葛根素对兔血管内皮细胞凋亡及凋亡基因GRP 78表达水平的影响

目的观察葡萄糖调节蛋白(glucose regulated Protein,GRP)78在动脉粥样硬化(AS)组织中的表达,探讨葛根素防治动脉粥样硬化的可能机制。方法葛根素诱导培养的兔血管内皮细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平。结果兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高。结论葡萄糖调节蛋白78在AS细胞质中表达增高,可能是葛根素作用靶点之一,如上调该基因,则可促进内皮细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用。

莱菔硫烷对HepG-2细胞Bip/GRP 78、caspase-12蛋白影响

研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对内质网相关蛋白Bip/GRP78和caspase-12蛋白表达的影响,探讨其诱导人肝癌HepG-2细胞的凋亡机制.采用Western Blot方法检测人肝癌HepG-2细胞内Bip/GRP78蛋白的表达,以及采用流式细胞仪检测caspase-12蛋白的表达.10、20、40μmol/L的SFN作用于人肝癌HepG-2细胞48 h后可显著上调HepG-2细胞内Bip/GRP78和caspase-12蛋白的表达.SNF可能通过上调HepG-2细胞内Bip/GRP78和caspase-12蛋白的表达启动内质网途径诱导肝癌HepG-2细胞的凋亡.

温阳生肌膏调控GRP78/CHOP通路抑制过度内质网应激促糖尿病难愈合创面修复

目的:通过分析葡萄糖调节蛋白78(CRP78)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路研究温阳生肌膏对内质网应激(ERS)的调控,以探讨温阳生肌膏促进糖尿病难愈合创面修复的相关机制。方法:SD大鼠高脂饲料喂养联合链脲霉素腹腔注射后手术制备背部全层皮肤缺损建立大鼠糖尿病难愈合创面模型;实验分为正常组、模型组、温阳生肌膏组和贝复新(重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶)组;正常组及模型组消毒后予以生理盐水涂抹,温阳生肌膏组及贝复新组分别以温阳生肌膏、贝复新涂抹创面,每日换药1次;处理14 d后观察创面愈合情况,计算创面愈合率;HE染色观察创面组织显微形态;Western blot法检测创面组织GRP78、CHOP和cas pase-12含量;免疫组化法检测创面GRP78、CHOP和caspase-12表达及分布情况;透射电子显微镜观察创面内质网数量及肿胀情况;ELISA检测创面促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)含量。结果:各组相应干预14 d后检测各项指标。与正常组相比,模型组创面愈合率显著降低(P<0.01),炎症渗出较多,肉芽组织生长情况差,GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达升高(P<0.01),炎症因子IL-1β含量显著增加(P<0.01);与模型组相比,温阳生肌膏组创面愈合率显著增加(P<0.01),炎症渗出减少,肉芽组织生长良好,创面组织GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达显著降低(P<0.01);炎症因子IL-1β含量显著降低(P<0.01)。结论:温阳生肌膏促进糖尿病难愈合创面愈合的作用,可能与其下调GRP78/CHOP通路,抑制过度ERS,降低创面细胞凋亡水平有关。

RCN1和GRP78在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:检测RCN1和GRP78在结直肠癌组织中的表达水平,分析与临床病理特点的相关性,并探索预后价值。方法:采用TCGA及UALCAN数据库分析RCN1和HSPA5 mRNA在结直肠癌中的表达情况,收集临床标本进行免疫组化验证两者表达情况,分析与临床病理特征的相关性及预后价值。结果:生物信息学分析表明,RCN1和HSPA5 mRNA在结直肠癌中都显著高表达,并且两者表达呈正相关。RCN1表达与N分期及TP53突变显著相关,HSPA5在黏液腺癌中的表达较高。在结直肠癌组织中,RCN1和GRP78蛋白均高表达并定位于细胞质,GRP78的表达与T分期显著相关。Kaplan-Meier生存分析曲线显示,RCN1高表达组患者DFS明显低于低表达组患者,且有较短的OS趋势。多因素COX回归分析表明,神经侵袭、TNM分期及高表达的RCN1是结直肠癌DFS的独立危险因素。相关性分析:RCN1和GRP78在结直肠癌中表达呈正相关。结论:RCN1与GRP78表达呈正相关,是结直肠癌不良预后的独立危险因素。

室旁核H_(2)S对高盐性高血压大鼠内质网应激蛋白GRP78的影响

目的:通过外源给予高盐性高血压大鼠室旁核(paraventricular nucleus,PVN)硫化氢(hydrogen sulfide,H 2S)供体GYY4137,观察PVN中GRP78的蛋白表达含量变化,探讨室旁核H 2S对高盐性高血压GRP78的影响。方法:雄性Dahl盐敏感大鼠40只,随机分成4组,即正常对照组、正常给药组、模型组和模型给药组。分别饲喂正常盐饲料(0.3%NaCl)和高盐饲料(8%NaCl)4周后,双侧PVN插管持续微量注射GYY4137,采用尾动脉无创测量平均动脉压(mean arterial pressure,MAP),ELISA法检测血浆去甲肾上腺素(norepinephrine,NE),采用免疫组织化学技术及Western blotting法检测PVN中GRP78蛋白表达。结果:(1)与正常对照组相比,高盐模型组的MAP、血浆NE水平明显升高(P<0.01);与高盐模型组相比,高盐干预组MAP、血浆NE水平明显下降(P<0.01);(2)与正常对照组相比,高盐模型组室旁核中GRP78的蛋白表达明显升高(P<0.01);与高盐模型组相比,高盐干预组室旁核中GRP78的蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论:室旁核H 2S可通过降低外周交感神经活动改善高盐性高血压,其机制可能与抑制室旁核内质网应激有关。

动态心电图联合血清IMA、GRP78、miR-29a诊断冠心病心肌缺血的临床价值

目的前瞻性研究动态心电图(DCG)联合血清缺血修饰白蛋白(IMA)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、微小RNA-29a(miR-29a)诊断冠心病心肌缺血的临床价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年8月于宿迁市第一人民医院就诊的冠心病心肌缺血患者100例,按照冠脉病变支分为单支组(n=67)、多支组(n=33),两组均行DCG联合血清IMA、GRP78、miR-29a检查。观察两组DCG特征;血清IMA、GRP78、miR-29a水平。以冠脉造影诊断结果为金标准,评价DCG及血清IMA、GRP78、miR-29a单独、联合诊断冠心病心肌缺血的诊断效能。分析冠心病心肌缺血患者DCG特征及血清IMA、GRP78、miR-29a水平与冠心病心肌缺血的病变程度相关性。结果单支组ST段压低幅度、ST段压低持续时间、心肌缺血发作频次分别为(1.41±0.16)mm、(7.82±0.80)min、(2.04±0.22)次、均小于多支组[(3.42±0.36)mm]、(17.13±1.93)min、(4.32±0.45)次],差异均有统计学意义(P<0.05)。单支组血清IMA水平为(13.29±1.60)U/mL,高于多支组[(7.34±0.76)U/mL],血清GRP78、miR-29a水平分别为(1.32±0.12)ng/mL、1.84±0.21,均低于单支组[(2.26±0.24)ng/mL、3.95±0.42],差异均有统计学意义(P<0.05)。以冠脉造影诊断结果为金标准,DCG及血清IMA、GRP78、miR-29a四者联合诊断冠心病心肌缺血的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均高于四者单独、两两及三三联合诊断(P<0.05)。经Pearson相关性分析,ST段压低幅度、ST段压低持续时间、心肌缺血发作频次及血清GRP78、miR-29a水平与冠心病心肌缺血不同病变程度呈正相关(r=0.812、0.737、0.713、0.594、0.686,P<0.05),血清IMA水平与冠心病心肌缺血不同病变程度呈负相关(r=-0.521,P<0.05)。结论DCG联合血清IMA、GRP78、miR-29a可提高对冠心病心肌缺血的诊断效能。

GRP78在胆管癌组织中的表达及其与预后的关系

目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)在胆管癌组织中的表达水平及其预后价值。方法:收集胆管癌组织标本,利用iTRAQ技术筛选胆管癌组织差异蛋白。采用qRT-PCR和Western blot方法检测GRP78的表达情况。利用组织芯片和免疫组化技术研究GRP78和胆管癌预后之间的相关性。结果:利用iTRAQ技术共筛选出147个差异蛋白,其中热休克蛋白70家族成员HSPA5(GRP78)在癌组织中异常高表达。Western blot发现癌组织中GRP78蛋白表达水平均高于癌旁组织,而且GRP78 mRNA平均相对表达量在癌组织和癌旁组织中分别是2.90和0.89,两者相差3.26倍,t=4.834,P<0.001。Kaplan-Meier曲线示GRP78高表达患者的中位总生存时间和无病生存时间分别为6.83和3.74个月,而GRP78低表达患者分别为12.01和11.70个月,GRP78高表达患者总生存率低且易复发,P<0.05。单因素Cox分析指出GRP78高表达、肿瘤直径≥5 cm、肝内胆管癌、血管侵犯阳性以及高TNM分期等与胆管癌患者总生存时间和无病生存时间密切相关(P均<0.05)。多因素Cox分析发现GRP78高表达和肝内胆管癌以及肿瘤直径≥5 cm皆是胆管癌患者复发的独立危险因素(P均<0.05),并且GRP78高表达是总生存时间的独立危险因素(P<0.05)。结论:GRP78在胆管癌组织中异常高表达,并且和胆管癌预后密切相关,是一个潜在的胆管癌预后指标和治疗靶标。

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠肾组织IRE1α及GRP78表达的影响

目的:观察黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠肾组织IRE1α及GRP78表达的影响。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为黄芪甲苷组(40 mg/kg)、糖尿病肾病组与白藜芦醇组(20 mg/kg)并设立空白对照组,每组各10只,干预时长8周。实验过程中记录大鼠一般情况,定期测量血糖、体重,收集大鼠的尿液,测定24 h尿蛋白定量、尿微量白蛋白浓度。8周末检测血肌酐、尿素氮、胆固醇、三酰甘油并观察肾组织病理变化;采用免疫组化检测各组间GRP78、IRE-1α表达情况。结果:相较正常组,8周末,糖尿病肾病组大鼠肾组织病理损伤,IRE1α与GRP78表达显著增加;相较糖尿病肾病组,黄芪甲苷组大鼠GRP78、IRE-1α表达明显下降,肾组织病理损伤明显减轻。结论:黄芪甲苷可能通过改善内质网应激状态参与缓解糖尿病肾病的作用。

益肾汤经结肠透析对慢性肾衰竭大鼠肠上皮细胞IRE1α、GRP78表达的影响

目的:观察益肾汤经结肠透析对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肠上皮细胞IRE-1α、GRP78表达的影响。方法:随机在60只健康雄性SD大鼠中抽取45只,腺嘌呤灌胃诱导建立CRF大鼠模型,其余15只为正常组。将造模成功大鼠随机分为CRF组、尿毒清结肠透析组和益肾汤结肠透析组,尿毒清结肠透析组予尿毒清结肠透析,益肾汤结肠透析组予益肾汤结肠透析,实验周期为4周。实验过程中记录大鼠一般状况、体重、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)的变化,4周末取肾组织、结肠组织行HE染色观察组织学改变,免疫组化检测各组结肠组织IRE1α、GRP78的表达及分布情况,实时荧光定量PCR法测定IRE1α、GRP78 mRNA表达情况。结果:(1)CRF组大鼠一般情况较正常组差,体重增长减慢(P<0.05),而尿毒清结肠透析组及益肾汤结肠透析组与CRF组相比有所改善,体重增加(P<0.05);(2)与正常组比较,CRF组Scr、BUN值升高(P<0.05),免疫组化示肠上皮细胞IRE1α、GRP78表达均明显上调(P<0.05),PCR结果显示GRP78、IRE1αmRNA相对表达量明显升高(P<0.05);(3)与CRF组比较,尿毒清结肠透析组及益肾汤结肠透析组Scr、BUN值降低(P<0.05),免疫组化示肠上皮细胞IRE1α、GRP78表达水平下调(P<0.05),PCR结果显示GRP78、IRE1αmRNA相对表达量显著降低(P<0.05),但两治疗组间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾汤经结肠透析可通过调节IRE1α、GRP78表达,抑制ERS保护肠黏膜屏障,从而改善CRF大鼠肾功能。

延龄草总皂苷通过调控GRP78/IRE1α/TRAF2/JNK信号通路抑制内质网应激而减轻PSCI大鼠海马神经元损伤

目的:探讨延龄草总皂苷(TST)对卒中后认知障碍(PSCI)大鼠海马神经元的保护作用及分子机制。方法:将采用改良Zea Longa线栓法造模成功的大鼠随机分为模型(model)组、TST(100 mg/kg)组和盐酸多奈哌齐(DON;0.45 mg/kg)组,另设假手术(sham)组,每组10只,连续给药4周。采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;TTC染色检测大鼠脑梗死体积变化,HE、Nissl和TUNEL染色观察大鼠海马组织神经元病理变化;免疫组化及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇需求酶1α(IRE1α)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、胱天蛋白酶12(caspase-12)、Bax和Bcl-2的蛋白水平。结果:与sham组相比,model组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数及目标象限停留时间显著减少(P<0.01);大鼠脑梗死体积显著增大,神经元尼氏小体数量显著减少,凋亡细胞显著增多;海马组织中GRP78、IRE1α、TRAF2、p-JNK、caspase-12和Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.01)。与model组比较,TST组及DON组大鼠逃避潜伏期显著缩短,穿越平台次数及目标象限停留时间显著增加(P<0.01);大鼠脑梗死体积显著缩小,神经元尼氏小体数量显著增多,凋亡细胞显著减少;GRP78、IRE1α、TRAF2、p-JNK、caspase-12和Bax蛋白水平显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:TST对PSCI大鼠海马神经元具有保护作用,其机制可能与减轻内质网应激、减少神经元凋亡并抑制GRP78/IRE1α/TRAF2/JNK信号通路有关。

基于GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制

目的基于葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制。方法将52只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组,每组13只。正常组、模型组大鼠只固定不进行处理;艾灸预处理组大鼠选取足三里穴、中脘穴进行艾灸,每次20 min,1次/d,连续灸7 d;针刺预处理组大鼠选穴和治疗时间同艾灸预处理组。预处理结束后,对模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组大鼠进行无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃7 d建立急性胃黏膜损伤模型。实验结束后,HE染色观察各组大鼠胃组织病理形态,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平,免疫组织化学法检测胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP蛋白表达情况。结果模型组大鼠胃组织上皮细胞结构破坏,炎症细胞浸润,胃黏膜组织损伤明显;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠胃组织病理损伤较轻。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显升高(P均<0.05),血清IL-10水平明显降低(P<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈强阳性表达,可见大量棕黄色颗粒;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显低于模型组(P均<0.05),血清IL-10水平均明显高于模型组(P均<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈弱阳性表达,可见少量棕黄色颗粒,且艾灸预处理组上述各项变化均较针刺预处理组明显。结论艾灸预处理对急性胃黏膜损伤具有保护作用,分析与其调节GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路,抑制内质网应激,调节促炎及抑炎因子表达有关。

黄连解毒汤含药血清对Aβ诱导的海马神经元凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

目的探究黄连解毒汤含药血清对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元凋亡及葡萄糖调节蛋白(GRP)78/蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT-增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法将海马神经元细胞随机分为对照组、Aβ组和黄连解毒汤低、中、高剂量组(2.7、5.4、8.1 g/kg),对照组加入空白血清培养,Aβ组加入Aβ_(25-35)(40μmol/L)和空白血清培养,给药组先加入Aβ_(25-35)再加入含药血清进行培养。噻唑蓝(MTT)法检测海马神经元细胞活性,TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡,Western印迹检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3及GRP78、PERK和CHOP表达水平。结果与对照组相比,Aβ组细胞活性明显降低,细胞凋亡指数明显升高,Bcl-2/Bax水平显著降低,cleaved-/pro-Caspase-3水平显著升高,GRP78、PERK和CHOP蛋白表达显著升高(均P<0.05);与Aβ组比较,黄连解毒汤各组细胞活性明显升高,细胞凋亡指数明显降低,Bcl-2/Bax水平显著升高,cleaved-/pro-Caspase-3水平显著降低,GRP78、PERK和CHOP蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论黄连解毒汤含药血清可抑制GRP78/PERK/CHOP通路,降低Aβ诱导的海马神经元细胞的凋亡。

茵陈蒿汤对阻塞性黄疸大鼠肝细胞ATF6/GRP78/CHOP凋亡信号通路的影响

目的:探讨茵陈蒿汤对阻塞性黄疸大鼠肝细胞凋亡通路转录激活因子6(ATF6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的影响。方法:将正常大鼠肝细胞系(BRL-3A)分为胎牛血清配制的培养基培养的对照组(S组)、阻塞性黄疸血清配制的培养基培养的阻塞性黄疸组(O组)以及梗阻性黄疸血清+茵陈蒿汤含药血清配制的培养基培养的阻塞性黄疸+茵陈蒿汤组(Y组),分别于培养6、24、48 h后收集细胞。观察细胞形态且采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,采用Western印迹和q-PCR法测定各组ATF6、GRP78及CHOP的蛋白及mRNA表达。采用ELISA法测定ALT、AST水平。结果:与S组相比,O组和Y组细胞各时间点均明显变小、变形和数量减少,凋亡指数明显升高,CHOP、ATF6和GRP78 mRNA及蛋白表达水平明显上调,上清液中AST、ALT含量均升高(F=29.75~154.3,均P<0.05);与O组相比较,Y组细胞状态在每个时间点均有显著改善,凋亡指数均下降,CHOP、ATF6和GRP78 mRNA及蛋白表达水平明显下调或趋于下调,上清液中AST、ALT含量均下降(F=29.75~154.3,均P<0.05)。结论:茵陈蒿汤可通过调控GRP78/ATF6/CHOP通路抑制细胞凋亡,减轻阻塞性黄疸引起的肝细胞损伤。

分子靶向治疗对直肠癌大鼠巨噬细胞极化及PPIA/GRP78的作用机制

目的研究分子靶向治疗对直肠癌大鼠巨噬细胞极化及肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)A/理葡萄糖调节蛋白(GRP)78的作用机制。方法健康SD大鼠48只随机分为健康组(健康大鼠)、肠癌组(建立直肠癌模型)、治疗组(模型+阿帕替尼治疗)、对照组(模型+植酸治疗)各12只。检测各组瘤重、抑瘤率。苏木素-伊红(HE)染色观察病理形态。免疫组化检测CD86、CD206、血管内皮生长因子(VEGF)表达。流式细胞术检测巨噬细胞的表型。反转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)与Western印迹检测PPIA、GRP78、VEGF mRNA及蛋白水平。结果健康组直肠组织正常;肠癌组直肠黏膜上皮大量坏死并有炎性细胞浸润,伴有血管增生。与肠癌组相比,对照组与治疗组病理形态显著改善。与健康组相比,肠癌组CD206水平及其阳性率、PPIA、GRP78 mRNA及蛋白水平显著增加,CD86水平及其阳性率显著降低(P<0.05)。与肠癌组相比,治疗组与对照组瘤重、CD206水平及其阳性率、PPIA、GRP78 mRNA及蛋白水平显著降低,CD86水平及其阳性率水平显著升高(P<0.05)。结论血管生成因子靶向药物阿帕替尼通过靶向抑制VEGF水平,促进巨噬细胞向M1型极化,抑制肿瘤生长,其作用机制可能与降低GRP78、PPIA表达水平有关。

大鼠脑缺血再灌注后GRP78和GADD153的表达变化研究

目的观察内质网应激相关因子GRP78和GADD153在大鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达,探讨脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的内质网应激机制。方法线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞及再通模型,应用缺口末端标记法检测细胞凋亡;通过RT-PCR、免疫组化和Western-blot方法检测脑缺血再灌注后不同时相缺血周围区GRP78和GADD153的mRNA和蛋白表达。结果模型组GRP78和GADD153表达均高于假手术组,分别于再灌注12h和24h达高峰,GADD153表达与神经细胞凋亡时间趋势一致。结论脑缺血再灌注启动内质网应激反应,前期以GRP78表达上调为主;后期GADD153大量表达,二者表达平衡可能对于神经细胞最后转归具有重要意义。

糖脂清对糖尿病大鼠海马内质网应激相关因子GRP78、CHOP、Caspase-12表达的影响

目的通过观察糖脂清对糖尿病大鼠海马组织的内质网应激相关因子GPR78、CHOP、Caspase-12的影响,探讨其在改善糖尿病大鼠认知功能的作用机制。方法采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,并给予糖脂清高、中、低剂量组干预8周后,采用ELISA法检测血清空腹葡萄糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);qPCR和Western blot法检测海马组织内质网应激相关因子GPR78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达水平。结果糖脂清各剂量组均能够显著降低FPG及HOMA-IR(P<0.01),除低剂量组外,糖脂清均可显著提高ISI(P<0.01),3组FINS水平无显著性差异(P>0.05)。与模型组比较,糖脂清低、中、高3个剂量组GRP78mRNA和蛋白相对表达均显著增加,CHOP、Caspase-12mRNA表达均减少(P<0.01),中、高剂量组CHOP、Caspase-12蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论糖脂清能够控制血糖,改善胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性,同时能够调节海马内质网应激相关因子GRP78、CHOP、Caspase-12mRNA和蛋白的表达。

电针内关、百会穴对脑缺血/再灌注大鼠GRP78和Caspase-12基因表达的影响

目的观察电针内关、百会穴对脑缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)大鼠脑GRP78和Caspase-12基因表达的影响,探讨针刺发挥脑保护作用是否与内质网应激凋亡通路有关。方法 100只大鼠随机分为5组,每组20只,即正常组、假手术组、手术造模组、依达拉奉组和针刺干预组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)脑I/R模型。采用TUNEL染色法,检测大鼠神经细胞凋亡指数;采用实时定量多聚酶链式反应(Real-Time polymerase chain reaction,RT-PCR),检测GRP78、Caspase-12 mRNA表达。结果与正常组和假手术组相比,手术造模组、依达拉奉组和针刺干预组大鼠细胞凋亡指数升高,GRP78和Caspase-12 mRNA表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与手术造模组相比,依达拉奉组和针刺干预组大鼠细胞凋亡指数和Caspase-12 mRNA表达均明显降低(P<0.01),GRP78 mRNA表达明显升高(P<0.01);与依达拉奉组相比,针刺干预组大鼠各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论针刺内关、百会穴可以有效抑制脑缺血神经元细胞凋亡,其保护机制可能上调内质网应激保护性GRP78表达,同时抑制促凋亡Caspase-12表达有关。

乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及与预后的关系

目的:探讨乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:采用免疫组化Envision法检测169例乳腺癌石蜡标本中GRP78、Survivin的表达状况,并对其表达的相关性以及与乳腺癌患者预后的关系进行了统计分析。结果:在169例乳腺癌标本中,GRP78强表达为68例(40.2%),弱表达为101例(59.8%);Survivin强表达为96例(56.8%),弱表达为73例(43.2%)。对二者相关性的分析表明二者表达的吻合度具有统计学意义,但吻合程度较弱。单因素生存分析结果表明GRP78(+)Survivin(+)组(1组)、GRP78(-)Survivin(+)组(2组)、GRP78(+)Survivin(-)(3组)之间的无病生存时间差异无显著性(P>0.05),但与GRP78(-)Survivin(-)组(4组)相比,其无病生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05);1、2、3组间的总生存时间差异无显著性(P>0.05),但与4组相比,其总生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05)。多因素Cox回归分析表明GRP78、Survivin的表达状况是影响乳腺癌患者无病生存时间的独立预后因素(P<0.05),但不是总生存时间的独立预后因素(P>0.05)。结论:乳腺癌中GRP78与Survivn存在着相关性,GRP78和/或Survivn强表达提示患者预后不良,GRP78、Survivin的表达状况对判断乳腺癌患者的预后具有一定的参考价值。

葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的差异表达

为探讨葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的生物学意义,利用蛋白质免疫印迹、免疫荧光及RNA印迹技术,检测了发育不同时期小鼠脑组织中GRP78、GRP94的表达及分布情况.结果显示:小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94的表达在时间和空间上呈现出显著差异,在脑发育的早中期GRP78表达水平高于GRP94,随发育的进程GRP78不断下降而GRP94逐渐升高,至胚胎发育晚期GRP94表达水平高于GRP78.在E16.5的不同脑区,GRP78的表达呈现出从端脑到后脑逐渐递减的“浓度梯度”分布,而GRP94在不同脑区中表达相同.小鼠出生后,二者作为应激蛋白在脑组织中的表达没有明显的差异性.免疫荧光结果显示,GRP78和GRP94在大脑组织中的分布基本相同,神经细胞和神经胶质细胞的细胞质均有分布.这些观察得到的结果提示,GRP78和GRP94与神经细胞分化和脑的形态建成有关,它们分别在脑发育的不同时期起作用.

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝组织GRP78及CHOP表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝纤维大鼠内质网应激通路相关分子GRP78、CHOP表达的影响,探讨GbE抗肝纤维的作用机制。方法:采用40%的CCl4皮下注射(3mL·kg-1·d-1,2次/周,首剂加倍)6周诱导大鼠肝纤维化模型,同时分别以200、100、50mg·kg-1·d-1的GbE灌胃干预6周,空腹取肝组织,Real-time PCR及免疫组化法分别检测肝组织GRP78及CHOP基因的mRNA及蛋白表达。结果:肝组织GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达较正常组明显增加(P<0.05,P<0.01);应用高、中、低剂量GbE干预后,大鼠肝组织GRP78和CHOP基因的mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:肝纤维化大鼠肝脏发生了内质网应激反应,GbE下调肝纤维化大鼠肝组织内质网应激通路相关分子GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。