化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid对胃癌BGC—823细胞生长抑制作用的实验研究

目的：研究化合物K_1(ent-kaur-16-en-19-oic acid)对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。方法：采用MTT法观察不同浓度化合物K_1对BGC-823胃癌细胞的生长抑制作用。结果：化合物K_1对BGC-823胃癌细胞增殖有明显的抑制作用。

miR-206通过靶向CDK14抑制雌激素诱导的ER-α36阳性胃癌BGC-823细胞的增殖和侵袭

目的:探讨miR-206对雌激素诱导的ER-α36阳性胃癌(gastric cancer,GC)细胞BGC-823增殖和侵袭的影响及其相关机制。方法:用不同浓度(1、10和100 pmol/L)的雌二醇(estradiol,E_(2))刺激ER-α36阳性BGC-823细胞后,用qPCR法检测miR-206表达水平,MTT法和Transwell实验分别检测细胞的增殖和侵袭能力,WB法检测细胞中CDK14的表达。将miR-206 mimic、miR-NC、pcDNA-CDK14、pcDNA-vector等转染ER-α36阳性BGC-823细胞,并给予100 pmol/L的E_(2)处理后,用MTT法和Transwell小室法分别检测细胞的增殖和侵袭能力,WB法检测细胞中CDK14的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-206与CDK14之间的靶向关系。结果:E_(2)能显著降低ER-α36阳性BGC-823细胞中miR-206表达水平(P<0.05或P<0.01)、增强细胞的增殖和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)、上调细胞中CDK14的表达水平(P<0.01)。过表达miR-206能显著降低E_(2)诱导的ER-α36阳性BGC-823细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.01)。miR-206通过直接结合CDK14 mRNA的3’-UTR发挥抑制作用,从而负向调节CDK14的表达,进而抑制ER-α阳性BGC-823细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.01)。结论:miR-206通过靶向CDK14从而抑制雌激素诱导的ER-α36阳性GC细胞的增殖和侵袭。

胃癌组织中高表达的miR-504通过TP53INP1调控胃癌细胞BGC-823的生物学行为

目的:探究微小RNA-504(miRNA-504)在胃癌(GC)组织中的表达水平及其对GC细胞生物学行为的调控机制。方法:收集2020年6月至2020年12月期间三亚中心医院外科收治的48例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qPCR检测组织中miR-504、肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1(tumor protein 53-induced nuclear protein 1,TP53INP1)mRNA的水平,WB法检测TP53INP1水平。体外培养人胃癌细胞BGC-823,分为对照组(正常培养的BGC-823细胞)、miR-504 mimic组、mimic-NC组、miR-504 inhibitor组、inhibitor-NC组、miR-504 inhibitor+si-NC组、miR-504 inhibitor+si-TP53INP1组,qPCR检测细胞中miR-504和TP53INP1 mRNA的表达,MTT法、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,WB法检测各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白(Cyclin D1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9)以及TP53INP1的表达。双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-504与TP53INP1 mRNA的靶向关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-504的表达显著升高(P<0.05),而TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),miR-504和TP53INP mRNA两者的表达呈负相关(P<0.01)。与对照组相比,miR-504 mimic组BGC-823细胞中miR-504的表达显著升高(P<0.05)、TP53INP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(均P<0.05),且细胞增殖率、划痕愈合率、侵袭入Transwell小室下层的细胞数量,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达均显著增加,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。转染miR-504 inhibitor能显著下调BGC-823中miR-504的表达、上调TP53INP1 mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖、迁移与侵袭能力而促进细胞凋亡(均P<0.05);而下调TP53INP1的表达可明显减弱miR-504下调对BGC-823细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P<0.01)。miR-504高表达能明显抑制野生型TP53INP1质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论:miR-504在胃癌组织中呈高表达,下调miR-504可抑制胃癌BGC-823细胞的恶性生物学行为而促进其凋亡,其作用机制可能与靶向调控TP53INP1的表达有关。

苗药铁筷子挥发油的化学成分分析及抑制BGC-823细胞增殖研究

目的:研究苗药铁筷子挥发油成分及挥发油抗肿瘤作用。方法:采用水蒸气蒸馏法提取铁筷子挥发油,利用GC-MS联用仪分析铁筷子挥发油的化学成分。CCK8法检测苗药铁筷子挥发油对BGC-823细胞增殖的抑制作用。结果:从苗药铁筷子挥发油中鉴定了33种化合物,共占挥发油的89.71%,苗药铁筷子挥发油中主要含有棕榈酸占总油量的19.99%、亚油酸占总油量的13.27%、油酸占总油量的10.99%。抗肿瘤活性表明苗药铁筷子挥发油对BGC-823细胞的增殖抑制作用,IC_(50)值为11.793μg/mL。结论:苗药铁筷子挥发油可抑制BGC-823细胞的增长。

β-1,6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶2在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨β-1,6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶2(GCNT2)基因在胃癌(GC)组织中的表达及其在GC发生、发展和诊断及预后中的作用。方法:利用TIMER、GEPIA2、Oncomine和UALCAN等数据库数据,以及2018年1月至2019年12月滨州医学院附属医院手术切除的25例GC患者的癌和配对癌旁组织标本,分析GCNT2基因在GC组织中的表达及其在GC诊断和预后中的价值,利用LinkedOmics、GSEA和ssGSEA分析GCNT2所涉及的主要信号通路及其与免疫浸润之间的相关性。将pc-GCNT2及其阴性对照质粒转染进胃癌SGC-7901和BGC-823细胞,用克隆形成实验和Transwell实验检测GCNT2对GC细胞增殖和侵袭的影响,WB法检测细胞中GCNT2、STAT3和PD-L1蛋白的表达水平。结果:GCNT2 mRNA在GC组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05或P<0.01),其表达水平与患者预后显著相关(P<0.05),其对GC诊断有较高的价值。GCNT2在GC组织中的甲基化状态显著高于癌旁组织,GCNT2基因参与的生物过程主要是参与细胞形态发生的成分、细胞间黏附、多细胞生物信号和突触传递等。单基因GSEA分析发现,GCNT2在GC中主要抑制IL-6/JAK/STAT3、IL-2/STAT5信号通路和炎症反应、α/γ干扰素响应与NF-κB表达等。GCNT2的表达与GC组织的免疫浸润具有显著相关性。过表达GCNT2可显著抑制GC细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.01),降低细胞中STAT3和PD-L1的表达水平(均P<0.01)。结论:GCNT2基因在GC组织中低表达,与GC的诊断及预后显著相关,其主要通过抑制IL-6/JAK/STAT3和免疫相关致癌信号通路而在GC的发生、发展中发挥重要的作用。