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党参炔苷调节TIM3/Gal9信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响
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作者 张丹 王翠霞 汤云 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第3期512-518,544,共8页
目的研究党参炔苷调节T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(TIM3)/半乳糖凝集素9(Gal9)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法以CCK-8法检测0、15、30、60、90、120、150mg/L的党参炔苷处理后的子宫内膜癌细胞HEC-... 目的研究党参炔苷调节T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(TIM3)/半乳糖凝集素9(Gal9)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法以CCK-8法检测0、15、30、60、90、120、150mg/L的党参炔苷处理后的子宫内膜癌细胞HEC-1-A存活率,筛选出其最佳作用浓度。将体外培养的HEC-1-A细胞随机分为对照组、党参炔苷组、TIM3敲低组、空载组、党参炔苷+TIM3过表达组,分组处理后以实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞TIM3/Gal9通路表达;以免疫荧光染色和CCK-8法检测各组细胞增殖;以流式细胞术检测各组细胞凋亡;以免疫荧光染色检测各组细胞凋亡相关蛋白表达,比较Bax/Bcl-2。将人外周血淋巴细胞与各组细胞以不同比例共培养后以CCK-8法检测其对各组细胞的杀伤率。结果与对照组比较,党参炔苷组、TIM3敲低组细胞TIM3、Gal9 mRNA及蛋白表达、Ki67阳性率、存活率降低(P<0.05),凋亡率、Bax/Bcl-2、杀伤率升高(P<0.05);空载组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与党参炔苷组比较,党参炔苷+TIM3过表达组细胞TIM3、Gal9 mRNA及蛋白表达、Ki67阳性率、存活率升高(P<0.05),凋亡率、Bax/Bcl-2、杀伤率降低(P<0.05)。结论党参炔苷可通过下调TIM3/Gal9信号通路表达来抑制子宫内膜癌细胞增殖并促进其凋亡,还可减弱其免疫逃逸,进而增强免疫细胞对其的杀伤力。 展开更多
关键词 党参炔苷 TIM3/gal9 子宫内膜癌 增殖 凋亡 免疫逃逸
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Novel Asynchronous Wrapper and Its Application to GALS Systems
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作者 庄圣贤 彭安金 Lars Wanhammar 《Journal of Southwest Jiaotong University(English Edition)》 2006年第1期34-40,共7页
An asynchronous wrapper with novel handshake circuits for data communication in globally asynchronous locally synchronous (GALS) systems is proposed. The handshake circuits include two communication ports and a loca... An asynchronous wrapper with novel handshake circuits for data communication in globally asynchronous locally synchronous (GALS) systems is proposed. The handshake circuits include two communication ports and a local clock generator. Two approaches for the implementation of communication ports are presented, one with pure standard cells and the others with Mttller-C elements. The detailed design methodology for GALS systems is given and the circuits are validated with VHDL and circuits simulation in standard CMOS technology. 展开更多
关键词 galS Asynchronous wrapper Handshake circuit systems-on-chip (SoC)
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Establishment of a humanized ST6GAL1 mouse model for influenza research
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作者 Lyu Chao Han Feng +10 位作者 Gao Qian Lv Limin Lu Ziwei Lu Shuangshuang Li Xiaoyan Hu Yuechao Yang Mengjie Zhao Yingze Liu Jun Lu Xuancheng Duo Shuguang 《Animal Models and Experimental Medicine》 CAS CSCD 2024年第3期337-346,共10页
Background:This study aimed to construct and characterize a humanized influenza mouse model expressing hST6GAL1.Methods:Humanized fragments,consisting of the endothelial cell-specific K18 promoter,human ST6GAL1-encodi... Background:This study aimed to construct and characterize a humanized influenza mouse model expressing hST6GAL1.Methods:Humanized fragments,consisting of the endothelial cell-specific K18 promoter,human ST6GAL1-encoding gene,and luciferase gene,were microinjected into the fertilized eggs of mice.The manipulated embryos were transferred into the oviducts of pseudopregnant female mice.The offspring were identified using PCR.Mice exhibiting elevated expression of the hST6GAL1 gene were selectively bred for propagation,and in vivo analysis was performed for screening.Expression of the humanized gene was tested by performing immunohistochemical(IHC)analysis.Hematologic and biochemical analyses using the whole blood and serum of humanized hST6GAL1 mice were performed.Results:Successful integration of the human ST6GAL1 gene into the mouse genome led to the overexpression of human SiaT ST6GAL1.Seven mice were identified as carrying copies of the humanized gene,and the in vivo analysis indicated that hST6GAL1gene expression in positive mice mirrored influenza virus infection characteristics.The IHC results revealed that hST6GAL1 was expressed in the lungs of humanized mice.Moreover,the hematologic and biochemical parameters of the positive mice were within the normal range.Conclusion:A humanized influenza mouse model expressing the hST6GAL1 gene was successfully established and characterized. 展开更多
关键词 hST6gal1 humanized mice influenza animal model
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外源性雌激素对IBA和D-gal诱发大鼠认知障碍的干预作用 被引量:13
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作者 郭宗君 金丽英 +2 位作者 王洪霞 郭云良 石秉霞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期761-763,共3页
目的 应用鹅膏蕈氨酸 (IBA)和 D-半乳糖 (D- gal)诱发 Wistar大鼠认知障碍模型 ,观察补充外源性雌激素的治疗作用与机理。方法  1认知障碍组 :应用 IBA(1μl)一次性微量注入大鼠 Meynert基底核 ,同时大鼠皮下注射 D- gal(48mg/ Kg) ,... 目的 应用鹅膏蕈氨酸 (IBA)和 D-半乳糖 (D- gal)诱发 Wistar大鼠认知障碍模型 ,观察补充外源性雌激素的治疗作用与机理。方法  1认知障碍组 :应用 IBA(1μl)一次性微量注入大鼠 Meynert基底核 ,同时大鼠皮下注射 D- gal(48mg/ Kg) ,制作模型。 2治疗组 :按模型组方法制备模型 ,在应用 IBA后 7d开始应用苯甲酸雌二醇 (1 mg/ Kg)和黄体酮 (1 0 mg/ Kg)治疗 ,每 7d皮下注射 1次 ,治疗时间 1 50 d。3假手术组 :健康大鼠按模型制作过程操作 ,应用生理盐水替代 IBA和 D- gal,注射用水替代雌二醇和黄体酮皮下注射。用 MG- 2迷宫观察大鼠至其测试达到连续 1 0次中有 9次正确反应所需要的电击次数 ,作为学习记忆成绩。HE染色和 Bielschowsky染色观察脑组织变化。结果 应用 IBA和 D- gal1 50 d后 ,模型组大鼠学习记忆能力较其他组明显低下 ,其电击次数 (2 5.5± 1 2 .39次 )明显高于治疗组 (3.80± 3.83次 )和假手术组 (2 .3± 4.50次 ) ,均 P<0 .0 5;而治疗组和假手术组比较无显著性差异 (P>0 .0 5)。光镜下海马皮层平均单个视野中锥体细胞计数模型组 (3.2 5± 2 .60个 )明显少于治疗组 (1 5.0± 6.35个 )和假手术组 (1 7.85± 1 1 .1 9个 ) ,均 P<0 .0 5;而治疗组和假手术组无显著性差异 (P>0 .0 5)。 展开更多
关键词 外源性雌激素 IBA D—gal 大鼠 认知障碍 作用机理 学习记忆能力 老年性痴呆
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鸡流感病毒SAα-2,3 Gal和α-2,6 Gal受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的作用 被引量:8
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作者 张增峰 罗殿中 +2 位作者 陈日荣 魏丹儿 王嘉 《广西医科大学学报》 CAS 2010年第4期497-501,共5页
目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道... 目的:探讨鸡流感病毒受体分布特点及其在流感病毒生态系统中的位置和作用。方法:应用凝集素组织化学染色技术检测鸡呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,用荧光素Alexa 488标记的禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1分别与鸡呼吸道、消化道各解剖部位结合。结果:鸡呼吸道均表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,SA-α2,6Gal受体在气管、支气管和次级支气管呈高密度分布,而SA-α2,3Gal受体在呼吸道的分布以副支气管上皮细胞为主;消化道结肠上皮细胞SA-α2,3Gal受体呈弥漫分布,但SA-α2,6Gal受体仅少量分布。同时,禽流感病毒H9N1、人流感病毒H1N1均可与呼吸道和消化道上皮细胞结合。结论:鸡同时表达SA-α2,3Gal和-α2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于病毒基因重配,可充当产生人类流感大流行潜在的中间宿主。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 受体 唾液酸 SA-α2 3gal受体 SA-α2 6gal受体
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新型α-半乳糖苷酶清除动物红细胞表面αGal抗原的研究 被引量:6
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作者 高红伟 张雪 +6 位作者 李素波 檀英霞 鲍国强 王颖丽 徐丽娟 季守平 宫锋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1231-1234,共4页
异种抗原αGal是引起异种移植免疫排斥反应的重要原因之一。脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶是一种新型的糖苷酶,能够切除支链多糖和直链多糖末端的αGal残基。本研究探讨新型α半乳糖苷酶清除红细胞表面αGal抗原的作用。利用新型的基... 异种抗原αGal是引起异种移植免疫排斥反应的重要原因之一。脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶是一种新型的糖苷酶,能够切除支链多糖和直链多糖末端的αGal残基。本研究探讨新型α半乳糖苷酶清除红细胞表面αGal抗原的作用。利用新型的基因重组α-半乳糖苷酶酶解牛、猪、狗、兔红细胞上的异种抗原,并用流式细胞术分析细胞表面的αGal抗原。结果表明,动物红细胞表面的异种抗原αGal被完全或部分清除。结论:新型α-半乳糖苷酶可以用来清除异种红细胞上的αGal抗原,对降低异种移植引起的超急性排斥反应具有潜在意义。 展开更多
关键词 红细胞 异种抗原 αgal抗原 Α-半乳糖苷酶
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GAL4/UAS系统在果蝇Tis11基因RNA干扰中的应用 被引量:3
7
作者 刘勇 张梅超 +1 位作者 韦有恒 马维骏 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期207-211,共5页
TTP在哺乳动物许多关键基因表达的转录后水平上起调控作用,Tis11是TTP蛋白在果蝇中的同源物.目前还没有现成的可用于研究Tis11功能的基因敲除或敲低的果蝇.为了获得肌动蛋白启动子或者热激蛋白启动子驱动表达Tis11 mRNA干扰序列的具有... TTP在哺乳动物许多关键基因表达的转录后水平上起调控作用,Tis11是TTP蛋白在果蝇中的同源物.目前还没有现成的可用于研究Tis11功能的基因敲除或敲低的果蝇.为了获得肌动蛋白启动子或者热激蛋白启动子驱动表达Tis11 mRNA干扰序列的具有较高干扰效率的Tis11基因干扰果蝇,将肌动蛋白启动子或者热激启动子驱动表达的GAL4果蝇品系与融合有Tis11 mRNA干扰序列的UAS品系杂交,收集同时带有GAL4基因和UAS序列的子一代果蝇.提取所收集果蝇的总RNA,将其中的mRNA逆转录成cDNA,并设计检测Tis11基因的特异性引物,然后通过Real-time PCR检测Tis11 mRNA的表达情况.结果显示所收集的能表达Tis11基因干扰序列的子一代果蝇与不能表达Tis11基因干扰序列的对照果蝇相比,其体内Tis11 mRNA的表达水平下降明显.收集的果蝇其体内所表达的干扰序列对Tis11 mRNA干扰效果显著,我们成功获得了Tis11基因的RNA干扰果蝇. 展开更多
关键词 Tis11 gal4/UAS系统 RNA干扰 果蝇
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外周血Gal-3、NT-proBNP在慢性心力衰竭患者中表达意义的研究 被引量:10
8
作者 顾驾云 夏海莲 +3 位作者 王芳芳 周杨 刘培 滕燕 《河北医药》 CAS 2016年第21期3214-3216,共3页
目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血半乳糖凝集素(Gal)-3、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)表达水平的变化。方法选择89例CHF患者作为研究对象,采用酶联免疫吸附法、电化学发光法分别检测入选患者外周血Gal-3、NT-proBNP表达水平,分析其... 目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血半乳糖凝集素(Gal)-3、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)表达水平的变化。方法选择89例CHF患者作为研究对象,采用酶联免疫吸附法、电化学发光法分别检测入选患者外周血Gal-3、NT-proBNP表达水平,分析其在不同类型心力衰竭[左心射血分数保留的心力衰竭(HFPEF)、左心射血分数降低的心力衰竭(HFREF)]、心功能分级患者中的变化,并进行相关性分析。结果 HFPEF、HFREF患者Gal-3、NT-proBNP表达水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000);心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者Gal-3、NT-proBNP表达水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000);Gal-3与NT-proBNP呈正相关(r=0.230,P=0.030),与LVEF呈负相关(r=-0.533,P=0.000);NT-proBNP与LVEF呈负相关(r=-0.372,P=0.000)。结论外周血Gal-3、NT-proBNP可作为评判CHF患者病情危重程度的重要指标。 展开更多
关键词 心力衰竭 慢性 血半乳糖凝集素(gal)-3 N末端B型利钠肽原
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基于GAL器件的步进电机控制器的研究与设计 被引量:5
9
作者 臧利林 贾磊 丁新 《电子技术应用》 北大核心 2004年第4期28-30,共3页
介绍了利用阵列逻辑器件GAL16V8对三相六拍步进电机实现控制的方法及其电路设计。通过计算机和编程器对GAL进行编程,可以满足各种控制要求。该电路简单,工作稳定可靠,编程灵活方便。
关键词 gal器件 步进电机 控制器 gall6V8 三相六拍 阵列逻辑器件
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GAL4/UAS系统在转基因技术中的应用研究进展 被引量:7
10
作者 李春峰 夏庆友 周泽扬 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第1期78-81,共4页
GAL4/UAS系统是一种转基因技术体系,其原理是利用特定的启动子或增强子,以组织特异性的方式激活酵母转录激活子GAL4的表达,GAL4又以同样的方式引起GAL4反应元件(UAS)-靶基因的转录。GAL4/UAS系统的关键点在于:GAL4基因和UAS-靶基因分别... GAL4/UAS系统是一种转基因技术体系,其原理是利用特定的启动子或增强子,以组织特异性的方式激活酵母转录激活子GAL4的表达,GAL4又以同样的方式引起GAL4反应元件(UAS)-靶基因的转录。GAL4/UAS系统的关键点在于:GAL4基因和UAS-靶基因分别存在于两个转基因系中。GAL4转基因系中有转录激活子,但没有靶基因;在UAS-靶基因系中,转录激活子不存在,因而靶基因处于沉默状态,只有将GAL4转基因系与UAS-靶基因系进行杂交,才可能产生表达靶基因的后代。本文综述了GAL4/UAS系统的建立及其研究应用。 展开更多
关键词 gal4/UAS系统 转基困 基因表达
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X-Gal培养基+PCR法快速鉴定酸奶中双歧杆菌 被引量:2
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作者 江晓 陈晓蔚 +2 位作者 曾理 贾力敏 丁洁 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第12期1629-1630,共2页
目的:探讨一种简易快速酸奶中双歧杆菌的鉴别方法。方法:在MRS培养基中添加一定量X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷),通过对标准双歧杆菌和乳酸菌混合菌及双歧杆菌和乳酸菌发酵的酸奶进行检测,对该培养基上不同颜色的菌落提取DNA作... 目的:探讨一种简易快速酸奶中双歧杆菌的鉴别方法。方法:在MRS培养基中添加一定量X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷),通过对标准双歧杆菌和乳酸菌混合菌及双歧杆菌和乳酸菌发酵的酸奶进行检测,对该培养基上不同颜色的菌落提取DNA作PCR鉴定。结果:在X-Gal培养基上呈白色或浅兰色菌落经PCR鉴定为双歧杆菌,而呈深兰色菌落经PCR鉴定未出现双歧杆菌特征性条带。结论:在X-Gal培养基上双歧杆菌和乳酸菌有明显鉴别性,可用于双歧杆菌和乳酸菌混合发酵的酸乳制品菌落鉴别计数。 展开更多
关键词 双歧杆菌 X—gal培养基 酸奶 PIER 菌落鉴别计数
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去除αGal抗原的猪红细胞输入猕猴体内的初步研究 被引量:3
12
作者 常宏宇 檀英霞 +5 位作者 张成林 卢雁平 张海洁 季守平 宫锋 章扬培 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2008年第2期110-113,共4页
目的探讨经α-半乳糖苷酶(AGL)去除了αGal抗原的猪红细胞输注给灵长类动物的可能性。方法使用AGL体外去除猪红细胞表面的αGal抗原,应用流式细胞术和配血试验检测修饰效果:用FITC标记此红细胞,将AGL酶解的pRBCs与未酶解的pRBCs分别输... 目的探讨经α-半乳糖苷酶(AGL)去除了αGal抗原的猪红细胞输注给灵长类动物的可能性。方法使用AGL体外去除猪红细胞表面的αGal抗原,应用流式细胞术和配血试验检测修饰效果:用FITC标记此红细胞,将AGL酶解的pRBCs与未酶解的pRBCs分别输注给使用免疫抑制剂(眼镜蛇毒因子及地塞米松)预注射的猕猴;流式细胞仪检测计算输注红细胞在猕猴体内的存活率,同时检测受试猕猴的血生化及尿液指标。结果AGL有效清除了猪红细胞表面的αGal抗原,使其与猕猴血清的凝集反应减弱。未酶解的pRBCs在猕猴体内存活<0.5h。AGL酶解后的猪红细胞输注后2h在猕猴体内有29%存活,8h猕猴体内仍可检测到荧光标记的pRBCs。结论AGL能有效清除猪细胞表面的αGal抗原,减弱HAR,延长异种移植物的存活时间。 展开更多
关键词 猪红细胞 αgal抗原 Α-半乳糖苷酶 猕猴 异种输血
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振腹环揉法对失眠大鼠下丘脑内SP、GAL、β-EP含量水平的影响 被引量:3
13
作者 张野 丛德毓 +2 位作者 董娜 郅晓宇 张红石 《辽宁中医杂志》 CAS 2022年第4期205-208,226,共5页
目的通过检测失眠大鼠下丘脑内的SP、GAL、β-EP的浓度,结合失眠大鼠症状改善变化,探讨振腹环揉法治疗失眠的作用机制。方法选取40只SD大鼠,随机分为空白组、模型组、推拿组,每组10只大鼠。空白组不进行造模和治疗;模型组仅造模但不治疗... 目的通过检测失眠大鼠下丘脑内的SP、GAL、β-EP的浓度,结合失眠大鼠症状改善变化,探讨振腹环揉法治疗失眠的作用机制。方法选取40只SD大鼠,随机分为空白组、模型组、推拿组,每组10只大鼠。空白组不进行造模和治疗;模型组仅造模但不治疗;推拿组造模后推拿治疗。分别在治疗5 d、10 d各处死5只大鼠采用ELISA法检测失眠大鼠下丘脑内SP、GAL、β-EP浓度,并观察失眠大鼠症状改善情况。结果造模后模型组潜睡眠时间和睡眠持续时间均有显著性差异(P<0.01)。比较SP含量,第5天与第10天比较模型组、推拿组SP含量均升高(P<0.05)。比较治疗5 d、10 d后SP含量模型组小于其他各组,且存在统计学意义(P<0.05)。比较GAL含量,模型组、推拿组第5天和第10天比较,GAL含量均升高(P<0.05)。治疗5 d后和10 d后模型组GAL含量均低于其他各组,且存在统计学意义(P<0.05)。比较β-EP含量,第5天与第10天比较,模型组、推拿组β-EP含量均增高,有统计学意义(P<0.05)。比较治疗5 d后和10 d后β-EP含量各组间比较,模型组显著低于其他各组,有统计学意义(P<0.01)。结论PCPA造模法能够模拟大鼠失眠的发生,振腹环揉法具有改善失眠大鼠模型失眠症状的作用,振腹环揉推拿疗法能够调节失眠大鼠模型下丘脑内SP、GAL、β-EP浓度治疗失眠。振腹环揉推拿疗法能改善下丘脑AS细胞排列状态调节下丘脑功能,改善昼夜节律和下丘脑能量代谢。 展开更多
关键词 振腹环揉 SP gal Β-EP
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^(51)Cr示踪法研究UDP-Gal在血小板储存中的作用 被引量:2
14
作者 崔云 刘璐 +2 位作者 黄成垠 尹其华 黄鹰 《同位素》 CAS 2004年第4期225-227,共3页
用51Cr示踪法对尿嘧啶二磷酸半乳糖(UDP-Gal)在4℃低温储存兔血小板中的保护作用进行了研 究。结果显示在血小板中加入UDP-Gal进行储存,回输体内后在肝脏中的破坏率明显减少,寿命延长。表明 UDP-Ga对低温储存的血小板具有良好的保护作用。
关键词 尿嘧啶二磷酸半乳糖(UDP—gal) 血小板 储存 ^51Cr
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ST6GalⅠ抑制TNFR1表达调控肾透明细胞癌凋亡 被引量:2
15
作者 李前进 王玉杰 +2 位作者 刘强 高新 拜合提亚·阿扎提 《中国癌症防治杂志》 CAS 2020年第4期415-420,共6页
目的探讨ST6GalⅠ对肾透明细胞癌细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法qRT-PCR和Western blot检测ST6GalⅠ和TNFR1在肾透明细胞癌细胞中的表达。构建ST6GalⅠ差异表达肾透明细胞癌细胞株,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,并分析ST6Gal... 目的探讨ST6GalⅠ对肾透明细胞癌细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法qRT-PCR和Western blot检测ST6GalⅠ和TNFR1在肾透明细胞癌细胞中的表达。构建ST6GalⅠ差异表达肾透明细胞癌细胞株,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,并分析ST6GalⅠ和TNFR1表达的相关性,qRT-PCR和Western blot检测差异表达ST6GalⅠ细胞中TNFR1的表达,采用流式细胞术检测同时差异表达ST6GalⅠ和TNFR1的A498和Caki-1细胞的凋亡水平。结果与ST6GalⅠ在5种肾透明细胞癌细胞中均高表达(P<0.05);抑制ST6GalⅠ表达后A498细胞凋亡率升高(P<0.01),Caki-1细胞过表达ST6GalⅠ后细胞凋亡率降低(P<0.001)。TNFR1 mRNA和蛋白在5种肾透明细胞癌细胞株中均低表达,且与ST6GalⅠm RNA和蛋白表达呈负相关(r=-0.9667,-0.9928,均P<0.01);抑制ST6GalⅠ表达TNFR1表达增加(P<0.001),而ST6GalⅠ过表达TNFR1表达降低(P<0.001);A498细胞同时抑制ST6GalⅠ和TNFR1表达后细胞凋亡率低于单独抑制ST6GalⅠ(P<0.01),Caki-1细胞同时过表达ST6GalⅠ和TNFR1后细胞凋亡率高于单独抑制ST6GalⅠ(P<0.01)。结论ST6GalⅠ可通过抑制TNFR1表达而抑制肾透明细胞癌的凋亡。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 ST6gal TNFR1 凋亡
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SPF鸡胚St3galⅠ基因的克隆及其在MDCK细胞中的表达 被引量:1
16
作者 陆玉建 吴信明 +4 位作者 管宇 张松林 李树芳 韩文瑜 沈志强 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期45-51,共7页
为了提高MDCK细胞表面禽流感病毒(AIV)受体的水平,以12日龄的SPF鸡胚为试材,通过反转录PCR扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因(St3galⅠ),并将回收的片段插入到pMD18-T载体中。酶切pMD18-T-St3galⅠ和pCI-neo质粒,将目的片段进行连接,构建含有St3ga... 为了提高MDCK细胞表面禽流感病毒(AIV)受体的水平,以12日龄的SPF鸡胚为试材,通过反转录PCR扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因(St3galⅠ),并将回收的片段插入到pMD18-T载体中。酶切pMD18-T-St3galⅠ和pCI-neo质粒,将目的片段进行连接,构建含有St3galⅠ基因的真核表达载体。利用脂质体介导法转染MDCK细胞,在G418的筛选下,获得具有抗性的转基因细胞系。通过细胞克隆化培养和PCR检测,筛选可稳定表达St3galⅠ基因的细胞株。结果表明,从鸡胚中克隆的St3galⅠ基因成功的插入到pCI-neo质粒,从而实现真核表达载体pCI-neo-St3galⅠ的构建。在G418选择压力下,初步获得了稳转目的基因的MDCK细胞系。将抗性细胞混合克隆进行稀释,经选择后挑选出30个单克隆抗性细胞株。分别以转染细胞基因组DNA和总RNA为模板,经PCR检测显示,目的基因已整合入MDCK细胞的基因组中并可稳定的进行表达。 展开更多
关键词 唾液酸 St3galⅠ基因 MDCK 转染 G418 PCR
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异种移植中Galα(1,3)Gal抗原的研究近况 被引量:3
17
作者 彭珊瑛 王文杰 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期248-250,共3页
同种异体组织和器官移植物供体来源有限 ,使得异种移植再度成为移植领域的研究热点。异种移植的主要障碍是人体内存在的天然抗体与移植物表面含有α1,3半乳糖残基 [Galα(1,3)Gal,αGal]的抗原结合 ,激活补体系统和炎症反应 ,导致超急... 同种异体组织和器官移植物供体来源有限 ,使得异种移植再度成为移植领域的研究热点。异种移植的主要障碍是人体内存在的天然抗体与移植物表面含有α1,3半乳糖残基 [Galα(1,3)Gal,αGal]的抗原结合 ,激活补体系统和炎症反应 ,导致超急性移植排斥反应 (HAR)的发生 ,使移植物失活。除人类和旧世纪猴外 ,其它所有哺乳动物的体内都含有αGal抗原 ,该抗原是由一组具有Galα(1,3)Gal双糖末端的糖蛋白或糖脂组成的 ,它的形成依赖于α1,3半乳糖基转移酶 (αGT)的催化。目前 ,针对αGal抗原克服超急性移植排斥反应的方法主要有如下几种 :(1)酶处理去除内皮细胞表面的αGal抗原 ;(2 )物理化学方法去除人体血浆中存在的特异性天然抗体 ;(3)基因工程方法改造表达催化αGal抗原形成的相关酶基因 。 展开更多
关键词 异种移植 超急性移植排斥反应 天然抗体 αgal抗原 移植手术
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siat7e基因和st3gal Ⅰ基因双表达载体的构建及其初步应用 被引量:3
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作者 陈小云 张敏 +3 位作者 张启龙 王磊 王栋 蒋桃珍 《中国兽药杂志》 2013年第4期6-10,共5页
应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从人类基因组中扩增出全长为1011 bp的唾液酸转移酶(siat7e基因),并从鸡基因组中扩增出全长为1029 bp的β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(ST3GAL Ⅰ)基因。将它们分别克隆入pMD18-T载体中。对扩增的全长si... 应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从人类基因组中扩增出全长为1011 bp的唾液酸转移酶(siat7e基因),并从鸡基因组中扩增出全长为1029 bp的β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(ST3GAL Ⅰ)基因。将它们分别克隆入pMD18-T载体中。对扩增的全长siat7e基因序列采用BamH Ⅰ和PstⅠ双酶切后连接入pReceiver真核表达载体,构建pRE-SⅠAT重组表达载体,进而,对扩增的全长st3gal Ⅰ基因采用Sac Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,后连接入pRE-SIAT重组表达载体,构建pRE-SIAT-ST3重组真核表达载体。经限制性内切酶消化及DNA序列分析,证实构建的重组表达质粒是正确的。将构建的双基因表达载体转染MDCK细胞,利用荧光显微镜观察,可见细胞表达明显的绿色荧光,从而初步证实了外源基因在MDCK细胞中的正确表达。本研究为最终构建能够适应悬浮培养,并且对禽流感病毒更为易感的MDCK细胞系奠定了基础。 展开更多
关键词 siat7e基因 st3gal Ⅰ基因 表达载体 MDCK细胞
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异种器官移植中的Galα(1,3)Gal抗原表位的研究进展 被引量:2
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作者 邢力 郭礼和 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期191-195,共5页
改造猪的器官移植给人类被认为是解决人类移植器官供不应求的可能方案,但由于猪和人在免疫学上的差异使移植到人体的猪的带血管器官很快被排斥掉,本文综述了近十年来对猪-人之间最重要的差异性抗原表位的研究进展。
关键词 异种器官移植 galα(1 3)gal抗原表位 基因结构
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果蝇GAL4/UAS系统在本科遗传学实验中的应用 被引量:3
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作者 马沛勤 苏仙绒 陈莉 《运城学院学报》 2014年第5期67-69,共3页
GAL4蛋白是酵母中的一类转录因子,它能够与特定的上游激活序列结合,并驱动UAS下游基因的表达。将酵母中的GAL4和UAS元件分别引入到果蝇中,含有UAS-目的基因的转基因果蝇品系,无法在亲本中表达,只有与驱动者GAL4品系杂交后的子一代中,目... GAL4蛋白是酵母中的一类转录因子,它能够与特定的上游激活序列结合,并驱动UAS下游基因的表达。将酵母中的GAL4和UAS元件分别引入到果蝇中,含有UAS-目的基因的转基因果蝇品系,无法在亲本中表达,只有与驱动者GAL4品系杂交后的子一代中,目的基因才会表达。在本科遗传学实验中,引入eyelessGAL4和UAS-Ras转基因果蝇品系杂交实验,通过观察F1代复眼中原癌基因ras表达后的表型,使学生了解如何通过GAL4-UAS系统在模式动物黑腹果蝇中实现靶基因的时空表达,认识GAL4-UAS系统在研究果蝇遗传发育中的重要性和优越性,理解分子调控、靶基因表达与个体的遗传和发育每个环节都是可以操作和控制的现代遗传学实验理念。 展开更多
关键词 gal4-UAS系统 果蝇 遗传实验
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