AFP、GP73及GPC3检测在原发性肝癌诊断及预后评估中的价值

目的分析血清甲胎蛋白(AFP)、高尔基体糖蛋白73(GP73)及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)检测在原发性肝癌诊断及预后评估中的价值。方法选取2021年5月至2022年5月郑州大学第一附属医院收治的原发性肝癌患者52例为研究对象,另外选取同期本院收治的肝硬化患者46例与健康体检者48名,分别设为肝硬化组与健康组。对比三组以及PHC组不同病理分期者AFP、GP73及GPC3水平;比较PHC不同预后者的一般资料及AFP、GP73及GPC3水平,采用多元Logistic回归分析影响PHC预后的危险因素,绘制ROC曲线分析血清AFP、GP73及GPC3单独检测及联合检测诊断PHC的效果。结果AFP、GP73、GPC3水平:PHC组>肝硬化组>健康组,差异具有统计学意义(P<0.05);PHC组不同病理分期者AFP、GP73、GPC3水平:Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,差异具有统计学意义(P<0.05);预后良好组45例,预后不良组7例。两组性别、年龄、BMI指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组凝血酶原、红细胞计数、载脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示,凝血酶原、红细胞计数、载脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3水平上升是影响PHC患者预后不良的危险因素(P<0.05);AFP、GP73、GPC3联合检测诊断PHC的敏感度、特异度分别为0.956、0.857;AUC=0.950(95%CI:0.909~0.991),明显高于AFP、GP73、GPC3单独检测。结论血清AFP、GP73、GPC3三者联合在PHC诊断中具有较高的临床价值,可用于PHC的早期诊断,临床可通过检测上述指标血清水平来评估PHC患者的预后情况。

lncRNA-ATB/miR-141-3p/GP73轴介导EMT促进TACE抵抗的研究进展

经导管动脉化疗栓塞(TACE)广泛应用于中晚期肝癌的治疗。然而,反复的TACE治疗并非总能对预后产生积极影响,部分学者将此现象称为TACE抵抗。由于定义的模糊和关键性证据不足,TACE抵抗的概念尚存争议。前有研究表明,上皮–间充质转化(EMT)是肝癌复发转移的重要原因,而肝癌的转移或许是TACE抵抗发生的潜在机制之一,故本文主要讨论TACE抵抗的相关研究,特别关注了GP73、miR-141-3p、lncRNA-ATB等介导EMT潜在促使TACE抵抗发生的研究进展,期望为中晚期肝癌治疗提供新靶点和理论基础。

肝癌及肝硬化患者血清中GP73的表达及临床意义

目的:本研究拟探讨肝癌及肝硬化患者血清中GP73的表达及早期诊断价值。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测75例肝癌患者、32例肝硬化患者及30例健康对照组血清GP73的浓度,分析肝癌患者血清GP73表达与有无乙肝感染、肿块大小、门脉癌栓及远处转移等临床指标的关系。结果:肝癌患者血清GP73浓度显著高于肝硬化组(P<0.001)及正常对照组(P<0.001),肝硬化患者血清GP73浓度与正常对照组差异无统计学意义(P=0.508)。进一步研究发现,血清中AFP与GP73不存在相关性(spearman相关分析,P=0.667),在所有入组HCC患者中,有41.3%上述两个指标中仅有一个升高,54.7%两者皆升高,而仅有4%两个指标均不升高。使用非条件Logistic回归分析GP73水平的影响因素(包括性别、年龄、CHILD分级、肿块大小、门脉癌栓、肝内转移、远处转移、TNM分期),结果提示只有肿块大小具有统计学意义(P=0.03)。ROC分析发现GP73和AFP联合检测后敏感性提高,曲线下面积增加。结论:血清GP73有可能成为肝癌的一个血清标志物,有一定早期诊断的价值。

血清GPC3、GP73和AFP联合检测在HCC中的临床价值

目的研究血清磷脂酰肌醇硫酸类肝素蛋白聚糖3(GPC3)、高尔基体蛋白73(GP73)和甲胎蛋白(AFP)联合检测在原发性肝细胞癌(HCC)诊断中的临床价值。方法用ELISA方法检测60例HCC患者、56例肝硬化患者和50名健康体检者血清GPC3和GP73水平;用微粒子酶免疫分析法(MEIA)测定血清AFP水平。结果 HCC患者的血清GPC3和GP73水平及阳性率均显著高于肝硬化组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清GPC3和GP73水平与AFP水平、HCC病灶大小、门静脉癌栓(PVI)浸润和HBV感染均无相关。AFP联合GPC3或GP73检测诊断HCC的敏感性(73.33%,80.00%)均优于AFP单独检测(53.33%);GPC3+GP73+AFP联合检测的约登指数最高(69.69%),敏感性为86.77%,特异性为83.02%。在AFP阴性的HCC病例中,GPC3和GP73的阳性率均为42.86%。结论 GPC3和GP73可作为新的肿瘤标志物与AFP联合检测,提高血清标志物检测对HCC的诊断率。

高尔基体驻膜糖蛋白GP73启动子克隆

[目的]寻找并克隆有活性的高尔基体膜蛋白GP73的启动子。[方法]对GP73基因转录起始位点上游1 000 bp至下游400 bp序列进行软件分析预测,以肝癌细胞系Huh7基因组DNA为模板,扩增目标片段,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组质粒,转染细胞后在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并采用流式细胞仪定量检测转染细胞的荧光强度。[结果]发现GP73转录起始位点上游980到下游330 bp长1 310 bp的序列具有启动子功能。该区域可能具有两个核心启动子序列和多个保守序列,包括TATA box和NF-κB、AP1、GC-SP1等DNA结合序列。[结论]该研究为探讨GP73的转录机制提供了参考。

益气解毒中药联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌疗效及对T淋巴细胞亚群、GP-73、GPC-3水平的影响

目的观察益气解毒中药联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌疗效及对T淋巴细胞亚群、高尔基体糖蛋白-73(GP-73)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC-3)水平的影响。方法将130例原发性肝癌患者随机分为2组,对照组65例给予肝动脉化疗栓塞术治疗,观察组65例在此基础上加用益气解毒中药治疗,观察2组治疗前后中医证候积分、肝功能指标水平、EORTCQLQ-C30评分、T淋巴细胞亚群水平、GP-73及GPC-3水平变化情况,统计2组近期疗效。结果 2组治疗后气短、神疲乏力、面色淡白、头晕眼花、舌淡及脉细积分均显著低于治疗前(P均<0.05),且观察组治疗后各项积分均显著低于对照组(P均<0.05);2组治疗后躯体功能、角色功能、情绪功能、认知功能及社会功能评分显著提高(P均<0.05),疲倦、恶心呕吐及疼痛评分显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后各项指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);对照组治疗前后T淋巴细胞亚群水平比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均显著提高(P均<0.05),CD8+水平显著降低(P<0.05),且观察组治疗后各项指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组近期治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论益气解毒中药联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌可有效缓解临床症状体征,保护肝功能,提高日常生活质量,调节机体免疫系统功能,降低GP-73和GPC-3水平。

血清AFP、GP73、GPC3单独及联合检测对肝细胞癌的诊断价值

目的探讨血清中AFP、GP73、GPC3三种肿瘤标志物在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的诊断价值及联合检测的意义。方法检测了45例HCC患者、32例乙肝携带者和30例正常体检者血清中AFP、GP73、GPC3的含量并进行相关分析。结果 AFP、GP73、GPC3用于诊断HCC时的敏感度和特异度分别是57.8%和90.6%、80.0%和98.3%、31.1%和92.3%,ROC曲线下面积分别为0.874、0.963、0.507;AFP与GP73联合,AFP与GPC3联合,GP73与GPC3联合以及三种标志物联合时敏感度和特异度分别是93.9%和88.9%、73.3%和83.8%、84.4%和91.5%、95.6%和82.1%,ROC曲线下面积分别为0.976、0.821、0.963、0.976。结论联合检测血清中AFP和GP73对HCC的诊断具有重要价值,血清GPC3检测对HCC的诊断意义较小。

Gp73在健康人群中的参考范围调查及其意义

目的：研究高尔基体蛋白73（Gp73）在广州地区健康人群中不同年龄段的参考范围及其意义。方法：选取肝功能正常无肝脏疾病的广州军区总医院体检人群血清样本，依据年龄段分青年组（18—40岁）、中年组（41～59岁）、老年组（≥60岁）3组，分别收集201份、188份及219份，共计608份血清样本，另设107例肝癌患者血清为对照组，分别进行Gp73测定，计算各组Gp73参考范围，并对组间及组内结果进行比较分析。结果：青年组、中年组、老年组及肝癌对照组Gp73含量参考范围分别为42．64—47．62μg／L、51．60～58．06μg／L、69．93～79．44μg／L及180．89。230．67μg／L。中年组Gp73含量男性与女性比较，无显著差异（P〉0．05）；老年组男性范围为78．20～94．30μg／L，女性为59．26～68．40μg／L；青年组男性范围为38．58～45．28μg／L．女性为44．60—51．86μ／L，各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05），通过肝癌组确立Gp73用于诊断原发性肝癌的临界值为101．54μg／L，在此临界值下的诊断灵敏度和特异度分别为76．6％和93．1％。结论：通过对健康人群各年龄段Gp73含量参考范围调查发现，Gp73的表达水平随着年龄的增长，其表达含量有增加的趋势：中年组男性与女性Gp73含量无明显差异，而青年组和老年组男性与女性差异明显。因此，实验室建立自身的参考值有助于提高医疗质量，避免误诊误治，也是临床作出诊断的重要依据。

N-糖基化修饰蛋白gp73与肝硬化患者Child-Pugh的关系

目的评价N-糖基化修饰蛋白gp73的血清水平与肝硬化患者Child-Pugh之间的关系及其可能的临床意义。方法所观察的患者均为2009年1月~2010年10月在北京地坛医院门诊及住院肝硬化患者,所有患者均为HBsAg阳性。观察患者共610例,其中男性患者448例,年龄17~82岁,平均48岁;女性患者162例,年龄18~76岁,平均55岁。入组肝硬化患者的Child-Pugh分级主要依据血清白蛋白、总胆红素、凝血酶原活动度、腹水及肝性脑病评价等5项指标。血清gp73浓度采用ELISA法检测。结果伴随肝功能衰退,血清gp73水平也相应升高。血清gp73水平Child-Pugh为C级的患者（255.78 ng/mL±100.89 ng/mL）显著高于B级（203.30 ng/mL±99.15 ng/mL）和A级的患者（125.28 ng/mL±67.05 ng/mL）。血清gp73与白蛋白之间呈显著负相关（r=-0.52,P〈0.0001）。结论 HBV感染肝硬化患者血清gp73水平随肝功能恶化而升高。

不同肝脏疾病血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平的表达

目的研究不同肝脏疾病血清高尔基蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、甲胎蛋白(AFP)及α-L-岩藻糖苷酶(AFU)表达水平及临床意义。方法选取我院于2014年1月至2015年11月收治的61例急性肝炎组,89例慢性肝炎组,26例肝硬化组,32例肝癌组及同期进行体检的60名健康对照组为研究对象,对5组分别进行单项血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU检测和联合检测,并使用ROC曲线对检测结果进行评价。结果肝癌组GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平与其他肝脏疾病组和健康对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05);联合检测诊断的灵敏度、特异度比单项检测都高,其中灵敏度达90.6%,特异度达89.0%。GP73、AFP-L3、AFP及AFU指标的ROC曲线面积分别为0.811、0.774、0.643、0.609;3项联合指标的ROC曲线面积为0.957。结论 GP73、AFP-L3、AFP及AFU在肝脏疾病发生和发展中发挥重要作用,联合检测区分肝癌与其他肝脏疾病价值显著,能显著提高诊断的灵敏度和精确度,ROC曲线评价能直观呈现诊断结果。

GP73与肝癌关系的研究进展

肝癌是一种恶性程度高、进展快的肿瘤。因其早期常无明显症状,一旦发现已多属晚期,虽经积极治疗,其预后仍差。肝炎、肝硬化和肝癌的关系密切,特别是慢性病毒性肝炎导致的肝硬化,更是肝癌的危险因素。AFP是目前世界公认的诊断肝癌的血清标记物,但因其敏感性和特异性不高,时有误诊漏诊,故并不令人满意。GP73是新近发现的一种肝癌相关蛋白,它在人体的多种组织中均可表达,但在肝细胞中几乎不表达。最近研究表明GP73在肝炎、肝硬化和肝癌中均有明显表达,尤以肝癌最为显著,肝硬化次之。因此,对肝炎后肝硬化患者用GP73进行监测,对肝癌的早发现、早诊断、早治疗具有十分重要的意义。GP73对肝癌的敏感性和特异性均优于AFP,若两者联合应用则更可提高对早期肝癌的诊断率。GP73有望成为最具潜力的诊断肝癌的一个新的血清标记物。

PIVKA-Ⅱ与GP73联合检测在AFP低浓度肝癌诊断中的临床价值

目的:探讨异常凝血酶原(protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ)与高尔基体蛋白(Golgi glycoprotein,GP73)联合检测对诊断血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)低浓度的原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)的临床价值。方法:选取本院2015年3月-2016年12月AFP低浓度PHC72例,其他肝病68例,同期体检正常对照组110例,分别检测PIVKA-Ⅱ(ELISA)和GP73(ELISA)、AFP(化学发光法)的血清浓度水平。结果:PIVKA-Ⅱ与GP73联合检测在AFP低浓度PHC的系列试验特异度高达100%,联合试验敏感度达90.2%。结论:单独检测PIVKA-Ⅱ和GP73对AFP低浓度肝癌具有较高的诊断价值,PIVKA-Ⅱ与GP73联合检测可提高AFP低浓度肝癌诊断。

Cloning of the Promoter Regions of Golgi Membrane Glycoprotein GP73

[Objective] The aim of this study is to clone the active promoter of golgi membrane glycoprotein GP73. [Method] The sequence within the range of upstream 1 000 bp and downstream 400 bp of transcription initiation site was analyzed, the genomic DNA of hepatoma cell line Huh-7 was regarded as template for PCR amplification. The amplified fragment was cloned into recombinant construct with enhanced green fluorescent protein (EGFP) report gene. The expression of EGFP in recombinants were observed under fluorescence microscope after transfection, with the assistant of flow cytometry. [Result] The 1 310 bp ranging between upstream 980 bp and downstream 330 bp of transcription initiation site assumed promoter function. The region contains two core promoters and several conserved sequences including TATA box and many DNA binding sites such as NF-κB, AP1, GC-SP1. [Conclusion] The cloning of the promoter provides a reference for the study of the transcription mechanism of GP73.

转化生长因子β上调肝癌中GP73表达的分子机制

目的:研究转化生长因子β(TGF-β)在翻译水平、转录水平对肝癌细胞表达高尔基蛋白73(GP73)的影响。方法:用不同时间(0、1、2、4、8 h),不同浓度(0、1、2 ng/mL)的TGF-β1刺激转染了pcDNA3-Flag-GP73、pcDNA3-Flag-V质粒的HepG2细胞,分别用免疫印迹检测细胞内GP73蛋白水平变化,荧光定量PCR检测细胞内GP73 mRNA表达水平变化;双萤光素酶报告基因检测TGF-β1能否激活GP73基因启动子。结果:在TGF-β1的刺激下,细胞GP73蛋白及mRNA水平均明显上调;TGF-β能激活GP73启动子且使其活性增强6倍左右,但对GP73启动子突变体无作用。结论:TGF-β能在蛋白水平、mRNA水平影响GP73的表达,GP73是TGF-β作用的靶分子。

人高尔基体蛋白GP73基因的克隆、表达、单克隆抗体的制备及鉴定

目的:高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是新近发现的肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的重要血清学标志物。通过克隆、表达人GP73,制备抗GP73单克隆抗体并鉴定其特性。方法:克隆GP73基因,构建GP73原核表达载体pComb3XSS-GP73,诱导表达,以HisFF Trap亲和层析柱纯化GP73-6×His重组融合蛋白。以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗GP73单克隆抗体。以间接法ELISA检测抗体效价;Western blot鉴定抗体特异性;免疫共沉淀法初步检测肝癌患者血清中GP73表达水平。结果:成功表达并纯化了GP73-6×His重组蛋白;获得5株稳定分泌抗人GP73单克隆抗体杂交瘤细胞株;免疫共沉淀证实抗GP73单克隆抗体能与肝癌患者血清中GP73蛋白特异性结合,GP73水平在肝癌患者血清中较正常人显著升高。结论:成功制备了抗人GP73单克隆抗体,为后期建立检测人GP73的双抗体夹心ELISA方法打下基础。

AFP-L3和GP73在原发性肝癌中的诊断价值

目的探讨AFP-L3和GP73在原发性肝癌中的诊断价值。方法分别检测来我院就诊的肝癌、肝硬化和肝炎患者的AFP-L3和GP73的含量,并对结果进行统计学分析。结果肝癌组与肝硬化和肝炎组GP73和AFP-L3的含量有统计学差异,肝癌组与肝硬化、肝癌组与肝炎组的GP73阳性率和AFP-L3含量有差异,但是肝硬化与肝炎组之间没有差异。血清GP73诊断原发性肝癌临界值为117.66μg/L,曲线下面积0.758,95%置信区间0.593~0.922,其诊断灵敏度为83.33%,特异度为69.1%;血清AFP-L3诊断原发性肝癌临界值为1.09%,曲线下面积0.722,95%置信区间0.539~0.905,其诊断灵敏度为58.30%,特异度为85.5%。结论 AFP-L3和GP73对原发性肝癌的诊断具有重要价值,可为临床决策提供参考。

TACE联合射频消融对中期肝癌患者血清GP73、 AFP、AFP⁃L3的影响

目的观察经肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合射频消融(RFA)治疗中期肝癌(HCC)近期疗效及对血清高尔基体糖蛋白⁃73(GP73)、甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体⁃3(AFP⁃L3)水平的影响。方法以本院收治的300例中期HCC患者,非随机临床同期对照研究及患者自愿原则分为对照组(TACE治疗,n=150)、实验组(TACE联合RFA,n=150),评估两组近期疗效,观察治疗前、治疗后血清GP73、AFP、AFP⁃L3、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,随访两组治疗后1年、2年复发率及总生存率,比较两组安全性。结果实验组近期有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后两组GP73、AFP、AFP⁃L3水平较治疗前明显降低,且实验组明显低于对照组(P<0.05),治疗后两组SOD、MDA较治疗前明显升高(P<0.05),但治疗后两组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组治疗后2年复发率明显低于对照组(P<0.05),两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论与单一TACE治疗比较,TACE联合RFA可明显提高中期HCC患者近期疗效、降低复发率,可有效杀死肿瘤细胞从而使AFP、AFP⁃L3及GP73水平明显下降,此外联合治疗不会增加机体氧化应激反应,安全性好。

GP73与肝癌关系的研究进展

肝癌是常见的恶性肿瘤之一,恶性程度高、死亡率高,其早期诊断对于病人的治疗极为重要。目前临床广为使用的甲胎蛋白检测与影像学相结合的方式,在早期肝癌的敏感性和特异性诊断方面尚存在一些缺陷,寻找更有效的新肿瘤标志物是临床期盼的需求。高尔基体糖蛋白73(Golgi protein-73,GP73)是存在于高尔基体的一种II型跨膜糖蛋白,在早期肝癌患者血清内表达上调,近年来有很多研究认为GP73是最有潜力的肝癌血清标志物之一。本文就近年来GP73与肝癌关系的研究进展做综述。

GP73在肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗肝癌中的临床应用

研究GP73、VEGF及AFP在肝动脉化疗栓塞(TACE)联合射频消融(RFA)治疗肝细胞癌(HCC)前后的变化情况。43例HCC患者同时接受肝穿刺,采用肿瘤组织免疫组织化学法和血清ELISA法检测AFP、VEGF及GP73水平,对治疗前血清GP73阳性38例患者比较其TACE+RFA治疗前后3种指标血中变化情况。2种方法检测患者病理标本及血清AFP、VEGF和GP73水平,差异无统计学意义(P>0.05);血清GP73阳性38例患者经TACE+RFA治疗前后AFP、VEGF及GP73比较,差异均有统计学意义(t=2.749、3.732及7.033,P<0.01)。血清GP73在HCC诊治检测中敏感性及特异性高于AFP,如联合VEGF及AFP检测对TACE+RFA治疗HCC的效果具有重要意义。

原发性肝癌患者血清AFP、GGTⅡ和GP73检测的临床意义

目的探讨原发性肝癌患者血清甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转移酶同工酶II(GGT-II)和高尔基体糖蛋白73(GP73)检测的临床意义。方法选取2012年5月—2014年5月收治的原发性肝癌患者152例(原发性肝癌组),肝良性肿瘤188例(肝良性肿瘤组),健康体检者200例(对照组),采用ELISA法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法和化学发光免疫分析法检测三组血清AFP、GGT-II和GP73水平。结果原发性肝癌组血清AFP、GGT-II和GP73水平高于肝良性肿瘤组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05),肝良性肿瘤组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。单一指标检测AFP、GGT-II和GP73的灵敏度分别为75.66%、82.24%和83.55,特异度分别为75.26%、77.06%和77.58,三项指标联合检测的灵敏度提高到95.39%,而特异度降低到66.75%,与单项检测比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清AFP、GGTⅡ和GP73联合检测诊断原发性肝癌具有灵敏度高的特点,能够明显提高诊断准确率,具有一定的临床推广应用价值。