铁死亡相关基因GLS2在泛癌中的预后及免疫价值

目的基于生物信息学方法评估铁死亡相关基因GLS2在泛癌中对预后及免疫的相关作用。方法采用癌症基因组图谱(TCGA)、GTEx、癌症细胞系百科全书(CCLE)及国际癌症基因组联盟(ICGC)等在线数据库进行GLS2基因泛癌分析,从基因表达、基因突变、生存分析、免疫浸润、免疫检查点相关基因和TMB及MSI等多个方面挖掘GLS2基因在不同肿瘤中的作用。结果GLS2在大多数癌组织与癌旁组织的表达具有显著差异,并且该表达与这些癌症的预后相关。在多种癌症中,GLS2的表达与免疫细胞浸润之间存在正相关关系,并与免疫检查点相关基因有关。GLS2还与TMB、MSI和甲基化呈正相关,其表达与可能的治疗反应具有一定关系。结论通过对铁死亡相关基因GLS2的泛癌分析表明,GLS2的表达可能作为肾透明细胞癌、肾上腺皮质癌、肺腺癌、胰腺癌诊断及预后的重要标志物。

新一代梅赛德斯-迈巴赫GLS SUV

售价:183.3万~248.8万元舒适豪华新境界新一代迈巴赫GLS 600礼乐版搭载4.0L V8发动机,带来410千瓦(557马力)功率和770牛·米扭矩的澎湃动力;新一代迈巴赫GLS 480则装备3.0L直列六缸发动机,提供280 kW(381马力)功率和500 N·m扭矩。两款车型均配备48伏ISG智能电机系统,标配9速自动变速器,兼具高能效和平顺舒适性。智能适时四驱系统,配合带有自适应减振系统增强版的空气悬挂系统以及可选的智能魔术车身控制系统。

用于超精密抛光机床的Spline+GLS定位误差补偿模型

针对三次样条插值定位误差补偿模型难达到超精密抛光机床大行程轴(1470 mm)的定位误差补偿精度要求问题,提出Spline+GLS定位误差补偿模型。首先,使用XL-80激光干涉仪测量超精密抛光机床直线电机轴的定位误差,建立三次样条插值定位误差补偿模型进行初补偿;然后,对补偿后的定位误差再次测量并建立最小二乘拟合定位误差补偿模型;最后,将两种定位误差补偿模型相连构成Spline+GLS定位误差补偿模型。在超精密抛光机床上进行补偿实验,结果表明,Spline+GLS定位误差补偿模型补偿后的最大定位偏差值较三次样条插值定位误差补偿模型下降约61.62%,且定位误差由86.12μm降低到0.5μm,满足超精密抛光机床的定位精度需求。

GLS1通过激活Nrf2/HO-1轴抑制过氧化氢诱导的ARPE-19细胞氧化应激、自噬与凋亡

目的探究GLS1对过氧化氢诱导的ARPE-19细胞氧化应激、自噬与凋亡的影响及机制。方法ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+Vector组、H_(2)O_(2)+GLS1组,对照组细胞不做任何处理,H_(2)O_(2)组细胞用200μmol/L H_(2)O_(2)诱导48h,H_(2)O_(2)+Vector组和H_(2)O_(2)+GLS1组细胞转染Vector和GLS1质粒后用200μmol/L H_(2)O_(2)诱导48 h,比色法测定各组细胞SOD、GSH和MDA浓度,透射电镜观察各组细胞自噬小体,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,Western blot检测各组细胞Nrf2、HO-1、LC3-Ⅱ、p62的表达。结果与对照组比较,H_(2)O_(2)组ARPE-19细胞SOD、GSH表达显著下降,MDA显著增加,自噬小体数目显著增加,细胞凋亡显著增加,LC3-Ⅱ表达显著上调,P62、抗核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶1(heme Oxygenase-1,HO-1)表达显著下调。与H_(2)O_(2)+Vector组比较,H_(2)O_(2)+GLS1组细胞SOD、GSH表达显著增加,MDA显著降低,自噬小体数目显著减少,细胞凋亡显著减少,LC3-Ⅱ表达显著下调,P62、Nrf2、HO-1表达显著上调。结论GLS1可抑制H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞氧化应激、自噬与凋亡,其机制为激活Nrf2/HO-1信号通路。

circ_0000619通过调控miR-595/GLS轴对食管鳞状细胞癌细胞增殖及谷氨酰胺代谢的影响

目的:探讨circ_0000619/miR-595/GLS轴对人食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)KYSE150细胞增殖、迁移、侵袭和谷氨酰胺代谢的影响及其可能的机制。方法:采用qPCR法检测KYSE150细胞中circ_0000619、miR-595、谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)mRNA等表达水平,Western blot检测KYSE150细胞中GLS蛋白的表达情况,使用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒、Transwell法分别检测KYSE150细胞增殖、迁移及侵袭能力,使用相应的检测试剂盒检测KYSE150细胞谷氨酰胺消耗、谷氨酸产生及ATP产生水平,利用生物信息学分析技术及双荧光素酶报告基因实验分析并检测circ_0000619、miR-595与GLS mRNA之间的相互作用关系。结果:circ_0000619在ESCC细胞系中呈现高表达,其亲本基因DENND4A mRNA在食管癌组织中呈高表达(P<0.01);敲减circ_0000619显著抑制KYSE150细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01),并显著抑制KYSE150细胞的谷氨酰胺消耗、谷氨酸及ATP产生水平(P<0.01);敲减circ_0000619显著上调miR-595表达(P<0.01),抑制GLS mRNA(P<0.01)及蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验显示在KYSE150细胞中,circ_0000619与miR-595存在靶向结合、miR-595与GLS存在靶向结合(P<0.01)。circ_0000619敲低显著降低了KYSE150细胞谷氨酰胺代谢和细胞增殖,并且这些作用被miR-595抑制或GLS过表达部分逆转。结论:circ_0000619能通过靶向调控miR-595/GLS轴增强ESCC细胞谷氨酰胺代谢及细胞增殖,并可能成为潜在的ESCC治疗靶点。

GLS在乳腺癌中表达及免疫逃逸预测

目的利用生物信息学,探讨谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)在乳腺癌中的表达及免疫逃逸中的作用。方法运用TCGA、TIMER2.0数据库,生信预测GLS在乳腺浸润性癌中的表达情况;利用STRING数据库、LinkedOmics数据库预测在乳腺癌中GLS蛋白表达及蛋白互作作用;利用TIMER2.0数据库,分析GLS对乳腺癌免疫浸润的影响,探讨GLS对免疫检查点分子表达的影响。结果GLS mRNA在乳腺浸润性癌中表达下调,与谷氨酰胺代谢相关蛋白表达相关;GLS与免疫细胞浸润相关,且与PD1、PD-L1、CTLA-4等免疫检查点分子表达相关。结论GLS在乳腺浸润性癌中表达下调,且与肿瘤免疫细胞浸润及免疫检查点分子表达相关。

GLS/GGLS/SUPG在三维注射成形充填模拟中的应用

塑料注射成形充填模拟中,采用GLS(Galerkin/least-squares)法能实现速度、压力同次插值时稳定地求解速度场、压力场,在能量场方程的求解中采用GGLS(Galerkin gradient least-squares)/SUPG(streamline upwind/Petrov-Galerkin)法能得到稳定的温度场数值解,其中SUPG法抑制对流占优导致的数值震荡问题,GGLS法消除由于小扩散系数造成的虚假温度升高。由GLS法、GGLS/SUPG法建立的速度、压力、温度求解的稳定有限元计算格式,实现了对注射成形充填模拟。模拟结果表明,采用GGLS法,温度场模拟结果更加合理,由GGLS/SUPG法获得了充填过程中稳定、准确的温度场,并采用GLS法正确地模拟了熔体速度、压力及流动前沿。

2022款奔驰迈巴赫GLS480开空调时出风口出热风

故障现象一辆2022款奔驰迈巴赫GLS4804MATIC,搭载256930型发动机,行驶里程为9866km,VIN码为W1N1679671A59****。据车主反映,开空调时,该车左侧B柱、马鞍台左后部出风口、左前座椅垫都出热风,但其他出风口制冷正常。

皇家邮政GLS公司进军塞尔维亚市场

将塞尔维亚纳入其欧洲网络是GLS公司加强在东欧市场地位的重要举措。GLS称,塞尔维亚正在经历电子商务的蓬勃发展,该地区对更广泛交付选择的需求日益增长。GLS在塞尔维亚的贝尔格莱德设立了一个中心枢纽,在诺维萨德、尼什和克拉古耶瓦茨等主要城市设有三个仓库;现在可以将包裹送到塞尔维亚的任一地址,并可让客户与世界各地连接。

相依回归模型的岭型GLS估计及其优良性

本文首先提出了相依回归模型的岭型ＧＬＳ估计。

小毛茛内酯影响耐药结核患者外周血淋巴细胞SHSP和GLS表达的研究

目的 :研究小毛茛内酯 (Ternatolide ,Tern)抗人PBL内结核休眠菌感染的分子免疫学机理。方法 :用Tern 2 0 0mg·L-1体外分别培养PBL 2 4 ,36 ,4 8,6 0 ,72 ,84h后 ,采用PCR方法检测 84例耐药、多耐药结核患者体外PBL内结核菌小热休克蛋白 (16KDaSHSP)基因的表达 ;采用反转录聚合酶链反应半定量 (QC RT PCR)方法 ,测定其PBL内颗粒裂解肽 (Granulysin ,GLS)mRNA的表达。结果 :Tern能显著减少耐药结核患者PBL内结核菌16KDaSHSP基因拷贝表达量 (P <0 .0 0 1) ,这种表达减少与培养时间成正比 ;同时显著增加了PBLGLSmRNA的表达水平 (P <0 .0 0 1)。结论 :Tern可能通过减少结核休眠菌 16KDaSHSP的表达 ,激活休眠菌的同时促进GLSmRNA高水平的表达 ,增强机体CTL杀菌能力 ,达到抗耐药的作用。

小毛莨内酯对结核休眠菌感染病人GLS mRNA表达的影响

目的 研究小毛莨内酯抗人体结核休眠菌感染的分子免疫学机理。方法 采用PCR方法检测结核病人PBLs中结核菌 16kDα 晶状体同源蛋白DNA阳性的 5 6例患者为本研究对象 ;采用反转录聚合酶链反应半定量 (QC RT PCR)方法 ,测定不同剂量的Tern .对以上病人PBL颗粒裂解肽mRNA表达水平的影响。结果 当Tern .在 10 0mg L ,2 0 0mg L浓度时 ,能诱导结核休眠菌感染病人体外活化的PBLGLSmRNA的表达。结论 Tern .可能通过促进颗粒裂解肽mRNA的表达 ,增强机体CTL杀菌能力 ,达到抗结核休眠菌的作用。

GLS/IL-12重组耻垢分枝杆菌的构建及其在小鼠体内的表达

目的构建携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)的重组耻垢分枝杆菌,并经鼻黏膜免疫观察其在小鼠体内的表达。方法将人GLS和小鼠IL-12基因及分枝杆菌复制子OriM同时克隆进多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中,得到穿梭质粒pZM03,以pZM03电转化耻垢分枝杆菌,再将该重组耻垢分枝杆菌滴鼻免疫Balb/c小鼠3次,第1次免疫后4周,处死小鼠,用免疫组化检测肺、脾组织中GLS表达,用ELISA检测血清IL-12和肺泡灌洗液特异性SIgA的水平。结果得到可表达GLS/IL-12重组耻垢分枝杆菌;在Balb/c小鼠肺、脾组织中均检测到重组耻垢分枝杆菌的分布,以及GLS的表达,并有血清IL-12水平升高和黏膜特异性SIgA的产生。结论成功构建GLS和IL-12修饰的重组耻垢分枝杆菌,该重组菌经鼻黏膜免疫小鼠后,可引起呼吸道黏膜特异性抗菌免疫,以及GLS和IL-12的体内表达,为新型疫苗的研究奠定了基础。

GLS1基因在乳腺癌中的表达及在新辅助化疗中的意义

目的 探讨GLS1基因在乳腺癌中的表达及在新辅助化疗中的意义。方法 收集134例乳腺癌患者为研究对象,入组患者经过穿刺活检确诊乳腺癌后,按照随机对照原则平均分成两组,每组67例。观察组在乳腺癌改良根治术前使用多西他赛＋表柔比星＋环磷酰胺（TEC）方案,进行3~4周期的化疗后再进行择期手术。对照组在改良根治术前不进行TEC化疗,直接手术摘除病变乳腺。术后两组患者采用免疫组化法,对病变组织中GLS1蛋白免疫组化染色。结果 GLS1基因在134例患者正常组织和乳腺癌组织中表达,但在乳癌组织中表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;术前采用新辅助化疗后,癌组织中GLS1基因表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。患者生存率与GLS1表达水平有关（P〈0.05）,表达水平越高生存率越低。结论GLS1基因在乳腺癌患者癌组织中高表达。在乳腺癌改良根治术前,使用辅助化疗可明显降低GLS1的表达水平;患者癌组织中GLS1基因表达水平与生存预后相关,GLS1基因在乳腺癌靶向治疗以及靶向治疗药物开发中可作为特异性的药物靶点之一。

GLS飞行程序三维仿真系统设计与实现

为解决GLS (GBAS landing system)飞行程序二维航图显示不直观和实际飞行过程中飞行技术要求高、成本高、风险高等问题,基于三维地理信息系统(U-GIS)进行开发,提出一种GLS飞行程序三维仿真系统的设计方案。根据系统功能需求,对系统体系结构及功能模块进行设计,实现基础数据管理、航迹管理、信号覆盖等子功能。实验结果表明,该系统能够快速完成GLS飞行程序三维可视化仿真,可用于GLS飞行程序的辅助验证。

GLS和IL-12偶联重组耻垢分枝杆菌免疫效果的观察

目的:研究携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)偶联重组耻垢分枝杆菌(ATCC607)经鼻黏膜免疫小鼠后,小鼠体内的免疫状况。方法:BALB/c小鼠36只,随机分为生理盐水、pZM03、ATCC607、卡介苗(BCG)、重组ATCC607(即携带pZM03的ATCC607)、灭活重组ATCC607组;采用滴鼻法免疫小鼠,BCG组0、14天各1次,其它组0、4、14天各1次,第0天免疫后4周处死小鼠,用ELISA检测血清中IFN-γ、IL-12、IgG2a、lL-4的分泌水平和淋巴细胞PPD诱导的IFN-γ分泌水平以及肺泡灌洗液特异性SIgA的水平,用MTS法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况。结果:重组ATCC607血清中IFN-γ、IL-12水平与BCG组无明显差异但明显高于其他组(P<0.05),IgG2a水平重组ATCC607组高于BCG组和其他组(P<0.05),各组间IL-4水平差异无统计学意义。重组ATCC607、BCG、灭活重组ATCC607及ATCC607组用PPD均可诱导小鼠脾淋巴细胞增殖,各组间差异无显著意义,但与生理盐水和pZM03组间差异有显著意义(P<0.05)。重组ATCC607组PPD诱导淋巴细胞IFN-γ明显高于其它组(P<0.05),与BCG组比较无显著差异。重组ATCC607等含菌组经鼻黏膜免疫可产生黏膜特异性SIgA。结论:重组ATCC607经鼻黏膜免疫小鼠后,机体特异性免疫特别是细胞免疫和黏膜免疫增强,为重组ATCC607治疗结核病的研究奠定了基础。

GLS3′-非编码区-荧光素酶报告质粒的构建及其活性鉴定

目的构建颗粒溶素基因3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)-荧光素酶报告质粒,检测颗粒溶素和微小RNA(miRNA)调控位点的关联性。方法将人工合成的GLS基因3’-UTR区序列,克隆至荧光素酶报告质粒pGL3-control;通过Targetscan5.1等软件预测可能与GLS基因3’-UTR作用的miRNA;将荧光素酶报告质粒和miRNA真核表达质粒共转染293T细胞,为防止脱靶效应,同时转染anti-mir-inhibitor和anti-mir-control,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果用Targetscan5.1软件、PicTar软件和miRBase数据库预测交叉结果显示,miRNA(mir)-218、mir-514、mir-185、mir-611均与GLS基因3’-UTR存在互补结合位点;构建的miRNA真核表达质粒和荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确;2种质粒共转染293T细胞后,miRNA-218可使荧光素酶报告质粒表达的荧光素酶活性降低75%左右(P<0.01);转染anti-mir-inhibitor后,荧光素酶的表达恢复到正常水平。结论成功构建了GLS基因3’-UTR荧光素酶报告质粒,通过检测荧光素酶活性,筛选出和GLS表达相关的miRNA片段即miRNA-218,为探讨miRNA调控GLS表达机制打下实验基础。

肝癌患者血清GLS含量

目的 :研究肝癌患者血清GLS含量及其临床意义。方法 :测定肝癌、非癌肝病患者和健康人GLS ,然后分组统计。结果 :肝癌组GLS(799± 2 2 6mg/L)显著高于健康组 (4 6 6± 6 5mg/L)和各良性肝病组 ;各良性肝病组与健康组无明显差异。测定GLS对肝癌诊断敏感度、特异度、准确度和诊断效率分别为 82 4 %、94 7%、89 7%和 78 0 % ,具有显著临床应用价值 ,并且高于血清AFP测定。测定GLS与AFP联合应用诊断价值更为显著。结论 :肝癌患者血清GLS显著增加 ;其测定对肝癌诊断、病情及疗效监测、预后分析具有显著临床价值 ;

求解不可压缩粘性流的GLS单元之比较

比较了用于求解不可压缩粘性流的四边形双线性、双二次单元及三角形二次单元的性能,这些单元采用GLS稳定化有限元格式,而压力和速度采用等阶数插值。对得出的非线性有限元方程,使用Newton-Raphson迭代来求解,推导了计算切线矩阵的所需公式。完成了对雷诺数分别为1000、5000、10000和20000的方腔上板流的数值模拟,并对不同单元的结果的精度和收敛率进行了比较。数值算例显示,较之于另两种单元,三角形的二次单元在精度和收敛性上达到最好的匹配。

基于格点搜索的随机效应的GLS估计

面板数据随机效应模型两步回归法参数估计使用的方差分量来自第一步的回归估计,它没有考虑方差分量的精度。为了弥补这一缺陷,故提出最优方差分量法(Optimal Variance Component),简称OVC。OVC方法增加了"格点搜索"技术,能够提供更多的方差分量组合,因此在一定程度上提高了参数估计的精度。蒙特卡罗模拟的结果虽然支持上述论点,但该方法却存在一定的问题,仍有待进一步完善。