苓泽合剂对痛风性肾病大鼠模型ABCG2、GluT9及URAT1蛋白表达影响

目的考察苓泽合剂对痛风性肾病模型大鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette protein2,ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(Facilitated glucose transporter 9,GluT9)及尿酸转运体1(Urate Transporter1,URAT1)蛋白表达的影响,探讨其治疗痛风性肾病的机理。方法 SD大鼠随机分为7组,分别为空白组,模型组,苯溴马隆片组(西药阳性对照),痛风定胶囊组(中药阳性对照药),苓泽合剂高、中、低剂量组(66.6、33.3、16.7 g·kg-1)。利用酵母粉联合腺嘌呤制备大鼠痛风性肾病模型,28 d后,测定其24 h尿量及尿蛋白、肾系数、血清尿酸、肌酐、尿素氮、尿激酶、β2-微球蛋白、胱抑素(Cys C)、尿N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(NAG)含量,蛋白质印迹(Western blot)法检测肾病组织中ABCG2、GluT9及URAT1蛋白表达。结果与模型组比较,苓泽合剂各组尿量、尿蛋白、肾系数、尿酸、肌酐、尿素氮、β2-微球蛋白、CysC及NAG减少,尿激酶增加,肾组织病理改变均有一定减轻,ABCG2蛋白的表达明显增加,GluT9及URAT1蛋白的表达明显降低。结论苓泽合剂对痛风性肾病大鼠具有较好肾保护作用,可能与其上调肾组织中ABCG2,下调GluT9及URAT1蛋白表达有关。

玉米须总黄酮抗大鼠高尿酸血症及肾脏保护作用

目的:探讨玉米须总黄酮(TFCS)抗大鼠高尿酸血症(HUA)及肾脏保护的价值。方法:将60只SD大鼠随机分成正常对照组,模型组,别嘌呤醇组和TFCS低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组给予250 mg/(kg·d)乙胺丁醇和100 mg/(kg·d)腺嘌呤的混悬液灌胃14 d,构建大鼠HUA模型。造模后别嘌呤醇组给予50 mg/(kg·d)别嘌呤醇,TFCS低、中、高剂量组分别给予0.5、1.0、2.0 mg/(kg·d)TFCS灌胃14 d。观察并记录大鼠的一般状态和体重;检测大鼠血清中尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、黄嘌呤氧化酶(XOD)水平及尿液中UA水平;HE染色观察肾组织病理形态变化;免疫组化法检测大鼠肾组织尿酸转运体1(URAT1)蛋白的表达;qRT-PCR法检测大鼠肾组织葡萄糖转运体9(GLUT9)mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠精神状态萎靡、排尿增多;血清UA、Cr、BUN、XOD水平升高,尿液UA水平降低(P<0.05);肾小管上皮边界模糊,细胞肿胀变性,肾间质炎性细胞浸润;肾组织URAT1蛋白和GLUT9 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,别嘌呤醇组和TFCS低、中、高剂量组大鼠精神状态及排尿情况好转;血清UA、Cr、BUN、XOD水平降低,尿液UA水平升高(P<0.05);肾组织损伤减轻,URAT1蛋白和GLUT9 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:TFCS可有效降低HUA大鼠UA水平,并对肾脏有一定保护作用,其作用机制可能与抑制UA合成关键酶活性及调节UA转运蛋白表达有关。

葡萄糖转运体9(GLUT9)基因启动子区的rs13124007(G/C)及rs6850166(G/A)位点的单核苷酸多态性(SNP)与汉族女性痛风相关性研究(英文)

目的:探讨葡萄糖转运体9(GLUT9)基因启动子区的rs13124007(C/G)及rs6850166(A/G)位点的单核苷酸多态性(SNP)与中国汉族女性人群痛风易感性之间的相关性。方法:选取185例痛风患者和300例正常对照者,提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR技术),特异性扩增GLUT9基因所需要的目的片段,对扩增的目的片段进行测序后,比较痛风组和正常对照组的基因型频率及等位基因频率分布情况。结果:女性痛风组中GLUT9基因的启动子区rs13124007和rs6805116两个位点的基因型频率分布与正常对照组相比,统计学上无明显的差异(X2=0.906,P=0.636;X2=3.335,P=0.189),rs13124007 SNP位点的C等位基因频率和rs6850166SNP位点的A的等位基因频率与正常对照组相比也无明显的统计学差异(X2=0.506,P=0.477;X2=3.268,P=0.071)。结论:葡萄糖转运体9(GLUT9)基因启动子区的rs13124007(C/G)及rs6850166(A/G)位点的单核苷酸多态性(SNP)与中国汉族女性人群痛风易感性无明显的相关性。

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇(30mg/kg)组和水蛭素低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g/kg)组。大鼠ig氧嗪酸钾(0.75 g/kg),1次/d,连续5周,建立高尿酸血症模型;同时各给药组分别ig相应剂量的药物,1次/d,连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平;免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1(organic anion transporter 1,OAT1)水平;Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、OAT1、尿酸盐转运体1(urate transporter 1,URAT1)蛋白表达;q RT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高(P<0.01),GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平(P<0.01),显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。结论水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达,从而发挥降尿酸作用。

建立检测树鼩葡萄糖转运蛋白GLUT9 mRNA相对表达水平的实时荧光定量PCR方法

建立检测树鼩葡萄糖转运蛋白GLUT9mRNA相对表达水平的实时荧光定量PCR方法。设计检测GLUT9(SLC2A9)及内参GAPDHmRNA的引物,以树鼩新鲜肾脏组织提取的总RNA为模板,进行实时荧光定量扩增,获得SLC2A9及GAPDH的标准曲线及其相对表达变化。测序结果显示扩增的SLC2A9及GAPDH核苷酸序列与人类的同源性为81%和95.1%。实时荧光定量PCR标准曲线的熔解曲线为单峰,R^(2)接近1。建立了检测树鼩GLUT9mRNA实时荧光定量方法,为研究高尿酸血症的发病机理、新药等奠定基础。

SLC2A9基因R265H位点单核苷酸多态性与痛风易感性的Meta分析

目的探索SLC2A9基因R265H位点突变与痛风易感性间的关联。方法检索6个电子数据库,获得SLC2A9基因R265H位点与痛风相关的文献,对纳入文献进行质量评价后,运用RevMan 5.0和Stata 11.0软件进行Meta分析。结果共纳入文献6篇,包含5 182例参与者（痛风病人1 999例,正常对照3 183例）。经Meta分析发现,SLC2A9基因rs3733591位点SNPs与痛风易感性在TT vs CC＋CT和CC vs TT＋CT模型及C等位基因中存在统计学关联,在CT vs TT＋CC模型中无统计学差异（TT vs CC＋CT：OR=0.71,95%CI=0.61～0.84,P〈0.000 1;CC vs TT＋CT：OR=1.23,95%CI=1.06～1.42,P=0.006;C等位基因：OR=2.39,95%CI=1.98～2.89,P〈0.000 1;CT vs TT＋CC：OR=1.06,95%CI=0.94～1.20,P=0.36）。亚组分析发现,仅TT vs CC＋CT和CC vs TT＋CT模型在亚洲人群中有统计学差异,其余均无统计学差异（TT vs CC＋CT：OR=0.66,95%CI=0.55～0.80,P〈0.000 1;CC vs TT＋CT：OR=1.45,95%CI=1.19～1.77,P=0.003）。纳入研究结果间无异质性及发表偏倚。结论 SLC2A9基因rs3733591位点多态性与痛风易感性在亚洲人群中可能存在关联,且C等位基因可能增加患痛风的风险。

3,5,2’,4’-四羟基查尔酮对尿酸诱导高尿酸血症小鼠尿酸排泄的影响研究

目的研究3,5,2’,4’-四羟基查尔酮(P40)对尿酸诱导的高尿酸血症小鼠尿酸排泄的影响,以及对尿酸肾脏转运体葡萄糖转运体9(GLUT9)、尿酸盐转运体1(URAT1)的调控作用。方法昆明种小鼠60只,随机分为正常组、模型组、P40 2.0、4.0、8.0 mg·kg-1组以及阳性对照组,分别灌胃给予受试药物5次;腹腔注射尿酸(150 mg·kg-1)诱导成高尿酸血症小鼠,磷钨酸法测定血尿酸水平和肝尿酸含量;RTPCR和Western blot检测小鼠肾脏GLUT9、URAT1的表达。结果 1 P40(4.0、8.0 mg·kg-1)剂量组明显降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05,0.01);各实验组肝尿酸含量降低,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。2 P40各剂量组URAT1基因表达水平无明显变化,蛋白表达水平有下降趋势,但尚未达到统计学意义(P>0.05)。P40(2.0、4.0、8.0 mg·kg-1)组GLUT9基因表达水平具有下调趋势,但与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);P40(4.0、8.0 mg·kg-1)组GLUT9蛋白表达水平明显下降,与模型组相比,差异有统计学意义。结论 P40具有促进高尿酸血症小鼠尿酸排泄的作用,其机制与下调GLUT9的蛋白表达有关。

基于肠道上皮细胞相关转运子探讨四妙散对高尿酸血症小鼠的祛湿机制

目的:探究四妙散对高尿酸血症小鼠回肠组织三磷酸腺苷结合盒转运蛋白转运体G2(ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)表达的影响。方法:将36只小鼠随机分为空白对照组,模型对照组,四妙散低、中、高剂量组,别嘌醇组,每组6只。除空白对照组外,其余各组建立高尿酸血症小鼠模型,四妙散低、中、高剂量组分别给予低剂量(0.175 g·mL^-1)、中剂量(0.35 g·mL^-1)、高剂量(0.7 g·mL^-1)四妙散灌胃,别嘌醇组予别嘌醇(40 mg·kg^-1)灌胃。检测各组小鼠血尿酸、回肠ABCG2和GLUT9表达变化,探究四妙散治疗高尿酸血症的可能机制。结果:各模型组小鼠血清尿酸明显高于空白对照组(P<0.05),不同剂量四妙散及别嘌醇治疗后小鼠血清尿酸水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),回肠ABCG2表达升高,GLUT9表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),其中四妙散中、高剂量组对ABCG2和GLUT9影响最大。结论:四妙散通过调节回肠ABCG2及GLUT9的表达起到降尿酸作用。

表没食子儿茶素没食子酸酯和维生素C联用对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响

以KM雄性小鼠为研究对象,酵母膏(7.5 g·kg^-1)和氧嗪酸钾(250 mg·kg^-1)联合给药建立高尿酸血症小鼠模型,探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和维生素C(Vc)联用对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响。将小鼠随机分为6组(n=6):空白组、模型组、别嘌呤醇组(阳性药组)、EGCG组、EGCG联合Vc组和Vc组,连续给药7 d后测定生化指标。结果表明,与模型组相比,EGCG联合Vc组小鼠的血尿酸值(UA),血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平均明显降低(P<0.001);EGCG与Vc联用明显抑制了肝脏中腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性(P<0.05或P<0.01),并显著下调了肾脏中葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)mRNA的表达(P<0.001);肾脏切片显示EGCG和Vc联用显著改善高尿酸血症小鼠的肾脏损伤。此外,EGCG与Vc联用对高尿酸血症小鼠的作用效果优于EGCG。

虎桂药对组分配伍治疗高尿酸血症的作用及机制研究

目的:探究虎杖苷和桂皮醛单体配伍对高尿酸血症大鼠的降尿酸作用及机制。方法:采用氧嗪酸钾(200 mg/kg)皮下注射,次黄嘌呤(50 mg/kg)和乙胺丁醇(250 mg/kg)灌胃建立高尿酸血症大鼠模型。造模5 d后,筛选造模成功的大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、别嘌醇(30 mg/kg)组、苯溴马隆(10 mg/kg)组及虎杖苷-桂皮醛低、中、高剂量(虎杖苷-桂皮醛:0.4 mg/kg+0.45 mg/kg、0.8 mg/kg+0.9 mg/kg、1.6 mg/kg+1.8 mg/kg)组。给药3 w后,分别检测血清中尿酸(SUA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;qPCR测定肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)和肾脏葡萄糖转运子(GLUT9)、尿酸盐转运子(URAT1)的mRNA表达;Western Blot测定肝脏XOD和肾脏GLUT9、URAT1蛋白表达;肾脏组织行HE染色观察各组病理学变化。结果:与模型组比较,虎杖苷-桂皮醛中、高剂量组大鼠SUA水平显著降低,肝脏ADA、XOD和肾脏GLUT9、URAT1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织病理学明显改善。虎杖苷-桂皮醛中剂量组血清BUN水平显著降低(P<0.05)。结论:虎杖苷和桂皮醛单体配伍具有显著的降尿酸作用,其作用机制可能与抑制大鼠肝脏中ADA、XOD mRNA和XOD蛋白及肾脏中GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达有关。

脾虚证对高尿酸血症小鼠肠道尿酸排泄的影响

目的:比较脾虚证高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)小鼠及非脾虚证HUA小鼠的血尿酸水平、粪便尿酸水平、各段肠道形态学变化、肠道尿酸转运体ABCG2及GLUT9表达的改变,探讨脾虚证影响尿酸代谢的途径及机制。方法:将小鼠随机分为对照组、脾虚证组、HUA组及脾虚证HUA组,以多因素伤脾制作脾虚证模型,以2%尿酸+3%氧嗪酸钾饲料制作HUA模型。脾虚证造模过程中监测小鼠体重、进食量及肛温。造模结束后取血标本检测血尿酸、血尿素氮等指标,取粪便检测粪便尿酸水平,取空肠、回肠及结肠组织行苏木精-伊红染色,Western Blot及免疫组化检测结肠组织中ABCG2及GLUT9蛋白的表达。结果:脾虚证模型评估:与对照组小鼠比较,脾虚证组小鼠体重减轻(P<0.05),进食量显著减少(P<0.01),肛温下降(P<0.05)。HUA造模期间,脾虚证HUA组小鼠体重逐渐上升,造模结束后体重与对照组比较差异无统计学意义。脾虚证HUA组小鼠血尿酸水平较HUA组升高(P<0.05),尿素氮及肌酐水平4组比较差异无统计学意义。粪便尿酸水平:脾虚证HUA组小鼠粪便尿酸水平较HUA组明显降低(P<0.05)。苏木精-伊红染色可见脾虚证组回肠及结肠组织绒毛缩短,排列松散;脾虚证HUA组空肠及回肠组织绒毛排列松散,结肠组织杯状细胞减少。Western Blot结果显示,与HUA组比较,脾虚证HUA组结肠组织中ABCG2及GLUT9的表达降低。免疫组化结果显示,与对照组比较,HUA组小鼠结肠组织中ABCG2及GLUT9的表达增多;与HUA组比较,脾虚证HUA组小鼠结肠中ABCG2及GLUT9的表达下降。结论:脾虚证HUA小鼠肠道尿酸排泄障碍导致血尿酸水平升高,可能与肠道尿酸转运蛋白ABCG2及GLUT9表达下降相关。

蠲痹历节清方对高尿酸血症大鼠肾脏中部分尿酸转运蛋白的影响

目的:探讨肾脏尿酸盐转运子1(Urate Transporter 1,URAT1)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ATP-binding Cassette Superfamily G Member 2,ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(Glucose Transporter 9,GLUT9)等尿酸转运蛋白在蠲痹历节清方降低血尿酸(Serum Uric Acid,SUA)中的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苯溴马隆组(5 mg/kg)及蠲痹历节清方低、中、高剂量组(11,22,44 g/kg)。除空白组外,其余各组均建立高尿酸血症模型;苯溴马隆组和蠲痹历节清方组分别予相应浓度混悬液进行灌胃干预。最后收集大鼠腹主动脉血和双肾组织,采用全自动生化仪检测各组大鼠腹主动脉中血尿酸含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠肾脏中URAT1、GLUT9、ABCG2 mRNA和蛋白的表达。结果:与空白组相比,模型组血尿酸水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);空白组与模型组血尿酸水平存在明显差异,提示造模成功。与空白组比较,模型组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,蠲痹历节清方各剂量组和苯溴马隆组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与蠲痹历节清方高剂量组比较,中、低剂量组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蠲痹历节清方可通过抑制肾脏中URAT1、GLUT9 mRNA及蛋白表达,促进ABCG2的mRNA和蛋白的表达,来调节尿酸的分泌,减少尿酸的重吸收,增加尿酸的排泄,进而降低血尿酸水平,且随着剂量的升高,其降尿酸的作用逐渐增强。

高尿酸血症相关基因修饰的动物模型研究进展

基因敲除技术日益成为建立高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)动物模型强有力的工具,HUA相关基因敲除的动物模型不仅有助于揭示尿酸代谢的分子机制,而且对于评估潜在治疗策略具有重要价值。通过查阅国内外文献详细探讨了基因敲除技术在构建HUA动物模型中的应用,重点关注了尿酸氧化酶(urate oxidase,UOX)、葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9,GLUT9)和ATP结合盒转运体G2(ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2)等蛋白的基因在实验动物中的敲除,以期为进一步利用基因敲除技术建立HUA动物模型提供参考和指导。

菊苣提取物对高尿酸血症大鼠肾脏果糖转运体9表达的影响

该研究给予雄性SD大鼠10%果糖饮水建立高尿酸血症模型,将其分为正常组、模型组、苯溴马隆组(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))、菊苣提取物高、中、低剂量组(5,7.5,10 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续42 d。分别测定血尿酸、血肌酐、尿素氮、尿尿酸,计算肾脏尿酸清除率;免疫组化法、逆转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法分别检测果糖转运体9(glucose transporter family member 9,Glut9)在大鼠肾脏的蛋白及基因的表达水平。探讨中药菊苣提取物降尿酸作用及对肾脏Glut9表达的影响。结果显示菊苣提取物能降低高尿酸血症大鼠血尿酸水平,增加肾脏尿酸清除率,降低肾脏Glut9的蛋白表达,抑制肾脏尿酸重吸收,从而促进肾脏尿酸排泄。

水蛭素抗痛风作用及其机制研究

目的探讨水蛭素抗痛风作用及其机制。方法利用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,尿酸钠诱导大鼠急性痛风性炎症模型,观察水蛭素对急性高尿酸血症尿酸水平及其诱导炎症的影响;利用氧嗪酸钾诱导小鼠慢性高尿酸血症模型,观察水蛭素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮水平及血清、肝脏黄嘌呤氧化酶活性,肾脏的病理学改变、C-反应蛋白(CRP)水平及葡萄糖转运体9(GLUT9)表达的影响。结果水蛭素可显著降低次黄嘌呤引起的高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,显著抑制由尿酸钠引起的大鼠足跖急性肿胀;可显著降低由氧嗪酸钾引起的慢性高尿酸小鼠血清高尿酸水平,降低血清尿素氮水平,显著抑制GLUT9的表达,减轻肾脏病理学损伤。结论水蛭素具有显著的抗高尿酸血症及抗痛风作用,其机制可能与保护肾脏作用及调节GLUT9表达有关。

五苓散对高尿酸血症小鼠降尿酸及肾保护机制的研究(英文)

目的:研究五苓散对高尿酸血症小鼠降尿酸和肾保护作用并探索其可能的作用机制。方法:在氧嗪酸钾连续7天诱导小鼠产生高尿酸血症模型同时每天灌胃给予不同剂量五苓散(每组10只),并以别嘌呤醇作为阳性药对照。分别测定每组动物血清尿酸、肌酐及尿液尿酸、肌酐等水平并计算其尿酸排泄分数。采用RT-PCR和Westernblot方法分别测定小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体1(mURAT1)、葡萄糖转运体9(mGLUT9)、有机阴离子转运体1(mOAT1)、有机阳离子转运体1和2(mOCT1、mOCT2)及肉毒碱转运体2(mOCTN2)mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,五苓散显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐水平,促进尿酸和肌酐排泄,提高尿酸排泄分数,呈现出促进肾脏尿酸排泄与肾保护作用。五苓散显著下调高尿酸血症动物肾脏mURAT1、mGLUT9mRNA及蛋白表达水平,并上调mOAT1、mOCT1、mOCT2以及mOCTN2mRNA及蛋白表达水平。结论:这些结果表明五苓散可介导肾脏有机离子转运体表达以促进高尿酸血症和肾功能异常动物尿酸排泄并发挥其肾保护作用。

痛风病理及临床中西医治疗的研究进展

随着人民生活水平的改善,膳食结构的改变,蛋白质、糖、脂肪等摄入量明显增多,痛风的患病率逐渐升高,与年龄的增长呈现正相关,发病年龄逐渐降低。尿酸钠晶体诱导的炎症是痛风的病理基础,激活固有免疫,释放白细胞介素(IL)-1β,IL-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α等多种炎症介质,进而引起炎症级联反应,出现关节红肿热痛等急性发作表现。痛风存在自发缓解机制,一方面巨噬细胞通过吞噬作为异物的单钠尿酸盐(MSU)晶体,减少MSU对机体的刺激,另一方面分化成熟的巨噬细胞通过分泌抗炎性因子转化生长因子(TGF)-β1等,抑制炎性因子的表达而促进痛风急性发作的自发缓解。除了炎症反应相关的细胞内信号分子被激活机制外,痛风的炎症机制还涉及补体激活、细胞激活等途径,其造成的心血管系统损害、关节破坏等并发症严重危害人体健康。目前治疗药物多用西药,如别嘌醇、非布司他等,通过抑制黄嘌呤氧化酶发挥疗效,苯溴马隆是通过抑制尿酸盐转运蛋白1(URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)减少肾脏对尿酸重吸收,促进尿酸排泄而发挥作用,即使目前研发中的来辛奴拉、曲尼司特等,也是基于抑制尿酸盐重吸收起效,上述药物存在较多的不良反应而限制了临床应用。中医药治疗痛风具有多靶点的特点,在降尿酸、抗炎和改善关节功能方面更具有优势,且安全性高,在临床治疗痛风中逐渐得到推广应用。因此,基于痛风的病理机制结合中西医治疗痛风是具有前景的研究方向。

基于调控尿酸转运蛋白的牛膝茎叶总皂苷治疗高尿酸血症肾病大鼠机制研究

目的:研究牛膝茎叶(SLAB)总皂苷对高尿酸血症(HUA)肾病大鼠尿酸转运蛋白的影响。方法:通过腺嘌呤(100mg/kg)合并乙胺丁醇(250mg/kg)建立大鼠HUA肾病模型。每天造模1h后,除空白组及模型组给等量溶媒,痛风舒组(600mg/kg)、别嘌醇组(42mg/kg)及SLAB低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg)灌胃给予相应药物。第23天给药后1h检测血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿素氮(BUN)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,肾匀浆液URAT1、OAT1和GLUT9水平,免疫组化法观察肾脏尿酸盐转运蛋白OAT1和GLUT9蛋白表达,HE染色法观察胸腺、脾脏、肾脏病理变化。结果:与模型组比较,SLAB高剂量组可降低血清UA、Cr、XOD、MCP-1和TNF-α水平(P<0.01,P<0.05),SLAB能降低肾脏URAT1、GLUT9水平,提高肾脏OAT1的表达,改善胸腺、脾脏和肾脏病理变化。结论:SLAB可有效降低大鼠HUA肾病模型的血清尿酸水平,其作用机制可能与抑制URAT1、GLUT9对UA的重吸收,促进OAT1分泌UA入尿有关。

高尿酸对小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体基因表达的影响

目的:研究高尿酸条件下尿酸盐阴离子转运体1(Urate anion exchanger 1,URAT1)、葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、有机阴离子转运体10(Organic Anion Transporter 10,OAT10)基因表达的动态变化。方法:(1)研究不同剂量尿酸对小鼠血尿酸水平的影响:遵循随机化原则将50只雄性昆明种小鼠分为5组(每组10只):分别为正常组、尿酸每天100、200、300、400mg/kg剂量组。每天2次腹腔注射尿酸磷酸盐溶液,共造模14天,确定最佳剂量。(2)确定最佳剂量后,小鼠腹腔注射最佳剂量尿酸每天300 mg/kg,复制高尿酸血症模型。在给予尿酸1、3、7、14天处死小鼠,用磷钨酸法测定小鼠血清尿酸水平和肝尿酸含量,用RT-PCR检测小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体URAT1、GLUT9、OAT10基因表达水平。结果:(1)腹腔注射尿酸每天300 mg/kg及400mg/kg能有效升高小鼠血尿酸水平(P<0.01),但400 mg/kg组小鼠死亡率高。而尿酸100、200 mg/kg组与正常组相比无统计学差异,300 mg/kg为最佳剂量;(2)与正常组相比,模型组血尿酸水平在造模1、3、7、14天均升高(P<0.05),造模成功;与正常组相比,模型组肝匀浆尿酸含量在造模1天显著升高(P<0.01);而造模3天、7天及14天均无统计学差异;与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏GLUT9基因表达水平在1、3、14天均增加(P<0.05);与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏URAT1和OAT10基因表达水平在各时间点均无显著变化(P>0.05)。结论:在尿酸诱导的高尿酸血症小鼠模型上,模型组GLUT9基因在给予尿酸1、3、14天后表达均上调,但URAT1、OAT10的基因表达均无显著变化。