ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较

比较了水产品中氯霉素残留的ELISA和GICA检测方法。经测定,GICA检测限为1.000μg/kg。GICA对ELISA的阴性符合率为94.7%,阳性符合率为92.3%,总符合率为92.5%。结果表明:GICA方法操作简单、快速、特异性强、重复性好,适合水产品中氯霉素残留的现场筛选。

自制GICA试纸条检测样品中人血红蛋白的初步研究

目的 建立一种国产的简易快速 ,自测式胶体金免疫层析测试条 (gold immunochromatographyassay ,GICA)用于检测人血红蛋白 (人Hb)。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗人血红蛋白抗体 (抗人Hb抗体 ) ,制成免疫层析法试纸条。样品中人Hb抗原与试纸条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维膜移动 ,与硝酸纤维膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色沉淀线。结果 GICA试纸条仅与人Hb发生特异性反应 ,与牛、马、羊、猪等动物血清无交叉反应。检测人Hb参比品溶液 ,灵敏度可达 3 0ng ml,与进口商品试纸条符合率为 90 %。结论 GICA检测人Hb样品特异性强 ,灵敏性较高 ,简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,具有广泛应用价值。

大豆种传南方菜豆花叶病毒和烟草环斑病毒的GICA-RT-PCR检测

南方菜豆花叶病毒(south bean mosaic virus,SBMV)和烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,TRSV)是我国重要的进境检疫性有害生物,两种病毒均为种传病毒,可随大豆种子实现远距离传播。本研究以这两种病毒的大豆病种子为试材,先用胶体金免疫层析试纸条(GICA)检测,将检测完病毒后的胶体金免疫层析试纸条上的T线和C线剪下,再用RT-PCR的方法将T线和C线上捕获的病毒直接进行扩增,这种将血清学与分子生物学相结合起来所建立的GICA-RT-PCR检测方法,省去了烦琐的总RNA提取的环节,简化了病毒检测的步骤,提高了检测的灵敏度。

GICA-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒的新方法

菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物。为解决普通RT-PCR不能直接检测大豆病种子中该病毒的问题,将简便快速的胶体金免疫层析技术(GICA)和高灵敏度的普通RT-PCR检测技术有机地结合起来,建立了GICA-RT-PCR检测新方法。即先用GICA捕获病毒,将捕获的病毒直接进行RT-PCR扩增,简化了检测的步骤,提高了检测的灵敏度。结果表明:用该方法检测提纯病毒灵敏度达到0.01μg.mL-1、检测大豆病叶和病大豆种皮,灵敏度达到10-4,分别比GICA检测提高了20倍、10倍和100倍。GICA-RT-PCR可进一步确认GICA的结果。

ELISA、GICA与MEIA法检测新生儿TORCH-IgM抗体的比较

目的比较ELISA、GICA与MEIA法对新生儿TORCH-IgM抗体的检测效果。方法选择120例疑似TORCH感染的新生儿作为研究对象,分别采用ELISA、GICA与MEIA三种方法检测血清TORCH-IgM抗体,比较三种方法对新生儿TORCH-IgM抗体检测的阳性率、符合率、灵敏度以及特异性。结果以MEIA法为金标准,ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体的灵敏度和特异性比较,ELISA法检测中的RV-IgM、HSV-IgM以及CMV-IgM检测的灵敏度均高于GICA法(P<0.01),两组的TOX-IgM检测比较无显著性差异(P>0.05);ELISA法检测中的CMV-IgM检测的特异性高于GICA法(P<0.01);ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体阳性预测值和阴性预测值比较,ELISA法中CMV-IgM检测的阳性预测值和阴性预测值均高于GICA法(P<0.05),尤其是阴性预测值(P<0.01);与MEIA法检测总符合率均在90%以上。结论 ELISA法检测新生儿TORCH-IgM抗体,具有特异性强、敏感性高、可信度高、简单易行等优点,是一种比较可靠的新生儿TORCH感染筛查的检测方法。

GICA检测高致病性禽流感抗体方法的建立

〔目的〕 建立可快速、简便地检测微量禽流感的抗体的方法。〔方法〕 利用灭活的高致病性禽流感病毒H5N1建立禽流感病毒浓缩纯化样品体系,获得大量纯度较高的禽流感病毒(1:5 12 )。将2 .80mg/mL纯化病毒与一定大小的胶体金颗粒偶联,吸附在玻璃纤维上,制作的高致病性禽流感病毒抗体胶体金检测试纸条,用于高致病性禽流感定量(合格)检测。〔结果〕 显色反应良好,条带稳定,检测获得成功。〔结论〕 其反应特异性、敏感性、重复性良好,具备微量、快速、简便的特点,适合于进出境现场检疫和疫情普查。

GICA法检测HBsAg的探讨

目的对3种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测HBsAg的性能、结果等技术参数进行初步探讨,为各实验室的选用提供参考.方法采用GICA法和酶联免疫吸附法(ELISA)对定值的HBsAg质控品和1 322份血清标本同时测定,并结合有关实验,对3种GICA试条的敏感性、特异性、渗透性、固相膜均匀性等结果进行初步评价.结果 3种GICA试条对HBsAg的最小检出量为1～5ng/ml;与ELISA法比较,检出率为97.37%～99.57%,一般不出现假阳性,未发现前带反应.结论 GICA适用于急诊检验,其敏感性低于ELISA法,成本高;特殊情况下,还必须与ELISA法并用,实行双检.

用RBPT、SAT及GICA诊断布氏杆菌病的效果对比

目的 :比较用RBPT(虎红平板凝集试验)、SAT(布病试管凝集试验)及GICA(胶体金法)诊断布氏杆菌病的临床效果。方法 :我院分别使用RBPT、SAT及GICA对400例从事养殖业、皮毛贩卖行业受检者的血清标本进行布氏杆菌病的检测。将进行实验室综合检查的结果作为最终的诊断结果,比较用RBPT、SAT及GICA诊断布氏杆菌病的阳性率、敏感性及特异性。结果 :检测的结果显示,对这些受检者的血清标本进行RBPT、SAT及GICA检测的阳性率均低于对其血清标本进行实验室综合检查的结果,但用这三种检测方法对这些受检者的血清标本进行布氏杆菌病检测的阳性率相比差异均不具有统计学意义(P>0.05)。用RBPT、SAT及GICA诊断布氏杆菌病的敏感性、特异性相比差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论 :在布氏杆菌病的临床诊断中,使用RBPT、SAT及GICA进行检测均存在一定的局限性。临床上应联用这三种检测方法对此病进行诊断,以提高其临床诊断的准确性。

RIA与GICA测定尿HCG的结果比较

目的 :对胶体金免疫层析试验与放射免疫分析随机尿HCG的结果进行比较分析。方法 :采用胶体金免疫层析测定试条和放射免疫分析法对 1 4 8例育龄妇女随机尿HCG进行测定。结果 :胶体金免疫层析试条对随机尿HCG的灵敏度为 1 2 0 0mIU/ml,检测范围在 1 2 0～ 42 7570mIU/ml,当尿HCG浓度大于 42 7570mIU/ml时 ,该试条出现带现象 ,放射免疫分析法的灵敏度为 2 5mIU/ml,没有带现象。结论 :胶体金免疫层析试条具有操作简单、快速等优点 ,与放射免疫分析法相比 ,存在灵敏度低、带现象和不能定量等问题 ,在日常应用中应加以注意。

GICA法检测乙肝病毒标志物“两对半”的结果分析

目的 用ELISA法作参照，对胶体金免疫层析测定(GICA)试纸条检测乙肝标志物表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)俗称“两对半”的性能、结果等技术参数进行了分析比较，为GICA法的临床应用提供参考。方法 从ELISA法测定“两对半”的血清标本中选出40例不同反应模式的标本及卫生部临介值血清，用GICA试纸条进行测定，对其反应的特异性，敏感性，符合度及试纸的反应阳性强度进行观察比较分析。结果 与ELISA法比较，GICA法测定血清标本的总特异性为93．8％；总灵敏度为94．4％：总符合率为94％。用GIcA法对卫生部临介值血清HBsAg2ng／ml、HBsAb30mlu／ml、HBcAb2ncu／m检出结果均为弱阳性，HBeAg2ncu／ml为阳性，HBeAb4ncu／ml为阴性，HBsAglng／ml为阴性．而将五项的原有浓度稀释一倍时均为阴性。两种方法检测各种模式符合率为80％。结论 GICA法用于两对半检测其特异性、敏感度、及符合率均达到90％以上，但灵敏度总体低于ELISA法，对于献血员的筛选有漏检的可能。在检测下限的标本有假阴性和假阳性出现，其试剂质量还有待于进一步提高和规范。但GICA法具有快速、简便、特异、不需特殊设备、适用于急诊病人检测的要求及可以单份测定等优点，其应用前景十分广阔。

GICA法检测急诊病毒三项的应用评价

目的:评价胶体金免疫层析试验(GICA)检测急诊病毒三项即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)、人类免疫缺陷病毒抗体(Anti-HIV1/2)的临床应用。方法:用GICA法与ELISA法检测的998份血清中急诊病毒三项,对结果进行比较分析并加以评价。结果:两种方法检测急诊病毒三项的阴性率差异无统计学意义(P】0.05),阴性符合率分别为99.78%、99.90%、100%。结论:GICA法检测急诊病毒三项操作简便、快速且准确度高,可应用于门诊及急诊手术前患者经血液传播疾病的快速筛查,但临床最终应采用GICA法联合ELISA法的检测模式报告结果。

GICA与EIA法检测血清HBsAg结果比较

目的胶体金免疫层析(GICA)与酶联免疫(EIA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果的分析。方法采用GICA和EIA法,对铁路系统体检人群3116份血清标本同时进行检测并分析。结果GICAA试条法检出111例阳性者,用EIA法检测全部为阳性;而用EIA法检出113例阳性同时用GICA法检测有2例阴性。结论GICA法与EIA法检测HBsAg比较,GICA法方法简便,速度快,准确率高,特别适用于大批量体检及献血员的HBsAg筛选实验。

胶体金免疫层析法高通量测定动物肌肉组织中多兽药残留

[目的]本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法]动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取,并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体与硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果]本试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素,磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35μg·kg^(-1),灵敏度≥97%,假阳性率≤2%,假阴性率≤3%,且与现有标准方法检测结果一致。[结论]该方法操作简便,灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

胶体金免疫层析法同步快速测定畜禽肉中3种兽药残留

该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、吐温-20添加量、衍生化试剂浓度和冻干保护剂种类等关键因素,并对检测卡的灵敏度、特异性和稳定性进行检测。结果显示,所建立的免疫层析方法可在35 min内检出猪肉和鸡肉中呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物和氯霉素药物,检出限分别为0.5、0.5、0.1μg/kg,灵敏度≥98%,假阳性率≤2%,假阴性率≤2%,稳定性可达到1年,且与现有标准方法检测结果一致。该方法操作简便、特异性强、灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

利用GICA-PCR快速检测瓜类果斑病菌

瓜类果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)是瓜类作物上重要的病原细菌,为我国进境植物检疫性有害生物。胶体金免疫层析试纸条方便快捷,应用广泛。该方法使用不当会出现假阳性问题,仅适用于病原菌的初筛检测。本研究将Aac胶体金免疫层析方法(GICA)与PCR技术相结合,建立了GICA-PCR检测方法。检测结果表明,该方法在蛋白与核酸2个层面上从发病西瓜叶片上检测到瓜类果斑病菌,有效解决了试纸条检测的假阳性问题,提高了瓜类果斑病菌检测的准确性,值得推广应用。

梅毒过筛检测方法ELISA、GICA、TRUST比较

目的通过三种方法的比较,选择理想的试验方法,防止漏检、误检,提高检测的准确度。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法(GICA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)对93例疑似梅毒患者进行检测。结果酶联免疫吸附试验(ELISA)为96.4%,胶体金免疫层析法为92.7%,甲苯胺红不加热血清试验为81.8%。结论甲苯胺红不加热血清试验的影响因素较多,敏感性、特异性相对较差,可以与TPHA同时检测对治疗前后有一定的诊断意义。大批量检测或筛查建议使用酶联免疫吸附试验,急诊输血或手术检测建议使用胶体金免疫层析法。