GLP模型在金属矿山地质灾害评估中的应用

金属矿山开采对周围环境有影响和破坏作用,有效地进行评估便于找出最大的影响因素,从而针对性地进行治理。本文通过运用GLP模型对矿区开采后形成的灾害进行等级确定,以便根据灾害等级采取合理的治理措施。将模型对具体金属矿山地质灾害问题进行应用取得了与实际情况较为吻合的效果。

多肽BR0336在小鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝炎模型上的初步药效学研究

目的研究多肽BR0336注射液在STZ-HFD诱导的雄性C57BL/6小鼠2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型上的药效学。方法新生雄性小鼠通过链脲佐菌素诱导建立T2DM模型,从1个月龄起开始给予高脂饲料喂养,根据空腹血糖和体重随机分为模型组、替西帕肽(TZP)的0.15 mg·kg^(-1)阳性对照组和BR0336的低(0.05 mg·kg^(-1))、中(0.15 mg·kg^(-1))、高(0.5 mg·kg^(-1))剂量组,通过与正常对照组比较,考察小鼠体重、摄食量、空腹血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、肝功能和血脂情况,并进行肝脏组织病理学NAS和纤维化分析。结果BR0336各剂量组能显著降低模型小鼠的体重、摄食量、空腹血糖、胰岛素和HbA1c%,减低肝脏NAS评分和纤维化率,并对模型动物的肝功能和血脂异常具有良好保护作用。与阳性对照组相比,等剂量BR0336在动物的摄食量、胰岛素、肝功能和血脂生化方面表现更优,能更有效延缓NASH和纤维化进程。结论BR0336对STZ-HFD诱导的T2DM合并NASH模型小鼠在高血糖和脂质代谢紊乱方面具有一定治疗作用。

以GLP-1受体为靶点的药物筛选模型的建立及功能鉴定

目的以GLP-1受体为靶点,建立GLP-1类似物活性检测的细胞模型,为GLP-1类似物以及GLP-1受体激动剂的药物筛选提供一种简单可靠的评价方法。方法首先将人源GLP-1受体基因插入pEGFP-N3,构建真核表达载体pEGFP-GLP-1R,并转染至HEK293A细胞中,经G418压力筛选后获得稳定表达GLP-1R-GFP的293A细胞株,然后通过GFP荧光信号和Western blot检测GLP-1R-GFP融合蛋白在该细胞中的表达与分布;最后利用GLP-1类似物利拉鲁肽刺激细胞,均相时间分辨荧光法检测细胞内cAMP含量变化。结果成功构建了GLP-1R-GFP-293A稳转细胞株,GLP-1RGFP蛋白主要分布在细胞膜表面,该细胞对GLP-1类似物利拉鲁肽具有高灵敏度和产生cAMP的特异性反应。结论利用所构建的细胞模型,可对小分子和GLP-1类似物进行体外活性分析,为筛选GLP-1受体激动剂奠定了模型基础。

GLP-1RA类药物的市场分析

目的:对新型注射类降糖药GLP-1RA类药物进行市场分析,以求GLP-1RA类药物可以充分发挥市场潜力,提升市场影响力。方法:运用灰色系统理论均值GM(1,1)模型对GLP-1RA类药物未来5年的全球销售额进行预测,分析其在目前市场中存在的问题,并提出相关建议。结果:未来5年GLP-1RA类药物在全球市场的销售额将一直呈上升趋势,预计到2024年,可达到34849.34百万美元。结论:伴随着疗效以及产品设计的提升,加以精准的市场策略,GLP-1RA类药物未来必将成为糖尿病药物治疗领域的重要产品。

GLP实验室QA项目检查流程信息化建模

QA检查在GLP实验室运行中作为一个重要的环节,拥有一套独立而又严格的管理体系,为了确保QA检查高效有序运行,如何实现QA检查的信息化成为新的问题,本文结合QA检查体系的特殊性,以QA项目检查为例,通过创建系统的用例模型、静态模型和动态模型,对系统的需求和内容进行了构建,提供了一套针对QA项目检查的信息化模型。

GLP-1R激动剂的细胞筛选模型的建立

目的构建靶向GLP-1R的高通量筛选模型。方法构建过表达GLP-1R的重组质粒和响应GLP-1信号通路的报告载体,共转染到HEK293细胞中,筛选得到稳定转染的单克隆细胞株,并用阳性药进行模型验证。结果成功构建了表达GLP-1R的重组质粒pcDNA3.1(+)-HuGLP-1R和响应GLP-1信号通路的报告载体PGL4.22-CRE-vip-GFP,共转染到HEK293细胞,筛选得到稳定转染细胞株CG-HEK293,经GLP-1刺激后,确定GFP的最佳表达时间为8 h,经过不同浓度的GLP-1刺激后,能够剂量依赖性地激活GFP的表达。结论构建了靶向GLP-1R的高通量筛选模型,该模型能够直观、稳定、高通量的筛选靶向GLP-1R的小分子或者GLP-1类似物,为长效的GLP-1类似物的研究和开发奠定了基础。

基于GLP准则的蚯蚓生态毒理试验UML建模研究

对于运行GLP(Good Laboratory Practice良好实验室规范)管理体系的实验室来说,对蚯蚓生态毒理试验有着严格的实验过程管理。本文通过UML建模语言,创建蚯蚓试验的用例模型,并使用静态模型创建系统内容,然后通过动态模型对系统的内容进行补充和说明,最后通过部署模型完成系统的部署工作,从而提供了一套针对蚯蚓生态毒理试验过程管理的模型。

胰高血糖素样肽-1受体激动剂减轻小鼠体质量的作用机制研究

目的探讨胰高血糖素样多肽-1受体激动剂(GLP-1Ra)减轻小鼠体质量的作用机制。方法正常对照(N)组8只小鼠以普通饲料喂养,高脂饮食(HF)组32只以高脂饲料喂养,造模成功后的小鼠分为单纯HF组(HF)组、处死前寒冷刺激(CS)组和200、400μg/kg GLP-1 Ra干预[Lira(200)、Lira(400)]组,喂养8周。观察各组小鼠的体质量、血糖及三酰苷油(TG)的水平变化。HE染色观察小鼠不同部位白色脂肪(WAT)形态学改变;免疫组织荧光染色、Real-time PCR方法观察利拉鲁肽对棕色脂肪(BAT)特异因子UCP-1表达的影响;Western blot方法观察UCP-1表达的调节因子PPAR-γ共激活因子1α(PGC-1α)表达的影响。结果 Lira(200)组和Lira(400)组平均体质量低于HF组(P<0.05)。HF组较N组血糖和TG水平均升高,Lira(200)组和Lira(400)组血糖和TG水平较HF组降低(P<0.05)。Lira(200)组及Lira(400)组肾周与腹股沟皮下脂肪组织部分转变为含有微小脂滴的棕色样脂肪细胞,UCP-1蛋白和基因、PGC-1α蛋白表达水平较HF组均有不同程度的增加,Lira(400)组均强于Lira(200)组(P<0.05)。结论 GLP-1Ra能明显减轻小鼠体质量,其机制可能与增加UCP-1表达,促进白色脂肪发生棕色样变有关。

土地系统计量分析模型与方法

建立了土地系统计量分析模型体系,介绍了定量监测与分析土地系统动态的探测模型、表征模型、驱动机理模型、过程模拟模型和效应评价模型,阐述了各个模型的方法与技术,展望了土地系统计量分析模型的发展方向,总结提出的土地系统计量分析模型为国家相关部门预测区域土地系统动态提供了有效工具。

长效促胰岛素降糖酵母的构建及其对糖尿病模型小鼠的治疗效果

益生菌生物药物是指通过口服表达药用多肽(蛋白)的重组益生菌活细胞达到治疗疾病的新型口服给药系统。为了构建一种能有效防治2型糖尿病的酵母生物药物,文章首先构建了酿酒酵母(S.cerevisiae)整合型表达载体p NK1-PGK,并且通过绿色荧光蛋白(GFP)证明其表达功能正常,利用该载体将10?GLP-1(Glucagon-like peptide-1)基因转化到酿酒酵母INVSc1中,通过营养缺陷型和Western blotting成功筛选出表达10?GLP-1的长效促胰岛素降糖酵母(Long-acting GLP-1 hypoglycemic yeast,LHY)。该酵母生长迅速,外源基因10?GLP-1表达稳定,表达量达到1.56 mg/g细胞湿重。通过链脲佐菌素和高脂高糖饮食联合诱导的方法构建了2型糖尿病小鼠模型,用LHY对其进行口服灌胃治疗,证明LHY具有较好疗效,明显降低血糖水平。

以GLP-1受体为靶点的药物筛选细胞模型的建立和应用

建立以GLP-1信号通路为靶点的药物筛选细胞模型,用于筛选GLP-1受体激动剂类的新型抗糖尿病药物。首先构建GLP-1受体信号通路调控的特异应答元件(RIP-CRE)多拷贝序列及报告基因E-GFP的重组载体。将该载体转染胰岛NIT-1细胞株,以检测转染细胞对GLP类似物的反应性和特异性,并通过稳定转染和单克隆培养,获得对GLP-1类似物特异应答的单克隆细胞株。该细胞模型在GLP-1类似物Exendin4刺激下激活表达报告基因,激活作用可以被GLP-1受体阻断剂Exendin9-39完全阻断,且激活途径非cAMP-PKA依赖,具有GLP-1受体特异性。构建该细胞模型,可以对肽类或非肽类GLP-1类似物进行高通量筛选。

GLP-1类似物活性检测细胞模型的建立及其功能分析

为探索GLP-1类似物活性检测模型在活性检测过程中影响稳定性与重复性的因素,该文以中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞为模型细胞,构建真核表达载体p EGFP-N1/h GLP-1R-EGFP,并将其转染至CHO中,经过G418抗性筛选和流式细胞仪分选富集后有限稀释,筛选获得一株稳定高表达的单克隆细胞株。倒置荧光显微镜分析、流式细胞术分析以及RT-PCR实验结果显示,此检测模型转录和翻译了h GLP-1R-EGFP基因,并且表达的受体蛋白质位于细胞膜侧。以利拉鲁肽和艾塞那肽作为模型药物进行活性检测分析,结果显示,该检测模型具有极高的药物灵敏度,不同代数模型细胞测活相对稳定。该文还进一步探索了影响GLP-1类似物EC50测量值的因素,主要包括模型细胞受体表达量、胎牛血清以及其单一组分BSA。综上所述,构建的细胞模型在检测GLP-1类似物活性中,具有较好的稳定性和可重复性,为GLP-1类似物的药物筛选与活性评价提供方便可靠的模型基础。