GNAS1基因T393C多态性与特发性室性心律失常的相关分析

目的分析Gs蛋白α亚基基因(GNAS1)T393C单核苷酸多态性(SNP)与特发性室性心律失常的相关性。方法分别选取特发性室性心律失常患者165例及健康对照162例,采用PCR-RFLP分析GNAS1基因T393C等位基因型及等位基因频率分布。结果两组基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P值分别为0.545 4和0.663 5)。T393C多态性等位基因型频率和等位基因频率在两组间比较具有显著性差异(P<0.01),CC基因型及393C等位基因的频率在病例组中显著增高。结论GNAS1基因T393C多态性与特发性室性心律失常有相关性。

GNAS1基因T393C多态性与EGFR突变状态未明复治晚期非小细胞肺癌TKI疗效的关联研究

背景与目的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)肿瘤组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor recetor,EGFR)突变是酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)最重要的疗效预测指标,但患者常常因肿瘤组织量太少导致EGFR突变状态未明。TKI可以诱导肿瘤细胞凋亡,并与许多凋亡相关基因表达相关。通过检测GNAS1基因T393C多态性,探讨其与EGFR突变状态未明的复治晚期NSCLC小分子TKI治疗疗效的关系。方法入组2009年1月1日-2012年4月30日就诊于浙江省肿瘤医院的116例复治晚期NSCLC患者,所有患者既往均接受过化疗,进展后接受吉非替尼或厄洛替尼靶向治疗。采用多聚酶链反应方法检测患者外周血白细胞中GNAS1基因T393C多态性。采用SPSS 18.0统计软件分析。结果总有效率29.3%,GNAS1基因T393C各基因型患者间的有效率无明显差异。相比GNAS1基因其它基因型,CC型疾病控制率更低(46.2%vs 73.8%,P=0.039)。单因素分析中位PFS,CC型中位无进展时间短于其它基因型(2.3个月vs 6.0个月,P=0.005),而女性长于男性(10.2个月vs 4.6个月,P=0.04);不吸烟者长于有吸烟史者(11.9个月vs 2.5个月,P<0.001);病理类型为腺癌长于其他类型(11.9个月vs 4.1个月,P<0.001),均达到统计学差异。多因素分析结果显示,包括吸烟史、ECOG评分和病理类型、GNAS1基因多态性为PFS的独立预后因素(P=0.006)。结论对复治晚期EGFR突变状态未明的NSCLC,GNAS1基因T393C基因型为CC者是提示近期疗效较差的指标。

GNAS1基因T393C单核苷酸多态性与非瓣膜性房颤的相关性

目的分析中国汉族人群Gs蛋白α亚基基因(GNAS1)T393C单核苷酸多态性(SNP)与非瓣膜性房颤是否存在相关性。方法分别选取非瓣膜性房颤患者90例及正常对照90例,采用PCR-RFLP分析非瓣膜性房颤患者GNAS1基因T393C等位基因型及等位基因频率分布特点,并通过研究其与心率变异性(HRV)的关系,从而分析GNAS1基因T393C位点与非瓣膜性房颤患者自主神经活动规律的关系。结果 GNAS1基因T393C多态性等位基因型频率和等位基因频率在两组间比较具有显著性差异(P<0.01),CC基因型及T393C等位基因的频率在病例组中显著增高;pNN50、LF、LF/HF在不同基因型间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GNAS1基因T393C SNP可能与中国汉族人群非瓣膜性房颤的发生有明显的相关性。

TT genotype of GNAS1 T393C polymorphism predicts better outcome of advanced non-small cell lung cancer patients

AIM: To evaluate the potential prognostic value of GNAS1 T393 C polymorphism in advanced non-small cell lung cancer.METHODS: We extracted genomic DNA from the peripheral blood leucocytes of 94 patients with advanced non-small cell lung cancer. Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to determine the allelic discrimination. The correlation between genotype and overall survival was evaluated using the multivariate analysis and Kaplan-Meier approach.RESULTS: Thirty-eight out of 94(40%) patients displayed a TT genotype, 29 out of 94(31%) a CT genotype and 27 out of 94(29%) a CC genotype. The median survival of TT(25 mo) genotype carriers was longer than CT(12 mo) or CC(8 mo) genotype carriers. The favorable TT genotype predicted better overall survival(OS)(2-year OS: 48%; P =0.01) compared with CT(2-year OS: 18%) or CC(2-year OS: 15%) genotype. However, dichotomization between C-genotypes(CC + CT) and T-genotypes(TT) revealed significantly lower survival rates(2-year OS: 16%; P = 0.01) for C allele carriers.CONCLUSION: Our data provided strong evidence that the GNAS1 T393 C genetic polymorphism influenced the prognosis in advanced non-small lung cancer with a worse outcome for C allele carriers.

人成骨样细胞SaOS-2向成骨分化过程中GNAS1基因的表达变化

目的:对成骨分化过程中GNAS1基因的表达进行研究.方法:对人成骨样细胞Sa OS-2进行成骨定向分化,采用茜素红染色、实时定量PCR和免疫印迹检测成骨分化效果和分化过程中GNAS1的表达变化.结果:实时定量PCR结果显示,RUNX2基因在成骨分化第3天表达最高,之后呈下降趋势,而实时定量PCR和免疫印迹均检测到GNAS1基因在成骨分化第3天表达最低,之后呈升高趋势.结论:GNAS1基因在成骨分化过程中表达存在差异,提示对成骨细胞分化具有调控作用.

GNAS1 T393C基因多态性与实体瘤遗传易感性的Meta分析

目的:系统评价GNAS1 T393C基因多态性与实体瘤遗传易感性的关系。方法:检索《PubMed》、《Web of Science》、《Cochrane Library》、《Embase》、《中国期刊全文数据库》、《中国生物医学文献数据库》、《维普数据库》、《万方数据库》,收集研究GNAS1 T393C基因多态性与实体瘤遗传易感性文献,文献发表时间为自数据库建库以来至2018年8月。由两位评价员独立筛选文献、提取资料,采用stata 12.0统计软件进行Meta分析。结果:共纳入7项研究,包括1 313例实体瘤患者。Meta分析结果显示,携带GNAS1 T393C TT基因型和TC+CC基因型人群实体瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.292),携带GNAS1 T393C T等位和C等位基因人群实体瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.355)。亚组分析显示,携带GNAS1 T393C TT基因型和TC+CC基因型亚洲人和高加索人实体瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.245、P=0.521),携带GNAS1 T393C T等位和C等位基因亚洲人和高加索人实体瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.208、P=0.206);携带GNAS1 T393C TT基因型和TC+CC基因型人群泌尿生殖系统肿瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.300),携带GNAS1 T393C T等位和C等位基因人群泌尿生殖系统肿瘤的遗传易感性差异无统计学意义(P=0.266)。结论:GNAS1 T393C基因多态性与实体瘤遗传易感性无明显相关性。

乳房过早发育患者活化的GNAS1基因突变

目的:为了确认在有乳房发育过大和(或)至少持续1年的慢性波动性的乳房过早发育而无其他性早熟体征、骨骼发育异常或McCune-Albright综合征典型皮肤损害的女童的GNAS1基因突变。研究设计:笔者对前述23位女孩的白细胞DNA,应用等位基因特异性的聚合酶链反应和酶切技术研究了其GNAS1基因的突变。结果:14例女童有波动性乳房发育,9例女童为乳房发育过大。分子学研究表明6例女童在密码子201的精氨酸由组氨酸代替[R201H(+)]。3例R201H(+)女童在平均实足年龄为10.8岁时出现月经初潮,9例R201H (-)女童在平均年龄为11岁时出现月经初潮。结论:在一些有慢性波动性乳房过早发育和(或)乳房发育过大而无其他McCune-Albright综合征典型体征的女童可观察到GNAS1基因的活化突变。

儿童进行性骨发育异常一例GNAS1 基因突变及临床特征的研究

目的探讨儿童进行性骨发育异常（POH）的临床特征、GNAS1基因突变及发病机制。方法总结1例POH患儿的临床特点、病理改变、影像学表现，进行家系调查。对这一家系的GNAS1基因进行测序确定基因突变位点，进行长期随访，并文献综述。结果患儿就诊年龄11岁4个月，男，新生儿期起病，病情慢性、进行性发展；表现右侧小腿背侧局部皮肤表面凹凸不平，多个米粒样或不规则小片状隆起，触及如骨样坚硬，左侧下颌、左侧咀嚼肌、左侧髋关节外侧皮下及深部组织不规则片状骨样硬结，逐渐出现张口困难。病变局部病理组织学检查显示：在结缔组织中可见疏松的纤维母细胞的增生、间质水肿，伴结缔组织的灶状骨化，形成骨组织。放射影像学显示：左侧下颌骨周围肌肉内和皮下层可见絮状高密度影，左侧咀嚼肌受累明显，CT三维重建显示左侧颞颌关节脱位。左侧髋关节外侧肌肉可见片状高密度影，其中密度不均匀。左足背皮下及跟腱可见板层状高密度影，与骨长轴平行，双手及双足未见巨拇趾及短趾（指）畸形改变。实验室血钙、血磷、碱性磷酸酶正常；同父异母兄弟及母系父系家族中均无相同疾病患者；DNA测序结果显示在父亲与患儿GNAS1外显子7发现等位基因突变，外显子5发现1个基因多态位点。结论中国儿童可发生POH，患儿在婴儿期出现皮肤异位骨化，并在儿童期进行性发展，出现皮肤、皮下深部组织、肌肉的异位骨化，可以出现颜面部组织的骨化。DNA测序结果显示突变位点与国外文献报道不同，但突变所在外显子位置与国外报道一致。

GNAS1 T393C多态性与晚期非小细胞肺癌生存的相关性研究

[目的]分析GNAS1 T393C多态性与晚期肺癌患者总生存率的相关性。[方法]选取2010年3月至2012年3月94例经病理证实Ⅲ~Ⅳ期接受放疗或化疗的肺癌患者。提取患者全血基因组DNA,应用PCR扩增目的基因片段,Sanger双脱氧测序方法分析GNAS1T393C位点的单核酸多态性基因型。应用SPSS12.0软件COX生存分析临床因素及基因型与晚期肺癌患者生存的相关性。[结果]随访至2012年3月,94例肺癌患者中位生存期14个月,1年、2年总生存率分别为61%和35%。COX生存分析显示GNAS1 T393C三种基因型TT、TC和CC间生存率有统计学差异(OR=0.660,95%CI:0.051~8.568,P=0.039);携带等位基因C的患者生存率明显低于等位基因T携带者(OR=0.333,95%Cl:0.026~4.284,P=0.030)。[结论 ]GNAS1 T393C多态性与肺癌总生存率相关,携带等位基因C的肺癌患者预后更差。

人类GNAS1基因突变的研究进展

GNAS1通过不同的启动子和共同的2-13号外显子转录产生Gsα,NESP55,XLαs等多种基因产物,主要产物是异源三聚体的Gsα,介导激素等多种细胞外因子的细胞内信号转导。GNAS1的种系失活性突变会导致Albright遗传性骨营养不良症（AHO）。活化的体细胞突变会导致以环磷酸腺苷（cAMP）为有丝分裂信号的细胞增殖,经典的表现为McCune-Albright综合征（MAS）。A366S突变发生在男性患者可表现为假性甲状旁腺功能减退症Ⅰa型（PHPⅠa）和睾丸中毒症并存。组织特异性的激素抵抗可能是由于组织特异性的GNAS1印记缺陷所致。

GNAS1 T393C多态性与放射性肺炎的相关性研究

[目的]分析GNAS1 T393C多态性与肺癌放疗疗效、血液毒性、放射性食管炎和放射性肺炎的相关性。[方法]共收集经病理证实的接受放疗的Ⅲ~Ⅳ期肺癌患者67例。应用PCR扩增目的基因片段,sanger双脱氧测序方法分析GNAS1 T393C位点单核酸多态性的基因型。应用卡方检验和Logistic回归分析临床因素及基因型与肺癌放疗疗效、血液毒性、放射性食管炎和放射性肺炎的相关性。[结果]本组研究病例中位年龄为61岁。单因素分析显示同时使用化疗可以增加肺癌放疗疗效（P=0.045）,但是相应的骨髓抑制发生率增加（P=0.004）。肺鳞癌患者更容易发生放射性肺炎（P=0.015）。GNAS1 T393C等位基因T携带者发生放射性肺炎的比例明显高于等位基因C携带者（P=0.035）;进一步通过Logistic回归分析校正其他可能临床因素影响后,提示GNAS1 TT基因型发生放射性肺炎的可能性更大（P=0.06,OR=0.26,95%CI：0.06~1.09）。[结论 ]GNAS1 T393C等位基因T与放射性肺炎相关,可能成为其预测因素,需要扩大样本量进行更深入的研究。

人GNAS1基因克隆、真核表达载体的构建及瞬时转染Hela细胞

目的:克隆人GNAS1基因编码区序列、构建真核表达载体并瞬时转染Hela细胞。方法:通过RT-PCR克隆GNAS1基因编码序列,亚克隆至pMD19载体,测序鉴定正确后,通过酶切连接至真核表达载体pEGFP-N1,通过菌液PCR和酶切鉴定获得pEGFP-GNAS1重组质粒;表达载体以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞,并用实时定量PCR检测外源基因在Hela细胞中的表达。结果:克隆到GNAS1基因并获得了pEGFP-GNAS1表达载体,在Hela细胞中获得了GNAS1的过量表达。结论:成功克隆了GNAS1基因编码序列,并构建其真核表达载体,瞬时转染至Hela细胞,为进一步深入研究Gsα蛋白生物学作用奠定基础。

新疆维吾尔族和汉族GNAS1基因T393C单核苷酸多态性与非瓣膜性心房颤动相关性的研究

目的分析新疆地区维吾尔族和汉族人群Gs蛋白α亚基基因(GNAS1)T393C单核苷酸多态性(SNP)与非瓣膜性心房颤动(简称房颤)的发生是否存在相关性。方法选取新疆地区非瓣膜性房颤患者维吾尔族103例及汉族102例,选取健康人群维吾尔族100例及汉族113例,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析非瓣膜性房颤患者GNAS1基因T393C基因型及等位基因频率分布特点。结果 GNAS1基因T393C多态性TT、TC、CC基因型和等位基因频率在汉族人群中病例组与对照组两组间比较无统计学差异(P=0.179,P=0.068),在维吾尔族人群中病例组与对照组两组间比较具有统计学差异(P=0.014,P=0.025)。结论GNAS1基因T393C在新疆地区汉族人群中与房颤无相关性,在维族人群中与房颤相关。

GNAS1基因T393C多态性与肾透明细胞癌临床分期和病理分级的关系

目的研究GNAS1基因T393C多态性与肾透明细胞癌的临床分期和病理分级的关系。方法收集42例手术切除肾透明细胞癌的标本,应用PCR-限制性片段长度多态性法,对肾透明细胞癌患者和健康查体者进行基因多态性的比较。结果在GNAS1基因T393C多态性与肾透明细胞癌的病理分级及临床分期无明显相关性(P>0.05)。结论 GNAS1基因T393C多态性与肾透明细胞癌的临床分期及病理分级无明显相关关系。

LncRNA GNAS-AS1通过调节miR-449a/Notch1轴参与胃癌细胞的增殖和迁移

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组、si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组。实时荧光定量PCR检测GNAS-AS1、miR-449a和Notch1 mRNA的表达;MTT实验、平板克隆形成实验检测增殖;wound healing实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。Western Blot检测Notch1、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449a和GNAS-AS1、Notch1的关系。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中GNAS-AS1、Notch1 mRNA表达升高,miR-449a表达降低(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-GNAS-AS1组AGS细胞GNAS-AS1表达、OD_(490)值、克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin蛋白表达表达降低,miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与si-GNASAS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组相比,si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组OD_(490)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin表达升高(P<0.05),miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。GNAS-AS1靶向负调控miR-449a表达,miR-449a靶向负调控Notch1表达。结论沉默GNAS-AS1可能通过上调miR-449a来抑制Notch1蛋白的表达,从而抑制GC细胞增殖、迁移、侵袭过程。

以下肢皮肤骨瘤为首发症状的Albright综合征一例

患儿,女,1岁6个月。右下肢多发性皮下丘疹1年余。皮损组织病理示:表皮未见异常,真皮及皮下组织周围可见分化成熟的骨组织、骨细胞。小儿为低出生体重儿,生长发育障碍并伴有甲状旁腺素升高。诊断:Albright遗传性骨营养不良。

假性甲状旁腺功能减退症的研究进展

假性甲状旁腺功能减退症是一种罕见的遗传性疾病,由甲状旁腺激素(PTH)抵抗所致。临床特点有低钙高磷血症、血清PTH升高,部分可表现为Albright遗传性骨营养不良症,并伴有多发激素抵抗。分子遗传学研究表明本症与编码Gs蛋白α亚基(Gsα)的GNAS1基因缺陷相关。Gsα的失活性突变导致AHO畸形,而多发激素抵抗可能是由于组织特异性的GNAS1印记缺陷所致。补充钙剂和活性维生素D是有效的治疗方法,基因治疗是未来的研究方向。

ACTH非依赖性Cushing综合征的分子生物学研究进展

促肾上腺皮质激素(ACTH)非依赖性Cushing综合征包括肾上腺皮质腺瘤、肾上腺皮质癌和肾上腺皮质结节样增生,其发病机制主要与基因突变(GNAS1、PRKAR1A和PDE11A)、异位受体表达、WNT通路异常激活及抑癌基因杂合丢失等诸多因素相关,该文就上述发病机制作一综述。

GNAS-AS1通过MAPK信号通路对肺鳞癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的 阐明长链非编码RNA GNAS反义RNA 1(GNAS-AS1)在肺鳞癌(LUSC)进展中的生物学作用和机制。方法 UALCAN在线分析LUSC组织的GNAS-AS1水平,荧光定量PCR检测LUSC细胞的GNAS-AS1水平。向SK-MES-1细胞分别转染靶向GNAS-AS1的小干扰RNA(GNAS-AS1-siRNA)、无关序列siRNA-NC或表皮细胞生长因子EGF(MAPK通路激活剂),分为NC组(阴性对照)、GNAS-AS1-siRNA组(沉默GNAS-AS1表达)和GNAS-AS1-siRNA+EGF组(沉默GNAS-AS1表达+激活MAPK通路)。采用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验评估SK-MES-1的增殖、迁移和侵袭能力。Western blotting检测p-MEK2/MEK2和p-ERK1/ERK1水平。结果 GNAS-AS1在LUSC组织中高表达,且与肿瘤分期相关(P<0.05)。与正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,LUSC细胞(H1703、H520、H226和SK-MES-1)的GNAS-AS1表达上调(P<0.01)。与NC组相比,GNAS-AS1-siRNA组SK-MES-1细胞的细胞活力、迁移和侵袭能力均降低(P<0.05)。此外,与GNAS-AS1-siRNA组相比,GNAS-AS1-siRNA+EGF组SK-MES-1细胞的细胞活力、迁移和侵袭能力均增强(P<0.05)。GNAS-AS1-siRNA组p-MEK2和p-ERK1水平低于NC组和GNAS-AS1-siRNA+EGF组(P<0.05)。结论 GNAS-AS1通过调节MAPK信号通路活性抑制LUSC进展,提示GNAS-AS1可能是肺癌潜在治疗靶点。