胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起的胰岛β细胞内游离钙变化

目的探讨胰高糖素样肽（ＧＬＰ）－１（７－３６）ＮＨ_２促胰岛素分泌的机制。方法以 Ｆｌｕｏ－３为探针，用粘附式细胞仪研究 ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２对培养的新生大鼠胰岛β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）浓度的作用。结果在 ２．８ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－ １（７－ ３６）ＮＨ_２不能使胰岛 β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高，而优降糖使β细胞内游离 Ｃａ^（２＋）升高明显。在 １６．７ ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时，ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛β细胞内Ｃａ^（２＋）升高明显，ＥＧＴＡ和硝苯吡啶能完全阻滞ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２引起的Ｃａ^（２＋）升高。结论ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素释放作用，细胞外Ｃａ^（２＋）通过电压依赖性钙通道内流对其引起的β细胞内游离Ｃａ^（２＋）升高起重要作用。

胰高糖素样肽-1(7-36)NH_2引起胰岛β细胞cAMP的变化

目的 探讨GLP -1(7-36 )NH2 促胰岛素分泌的细胞内机制。方法 用放免法检测GLP -1(7-36 )NH2 在不同葡萄糖浓度下对培养的新生大鼠胰岛 β细胞的胰岛素分泌量和cAMP含量的变化。 结果 在 2 .8mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使 β细胞胰岛素分泌和cAMP含量无明显增加 ;优降糖能使胰岛素分泌增加 ,而cAMP含量无明显变化。在 5 .6 ,11.2和 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,GLP -1(7-36 )NH2 使胰岛素分泌和cAMP含量均明显增加。在 16 .7mmol/L葡萄糖时 ,加入EGTA或硝苯吡啶后 ,GLP -1(7-36 )NH2 不能引起胰岛素分泌 ,但仍使cAMP含量增加。结论 GLP -1(7-36 )NH2 具有葡萄糖浓度依赖的刺激cAMP生成的作用 。

胰高血糖素样肽-1(7-36)NH_2的促胰岛素分泌作用和胞内cAMP浓度改变

目的:观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)(7-36)NH2的促胰岛素分泌作用,并进一步探讨GLP-1(7-36)NH2促进胰岛素分泌的相关机制。方法:通过放射免疫分析的方法观察GLP-1(7-36)NH2的促胰岛素效应和GLP-1(7-36)NH2对胞内cAMP浓度的影响。结果:随着GLP-1(7-36)NH2浓度的增加,胰岛素分泌逐渐增加;CAMP类似物8-溴环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)增加了胰岛素分泌,GLP-1(7-36)NH2则增加了胞内第二信使cAMP的浓度。结论:GLP-1(7-36)NH2可以促进胰岛素分泌,在一定范围内呈剂量依赖性,其机制与GLP-1(7-36)NH2增加了胞内第二信使cAMP有关。

胰升糖素样肽GLP－1（7－36）NH_2对血糖和血糖调节激素的影响

采用ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２外周灌流及脑室注射到禁食大鼠的方法，观察ＧＬＰ－１（７－６）ＮＨ２对大鼠血糖及血糖调节激素的影响。结果表明：静脉输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使糖耐量曲线明显低平，血糖浓度恢复实验前水平比对照组提前。一次性推注葡萄糖后，外周输入ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使Ｃ肽特别是胰岛素浓度明显增高，而不影响胰升糖素的水平。脑室注射ＧＬＰ－１（７３６）ＮＨ２对血糖无明显影响。本实验表明ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在一次性推注葡萄糖后是通过刺激胰岛β细胞的分泌来调节血糖水平的。ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２可能在糖尿病的致病机理中起重要作用。本研究为研制ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２高活性类似物奠定了基础。

高血糖素样肽1(9-36)NH_2的生理学功能

许多研究表明,高血糖素样肽1(9-36)NH2〔GLP-1(9-36)NH2〕是GLP-1(7-36)NH2被二肽基肽酶快速降解后的主要体内存在形式,具有许多的生理学功能。GLP-1(9-36)NH2中除了具有非依赖于胃排空和胰岛素分泌所致的降低餐后血糖的作用外,GLP-1(9-36)NH2更多的是直接对外周器官的保护作用,包括快速逆转心力衰竭、改善舒张末期压、快速刺激心肌葡萄糖摄取及减少缺血再灌注对心脏的损伤;以及它具有不依赖于GLP-1受体的血管系统的抗氧化作用和抑制肝脏糖原异生、促进肝糖原的合成。因此,可以说明GLP-1(9-36)NH2在体内是一个具有重要生理功能的活性肽,而不仅仅是GLP-1(7-36)NH2的代谢产物。GLP-1(9-36)NH2对糖尿病及其包括胰岛素抵抗、心血管疾病、肝脏脂肪变性等并发症的治疗将会起到非常重要的作用。

GLP-1（7-36）对高糖状态下人脐静脉内皮细胞活性的影响及其机制的初步研究

目的：研究GLP-1（7-36）对高糖培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）活性的影响及相关机制.方法：正糖（5mmol/l）和高糖（33mmol/l）环境下培养的HUVECs分别加入不同浓度的GLP-1（7-36）（0nmol/l,0.3nmol/l,3nmol/l,30nmol/l）并干预不同时间（24h,48h,72h）后行MTT检测细胞活力.选择某个合适的GLP-1（7-36）干预浓度和时间后继续行一氧化氮（NO）浓度检测.结果：①高糖培养48h、72h分别较正糖培养48h、72h细胞活力下降（p〈0.05）,②高糖培养环境下经3 nmol/l、30nmol/l浓度 GLP-1（7-36）分别干预48h、72h后较高糖对照组细胞活力显著增加（p〈0.01）,而正常糖培养环境下分别加入不同浓度GLP-1（7-36）干预不同时间后均与正糖对照组细胞活力无差异,③高糖培养48h较正糖培养下细胞培养上清液中NO的量下降,高糖组加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO的量增加,正糖组中加入3nmol/l的GLP-1（7-36）后NO产量不变.结论：GLP-1（7-36）可以改善高糖引起的HUVECs活力的下降,且该保护作用与NO相关.

ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴及其基因学研究进展

肾素-血管紧张素系统(RAS)在心血管、肾脏功能活动调节中起着重要作用,在维持血压稳态、水盐平衡及局部组织器官的正常功能等方面具有重要的作用.……

CGRP对GLP-1和胰岛素分泌的影响

目的 :进一步探讨类胰高血糖素肽 1(GLP 1)的分泌机制和生理意义。方法 :应用三种不同浓度的降钙素基因相关肽 (CGRP)进行实验 ,通过放射免疫分析方法检测CGRP对GLP 1和胰岛素分泌的影响。结果 :无论外源性葡萄糖是否存在 ,低浓度组和中浓度组CGRP于各实验时间对GLP 1、胰岛素分泌均无影响 ,P >0 .0 5;而高浓度组CGRP均刺激GLP 1、胰岛素的分泌 ,并随CGRP处理时间的延长 ,GLP 1(7～ 3 6)酰胺、胰岛素血浆水平呈逐渐增加趋势 ,并以 90min水平最高 ,与对照组相比差异存在显著性 ,P <0 .0 1。结论 :CGRP对胰岛素刺激可能是全部或部分通过GLP 1途径发挥作用 ;低、中浓度的CGRP不能影响GLP 1和胰岛素分泌 ,高浓度的CGRP能刺激GLP

脑室给予胰升糖素样肽GLP－1（7－36）对大鼠血糖及血糖调节激素的影响

采用给禁食大鼠脑室灌注溶于不同溶剂中的ＧＬＰ－１（７－３６）的方法，观察ＧＬＰ－１在中枢对大鼠血糖及血糖调节激素浓度的影响。结果表明：脑室灌注溶于生理盐水的ＧＬＰ－１与单纯灌注生理盐水相比，血糖无明显变化，但１小时后，血中胰岛素、胰升糖素浓度均明显降低；脑室灌注溶于３０％葡萄糖的ＧＬＰ－１与单纯灌注３０％葡萄糖相比，血糖明显升高，在３０’、４５’、６０’有显著性差异，血中胰岛素浓度明显低于对照组，胰升糖素浓度无变化。这些实验说明ＧＬＰ－１参与了中枢神经系统对胰岛分泌激素功能的调节。

胰高血糖素样肽1(GLP-1)对心血管疾病治疗的研究进展

胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是肠道L细胞分泌的一种由30个氨基酸组成的多肽,具有促进胰岛素分泌,抑制胰高血糖素分泌和刺激胰岛β细胞增殖等生物学作用。GLP-1在体内主要以GLP-1(7-36a)的形式存在。GLP-1(7-36a)的半衰期很短(1～2 min),可被二肽基肽酶4(diaminopeptidyl peptidase-4,DPP4)迅速降解为GLP-1(9-36a),因此GLP-1(9-36a)是GLP-1在循环中的主要存在形式。GLP-1不仅具有调控血糖和能量代谢的作用,还有保护心肌细胞、改善心脏功能和舒张血管等作用,直接或间接发挥心血管保护效应。心血管疾病是2型糖尿病的常见并发症和首要死因。目前基于GLP-1的2型糖尿病药物研发主要有两个方向:可以抵抗DPP4降解的GLP-1受体(GLP-1R)激动剂和DPP4抑制剂。虽然,这两种方法均可延长内源性GLP-1的作用,但显然未兼顾GLP-1(9-36a)对心脏的保护效应。本文通过总结GLP-1(7-36a)及GLP-1(9-36a)在心血管效应方面的异同及其生理学研究进展,探讨GLP-1应用于心血管疾病治疗的新策略。

注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)与二甲双胍合用治疗2型糖尿病的临床研究

目的探讨注射用重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)〔rhGLP-1(7-36)〕与二甲双胍合用治疗2型糖尿病(T2DM)的临床效果。方法采取随机、双盲、安慰剂对照的试验设计,36例T2DM患者在应用二甲双胍治疗的基础上随机分入用药组与安慰剂组,分别给予皮下注射rhGLP-1(7-36)(0.2 mg)及安慰剂(甘露醇,2.5 mg)治疗12周;观察基线及12周后用药组与安慰剂组的糖化血红蛋白(HbA1C)、空腹血糖(FPG)及胰岛素水平(FINS)、餐后2 h静脉血糖(2 h PG)及胰岛素水平(2 h INS)、血脂、血压、体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素分泌指数(HOMA-IS)等指标的变化,同时记录低血糖事件及不良反应的发生情况。结果在应用二甲双胍治疗的基础上,用药组的T2DM患者在给予rhGLP-1(7-36)治疗12周后,HbA1C、FPG、2 h PG值以及体质量、BMI均比基线时有所降低,其差异具有统计学意义(P<0.05),低血糖发生率为2.8%。结论 rhGLP-1(7-36)联合二甲双胍治疗T2DM有效并且低血糖发生率低,可成为治疗新的选择。

重组人胰高血糖素类多肽1(7-36)在2型糖尿病患者中的药动学研究

目的:研究重组胰高血糖素类多肽1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]在2型糖尿病患者单次和多次给药的药动学特征。方法:将轻型2型糖尿病患者16例,随机分为0.1、0.2mg剂量组,每组8例,试验前1天给予同体积生理盐水,第1～5天每日3餐前5min腹部皮下注射rhGLP-1(7-36)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定给药前1天及给药第1、5天各时间点(给药前0min及给药后5、10、20、30、40、50、60、70、90、120min)rhGLP-1(7-36)的血药浓度以及第2～4天谷峰浓度。应用DAS2.1.1软件计算药动学参数,SPSS13.0软件进行统计分析。结果:两组首次给药药动学参数分别为:tmax(22.5±11.65)、(17.50±7.07)min,t1/2z(15.78±6.82)、(12.12±5.52)min,cmax(142.69±96.64)、(407.29±287.48)ng/L,AUC0-120min(3783.64±2177.03)、(9034.88±4262.92)ng.min/L,MRT0-120min(30.69±6.32)、(26.44±6.02)min;2组末次给药药动学参数分别为:tmax(26.25±7.44)、(16.25±5.18)min,t1/2z(20.72±13.44)、(12.97±6.46)min,cmax(118.05±38.39)、(361.11±217.81)ng/L,AUC0-120min(3321.91±993.47)、(9514.97±5077.89)ng.min/L,MRT0-120min(30.34±4.81)、(24.29±4.52)min;多次给药的蓄积指数分别为(0.96±0.32)、(0.88±0.43)。两组间首次给药的药动学参数AUC0-120min、AUC0-∞、cmax比较差异有统计学意义,在0.1～0.2mg剂量范围内呈剂量依赖性;两组间末次给药各药动学参数比较,差异均无统计学意义;两组内首末次给药的药动学参数比较差异均无统计学意义。结论:2型糖尿病患者腹部皮下单剂量注射rhGLP-1(7-36)后,在0.1～0.2mg剂量范围内符合线性药动学过程;多次给药不会引起药动学参数的改变,体内无蓄积。

新生SD大鼠岛源性胰岛祖细胞的分离培养与诱导分化

目的:分离培养新生大鼠岛源性胰岛祖细胞,观察GLP-1(7-36)NH2诱导其向成熟细胞分化作用。方法:分离与纯化胰岛,在含20μg/L EGF和20μg/L bFGF的RPMI1640培养基中分离和扩增胰岛祖细胞,用20nmol/LGLP-1(7-36)NH2诱导分化。用原位杂交、免疫细胞化学染色、二硫腙(DTZ)染色和放射免疫分析等方法对的胰岛祖细胞分化前后细胞特征进行初步鉴定。结果:胰岛祖细胞表达Nestin,不表达PDX-1、Insulin mRNA、Insulin、So-matostatin。以GLP-1(7-36)NH2诱导分化后,部分细胞表达PDX-1、胰岛素mRNA、胰岛素、生长抑素,胰岛样细胞团(ICCs)形成,其周边细胞DTZ着色。分化3周后培养基中胰岛素释放明显增加。结论:在新生SD大鼠胰岛存在有一类胰岛祖细胞,可以被分离并在体外不断扩增。GLP-1(7-36)NH2可以诱导胰岛祖细胞形成有胰岛素分泌功能的胰岛样细胞团。