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转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测 被引量:6
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作者 王恒波 陈平华 +2 位作者 郭晋隆 陈如凯 许莉萍 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1177-1183,共7页
GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据已公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物... GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据已公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物进行了退火温度、特异性及扩增效率的PCR检测,结果显示,5对特异性引物均能够从GTS40-3-2中扩增出大小约279bp、238bp、470bp、490bp和257bp的预期产物,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2转化事件。以转基因大豆GTS40-3-2含量为5%、2%、1%、0.5%和0.1%的标准品进行PCR灵敏度检测,结果表明5对引物的检测灵敏度均能达到0.1%。通过荧光定量PCR对5对特异性引物的Ct值与溶解曲线比较,最后选择出RRS2引物对为转基因大豆GTS40-3-2品系特异性检测的最适引物。本文结果将为我国未来转基因生物产品成分检测提供科学合理的实验参考。 展开更多
关键词 转基因大豆 gts40-3-2 转化事件 特异性PCR检测
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动物饲料中转基因抗草甘膦大豆GTS40-3-2成分的检测 被引量:4
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作者 袁建琴 赵江河 +3 位作者 史宗勇 李静怡 李敏 王俊东 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期295-300,共6页
转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS 40-3-2作为目前在最多国家和地区批准种植的转基因大豆,除榨取大豆油外,剩余的豆粕等副产品被用作动物饲料。通过对山西省太谷周边11个动物养殖户的饲料进行转基因标识情况专项调查,采用定性和定量PCR技术... 转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS 40-3-2作为目前在最多国家和地区批准种植的转基因大豆,除榨取大豆油外,剩余的豆粕等副产品被用作动物饲料。通过对山西省太谷周边11个动物养殖户的饲料进行转基因标识情况专项调查,采用定性和定量PCR技术对转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS 40-3-2含有的Ca MV35S启动子、NOS终止子、Cp4-EPSPS及大豆内标Lectin基因进行检测。结果表明:11份饲料全部含有转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS 40-3-2成分,且其含量各不相同,其中蛋鸡饲料GTS 40-3-2转化体的含量最低,但所有饲料均无转基因标识。试验为我国转基因饲料饲用安全性评价体系提供了试验数据支持,同时也对来源于转基因作物的原材料产品的合理应用以及通过转基因饲料喂养动物所产生的农畜产品的安全性评价具有重要的现实和理论意义。 展开更多
关键词 动物饲料 转基因大豆gts 40-3-2 定性PCR 实时荧光定量PCR 检测
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转基因大豆GTS 40-3-2品系特异性环介导等温扩增法检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 刘津 凌莉 +4 位作者 吴少云 蔡颖 石磊 高东微 李志勇 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2012年第12期60-63,共4页
根据外源插入序列与大豆内源基因边界序列,用设计软件Primer Explorer Version 3设计并筛选了转基因大豆GTS 40-3-2品系的环介导等温扩增引物,并进行了反应体系和反应条件的优化,建立了转基因大豆GTS 40-3-2品系特异性环介导等温扩增检... 根据外源插入序列与大豆内源基因边界序列,用设计软件Primer Explorer Version 3设计并筛选了转基因大豆GTS 40-3-2品系的环介导等温扩增引物,并进行了反应体系和反应条件的优化,建立了转基因大豆GTS 40-3-2品系特异性环介导等温扩增检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度、稳定性评价,结果显示:该方法能够特异、稳定、灵敏地检测大豆及其制品中的转基因大豆GTS 40-3-2成分,检测低限达到0.5%。此外,对12份实际样品的检测结果表明,该方法与实时荧光PCR方法的检测性能相当,结果吻合率为100%,假阳性率和假阴性率均为0。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 转基因大豆品系gts 40-3-2 特异性检测
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转基因大豆GTS40-3-2成分现场可视化检测方法的建立 被引量:4
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作者 王永 兰青阔 +4 位作者 朱珠 赵新 陈锐 郭永泽 程奕 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期570-573,共4页
转基因大豆GTS40-3-2转化体是种植面积最广的转基因大豆品种,根据GTS40-3-2转化体特异性序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对其进行快速扩增及可视化判断;同时建立转基因成分人工污染的食品模型,比较了LAMP法与定性PCR方法检... 转基因大豆GTS40-3-2转化体是种植面积最广的转基因大豆品种,根据GTS40-3-2转化体特异性序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对其进行快速扩增及可视化判断;同时建立转基因成分人工污染的食品模型,比较了LAMP法与定性PCR方法检测的敏感性。结果表明:该方法仅对GTS40-3-2转化体产生特异性扩增,灵敏度高达0.001%。所建立的GTS40-3-2转化体特异性现场可视化筛查方法具有较高的特异性与灵敏性,操作简单、快速,可用于转基因大豆GTS40-3-2成分污染的现场可视化检测。 展开更多
关键词 转基因大豆gts40-3-2 转化体特异性 环状等温扩增技术 现场可视化检测
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转基因大豆GTS40-3-2环介导等温扩增检测方法的建立 被引量:3
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作者 杨丽霞 邱华丽 +1 位作者 彭新凯 宋涛平 《亚热带植物科学》 2015年第3期213-217,共5页
采用转基因大豆GTS40-3-2品系特异性基因LAMP引物,建立2种转基因大豆GTS40-3-2品系特异性基因等温扩增方法:(1)实时荧光环介导等温扩增方法;(2)反应前加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,根据反应后HNB的颜色变化进行判定。... 采用转基因大豆GTS40-3-2品系特异性基因LAMP引物,建立2种转基因大豆GTS40-3-2品系特异性基因等温扩增方法:(1)实时荧光环介导等温扩增方法;(2)反应前加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,根据反应后HNB的颜色变化进行判定。对两种方法进行灵敏度、特异性测试,结果表明,两种方法皆能快速、特异性检测出转基因大豆GTS40-3-2品系成分,定性检测限为0.1%。基于颜色判定的LAMP检测方法对设备要求更简单,更适用于日常检验及监管部门进行转基因成分的快速检测。 展开更多
关键词 转基因大豆gts40-3-2品系 环介导等温扩增 可视化检测
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Evaluation of Uncertainty in Measuring the Content of CaM V35S Promoter in Genetically Modified Soybean,GTS40-3-2,by Real-time Quantitative PCR
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作者 Dong WANG Jun SONG +5 位作者 Ling'an GUO Shaorong LEI Wenjuan LIU Lijuan CHANG Quan YIN Fuli ZHANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2015年第1期23-26,30,共5页
[ Objective ] This study aimed to investigate the major contributors to the measurement uncertainty in quantitative analysis of genetically modified ingreclients and improve the quality of quantitative detection of ge... [ Objective ] This study aimed to investigate the major contributors to the measurement uncertainty in quantitative analysis of genetically modified ingreclients and improve the quality of quantitative detection of genetically modified components. [ Method] The content of CaMV35S promoter (parameter) in GTS40- 3-2 soybean powder samples was measured to estimate the measurement uncertainty preliminarily. [ Result] Type A uncertainty (uA) ' type B uncertainty (uB) and combined standard uncertainty (Uc) were 0.0 004, 0.002 and 0.002, respectively. At a confidence level ofp = 95% and freedom degree of Voff = 3 251, coverage factor k = 1.96, expanded uncertainty U = 0.004. The final measurement result was C = 0.028 ± 0. 004, which was dose to the conventional true value (0.03). Thus, the measurement uncertainty was relatively small, indicating a high quality of measurement. In this study, uncertainty evaluation indicated that the deviation of micro liquid transfer made the greatest contribution to the measurement uncertainty. [ Cludusion ] The deviation of micro liquid transfer should be reduced to im- prove the quality of measurement. 展开更多
关键词 Genetically modified soybean gts40-3 -2 Content of CaM-V35S promoter UNCERTAINTY EVALUATION
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多重PCR检测抗草甘膦大豆GTS40-3- 被引量:2
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作者 尹全 李忆 +5 位作者 宋君 王东 张富丽 刘文娟 常丽娟 刘勇 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期666-671,共6页
将大豆内源参照基因(Lectin)、外源基因P-CaMV 35S、CP4-EPSPS和T-NOS作为多重PCR检测参数,建立了一种多重PCR检测抗草甘膦大豆GTS40-3-2的方法。反应条件优化结果表明:多重PCR的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol·L^(-1))... 将大豆内源参照基因(Lectin)、外源基因P-CaMV 35S、CP4-EPSPS和T-NOS作为多重PCR检测参数,建立了一种多重PCR检测抗草甘膦大豆GTS40-3-2的方法。反应条件优化结果表明:多重PCR的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol·L^(-1))配比为:0.1∶0.2∶0.2∶0.2。采用已知样品对多重PCR体系进行验证,检测结果可靠,证明该多重PCR体系为一种有效的抗草甘膦大豆GTS40-3-2的检测方法。 展开更多
关键词 多重PCR 大豆 gts40-3-2 检测
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转基因大豆GTS 40-3-2基体标准物质联合定值研究及不确定度分析
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作者 刘瑛颖 隋志伟 +1 位作者 王晶 傅博强 《计量技术》 2013年第11期25-29,共5页
对研制的3个含量水平(A、B和C)的转基因大豆GTS 40-3-2基体标准物质进行了多家实验室联合定值,并进行了相应的不确定度的分析.具体研究过程为提取转基因大豆GTS 40-3-2中的基因组DNA,并采用定量PCR方法进行标准物质的多家实验室联合定... 对研制的3个含量水平(A、B和C)的转基因大豆GTS 40-3-2基体标准物质进行了多家实验室联合定值,并进行了相应的不确定度的分析.具体研究过程为提取转基因大豆GTS 40-3-2中的基因组DNA,并采用定量PCR方法进行标准物质的多家实验室联合定值,最后对定值的不确定度进行评估. 展开更多
关键词 转基因大豆gts 40-3-2 定量PCR 基体标准物质 联合定值
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Glyphosate-Residues in Roundup-Ready Soybean Impair Daphnia magna Life-Cycle
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作者 Marek Cuhra Terje Traavik +3 位作者 Mickael Dando Raul Primicerio Daniel Ferreira Holderbaum Thomas Bohn 《Journal of Agricultural Chemistry and Environment》 2015年第1期24-36,共13页
Herbicide tolerant plants such as Roundup-Ready soybean contain residues of glyphosate herbicide. These residues are considered safe and previous animal-feeding-studies have failed to find negative effects related to ... Herbicide tolerant plants such as Roundup-Ready soybean contain residues of glyphosate herbicide. These residues are considered safe and previous animal-feeding-studies have failed to find negative effects related to such chemical residues. The present study tests 8 experimental soy- meal diets as feed in groups (each containing 20 individuals) of test-animals (D. magna). The diets have different levels of glyphosate residues and we show that animal growth, reproductive maturity and number of offspring are correlated with these chemicals. The tested soybeans are from ordinary agriculture in Iowa USA and the residues are below the regulatory limits. Despite this, clear negative effects are seen in life-long feeding. The work enhances the need for including analysis of herbicide residues in future assessment of GMO. 展开更多
关键词 Transgenic gts 40-3-2 Roundup-Ready soybean Glyphosate Residues Life-Long Animal Feeding Study gmO Risk-Assessment Herbicide-Tolerant Cultivar Quality Aquatic Invertebrate Ecotoxicology
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转基因大豆GTS40-3-2定量检测质粒DNA标准物质的研制
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作者 许丽 李妍 +7 位作者 张波 梁文 李春华 刘刚 李兰英 罗明 丁敏 任淑贞 《江苏现代计量》 2014年第5期38-40,共3页
一、引言转基因大豆是全世界种植面积最大的转基因作物,由于导入了抗草甘膦基因EPSPS基因(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase),可以编码磷酸烯醇式丙酮酰莽草酸合成酶,能够耐受除草剂草甘膦的伤害,方便大豆农业生产和管理,但... 一、引言转基因大豆是全世界种植面积最大的转基因作物,由于导入了抗草甘膦基因EPSPS基因(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase),可以编码磷酸烯醇式丙酮酰莽草酸合成酶,能够耐受除草剂草甘膦的伤害,方便大豆农业生产和管理,但是,随着转基因作物在世界范围的广泛种植。 展开更多
关键词 转基因大豆 gts40-3-2 DNA 抗草甘膦 烯醇式 除草剂草甘膦 特异性序列 特异性基因 引物
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饲料中转基因大豆成分检测 被引量:2
11
作者 刘彦泓 刘岑杰 《农业与技术》 2019年第24期25-27,共3页
转基因农作物的商品化满足了人民日益增长的物质需求,但转基因作物在食用安全性、对生态环境的影响等方面一直备受关注。本研究采用实时荧光PCR方法检测饲料及饲料原料中转基因大豆GTS40-3-2成分,可以准确、快速完成检测,满足饲料中转... 转基因农作物的商品化满足了人民日益增长的物质需求,但转基因作物在食用安全性、对生态环境的影响等方面一直备受关注。本研究采用实时荧光PCR方法检测饲料及饲料原料中转基因大豆GTS40-3-2成分,可以准确、快速完成检测,满足饲料中转基因成分的监管需求。实验表明目前饲料中转基因大豆GTS40-3-2成分的占有率较高,应引起相关部门的重视,加大监管力度。 展开更多
关键词 饲料 转基因大豆gts40-3-2 实时荧光PCR
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转基因大豆豆粕外源基因和蛋白在SD大鼠体内消化吸收分析 被引量:2
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作者 袁建琴 常泓 +2 位作者 赵江河 史宗勇 王俊东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期657-668,共12页
为了评估转基因抗草甘膦除草剂大豆的食用安全性,以20%的比例将转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS40-3-2和其亲本非转基因大豆A5403豆粕分别添加到基础饲料中喂养两代Sprague-Dawley(SD)大鼠,采用定性、定量PCR和ELISA方法检测转基因大豆成... 为了评估转基因抗草甘膦除草剂大豆的食用安全性,以20%的比例将转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS40-3-2和其亲本非转基因大豆A5403豆粕分别添加到基础饲料中喂养两代Sprague-Dawley(SD)大鼠,采用定性、定量PCR和ELISA方法检测转基因大豆成分相关基因和蛋白在长期饲喂的大鼠体内代谢残留状况。结果表明,大鼠喂养转基因大豆豆粕后,除了大鼠肠粪和盲肠内容物检测到有转基因成分的残留,肠道菌群和实质脏器均未发现相关基因和蛋白。结果提示,长期饲喂转基因抗草甘膦除草剂大豆GTS40-3-2与亲本A5403大豆豆粕对SD大鼠具有同样的食用安全性。 展开更多
关键词 抗草甘膦除草剂 转基因大豆gts40-3-2 SD大鼠 外源基因和蛋白 消化吸收
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山西市场动物饲料中转基因成分的检测(英文) 被引量:2
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作者 袁建琴 常泓 +3 位作者 赵江河 唐中伟 史宗勇 王俊东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1576-1589,共14页
为了评估转基因玉米和大豆在山西动物饲料市场的占有率和标识情况,采用改良十六烷基三甲基溴化铵法(Hexadecyltrimethy ammonium bromide,CTAB)提取山西市场抽取的30份鸡和猪饲料,通过定性PCR打包筛查,对检测阳性结果打包饲料拆包并检测... 为了评估转基因玉米和大豆在山西动物饲料市场的占有率和标识情况,采用改良十六烷基三甲基溴化铵法(Hexadecyltrimethy ammonium bromide,CTAB)提取山西市场抽取的30份鸡和猪饲料,通过定性PCR打包筛查,对检测阳性结果打包饲料拆包并检测CaMV35S启动子、NOS终止子、玉米内标zSSIIb、大豆内标Lectin和Cry IA(b)基因。同时检测玉米和大豆转化体事件MON810和GTS40-3-2。结果表明,83.3%的饲料含有转基因成分。所抽取的玉米、大豆、猪饲料和鸡饲料转基因成分阳性率分别为6.67%、100%、93.3%和73.3%。实时荧光定量PCR检测结果与定性PCR一致。结果提示,鸡和猪饲料中转基因成分在山西市场的占有率较高。 展开更多
关键词 商业化鸡饲料 商业化猪饲料 转基因玉米 转基因大豆 定性PCR 实时荧光定量PCR 转化体事件MON810和gts40-3-2
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大豆及豆制食品中转基因成分检测分析 被引量:3
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作者 王超 谭冬梅 +2 位作者 王红 瞿聪 韦程媛 《食品科技》 CAS 北大核心 2017年第9期315-321,共7页
建立大豆及豆制食品中转基因成分分析的real-time PCR扩增体系和方法。选择市售的大豆、豆粉、豆干、豆腐、豆浆和腐竹等6种大豆及豆制食品,针对不同的样品探索高质量基因组DNA的提取方法,扩增大豆内参基因lectin进行质量检测。针对我... 建立大豆及豆制食品中转基因成分分析的real-time PCR扩增体系和方法。选择市售的大豆、豆粉、豆干、豆腐、豆浆和腐竹等6种大豆及豆制食品,针对不同的样品探索高质量基因组DNA的提取方法,扩增大豆内参基因lectin进行质量检测。针对我国批准的3种主要转基因大豆品系(GTS40-3-2,A2704-12和MON89788)设计特异性的引物和探针,进行real-time PCR检测。购买3种转基因大豆品系的标准品作为质控对照。从该6种大豆及豆制食品中均提取到了高质量的基因组DNA,建立了稳定的针对外源基因特异性、结构特异性和品系特异性片段检测的real-time PCR扩增体系。成功建立了6种大豆及豆制食品中针对3种转基因大豆品系成分检测的real-time PCR方法。 展开更多
关键词 大豆制品 转基因成分检测 转基因大豆品系 gts40-3-2 A2704-12 MON89788 REAL-TIME PCR
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