异(P>0.05)。与模型组比较:5个给药组2VO大鼠8周后海马Glu和GABA略有降低,但均无明显差异(P>0.05)。结论:参知健脑胶囊改善拟VD大鼠的学习记忆功能可能与降低皮层中的神经递质Glu和GABA的含量有关,但其具体作用机制尚需深入探讨。

囊立消对大鼠癫痫模型脑组织中GABA Glu含量的影响

目的:通过囊立消对美解眠诱导的大鼠癫痫模型脑组织中GABA、G lu含量测定,探讨囊立消的抗癫痫作用。方法:利用氨基酸自动分析仪测定大鼠癫痫模型脑组织中GABA、G lu的含量。结果:该方药可使癫痫大鼠脑内GABA含量明显升高(P<0.05),并可降低癫痫大鼠脑内G lu含量(P<0.05)。结论:囊立消可有效地改善癫痫大鼠的行为表现,囊立消具有一定的抗癫痫作用,与维持脑内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的动态平衡有关。

有氧运动对大鼠心血管自主神经中枢Glu能神经和GABA能神经的影响

为验证谷氨酸(Glu)能神经和γ-氨基丁酸(GABA)能神经之间的相互作用可能是有氧运动改变自主神经平衡状态的中枢机制之一,以正常大鼠为实验对象,以8周中等强度的游泳运动为干预手段,观察比较两组大鼠Glu能神经和GABA能神经免疫阳性产物在心血管自主神经中枢各核团内的表达情况,以及脑脊液中氨基酸类神经递质的变化。研究结果提示,长期参加有氧运动可通过下列中枢途径改变自主神经的平衡状态:降低下丘脑室旁核内Glu能神经纤维密度,增加GABA能神经纤维密度,从而改变下丘脑室旁核交感兴奋性神经元的“兴奋-抑制”平衡,表现为抑制性作用加强;改变孤束核和疑核内兴奋性神经元和抑制性神经元的比例,从而增强应激状态下自主神经对心血管反射的调节能力或加强安静状态下的迷走神经紧张性;通过增加CVLM向RVLM投射的GABA能神经纤维,从而加强对RVLM内交感节前神经元的抑制;通过脑脊液中的氨基酸类神经递质含量的变化,对触液神经元的功能产生影响,从而影响心血管自主神经的平衡状态。

恐伤孕鼠所产21日龄仔鼠的认知发育与海马区GLU、GABA、GLY的相关性研究

目的:考察恐伤孕鼠所产21日龄仔鼠认知发育与海马区谷氨酸(Glutamic acid, GLU)、γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid, GABA)、甘氨酸(Glycine, GLY)的相关性。方法:应用旁观电击法建立恐伤肾孕鼠模型,通过对21日龄仔鼠进行Morris水迷宫实验,观察其认知发育;通过脑立体定位仪在右侧海马区采集脑透析液,应用HPLC-ECD法测定仔鼠脑透析液中GLU、GABA、GLY含量。结果:与对照组比较,21日龄模型组仔鼠平均逃避潜伏期时间久、游泳速度慢、跨台次数少、20%边缘区域停留时间长,差异均有统计学意义(P<0.05);21日龄模型组仔鼠海马组织细胞外液中GLU、GLY的水平在各个灌流时间点均升高,而GABA的水平在各个灌流时间点均降低,差异有统计学意义(P<0.05);21日龄仔鼠海马区氨基酸类神经递质GLU、GLY与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在负相关,与20%边缘区域停留时间呈正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05);神经递质GABA与其平均逃避潜伏期、跨台次数存在正相关,与20%边缘区域停留时间呈负相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:恐伤孕鼠可影响其21日龄仔鼠的认知发育及海马区GLU、GABA、GLY的含量,其认知发育水平与海马区GLU、GABA、GLY的含量改变有一定的关系。

针刺结合音乐疗法对焦虑模型大鼠海马Glu/GABA兴奋/抑制平衡系统的影响

目的通过观察针刺结合音乐疗法对焦虑模型大鼠海马谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)含量和二者比值的影响,探讨此方法的部分抗焦虑机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、音乐组和针刺音乐组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠均给予连续21 d不可预见性的刺激,同时针刺组、音乐组及针刺音乐组在每次刺激前1 h给予相应的针灸及音乐干预。实验结束后取各组大鼠的海马,采用高效液相色谱检测法分析各组样本中Glu和GABA含量。结果模型组大鼠海马Glu含量及Glu/GABA比值均明显高于空白组(P均<0.05),GABA含量明显低于空白组(P<0.05)。针刺组和针刺音乐组Glu含量及Glu/GABA比值均明显低于模型组(P均<0.05),针刺组、音乐组和针刺音乐组GABA含量均明显高于模型组(P均<0.05),针刺组和针刺音乐组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论针刺结合音乐疗法抗焦虑作用与其海马Glu/GABA平衡有关。

马桑内酯致痫大鼠海马区GABA和Glu在神经元和神经胶质内时空变化研究

目的观察马桑内酯致癫痫鼠脑海马内不同时间段兴奋性神经递质谷氨酸与抑制性神经递质γ-氨基丁酸在神经元与神经胶质之间的时空变化情况。方法采用免疫细胞化学方法对癫痫发生不同时间段的鼠脑海马区进行GABA和Glu的标记。结果癫痫发作前期及间歇期,海马区GABA和Glu在神经胶质内聚集明显,而癫痫发作期,GABA和Glu在神经元内聚集明显。结论癫痫发作过程中,GABA和Glu存在一个从神经胶质转移到神经元后再转移到神经胶质的过程,这个时空变化提示可以从阻断这种转移方面开辟癫痫治疗的新途径。

神经干细胞移植治疗癫痫海马区r-GABA和Glu的变化

目的研究神经干细胞移植对戊四氮慢性癫痫模型大鼠海马区r-氨基丁酸(r-GABA)和谷氨酸(Glu)及脑电图的变化。方法56只雄性大鼠选择雄性SD大鼠56只,腹腔注射生理盐水组8只,癫痫模型组分神经干细胞移植实验组24只,未移植对照组24只。然后3组中再分A,B,C,D4组。其中注射组生理盐水每组2只,实验组和对照组各6只。建立脑电电极。制作成四氮慢性癫痫模型,记录脑电图和高效液相色谱仪测定大脑海马组织GABA、Glu含量。结果移植组1周,2周GABA、Glu的变化不大,而到第4周后,GABA逐步升高,Glu逐步下降,第8周时GABA明显升高,Glu明显下降。未移植组GABA、Glu含量基本无变化,移植组对癫痫大鼠的脑电具有明显的抑制作用,移植组与未移植组比较P<0.05,组间有明显差异。结论神经干细胞移植可以干预癫痫大鼠海马区GABA、Glu的变化。

五味子宁神口服液对大鼠脑组织中GABA和Glu含量的影响

目的:测定五味子宁神口服液(WOL)对大鼠脑组织中神经递质γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)含量的影响,初步探讨WOL的镇静催眠作用机制。方法:采用全自动氨基酸分析仪测定GABA和Glu的含量变化。结果:WOL提高大鼠脑组织中GABA含量以及GABA/Glu的比值。结论:提高脑内GABA含量以及GABA/Glu比值可能是WOL镇静催眠作用的途径之一。

通络益智散对拟血管性痴呆大鼠脑组织中Glu和GABA影响的实验研究

目的:探讨通络益智散对拟血管性痴呆大鼠海马区兴奋性和抑制性氨基酸的影响。方法:选用改良的脑缺血再灌注配合腹腔注射硝普钠降压法复制血管性痴呆模型。将实验大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、尼莫地平组、通络益智散大剂量组、通络益智散小剂量组。给药3周后,取海马匀浆检测谷氨酸(G lu)含量,并观察海马区γ-氨基丁酸(GABA)的表达。结果:通络益智散可以显著降低拟血管性痴呆模型大鼠海马区G lu的含量、增强GABA的表达(P<0.01)。结论:通络益智散能够通过调节血管性痴呆大鼠海马区G lu和GABA的含量保护脑组织,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机制之一。

猫初级视皮层内Glu/GABA表达比率的衰老性变化(英文)

最近的一些研究结果显示,视皮层内抑制性递质系统作用减弱可能是导致老年性视觉功能衰退的重要因素。是否皮层内兴奋性递质系统亦伴随衰老而发生改变并影响皮层内神经兴奋与抑制的平衡尚不清楚。为此,利用Nissl染色和免疫组织化学染色方法以及Image-Pro Express图像分析软件对青、老年猫初级视皮层(17区)内各层神经元密度、兴奋性递质谷氨酸免疫反应阳性(Glu-immunoreactive,Glu-IR)神经元密度以及抑制性递质γ-氨基丁酸免疫反应阳性(γ-aminobutyric acid-immunoreactive,GABA-IR)神经元密度进行了统计分析。结果显示,青、老年猫初级视皮层各层神经元密度均没有明显的年龄性差异(P>0.05);与青年猫相比,老年猫初级视皮层Glu-IR、GABA-IR神经元密度均显著减少(P<0.01),而Glu-IR/GABA-IR神经元密度比率却显著增大(P<0.01)。结果提示,老年猫初级视皮层内兴奋性递质系统作用相对增强,而抑制性递质系统的作用相对减弱,导致皮层内兴奋?抑制平衡关系失调,这可能是引起老年个体视觉功能衰退的重要原因之一。

麻黄汤不同配伍对大鼠脑内Glu/GABA比值的影响

目的:研究麻黄汤不同配伍对大鼠额叶皮层中谷氨酸/γ-氨基丁酸(Glu/GABA)比值的影响。方法:采用HPLC法测定氨基酸类神经递质的量。结果:桂枝、杏仁、甘草均显著降低了大鼠额叶皮层中Glu/GABA比值(P=0.021,0.007,0.028),且桂枝与甘草(P=0.014)、杏仁与甘草(P=0.009)呈显著的一级交互作用。结论:麻黄汤不同配伍对大鼠额叶皮层中Glu/GABA比值的影响呈规律性变化。

电刺激丘脑底核对脑纹状体DA、Glu、GABA的影响

目的 探讨电刺激丘脑底核对大鼠纹状体多巴胺能神经元递质释放的影响。方法 以深部电刺激术 (Deepbrainstimulation ,DBS)刺激 6 -OHDA损伤大鼠后 ,应用高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)测定大鼠脑组织中的DA、Glu、GABA。结果 15 0Hz电刺激时 ,纹状体DA和GABA含量几乎达到正常对照组水平 ,与正常对照组差异无显著性 (10 .0 9± 1.4 7ng/mgvs 10 .6 5± 1.5 2ng/mg,P>0 .0 5 )。Glu的含量比较 ,在各种频率电刺激时 ,均显著低于正常组 ,但 15 0Hz电刺激组Glu含量较 5 0Hz、10 0Hz电刺激组有显著性升高 (2 .87± 0 .2 9μg/mgvs 2 .0 8±0 .2 2 μg/mg,2 .4 9± 0 .17μg /mg ,P <0 .0 1)。结论 DBS使纹状体多巴胺能神经元递质合成与分泌发生了改变。

迷走神经刺激对戊四氮癫痫大鼠海马区γ-GABA、Glu和脑电变化

目的观察VNS对正常大鼠和戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠的脑电图的影响,以及测定海马区GABA,GLU的变化。进一步探讨迷走神经刺激(VNS)的抗癫痫机制。方法随机分为对照组、刺激A组、刺激B1组、刺激B2组、刺激B3组、刺激C组,各10只。分别观察脑电图和测定海马GABA、GLU的变化。结果VNS可明显延长致病大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期(P<0.05),减轻癫痫发作的严重程度,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放,VNS对正常人鼠脑电图无影响。刺激各组海马GABA升高,GLU下降,组与组之间有明显差异P<0.05。结论VNS可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫痫。