反流性食管炎大鼠食管内脏高敏感与酸离子敏感通道1表达的关系

目的探讨反流性食管炎（RE）大鼠内脏传入神经的敏感性和酸离子敏感通道1（ASIC1）可能在其中发挥的作用。方法选取雄性Sprague-Dawley大鼠60只，建立动物模型。将60只大鼠分为开腹对照组20只和RE组40只。对两组大鼠行常规食管病理活组织检查，通过1，1′-二（十八烷基）-3，3，3′，3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐示踪法定位食管特异性DRG神经元并进行全细胞膜片钳检测。用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测食管黏膜和脊髓胸椎第3～5节段（T3～T5）DRG中ASIC1的蛋白质表达和mRNA含量。统计学分析采用两独立样本t检验。结果RE组大鼠体质量低于开腹对照组[（179.41±16.38） g比（290.75±22.20） g]，差异有统计学意义（t＝17.090，P〈0.01）。RE组大鼠食管基底细胞增生，乳头延长，血管扩张、充血，炎性细胞浸润。全细胞膜片钳检测结果显示，RE组食管特异性DRG神经元静息膜电位较开腹对照组去极化显著[－（46.20±1.92） mV比－（51.60±1.52） mV]，差异有统计学意义（t＝4.930，P〈0.01）；RE组阈电流低于开腹对照组[（18.00±13.04） pA比（80.00±12.25） pA]，差异有统计学意义（t＝7.750，P〈0.01）。2倍、3倍阈电流刺激下，RE组动作电位发放频率增加[分别为（5.80±1.48）个比（3.00±1.58）个，（10.60±2.30）个比（5.20±1.92）个]，差异均有统计学意义（t＝2.890、4.030，P均〈0.01）。蛋白质印迹法结果显示，RE组大鼠食管黏膜ASIC1表达低于开腹对照组（0.614±0.120比0.976±0.283），差异有统计学意义（t＝2.885，P〈0.05）；RE组和开腹对照组大鼠DRG中ASIC1表达（0.804±0.182比1.032±0.316）比较差异无统计学意义（t＝1.528，P〉0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，RE组大鼠食管黏膜ASIC1 mRNA含量低于开腹对照组（0.694±0.118比1.036±0.137），差异有统计学意义（t＝4.642，P〈0.01）；RE组大鼠DRG中ASIC1 mRNA含量与开腹对照组（1.002±0.074比0.985±0.120）相比差异无统计学意义（t＝0.294，P〉0.05）。结论RE组大鼠食管内脏传入神经敏感性增高，ASIC1可能对食管内脏痛觉过敏的形成具有负性调节作用。