运动过程中糖皮质激素受体减少的机制探讨——GR mRNA的变化

同步观察大鼠在 7周递增负荷训练过程中血浆皮质酮、肝胞液糖皮质激素受体 (GR)和肝脏GRmRNA的动态变化 ,试图从GRmRNA水平上探讨运动应激后GR变化的机制。SD大鼠随机分为对照组 ,训练 3周组 ,训练 5周组 ,训练 7周组 ,训练 7周 +恢复 1周组。动物训练采用递增负荷的跑台训练。采用放射配体结合分析法测定肝胞液GR结合量 ;定量RT -PCR检测肝GRmRNA表达。结果发现 :(1) 7周递增负荷训练过程中 ,血浆皮质酮浓度表现为不断增加 ,至第 7周达最高 ,第 8周 (恢复周 )又降至接近对照组水平。 (2 )大鼠在 7周递增负荷训练过程中 ,肝胞液GR呈持续下降 ,至训练第 7周降至最低 ,恢复 1周后大鼠肝胞液GR有回升。 (3)在 7周递增负荷训练过程中 ,肝脏GRmRNA的变化与肝胞液GR的变化相近 ,与肝胞液GR的变化不同 ,恢复 1周后肝GRmRNA已恢复至正常水平。结果表明 ,递增运动负荷训练过程中GR结合容量的减少至少部分地发生在mRNA水平上 ,即由于GRmRNA的减少 ,造成GR分子的合成减少。但是 ,GR结合容量的恢复速度比GRmRNA慢 ,提示训练过程中 ,大鼠肝GR结合容量的减少不全是GRmRNA减少的结果 ,可能还有其他影响因素 ,比如GR结合活性的减少和 /或GR蛋白分解加速。

补肾方对自然衰老大鼠海马CA1区GR、MR基因mRNA表达的影响

目的从海马GR、MR基因mRNA表达的变化探讨自然衰老的机理及补肾方的作用机制。方法以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚模型,左归丸和右归丸进行干预,大鼠自20月龄始,左归丸、右归丸均按相当于生药7.5g.kg-1(成人临床用量的15倍)自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;原位杂交检测海马CA1区神经元GR、MR基因mRNA表达。结果与青年组比较,老年组大鼠海马CA1区GR、MR mRNA表达水平均下降(P<0.05);与老年组比较,左归组和右归组大鼠海马CA1区GR、MR mRNA表达水平均升高。差异均有显著性(P<0.05)。结论大鼠衰老与海马GR、MR mRNA表达变化密切相关,补肾方可通过调节海马CA1区神经细胞GR、MR基因mRNA的表达,改善海马功能、延缓机体衰老。

左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的 :观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)mRNA表达的影响 ,探讨海马对下丘脑 垂体 肾上腺 (HPA)轴的调节作用 ,以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退化的作用机制。方法 :以自然衰老大鼠为动物模型 ,采用原位杂交法 ,观察药物对大鼠海马各分区 (DG、CA1、CA2、CA3 )GRmRNA表达变化。结果 :老年大鼠海马各分区GRmRNA表达均明显减弱 ,而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1和CA3分区低下的GRmRNA的表达。结论 :左归丸、右归丸通过提高GRmRNA表达 ,进而改善海马对HPA轴的抑制性调控作用 ,以延缓机体衰老。

生长激素受体mRNA在肝细胞癌和癌旁肝硬化组织中的表达

背景与目的:正常肝组织富含生长激素受体mRNA,但在肝细胞癌、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况不详,因此,本文旨在探讨肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况。方法:采用逆转录-聚合酶链反应方法检测37例肝癌患者肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达。结果:肝癌组织生长激素受体mRNA表达率(30/37,81.0%)较癌旁肝硬化组织的表达率(32/32,100%)低(P<0.05),未分化肝癌的表达率(1/4,20.0%)更低(P<0.5);癌旁肝硬化组织的生长激素受体mRNA的表达量犤积分光密度比值(riOD)为(30.77±8.24)%,n=32犦较正常对照肝组织的表达量犤riOD为(44.93±6.25)%,n=5犦少(P<0.05),重度肝硬化的表达量犤riOD为(21.90±4.72)%,n=8犦更少(P<0.05)。结论:生长激素受体mRNA的表达下调与肝癌的分化程度、癌旁肝硬化的严重程度有关。

滋阴清热方对MRL/lpr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的观察MRL/lpr狼疮鼠皮质醇及糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的变化及滋阴清热方对其水平的影响,探讨中药减轻激素不良反应的机理。方法 40只MRL/lpr狼疮模型鼠随机分为4组,即模型组、中药组、西药组、中西药组。分别给予生理盐水、滋阴清热方、强的松悬液、滋阴清热复方+强的松悬液灌胃,均每日1次,每次0.5mL,连续用药10周。另选用昆明小鼠10只作为正常对照组。应用放射免疫法测定MRL/lpr狼疮鼠糖皮质醇水平,反转录酶-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测GR mRNA,观察各组皮质醇、GR mRNA表达的变化。结果模型组血清皮质醇水平与正常组比较,P>0.05,而GRα mRNA表达明显低于正常组(P<0.05)。西药组GRα mRNA、GRβmRNA下调水平高于中药组和中西药组(P<0.01或P<0.05)。结论滋阴清热方可上调MRL/lpr狼疮鼠GR mRNA表达水平,从而增强糖皮质激素的临床疗效,减少激素不良反应。

黄芩黄酮对硒性白内障晶状体抗氧化酶表达的影响

为探讨黄芩黄酮防治白内障的作用机理 ,采用半定量RT PCR方法比较正常组、白内障组和中药防治组大鼠晶状体中GSH Px、GR和Cu ZnSOD的mRNA水平 .白内障组GSH Px、GR和Cu ZnSOD的mRNA水平在 15d龄时显著高于正常 ,然后下降 ;在 2 7d和 31d龄 ,GR和Cu ZnSOD的mRNA水平下降至与正常无显著差异 ,GSH PxmRNA水平仍略高于正常 .中药防治组晶状体中 ,3种抗氧化酶的mRNA水平在各实验取样点无明显变化 ;其中 ,GR和Cu ZnSOD的mRNA水平一直与正常无显著差异 ,GSH PxmRNA水平略高于正常 .黄芩黄酮可能通过有效清除亚硒酸钠间接产生的活性氧来防止白内障的发生 。

6周递增跑台运动对大鼠肾上腺ACTH、GC受体和血清GC的影响

目的探讨6周递增跑台运动对大鼠血清GC和肾上腺ACTH、GC受体的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠128只,随机分成16组,分别是完全不训练组(A),共4小组,每小组8只;处死当天不训练组(B),共4小组,每小组8只;运动后即刻处死组(C),共4小组,每小组8只;运动后3 h处死组(D),共4组,每小组8只。A组在整个实验过程中不训练,B、C、D组进行6周递增负荷跑台运动。分别在第0、2、4、6周周末处死A、B、C、D组各一小组。取肾上腺和血液,用Real-time PCR测试各小组肾上腺ACTH-R mRNA和GR mRNA的表达,用ELISA法测试各小组血清中GC的含量。结果第0、2、4、6周末4组大鼠的肾上腺中ACTH-R mRNA在第0周、第2周末和第6周末的表达没有显著性差异(P﹥0.05),只是在第4周末B组和C组比A组和D组有显著性升高(P<0.05);各组GR mRNA在第0周和第2周末无显著性差异,第4周末和第6周末的C组和D组比其它两组有极显著性升高(P<0.001);各周末血清中GC含量都表现为C组和D组比其它两组有显著性升高(P<0.05)。结论 6周递增负荷运动过程中,肾上腺ATCH-R mRNA表达表现出时相性和饱和性,其表达并没有和ACTH阳性细胞的表达保持一致,二者具有不同步性,可能是ACTH在运输或在正、负反馈调节环节受到调控的结果。随着运动强度的增大,机体的中GR mRNA表达的含量降低,其表达趋势和GC分泌趋势相反,这应该是机体保持自身稳态的保护机制之一。

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体水平的调节作用

目的:观察黄芪多糖(APS)对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马组织中糖皮质激素受体水平的调节作用。方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组、DM模型组、APS干预组组,采用小剂量链脲佐菌素加高脂饮食饲养的方法建立2型糖尿病肥胖大鼠模型。成模4周后,断头处死所有大鼠,检测各组大鼠血CRH、ACTH、CorT的含量,以及海马组织中糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达。结果:DM模型组血ACTH、CorT含量较正常组显著升高,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠血ACTH、CorT含量显著降低(P<0.05);DM模型组海马GRmRNA含量较正常组极显著降低,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠海马GR mRNA含量明显上调(P<0.01)。结论:APS保护高糖环境下的海马组织,改善HPA轴功能。

内毒素性休克大鼠肺组织糖皮质激素受体mRNA的表达

目的探讨内毒素（LPS）性休克大鼠肺组织糖皮质激素受体（GR）mRNA的表达。方法56只SD大鼠，随机（随机数字法）分LPS休克组（16只）、LPS＋血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）组（16只）、LPS＋VIP＋糖皮质激素（GC）组（16只）和对照组（8只）。尾静脉注射LPS制作休克模型，尾静脉注射LPS10mg／kg后，分别于15min内注射VIP5nmol／kg或VIP5nmol／kg＋甲基强的松龙3mg／kg，对照组注射等容量生理盐水，分别于注射后6h和24h处死，留取肺标本，观察肺组织病理变化，RT-PCR检测肺组织GRmRNA的表达。结果（1）肺组织病理改变：LPS组见肺泡腔结构破坏、肺泡间隔增宽、炎性细胞浸润、出血、间质水肿、细胞器破坏，LPS＋VIP组和LPS＋VIP＋GC组病变较轻。（2）GRmRNA的表达：注射LPS后6h，LPS组和LPS＋VIP组GRmRNA表达下降，与对照组相比，差异具有统计学意义（P〈0．05），LPS组下降较LPS＋VIP组稍明显，但差异无统计学意义（P〉0．05）。24hGRmRNA表达恢复。LPS＋VIP＋GC组GRmRNA表达6h增加，24hGRmRNA表达更高（P〈O．05）。结论LPS致肺损伤时，肺组织GRmRNA的表达减少。VIP和GC可抵抗炎症反应、减轻肺损伤，其机制可能与增强GRmRNA的表达有关。

电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴相关激素的影响

目的:观察电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠不同时间点下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴相关激素的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针非经穴组和电针经穴组,各组随机分成1 d、3 d、7 d 3个时间点,每时间点6只。采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。电针经穴组取"曲池""足三里"穴,每次30 min,每日1次,取材前2 h再针刺1次。运用酶联免疫吸附实验方法检测大鼠血清皮质醇(CORT)含量变化,逆转录聚合酶链反应方法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、糖皮质激素受体(GR)及垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)mRNA表达的差异。结果:与正常组比较,模型组各指标均有明显变化(P<0.05,P<0.01);与电针非经穴组和模型组各时间点比较,电针经穴组可明显降低CORT含量及CRF mRNA、ACTH mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),并可明显升高GR mRNA表达水平(P<0.01,P<0.05)。结论:电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠HPA轴相关激素的调节具有相对特异性,电针经穴通过调控脑缺血再灌注损伤大鼠HPA轴功能紊乱起到脑保护作用。

免疫学因素对重症肌无力患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体的影响

目的 探讨重症肌无力 (MG)患者外周血单个核细胞 (PBMC)糖皮质激素受体 (GR)数改变的可能机制。方法 13例MG患者及 11例正常对照PBMC在体外与乙酰胆碱受体 (AChR)、IFN γ或AChR +IFN γAb孵育前后同时测定PBMCGR数及GRmRNA含量。3H 地塞米松 (3H Dex)放射配体法测定GR数 ,狭缝印迹杂交法测定GRmRNA量 ,以 β actincDNA为内对照。同时 ,ELISA法测定患者血浆中的IFN γ含量及AChRAb水平。结果 正常对照PBMC分别在AChR、IFN γ、AChR +IFN γAb中培养后其GR数虽有降低 ,但未达到统计学意义 (P >0 .0 5 )。MG患者PBMC的GR数在AChR及IFN γ中培养后明显降低 (与培养前相比 ,前者P <0 .0 5 ,后者P <0 .0 1) ,而在AChR +IFN γAb中培养后则无明显改变 (P >0 .0 5 )。正常对照PBMC分别在AChR、IFN γ、AChR +IFN γAb中培养后其GRmRNA无显著降低 (P >0 .0 5 )。MG患者PBMC的GRmRNA在AChR及IFN γ中培养后与培养前相比明显降低 (前者P <0 .0 5 ,后者P <0 .0 1) ,而在AChR +IFN γAb中培养后则无明显改变 (P >0 .0 5 )。MG患者的血浆中IFN γ及AChRAb水平均显著高于正常对照 (前者P <0 .0 1;后者P <0 .0 5 )。MG患者的IFN γ含量与AChRAb水平间具有良好的正相关关系 (r=0 .92 ,P <0 .0 1)。MG患者的PBMC在体?