Progastrin-releasing peptide and gastrin-releasing peptide receptor mRNA expression in non-tumor tissues of the human gastrointestinal tract

瞄准：用分子的生物学技术在人的食管，胃肠道，胰和胆囊的非肿瘤纸巾调查释放 gastrin 肽(GRP ) 和 GRP 受体 mRNA 的表示。方法：多形核白细胞，(+) mRNA 用一个自动化 nucleic 抽出者从全部的 RNA 摘录被孤立并且随后，变换成搁浅单人赛的 cDNA (ss-cDNA ) 。PCR 扩大用基因特定的 GRP 和 GRP 受体教材被执行。PCR amplicons 的特性被南部的污点分析进一步用基因特定的 GRP 和 GRP 受体杂交探针证实。结果：GRP 和 GRP 受体 mRNA 的表示在将近非肿瘤标本的片断分析了的所有在各种各样的层次被检测，除了胆囊。在大多数活体检视标本， GRP 和 GRP 受体 mRNA 的合作表示看起来发生。然而， GRP mRNA 的表示比是 GRP 受体 mRNA 是更突出的。结论：GRP 和 GRP 受体 mRNAs 在整个胃肠道被表示并且在正常和肿瘤房间为印射的未来和它的生理的重要性的决心提供信息。

mGM-CSF-GnRH3与mGM-CSF-GRP6融合蛋白体外抗肿瘤作用及生物信息学预测

目的:制备鼠源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse granulocyte-macrophage colony stimulating factor,m GM-CSF)与促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,Gn RH)的融合蛋白m GM-CSF-Gn RH3(m GGn)和m GM-CSF与胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)的融合蛋白m GM-CSF-GRP6(m G6),探讨这两种融合蛋白在体外对黑色素瘤B16F10细胞的抑制效果,并对其等电点、相对分子质量、疏水性、稳定性、亚细胞定位、信号肽、空间结构、潜在抗原表位等进行初步预测。方法:m GGn与m G6融合蛋白制备成功后,通过显微观察、划痕实验、CCK-8法、流式细胞术分别检测不同浓度蛋白对B16F10细胞形态、细胞迁移、细胞增殖、细胞周期的影响,利用蛋白质在线分析系统EXPASY、GOR4、SWISS MODEL对重组融合蛋白进行基本属性、二三级结构分析预测,运用IEDB和ABCpred软件综合预测其B细胞抗原表位,采用SYFPEITHI、Bl MAS和Net CTL软件综合预测其CTL表位,利用Net MHCIIpan 3.1 Server和IEDB软件综合预测其Th表位。结果:m GGn和m G6融合蛋白均抑制肿瘤细胞的增殖和迁移;m GGn能使B16F10细胞周期阻滞于G1期,m G6能使B16F10细胞周期阻滞于S期,不能进入G2期,从而抑制瘤细胞的增殖。m GGn和m G6结构丰富,含有较多潜在的B细胞、CTL和Th表位。结论:m GGn与m G6融合蛋白在体外对黑色素瘤B16F10细胞具有抑制作用,其生物信息学预测为进一步研究两种融合蛋白的生物学功能和免疫活性奠定了基础。

血清Pro-GRP对小细胞肺癌的诊断价值的Meta分析

目的:探讨血清Pro-GRP(胃泌素释放肽前体)对SCLC(小细胞肺癌)诊断的价值。方法:计算机检索Medline数据库、Cochrane图书馆、OVID、Web of Science、CNKI、万方、维普等数据库,搜索并且收集涉及血清Pro-GRP对SCLC诊断的相关文献,采用QUADAS对文献的质量进行评价,采用Meta-Disc 1.4对数据进行分析。结果:按照统一的排除和纳入标准,得到符合要求的文献13篇,中文9篇,英文4篇。累计病例2587例,其中小细胞肺癌例855例,良性肺部疾病、健康、其他肿瘤共1732例。13个研究结果的汇总SEN和SPE分别为79%(76%-82%)和94%(92%-95%)。汇总+LR、-LR分别为:13.73(8.41-22.44)、0.24(0.20-0.30)。DOR为58.34(32.70-103.74),曲线下面积AUC为0.8628,Q为0.7935。结论:本研究证据显示,Pro-GRP诊断SCLC有一定的临床价值,可作为早期诊断SCLC的指标之一,但是由于纳入的研究不够多,样本量不够大,所以Pro-GRP诊断SCLC仍然需要大样本的研究加以进一步验证。

循环肿瘤细胞联合血清胃泌素释放前肽及神经元特异性烯醇化酶水平对SCLC化疗疗效的评估意义

目的:探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)数量联合胃泌素释放前肽(gastrin releasing peptide,pro-GRP)及神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)对小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者化疗疗效的评估意义。方法:收集2015年10月1日至2016年12月30日长海医院呼吸与危重症科收治的40例SCLC患者作为观察对象,分别于第1、3周期化疗前抽取患者外周血,检测其CTC、pro-GRP及NSE水平,分析CTC数目及其联合pro-GRP、NSE水平与化疗疗效的关系;第1、3周期化疗前行胸部CT,对比CTC、pro-GRP及NSE联合判断化疗疗效与实体瘤疗效评价标准(response evaluation criteria in solid tumors,RECIST)标准判断化疗疗效的差异性;分析CTC数与患者临床特征的关系。结果:40例SCLC患者中初次、二次检测到CTC的阳性率为82.5%、87.5%。化疗后外周血CTC数下降越多,疗效越好。根据RECIST标准,肿瘤进展组与肿瘤控制组CTC的变化差异有统计学意义(P<0.05)。CTC数目评价标准下,肿瘤控制与否与患者的年龄、性别、吸烟与否、初诊时肿瘤大小、肿瘤分期无明显关联(P>0.05)。CTC数目评价化疗疗效与RECIST两者存在一致性。联合检测CTC、pro-GRP及NSE,三者量值评价化疗疗效与RECIST疗效评价结果同样一致(P>0.05),且三者联合检测可提高疗效判断的灵敏性。结论:CTC数目与化疗疗效呈负相关,联合检测CTC、pro-GRP及NSE评估SCLC患者化疗疗效灵敏性更高。

胃泌素释放肽及其受体预测小细胞肺癌远处转移的价值分析

目的探讨小细胞肺癌肿瘤标志物与预后,远处转移的关系以及预测远处转移的价值。方法回顾性分析73例小细胞肺癌患者临床及病理资料,接受手术治疗者38例(52.1%),局部放疗者35例(47.9%)。用免疫组织化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胃泌素释放肽(GRP)、胃泌素释放肽受体(GRPR)的蛋白表达,结合肿瘤体积重新分级,分析其与小细胞肺癌患者预后、远处转移的关系。结果 NSE、GRP、GRPR蛋白在小细胞肺癌组织中的阳性表达率分别为71.2%、79.5%、75.3%,GRP与GRPR的表达存在相关性(P=0.000)。GRP、GRPR蛋白不同表达水平患者间的预后及远处转移差异均有统计学意义(P<0.05)。GRP与GRPR蛋白表达预测小细胞肺癌远处转移的敏感度均为71.4%,特异性分别为83.9%、90.3%。结论 GRP、GRPR是敏感度及特异性均较好的预测小细胞肺癌侵袭性及远处转移的重要指标。

小细胞肺癌患者血清胃泌素释放肽前体与神经元特异性烯醇化酶水平相关性分析

目的分析小细胞肺癌患者血清胃泌素释放肽前体与神经元特异性烯醇化酶水平相关性。方法回顾性分析2010年1月至2012年12月间住院的小细胞肺癌患者的临床资料，以ELISA方法检测标本血清中NSE、Pro—GRP水平。结果血清NSE、Pro—GRP水平分别与随TNM分期增加而增高，血清NSE、Pro—GRP水平分别与TNM分期显正相关（Spearman相关系数=0．355，P=0．000；Spearman相关系数一0．215，P=0．000）。小细胞肺癌患者血清NSE、Pro—GRP水平间不具有相关性（偏相关系数为0．090，P值为0．015）。结论小细胞肺癌患者血清胃泌素释放肽前体与神经元特异性烯醇化酶水平间不具有相关性。

融合蛋白G3G6和HST1致敏DC疫苗抗黑色素瘤的药效学研究

探究促性腺激素释放激素(GnRH)与胃泌素释放肽(GRP)偶联的融合蛋白(G3G6)和热休克蛋白65(HSP65)与六跨膜前列腺上皮抗原(STEAP1)偶联的融合蛋白(HST1)致敏树突状细胞(DC)的效果和致敏后DC对B16F10黑色素瘤的抑制杀伤作用。利用实验室现存工程菌表达融合蛋白G3G6和HST1,按未致敏DC(US-DC)组,G3G6融合蛋白致敏DC(G3G6-DC)组,HST1融合蛋白致敏DC(HST1-DC)组和G3G6及HST1联合致敏DC(GH-DC)组致敏小鼠骨髓来源的DC分化成熟,获得融合蛋白致敏的相应DC疫苗。将B16F10黑色素瘤细胞以1×10~6个/只移植于C57BL/6J雄性小鼠构建黑色素瘤模型,DC疫苗免疫治疗,体内外实验探究DC疫苗的抗肿瘤药效。流式细胞术分析证明,融合蛋白有效刺激DC分化成熟;动物实验显示,与US-DC组相比,G3G6-DC黑色素瘤抑制率为35.75%,HST1-DC组为34.03%,GH-DC组为55.74%。研究结果初步证明,G3G6-DC和HST1-DC均可有效抑制黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的生长(P<0.05),且联合用药优于单独用药(P<0.01)。

胃泌素释放肽受体拮抗剂RC-3095通过抑制TLR4途径减轻小鼠肝缺血再灌注损伤的研究

目的 本文观察胃泌素释放肽(GRP)受体(R)在肝缺血再灌注损伤模型中的表达情况,并探讨GRP及GRPR拮抗剂RC-3095对小鼠肝缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法构建小鼠肝缺血再灌注损伤模型,将小鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R再灌注后3 h组(3 h)、I/R再灌注后6 h组(6 h)、I/R再灌注后12 h组(12h),观察GRP及GRPR在缺血再灌注引起的肝损伤中的表达情况;然后将小鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R组(I/R)、RC-3095干预组(RC-3095),HE染色观察小鼠肝组织坏死程度,检测各组小鼠外周血谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平,ELISA法检测小鼠外周血及肝脏组织中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的表达水平,RT-PCR法检测肝脏组织TLR4水平。结果小鼠肝脏缺血再灌注损伤GRP及GRPR表达增加,6 h达到高峰,随后表达降低;RC-3095能明显减轻肝缺血再灌注损伤模型小鼠肝脏坏死程度,抑制炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)的释放,抑制TLR4的表达。结论RC-3095可以通过抑制炎症因子的释放起到保护肝缺血再灌注损伤,其可能的机制是抑制TLR4的表达。

儿童空腹血浆胃泌素和胃泌素释放肽的水平

应用放射免疫法测定了125例儿童(年龄自2月至14岁)空腹血浆胃泌素(gastrin)和胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)。胃泌素和GRP的均值和实测范围分别为14.0±14.9,0～98.0 pmol/L和8.8士8.2,0～48.0 pmol/L。两种激素的浓度无显著的性别差异。胃泌素以2月至3岁以下组的含量为最高,其均值为12～14岁组的4倍以上。结果表明,胃泌素的浓度与年龄呈负相关(r=-0.50,P<0.001),而GRP的浓度则与年龄无相关性(P>0.05)。本文讨论了在不同年龄组的儿童的空腹血浆浓度的变化。

胃泌素释放肽及其受体在结直肠癌中的表达

目的探讨结直肠癌中胃泌素释放肽与预后、远处转移的关系,同时分析其在远处转移中的预测价值。方法收集我院62例诊断为结直肠癌患者的临床及病理资料,采用前瞻性研究方法,利用免疫组化技术了解患者中胃泌素释放肽(GRP)、胃泌素释放肽受体(GRPR)蛋白的表达,结合肿瘤体积进行分析,了解二者与结直肠癌患者预后、远处转移的关系。结果 GRP、GRPR蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率分别为79.0%和83.2%,二者表达存在相关性。GRP、GRPR蛋白水平与结直肠癌患者的预后及远处转移差异具有一定的相关性。GRP、GRPR能够在一定程度上预测结直肠癌远处转移,敏感度及特异度为69.4%、71.3%及70.1%、65.5%。结论 GRP、GRPR能够较好的预测结直肠癌患者的预后及远处转移,具有较好的敏感性及特异性。

血清NSE、胃泌素释放肽前体联合检测对小细胞肺癌的诊断意义

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)联合检测对小细胞肺癌的诊断意义。方法选取小细胞肺癌100例作为肺癌组,依据病变范围分为局限组(n=60例)和广泛组(n=40例),同期选取非肺癌人员30例作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清NSE、Pro-GRP水平,统计分析所有研究对象的血清NSE、Pro-GRP水平。结果肺癌组患者血清NSE、Pro-GRP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);广泛组患者血清NSE、Pro-GRP水平明显高于局限组,差异有统计学意义(P<0.05);NSE以26μg/L为临界值、Pro-GRP以47 ng/L为临界值时,其诊断小细胞肺癌的敏感度、特异度、准确度分别为96.00%、93.33%、96.92%,与实际结果基本相同,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清NSE、Pro-GRP水平与小细胞肺癌的发生发展有关,联合检测二者水平诊断该疾病具有良好的敏感性、特异性和准确性,值得临床作进一步推广。

人肝癌组织GRP、GRPR的表达及临床意义

胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）是与蛙皮素同源的小的调节肽，GRP和GRP受体（gastrin-releasing peptide receptor，GRPR）在较大范围的人类肿瘤高度表达，GRP作为有丝分裂因子促进肿瘤的进展。我们利用人肝癌组织标本，通过免疫组化检测肝癌组织中GRP、GRPR的表达，分析表达与肝癌临床病理指标的关系。

胃泌素释放肽及其受体在AEW诱发的小鼠干皮症模型瘙痒中的作用

目的建立丙酮/二乙醚溶液和水方法诱发的C57BL/6小鼠干皮症模型(AEW模型),检测胃泌素释放肽(GRP)及受体(GRPR)在颈段背根神经节(DRG)及脊髓的表达,并探讨它们在AEW诱发的干皮症慢性瘙痒发病机制中的作用。方法外用丙酮/二乙醚混合液(1∶1)和水7d建立C57BL/6小鼠的AEW模型,观察小鼠搔抓行为学,皮肤干燥症状,皮肤组织学(HE染色)和肥大细胞浸润(甲苯胺蓝染色)等指标,定量PCR分析GRP在颈部背根神经节(DRG),GRPR在颈部脊髓的mRNA表达水平变化。结果与对照组相比,AEW模型组小鼠的自发性搔抓次数明显多于对照组;AEW模型组小鼠颈背部皮肤表现出明显干燥、脱屑,病理提示表皮增厚、真皮肥大细胞浸润不明显;在颈部DRG的GRP、在颈部脊髓的GRPR mRNA表达水平升高。结论成功建立了干皮症且伴有强烈搔抓行为的C57BL/6小鼠模型,GRP和GRPR在AEW模型瘙痒中有重要作用。

胃泌素释放肽及其受体对认知及情绪影响的研究进展

胃泌素释放肽（Gastrin － releasing Peptide ， GRP）是由27个氨基酸构成的哺乳类神经肽，是1971年由 Anastasi 首次从欧洲蛙类皮肤中提取出来的一种与蛙皮素同源的小调节肽，GRP 与蛙皮素在结构上相似，拥有相同的7 C －末端氨基酸序列，并且在多种哺乳动物细胞和组织中发挥相似的生物学作用。 GRP 通过与 GRP 受体（GRPR）高亲和从而发挥生物学作用。与其他类型哺乳类蛙皮素样肽（Bombesin － Like Peptides ，BLP）受体一样，GRPR也属于 G 蛋白偶联受体家族，包含典型的7个跨膜结构域［1］。 GRPR 由384个氨基酸构成，在人类、小鼠和大鼠分别定位于染色体 Xp22．2－ p22．13（人类），X F4（小鼠），Xq21（大鼠）。在过去的研究中，越来越多的证据表明，GRP／GRPR 系统广泛影响生理功能，包括痒感觉、疼痛感、记忆的形成和表达、应激反应、焦虑、恐惧、细胞增殖和免疫系统中的趋化作用等［2］。