2岁龄滩湖杂G_(0)代与滩羊产肉性能、肉品质及风味物质的比较研究

旨在比较研究2岁龄滩湖杂G_(0)代与滩羊产肉性能、肉品质及风味物质方面的差异。选取2岁龄健康、体重相近的滩湖杂G_(0)代公羊和同期滩羊公羊各3只,屠宰后测定产肉性能、肉品质,电子鼻测定肉质气味轮廓。结果:2岁龄滩湖杂G_(0)代与同期滩羊各项屠宰性状差异均不显著(P>0.05),但G_(0)代胴体重、屠宰率、净肉率、GR值及背膘厚等指标高于滩羊,尾重较滩羊降低4.88%,头重显著低于滩羊(P<0.05),皮张面积大于滩羊(P<0.05)。与滩羊肉质相比,滩湖杂G_(0)代肉中氨基酸与脂肪酸含量差异不显著(P>0.05),但剪切力降低7.95%,失水率降低10.55%。对肉质起挥发性作用的物质是氮氧化合物、烷烃及芳香成分,利用电子鼻不能完全区分滩湖杂G_(0)代与滩羊肉质。综上,2岁龄滩湖杂G_(0)代的屠宰性能有优于同期滩羊的趋势,肉质食用品质有所提升,肉品风味无显著差异。

20-HETE通过GPR75受体偶联G_(αq)信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用

目的 探讨GPR75受体偶联G_(αq)信号通路在20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法 H9c2心肌细胞采用慢病毒载体干扰GPR75表达,敲减效率通过RT-qPCR和Western blot法检测;ELISA法检测IP_(3)及cAMP含量;TUNEL法评估细胞凋亡率;分别使用Fluo-4/AM、DHE和JC-1荧光探针检测细胞内Ca^(2+)浓度、ROS含量以及线粒体膜电位(ΔΨm)水平;Western blot检测EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β、Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3蛋白表达。结果 慢病毒载体shGPR75转染后,H9c2心肌细胞GPR75受体mRNA和蛋白表达分别降低67.16%和63.99%(P<0.05)。敲减GPR75表达或应用AAA阻断其作用,显著抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡(P<0.05),并可逆转ΔΨm下降及凋亡相关蛋白Bax、Cyt C、Caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。20-HETE处理后细胞内IP_(3)含量明显增加(P<0.05),但对cAMP生成无显著影响(P>0.05),而敲减GPR75表达、应用AAA或者PLC信号通路阻断剂U73122预处理后,可显著阻断细胞内IP_(3)生成(P<0.05)。敲减GPR75表达、应用AAA或者U73122预处理后,明显抑制20-HETE诱导的Ca^(2+)浓度升高和ROS生成效应(P<0.05)。20-HETE处理后,GPR75受体下游调控关键蛋白EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β磷酸化水平明显升高(P<0.05),敲减GPR75表达或应用AAA可有效阻断20-HETE上述效应(P<0.05)。最后,阻断PLC或PI3K信号通路,显著抑制20-HETE诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论 20-HETE通过GPR75受体偶联的G_(αq)蛋白及其介导的PLC、EGFR/ERK1/2/AKT/GSK3β信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡。

G_(b)-(p,r)E-半预不变凸多目标规划的最优性条件

为了丰富广义凸函数类,扩大多目标规划的应用范围,运用Clark广义梯度,借助αE半预不变凸函数和G B(p,r,α)不变凸函数,进一步给出了一类新的广义凸函数的定义:G_(b)(p,r)E半预不变凸函数。对于涉及这类函数的多目标规划问题,得到了其可行解是弱有效解的若干最优性条件。

桑黄水提物诱导黑色素瘤细胞系B16-F10 G_(0)/G_(1)期阻滞的研究

通过噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞分析、转录组测序和蛋白印迹等手段,探究桑黄水提物(SH)对黑色素瘤细胞系B16-F10的抑制作用及分子作用机制。MTT实验结果显示,SH能够抑制B16-F10细胞系增殖,且呈剂量依赖性。流式细胞分析发现,SH能够诱导细胞G_(0)/G_(1)期阻滞,但对细胞凋亡无明显影响。RNA-seq、qRT-PCR和Western blot分析发现,SH主要通过上调p53信号通路中p21的表达,进而抑制细胞周期通路中CyclinD3、CDK2和CDK6的表达来影响细胞周期阻滞。研究结果证明SH对黑色素瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,p21-CyclinD3-CDKs信号通路介导的G_(0)/G_(1)期阻滞是其作用机制之一。

基于G_(NS)蛋白的牛流行热病毒感染与免疫鉴别诊断ELISA方法的建立

旨在建立牛流行热病毒(BEFV)感染与疫苗免疫的抗体ELISA诊断方法。在证实BEFV G_(NS)截短体与BEFV感染血清特异性反应的基础上,利用原核表达系统表达纯化G_(NS)全长蛋白并以其作为包被抗原,优化反应条件,建立基于BEFV G_(NS)的鉴别病毒感染与疫苗免疫的BEFV间接ELISA方法。结果显示:在大肠杆菌中成功表达G_(NS)蛋白,主要以包涵体的形式存在,纯化获得73 ku的重组蛋白。Western blot结果显示,纯化后的重组蛋白与BEFV感染牛血清反应原性良好,且与BEF疫苗免疫牛血清未见反应。G_(NS)抗原最佳包被浓度为0.50μg·mL^(-1),血清最佳稀释度为1∶20,酶标二抗最佳稀释度为1∶4000,阴阳性临界值为S/P值0.2069。该方法与BVDV、FMDV以及IBRV阳性血清无交叉反应,特异性良好;批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好,可用于BEFV感染与疫苗免疫牛的鉴别诊断。

鹅源腺病毒Y_(81)G_(4)株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析

对鹅源腺病毒株Y81G4 基因组两侧末端序列测定和比较 ,鉴定出其ITR区。Y81G4 株ITR全长为 12 5bp ,远长于其它禽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群腺病毒ITR长度。在Y81G4 株ITR中有一些腺病毒ITR序列特征 :① 5 _C(A/T) (A/T)NTCAT_腺病毒典型起始序列 ;② 9～ 13bp存在腺病毒科共有的 (A/T)T(A/T)ATA保守序列 ;③在ITR区 37～ 42bp出现的GNGGCG保守序列 ;④在ITR 45～ 5 0bp出现TGACGT保守序列。此外 ,哺乳动物腺病毒ITR中被转录因子SP1所识别的序列和以增强DNA复制启动的两个宿主核蛋白NFⅠ和NFⅢ的结合序列在Y81G4 株TIR中并没有出现。经DNASTAR软件“Clustal”方法对禽腺病毒Y81G4 株ITR与其它腺病毒ITR的同源性进行比较 ,其同源性由高到低依次为 :禽Ⅲ群减蛋综合征病毒 (EDSV ,10 0 % ) >羊腺病毒 (OAV ,43 .5 % ) >禽Ⅱ群火鸡出血性肠炎病毒 (HEV ,30 .8% )和禽Ⅰ群鸡胚致死孤儿病毒 (CELO株 ,2 8.2 % ) >人腺病毒 12型 (HAd12 ,2 6 .4% )和牛腺病毒 1型 (BAd1,2 6 .4% )。通常在腺病毒科同一亚属或亚群中ITR是很保守的 ,因而推测Y81G4

基于BIC和G_PLDA的说话人分离技术研究

传统的以贝叶斯信息准则(Bayesian information criterion,BIC)作为相似性度量的说话人分离技术,在短时对话的分离任务中能取得较好的效果,但是随着对话时长的增加,BIC的单高斯模型不足以描述不同说话人数据的分布,且层次聚类(Hierarchical agglomerative clustering,HAC)时,区分相同说话人和不同说话人的门限值难以划定.针对此问题,提出基于短时BIC和长时G_PLDA的融合方法,充分利用BIC在短时聚类的可靠性和G_PLDA在长时段上的优异区分性,在美国国家标准技术局(NIST)08Summed测试集上的实验表明,该方法将分类错误率(DER)从BIC基线系统的2.34%降到1.54%,性能相对提升34.2%.

葫芦素B诱导G_2/M期阻滞抑制人前列腺癌DU145细胞增殖并诱导细胞凋亡研究

目的探讨葫芦素B对人前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养DU145细胞,MTT法检测不同浓度葫芦素B对DU145细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Hoechst 33258核染色观察细胞核的形态变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测葫芦素B对DU145细胞周期调节蛋白Cyclin B1表达的影响。结果葫芦素B对DU145细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;葫芦素B使DU145细胞发生G_2/M期阻滞;可见细胞核染色质浓缩、核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变;流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B诱导DU145细胞凋亡,呈剂量依赖性;葫芦素B使DU145细胞Cyclin B1蛋白表达降低。结论葫芦素B通过诱导G_2/M期阻滞抑制人前列腺癌DU145细胞增殖并诱导细胞凋亡。

GTSE1在肝癌中的表达及其对预后和免疫浸润的影响

目的研究G_(2)/S期应答相关蛋白1(G_(2) and S phase-expressed protein 1,GTSE1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达、免疫学作用和预后分析,及其潜在作用机制。方法使用公共数据库癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)提供的数据,用Kaplan-Meier、肿瘤免疫评估资源(Tumor Immune Estimation Resource,TIMER)数据库和基因表达谱交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库进行GTSE1基因表达、免疫学作用及预后分析,通过免疫组化实验验证GTSE1在临床样本中的表达,应用R软件对GTSE1相关差异基因进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。结果GTSE1在人类癌组织中显著高表达,且与肝细胞癌预后不良显著相关(P<0.05);GTSE1基因表达与HCC中浸润性免疫细胞的丰度显著相关(P<0.001)。GTSE1相关的差异表达基因主要富集于核分裂、细胞器裂变、离子通道活性等基因模块;其参与的信号通路主要包括神经活性配体-受体的相互作用、细胞周期等。结论GTSE1在HCC中的表达显著上调并与患者预后不良显著相关,且在免疫细胞浸润中发挥重要作用,可作为HCC的预后标志物和免疫治疗靶点。

黄连素通过诱导G_(0)/G_(1)或G_(2)/M期阻滞抑制前列腺癌细胞株PC-3的增殖作用分析

目的观察黄连素在体外对前列腺癌细胞株PC-3的抑制及凋亡的诱导,并进一步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度黄连素对前列腺癌细胞株PC-3的增殖抑制作用,采用流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡,通过PI染色法结合流式细胞仪检测黄连素对前列腺癌细胞株PC-3细胞周期的影响;蛋白免疫印迹(WB)方法检测黄连素作用于前列腺癌细胞株PC-3后细胞中脂肪酸合成酶(FAS)蛋白的表达。结果黄连素组前列腺癌PC-3细胞株增殖抑制率及凋亡率均高于未加入黄连素组,且随着黄连素浓度的上升,前列腺癌PC-3细胞株增殖抑制率及凋亡率均逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。黄连素孵育24 h组、黄连素孵育48 h组、黄连素孵育72 h组的前列腺癌PC-3细胞株在G_(0)/G_(1)期比例高于对照组,在S期与G_(2)/M期比例低于对照组,且随黄连素孵育时间增加,前列腺癌PC-3细胞株在G_(0)/G_(1)期比例明显增加,在S期与G_(2)/M期比例逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。黄连素不同孵育时间及不同浓度均对前列腺癌PC-3细胞株中FAS蛋白存在影响,且随着孵育时间的延长与浓度的增加,FAS蛋白含量均逐渐减少。结论黄连素可通过诱导细胞G_(2)/M期阻滞和抑制前列腺癌PC-3细胞株中FAS蛋白表达对前列腺癌细胞株PC-3的增殖生长及凋亡起到抑制与促进作用,且与时间、浓度呈依赖性。

G_5振动排痰机在神经内科病人排痰中的应用

目的探讨神经内科患者排痰的有效方法。方法将41例清理呼吸道无效的患者分为2组,实验组采用G5振动排痰机对患者进行排痰,对照组采用传统的手叩背排痰法。结果达到评价标准的实验组有19例,对照组有7例。对比2组吸痰后SpO2,实验组明显优于对照组。在观察的10d内,实验组的排出痰量均为先多后少,先粘稠后稀薄,对照组为较前痰量稍少稀薄的为9例。结论使用G5振动排痰机排痰效果明显优于传统的手叩背排痰法。

跨膜Ca^（2＋）梯差通过调节膜脂流动性影响G_s激活腺苷酸环化酶

将牛脑皮层激活型Ｇ－蛋白（Ｇｓ）和腺苷酸环化酶（ＡＣ）重建于大豆磷脂脂质体，形成具有或不具有１０００倍跨膜Ｃａ２＋梯差的四种脂酶体，研究了跨膜Ｃａ２＋梯差对Ｇｓ功能的影响及其与膜脂物理状态的关系。结果表明，在具有与生理条件相似的正向跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ａ中，ＡＣ的基础活力和Ｇｓ对ＡＣ的激活活力均最大；而跨膜Ｃａ２＋梯差与生理条件相反时（脂酶体Ｄ），ＡＣ的基础活力和Ｇｓ对ＡＣ的激活作用最小。外加Ｃａ２＋载体Ａ２３１８７消除脂酶体两侧的Ｃａ２＋梯差可导致前者（脂酶体Ａ）Ｇｓ功能降低和后者（脂酶体Ｄ）Ｇｓ功能增强，使两者Ｇｓ功能恢复到无跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体水平。用荧光探针ＤＰＨ标记上述四种大豆磷脂制备的磷酶体，以时间分辨纳秒荧光技术研究在不同跨膜Ｃａ２＋梯差条件下膜脂物理状态变化。四种脂酶体的荧光各向异性测量结果表明，具有正向跨膜Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ａ的序参数（Ｓ＝０．３２８），微粘度（η＝０．６１ｐ）和旋转相关时间（τｒ＝２．４ｎｓｅｃ）均较具有反向Ｃａ２＋梯差的脂酶体Ｄ者（Ｓ＝０．３５２，η＝０．６４ｐτｒ＝２．５ｎｓｅｃ）小，即前者的膜脂流动性较后者增加。这可能提示，一个相似于生理条件的跨膜Ｃａ２＋?

一种自适应时间常数匹配G_(m)-C电感电流采样方法

提出了一种自适应时间常数匹配G_(m)-C电感电流采样方法。该方法通过比较Buck变换器SW点电压的过零时间与G_(m)-C滤波采样电压的过零时间,判断G_(m)-C时间常数是否与DCR时间常数匹配。使用鉴频鉴相器检测二者过零时间差,并控制双向计数器,实现对电容阵列等效容值的调制,最终实现自适应时间常数匹配G_(m)-C电感电流采样。与前序工作相比,该校准过程平滑,并且可以在DC-DC变换器正常工作情况下进行在线调制,能有效适应DC-DC变换器工作中温度、电压、电流等外部条件的变化。

G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用

目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 发现酵母三杂交系统中 AD-β 1，γ 2和 BD-ACⅡ间的相互作用明显强于双杂交系统中 AD-β 1和 BD-ACⅡ的相互作用。对 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1在酵母双杂交系统和三杂交系统中的表达进行免疫印迹杂交分析 ,发现其表达水平与β-半乳糖苷酶活力大小无关 ,即酵母三杂交系统和双杂交系统中相互作用的显著差别不是由 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1蛋白表达水平的差异所造成。结论 β亚基对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的相互作用十分重要 ,而γ亚基的存在显著增强了β亚基与 ACⅡ的相互作用 ,对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的高亲和性很重要。

棕矢车菊素诱导人宫颈癌Hela细胞G_(2)/M期停滞的机制研究

目的:研究棕矢车菊素对宫颈癌(cervical carcinoma,CC)细胞Hela的增殖抑制和周期阻滞能力,探索棕矢车菊素是否具有宫颈癌治疗药物的潜力。方法:MTT比色法检测细胞活力;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)法检测细胞增殖水平变化;碘化丙啶(propidium,PI)单染检测细胞周期;免疫印迹法(western blot,WB)检测细胞蛋白表达水平。采用裸鼠成瘤检测棕矢车菊素体外抑制肿瘤效果。结果:棕矢车菊素可以显著抑制Hela细胞活力水平,且具有时间和浓度依赖性;棕矢车菊素抑制Hela细胞增殖,且100μmol/L棕矢车菊素可显著诱导细胞发生G_(2)/M周期阻滞。分子机制上,研究证明了棕矢车菊素可以通过促进细胞周期检验点激酶(checkpoint kinase 2,CHK2)激活,抑制细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin 25 homolog C,CDC25C)活力,从而提高无活性的pCDC2水平。棕矢车菊素同时降低了Cyclin B1表达。因此,棕矢车菊素通过抑制G_(2)/M期调控蛋白Cyclin B1/CDC2复合物活性来诱导细胞发生G_(2)/M期阻滞。同时,体外裸鼠成瘤,棕矢车菊素灌胃4周后,小鼠肿瘤体积显著减小。结论:在Hela细胞上,棕矢车菊素具有抑制细胞增殖和诱导G_(2)/M期阻滞的作用,证明了棕矢车菊素具有抗宫颈癌细胞的治疗潜力。

酒东油田深层K_(1)g_(3)砂岩成岩演化与优质储层分布

针对酒泉盆地酒东油田深层K_(1)g_(3)砂岩优质储层分布规律不明确的问题,通过铸体薄片、扫描电镜、物性等资料,开展成岩特征、成岩演化、成岩相与优质储层分布等研究。结果表明:酒东油田深层K_(1)g_(3)砂岩具有3类成岩特征,且Ⅱ、Ⅲ类成岩特征的砂岩是由Ⅰ类含铁白云石胶结致密砂岩在酸性溶蚀流体差异化作用下形成。酸性溶蚀流体有3期,前2期为大气淡水,第3期为有机酸流体,对砂岩溶蚀作用贡献最大的酸性流体是第2期大气淡水。K_(1)g_(3)砂岩可以划分为4类成岩相和2个成岩相带,B类成岩相为高孔高渗优质储层,D类成岩相为中孔低渗差储层,A、C类成岩相为含铁白云石胶结致密非储层;长2断层以西的主产油区为B类成岩相带,以东的扩边区为D类成岩相带,A、C类成岩相总体不发育。该成果可为酒东油田开发方案调整和扩边勘探部署提供依据。

再谈ΔG_m～和ΔG_m的区别及它们的功能

在已区别ΔG_m～和ΔG_m的基础上,进一步以理想气体反应为例.作必要的推证和分析,有说服力地对ΔG_m～(?)和ΔG_m加以区别,并阐明它们不同的功能.

G_2/M期阻滞与细胞放射敏感性关系的研究进展

在肿瘤的临床治疗中,放射治疗的适应证宽泛,选择性大,故其在肿瘤治疗中的作用和地位日益突出。电离辐射可以引起肿瘤细胞的DNA损伤,之后通过多种机制杀灭肿瘤细胞。其中,影响肿瘤细胞的周期调控,即通过降低肿瘤细胞的G_2/M期阻滞,从而影响肿瘤细胞受损DNA的修复,引起肿瘤细胞死亡就是其治疗肿瘤的主要机制之一。

DNA吸附消除黄曲霉毒素G_(1)

鉴于黄曲霉毒素G1(AFG_(1))的毒性强,难降解和有效去除,利用AFG_(1)与DNA的嵌插结合,构建选择性吸附消除AFG_(1)的有效方法。AFG_(1)嵌入DNA的最佳反应条件为pH 7.4及30℃,其DNA结合饱和值和去除率为1.66、88.14%。添加NaCl、CaCl_(2)、L-天冬氨酸、葡萄糖、尿素、亮氨酸、赖氨酸、维生素C等后,DNA结合饱和值分别为1.45、1.45、1.29、1.05、1.95、1.95、2.32和2.90。去除率分别为78.08%、76.44%、75.92%、75.16%、88.41%、88.67%、88.87%、90.27%。NaCl、CaCl_(2)、L-天冬氨酸、葡萄糖等负电基团或者离子强度较高不利于AFG_(1)-DNA嵌插结合,而尿素、亮氨酸、赖氨酸、维生素C等带正电基团和相似基团的物质利于AFG_(1)-DNA的嵌插结合。花生油中的AFG_(1)的去除率达到80%以上。动力学相关系数和吸附容量可知,该吸附过程符合准二级动力学模型,表明吸附过程的限速步骤为化学相互作用。吸附过程遵循Freundlich等温吸附模型,该吸附过程为多层吸附。热力学结果显示DNA对AFG_(1)的吸附是自发的放热过程。综上,DNA能选择性吸附AFG_(1),因此,可进一步开发DNA新型材料,在去除食品中黄曲霉毒素方面有重要意义。

HPLC-MS/MS法测定化妆品中黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)

建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定化妆品中黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)的方法。化妆品经70%甲醇提取并经免疫亲和柱净化,采用C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相体系为2.0 mmol/L乙酸铵甲醇溶液(含0.1%甲酸)和2.0 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸),流速为0.3 mL/min进行梯度洗脱,扫描方式为正离子多反应监测模式(MRM)。黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)在一定浓度范围内线性关系均良好,相关系数不低于0.998。检出限范围为0.028~0.078 ng/g。精密度及稳定性均良好,回收率85.0%~96.2%。该方法准确、高效,为化妆品中黄曲霉毒素的测定提供了技术支持。