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Apoptosis mechanisms of human gastric cancer cell line MKN-45 infected with human mutant p27 被引量:9
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作者 Jin-Shui Zhu Long Wang Guo-Qiang Cheng Qin Li Zu-Ming Zhu Li Zhu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第47期7536-7540,共5页
AIM: To explore the inducing effect of human mutant p27 gene on the apoptosis of the human gastric cancer cell line MKN-45 and its associated mechanisms. METHODS: The recombinant adenovirus Ad-p27mt was constructed to... AIM: To explore the inducing effect of human mutant p27 gene on the apoptosis of the human gastric cancer cell line MKN-45 and its associated mechanisms. METHODS: The recombinant adenovirus Ad-p27mt was constructed to infect the human gastric cancer cell line MKN-45. Using flow cytometry, TUNEL assay and DNA fragment analysis, we measured the apoptotic effect of Ad-p27mt on the human gastric cancer cells. RESULTS: Ad-p27mt was successfully constructed and the infection efficiency reached 100%. After 18 h of infection, we observed an apoptotic hypodiploid peak on the flow cytometer before G1-S and apoptotic characteristic bands in the DNA electrophoresis. The apoptotic rate detected by TUNEL method was significantly higher in the Ad-p27mt group (89.4±3.12%)compared to the control group (3.12±0.13%, P < 0.01).CONCLUSION: Human mutant p27 can induce apoptosis of the human gastric cancer cells in vitro. 展开更多
关键词 细胞凋亡 mkn-45 胃癌 肿瘤细胞
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MAPK通路在红托竹荪多糖诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡中的作用机制研究
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作者 杨茜 卢海洋 +1 位作者 胡露 王忠元 《中国医院用药评价与分析》 2023年第10期1185-1189,共5页
目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的... 目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的红托竹荪多糖作用于细胞48 h后,采用细胞计数法检测红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察不同浓度的红托竹荪多糖作用于人胃癌MKN-45细胞48 h后细胞形态学的变化。设立实验组的红托竹荪多糖终浓度为8 mg/mL,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色流式细胞技术检测细胞的凋亡率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白质印迹法检测红托竹荪多糖作用胃癌细胞后p38蛋白激酶(p38)、磷酸化p38蛋白激酶(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、磷酸化C-JUN氨基末端激酶(p-JNK)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达,即与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)灰度值比值。结果:作用48 h后,不同浓度的红托竹荪多糖(4、6及8 mg/mL)对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制率分别为(8.27±5.99)%、(21.83±5.77)%和(56.95±5.21)%;在检测的浓度范围下,随着浓度的升高,红托竹荪多糖对MKN-45细胞增殖的抑制率逐渐升高。倒置显微镜下显示,经8 mg/mL的红托竹荪多糖作用48 h后,MKN-45细胞密度与对照组相比明显减少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组人胃癌MKN-45细胞凋亡率显著升高(P<0.05);细胞周期结果显示,实验组G_(1)期细胞比例明显减少(P<0.05),G_(2)期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组MKN-45细胞中cleaved Caspase-3的表达有升高趋势(P<0.05),Bcl-2的表达有降低趋势(P<0.05),p-P38/P38比值、p-ERK/ERK比值与p-JNK/JNK比值均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论:红托竹荪多糖在体外能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖并诱导细胞凋亡,使肿瘤细胞阻滞在G_(2)/M期,其作用可能通过调控MAPK信号通路实现。 展开更多
关键词 竹荪多糖 人胃癌mkn-45细胞 细胞凋亡 细胞周期 MAPK信号通路 B淋巴细胞瘤-2蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3
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金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响 被引量:13
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作者 余志红 魏品康 +4 位作者 许玲 秦志丰 施俊 肖艳 林晖明 《中西医结合学报》 CAS 2006年第3期275-280,共6页
目的:评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植入胃癌MKN-45细胞的抑制作用.方法:50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组.各组裸鼠予以相应药物实施干预.观察各组荷瘤裸鼠一般情况,... 目的:评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植入胃癌MKN-45细胞的抑制作用.方法:50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组.各组裸鼠予以相应药物实施干预.观察各组荷瘤裸鼠一般情况,肿瘤生长情况及抑瘤率.流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况.采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)双标记染色法鉴别早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞.电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化.结果:金龙蛇颗粒高、中、低剂量组的抑瘤率分别为68.13%、55.94%和50.31%,呈剂量依赖效应,与5-FU干预组抑瘤率比较,差异无统计学意义.金龙蛇颗粒各剂量组肿瘤细胞凋亡率为22.81%~38.54%,亦呈剂量依赖效应,且肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期.AnnexinV-FITC/PI双标记染色结果显示,金龙蛇颗粒各剂量组以早期凋亡细胞居多,5-FU干预组则以晚期凋亡细胞和坏死细胞居多.结论:金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制作用,促进MKN-45细胞凋亡可能是其抗肿瘤治疗的主要作用机制之一. 展开更多
关键词 金龙蛇颗粒 胃肿瘤 原位移植 细胞周期 细胞凋亡 中医药 裸鼠 人胃癌细胞系mkn-45
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参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45细胞周期阻滞及抗侵袭转移的影响 被引量:11
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作者 马春林 吴红彦 +2 位作者 李海龙 陈杰 张宣 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2016年第4期64-67,共4页
目的 探讨不同浓度参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45 细胞周期阻滞及抗侵袭转移作用的相关机制.方法 60 只SPF 级Wistar 大鼠,随机分为对照组和参芪抑瘤方低、中、高剂量组,每组15 只.参芪抑瘤方低、中、高剂量组分别给予0.25、0.50、1.0... 目的 探讨不同浓度参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45 细胞周期阻滞及抗侵袭转移作用的相关机制.方法 60 只SPF 级Wistar 大鼠,随机分为对照组和参芪抑瘤方低、中、高剂量组,每组15 只.参芪抑瘤方低、中、高剂量组分别给予0.25、0.50、1.00 g 原药材/mL 药液灌胃,空白组给予等量饮用水灌胃,每日2 次,连续7 d,末次灌胃2 h 后取血,分离血清.MKN-45 细胞经不同浓度药物血清处理后,流式细胞术检测细胞周期,免疫组化检测COX-2、PTEN 蛋白表达.结果 药物血清干预后细胞G0~G1 期比例增加,S 期比例减少;药物血清可降低MKN-45 细胞COX-2 蛋白阳性表达率,升高PTEN 蛋白阳性表达率(P〈0.05).结论 参芪抑瘤方药物血清阻滞细胞周期及抗侵袭转移作用可能与影响COX-2、PTEN 蛋白表达有关. 展开更多
关键词 参芪抑瘤方 胃癌 mkn-45细胞 细胞周期 COX-2蛋白 PTEN蛋白 大鼠
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5-氟尿嘧啶气雾对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响 被引量:4
5
作者 林填 余江 +3 位作者 魏志刚 胡彦锋 王亚楠 李国新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1066-1068,共3页
目的通过体外模拟5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔气雾化疗环境,评价5-Fu雾化对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响。方法运用自主研发的气雾化疗仪将5-Fu雾化,体外模拟腹腔气雾化疗环境,对胃癌细胞进行处理,维持气雾环境压力为8mmHg,作用时... 目的通过体外模拟5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔气雾化疗环境,评价5-Fu雾化对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响。方法运用自主研发的气雾化疗仪将5-Fu雾化,体外模拟腹腔气雾化疗环境,对胃癌细胞进行处理,维持气雾环境压力为8mmHg,作用时间为30min,并设生理盐水雾化作为对照,处理后用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 MTT结果显示,5-Fu气雾化疗组杀伤率显著高于生理盐水组[(31.13±3.51)%比(4.65±1.99)%,P<0.001];流式细胞结果显示,与生理盐水组相比,5-Fu气雾化疗组细胞凋亡率升高[(12.00±0.92)%比(2.65±0.52)%,P<0.001)],G1期细胞增多[(51.83±1.95)%比(36.41±2.33)%,P<0.001]、S期细胞减少[(16.72±2.36)%比(45.20±3.27)%,P<0.001],差异均有统计学意义。结论 5-Fu气雾能有效抑制胃癌细胞的增殖并诱导凋亡,使细胞阻滞于G1期,为气雾化疗的临床应用提供实验依据。 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 腹腔气雾化疗 胃癌细胞 mkn-45 凋亡
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藤梨根提取物对人胃癌MKN-45细胞增殖及凋亡的影响 被引量:27
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作者 附舰 陈光伟 +3 位作者 刘理礼 闵婕 王宏 张贺龙 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第1期20-22,共3页
目的:探讨太白山藤梨根提取物(Radix Actinidiae extractive,RAE)在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法:用0.01-100μg/ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTT法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;... 目的:探讨太白山藤梨根提取物(Radix Actinidiae extractive,RAE)在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法:用0.01-100μg/ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTT法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对MKN-45细胞凋亡及细胞周期分布的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:RAE在体外能够显著抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,且呈现浓度和时间依赖性;RAE对胃癌细胞的作用表现为周期特异性,使细胞阻滞于G0/G1期,进一步诱导细胞凋亡。对照组凋亡率为0.53%,1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml浓度的RAE干预胃癌细胞48小时后均出现凋亡峰,细胞凋亡率分别为3.27%、8.97%、12.6%。DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,不同浓度RAE处理的细胞样品中均可看到梯形凋亡条带,并呈现浓度依赖性。结论:RAE在体外对人胃癌MKN-45细胞有显著的抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡作用,其作用机制可能是使胃癌细胞周期阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 mkn-45胃癌细胞 细胞周期 细胞凋亡
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人参皂甙Rg3刺激淋巴细胞CD4上调以及对胃癌细胞MKN-45的杀伤作用 被引量:9
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作者 胡银英 郭江梅 +5 位作者 黄艳琴 袁芳 戴志芳 袁佳蕾 杨淑华 袁铿 《实验与检验医学》 CAS 2011年第1期24-26,64,共4页
目的探讨人参皂甙Rg3对淋巴细胞的免疫刺激作用及其对胃癌细胞MKN-45的影响。方法采用梯度密度分离法分离正常人淋巴细胞,经人参皂甙Rg3刺激后流式细胞术检测人参皂甙Rg3对正常人淋巴细胞CD4表达的影响;用MTT法测定人参皂甙Rg3对MKN-45... 目的探讨人参皂甙Rg3对淋巴细胞的免疫刺激作用及其对胃癌细胞MKN-45的影响。方法采用梯度密度分离法分离正常人淋巴细胞,经人参皂甙Rg3刺激后流式细胞术检测人参皂甙Rg3对正常人淋巴细胞CD4表达的影响;用MTT法测定人参皂甙Rg3对MKN-45抑制作用;HE染色法观察人参皂甙Rg3诱导MKN-45的凋亡作用。结果人参皂甙Rg3促进正常人淋巴细胞CD4表达明显高于正常对照组(P<0.05);人参皂甙Rg3对MKN-45抑制率、凋亡率与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3具有刺激淋巴细胞CD4上调的作用以及抑制MKN-45细胞生长的作用。 展开更多
关键词 人参皂甙RG3 胃癌细胞mkn-45
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盐酸伊利替康及氧化苦参碱对多耐药人胃癌细胞MKN-45的作用 被引量:3
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作者 朱金水 张卫平 +4 位作者 宋明全 李沁 达炜 孙群 陈国强 《中国临床医学》 北大核心 2007年第4期498-500,共3页
目的:探讨盐酸伊利替康(CPT-11)及氧化苦参碱对裸鼠体内多药耐药人胃癌细胞MKN-45的抑制作用及其抗肿瘤作用的分子机制。方法:建立了多药耐药人胃癌MKN-45细胞的皮下移植瘤模型,随机分成0.9%氯化钠对照组、CPT-11治疗组、氧化苦参碱治... 目的:探讨盐酸伊利替康(CPT-11)及氧化苦参碱对裸鼠体内多药耐药人胃癌细胞MKN-45的抑制作用及其抗肿瘤作用的分子机制。方法:建立了多药耐药人胃癌MKN-45细胞的皮下移植瘤模型,随机分成0.9%氯化钠对照组、CPT-11治疗组、氧化苦参碱治疗组和CPT-11联合氧化苦参碱治疗组。每组裸鼠在胃癌组织移植7周后处死,并测算其肿瘤抑制率。采用末端脱氧核酸转移酶原位标记(TUNEL)和流式细胞仪法分析其凋亡指数。结果:CPT-11治疗组(10 mg.L^(-1)、20 mg.L^(-1))对多药耐药MKN-45细胞皮下移植瘤的抑制率显著增加,其凋亡率分别是(11.2±0.18)%和(12.2±1.65)%,两者比较无显著差异(P>0.05);氧化苦参碱联合CPT-11治疗组凋亡指数(AI)为(62.4±6.14)%,显著高于CPT-11治疗组和0.9%氯化钠时照组(1.27±0.11)%,(P<0.01)。结论:CPT-11可以增强氧化苦参碱对多药耐药细胞MKN-45的抑制作用,诱导裸鼠体内人胃癌细胞的凋亡;并能增强裸鼠体内胃癌对化疗的疗效和敏感性。 展开更多
关键词 CPT-11 胃癌 多药耐药细胞mkn-45 凋亡
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鱼藤素对胃癌细胞MKN-45增殖及凋亡的影响 被引量:1
9
作者 康文 郑晓 +1 位作者 王萍 郭善禹 《外科理论与实践》 2016年第6期502-507,共6页
目的:研究鱼藤素对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:利用CCK8检测不同浓度(0、1、10和25μmol/L)鱼藤素作用于胃癌细胞MKN-45 24、48、72和96 h后对其增殖的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;利用倒置相差显... 目的:研究鱼藤素对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:利用CCK8检测不同浓度(0、1、10和25μmol/L)鱼藤素作用于胃癌细胞MKN-45 24、48、72和96 h后对其增殖的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;利用倒置相差显微镜观察鱼藤素作用后细胞形态的变化;DAPI及Hoechst染色观察细胞核变化。结果:1μmol/L鱼藤素作用于MKN-45细胞24 h后抑制率为(28.82±0.002)%。随着鱼藤素浓度(10、25μmol/L)增加,作用时间(48、72、96 h)延长,其抑制作用增加,表明其抑制作用呈时间-剂量依赖关系。不同浓度(1、10和25μmol/L)鱼藤素作用于细胞48 h后,早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率显示鱼藤素显著促进细胞凋亡。细胞周期检测发现,与对照组比较,1μmol/L鱼藤素作用于细胞48 h后,S期细胞比例升高,G_0/G_1期及G_2/M期细胞比例下降;10μmol/L鱼藤素作用于细胞48 h后,G_2/M期细胞比例升高,G_0/G_1期细胞比例下降(P<0.01)。倒置相差显微镜检查镜下则显示,1、10和25μmol/L鱼藤素作用MKN-45细胞48 h后,可见典型凋亡样改变。DAPI及Hoechst染色可见鱼藤素组细胞核皱缩变小、染色质浓聚和典型的凋亡小体。结论:鱼藤素可明显抑制胃癌细胞的增殖、促进凋亡。机制可能与细胞周期阻滞于S期及G_2/M期有关。 展开更多
关键词 鱼藤素 胃癌 细胞增殖 细胞凋亡 mkn-45细胞株
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温热对胃癌MKN-45细胞凋亡及基因Bax表达的影响 被引量:1
10
作者 蒋莉萍 邱瑜 +1 位作者 肖凤 吴凤珍 《中国实验诊断学》 2013年第10期1761-1764,共4页
目的探讨温热对人胃癌细胞凋亡及基因Bax表达的影响。方法体外培养胃癌细胞MKN45并进行(43.0±0.1)℃温热疗法对癌细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测温热后MKN-45细胞Bax mRNA水平的表达变化。结果温热后MKN-45细胞随着处理时间延长凋亡... 目的探讨温热对人胃癌细胞凋亡及基因Bax表达的影响。方法体外培养胃癌细胞MKN45并进行(43.0±0.1)℃温热疗法对癌细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测温热后MKN-45细胞Bax mRNA水平的表达变化。结果温热后MKN-45细胞随着处理时间延长凋亡增加;RT-PCR结果显示,Bax mRNA的表达增加(P<0.05)。结论温热对胃癌MKN-45细胞具有明显的促凋亡作用,可能与其上调促凋亡基因Bax的表达有关。 展开更多
关键词 mkn-45细胞 胃癌 温热 细胞凋亡 BAX mRNA
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siRNA沉默PIM1基因表达对人胃癌MKN-45细胞增殖及凋亡的影响 被引量:1
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作者 王月颖 耿晢 傅思武 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第17期2927-2932,共6页
目的:探讨PIM1基因沉默对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计2条针对PIM1 mRNA靶序列的干扰RNA正义链和反义链及阴性对照序列,构建重组pSIREN-retroQ质粒载体,并转染胃癌MKN-45细胞。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检... 目的:探讨PIM1基因沉默对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计2条针对PIM1 mRNA靶序列的干扰RNA正义链和反义链及阴性对照序列,构建重组pSIREN-retroQ质粒载体,并转染胃癌MKN-45细胞。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测PIM1在mRNA水平及蛋白水平的表达。CCK-8法检测胃癌MKN-45细胞的增殖,流式细胞分析胃癌细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达。结果:重组克隆通过PCR扩增及测序,证明干扰序列插入正确。与正常对照组和阴性对照组相比,两个RNA干扰组胃癌MKN-45细胞PIM1在mRNA及蛋白水平的表达量都显著降低(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05)。此外,干扰组细胞凋亡明显增多(P<0.01),Caspase 3和Caspase9蛋白表达上调(P<0.01)。结论:PIM1 siRNA能有效下调靶基因表达,产生特异性基因沉默效应;PIM1基因沉默显著抑制胃癌MKN-45细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 胃癌mkn-45细胞 PIM1 SIRNA干扰 增殖 凋亡
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槐耳醇提物抑制人胃癌细胞MKN-45增殖的实验研究 被引量:5
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作者 黄挺 陈佳辉 +2 位作者 徐志远 吕航 程向东 《陕西中医药大学学报》 2017年第1期73-75,92,共4页
目的观察槐耳不同提取部位对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响,并筛选其有效部位。方法用系统溶剂法将槐耳提取为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水五个部位后,用CCK-8显色法,检测不同部位不同浓度的槐耳醇提取物对MKN-45增殖的作用。结果... 目的观察槐耳不同提取部位对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响,并筛选其有效部位。方法用系统溶剂法将槐耳提取为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水五个部位后,用CCK-8显色法,检测不同部位不同浓度的槐耳醇提取物对MKN-45增殖的作用。结果槐耳石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇部位为抗肿瘤有效部位,其中以正丁醇部位效果最佳,其对MKN-45细胞半数抑制率(IC50)为56.142μg·m L-1。结论槐耳醇提物能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖,其最有效部位为槐耳正丁醇部位。 展开更多
关键词 槐耳 提取物 人胃癌mkn-45 细胞增殖
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槐耳清膏抑制小鼠模型人胃癌MKN-45细胞生长和转移的实验研究 被引量:8
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作者 张袁骕 程向东 +4 位作者 徐志远 吕航 杜义安 汤加宁 罗华荣 《浙江中西医结合杂志》 2016年第3期219-222,I0004,共5页
目的研究槐耳清膏对人胃癌MKN-45细胞在裸鼠体内生长和转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用BALB/c裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞淋巴结转移模型,随机分为槐耳清膏组、空白对照组,每组20只。建模后,每5天测量裸鼠荷瘤并计算肿瘤相对体... 目的研究槐耳清膏对人胃癌MKN-45细胞在裸鼠体内生长和转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用BALB/c裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞淋巴结转移模型,随机分为槐耳清膏组、空白对照组,每组20只。建模后,每5天测量裸鼠荷瘤并计算肿瘤相对体积(RTV);用药5周后处死裸鼠,Real-time q PCR检测肿瘤组织Wnt、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin和VEGF表达水平。结果槐耳清膏组末次测得的足垫瘤RTV为(662.75±450.66)mm3,明显小于空白对照组的(1611.85±611.83)mm3(P<0.01)。槐耳清膏组淋巴结转移率8/20(40%)与对照组15/20(70%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。槐耳清膏组肿瘤组织Wnt、β-catenin、N-cadherin和VEGF的△CT值分别为(11.36±1.32)、(11.31±1.76)、(12.82±2.22)、(13.22±1.52),均高于对照组的(9.48±2.07)、(9.37±1.88)、(7.74±2.64)、(11.04±1.61),而E-cadherin的△CT值(8.26±2.39)低于对照组的(10.64±1.48)(P<0.05)。结论槐耳清膏可抑制人胃癌MKN-45细胞在裸鼠上的生长及转移,其机制可能与抗血管生成和阻碍上皮间质转化(EMT)过程有关。 展开更多
关键词 裸鼠 槐耳清膏 人胃癌mkn-45细胞 淋巴结转移 上皮间质转化
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干扰CTPS基因促进川楝素诱导的人胃癌MKN-45细胞凋亡 被引量:1
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作者 罗海静 潘阳 +4 位作者 陈雯 张伟伟 邵淑丽 杨清竹 李铁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1126-1133,共8页
目的探讨干扰CTPS基因对川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡的影响。方法通过生物信息学分析CTPS基因在人胃癌组织中的表达情况以及CTPS基因高表达的胃癌患者的总生存期。以人胃癌MKN-45细胞为实验材料,构建CTPS基因干扰载体,转染MKN-45细... 目的探讨干扰CTPS基因对川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡的影响。方法通过生物信息学分析CTPS基因在人胃癌组织中的表达情况以及CTPS基因高表达的胃癌患者的总生存期。以人胃癌MKN-45细胞为实验材料,构建CTPS基因干扰载体,转染MKN-45细胞48 h后,采用qRT-PCR和Western blot检测CTPS基因mRNA和蛋白表达情况。用80 nmol/L的川楝素处理干扰CTPS基因的MKN-45细胞48 h,使用MTT实验法检测细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察细胞形态,免疫荧光法检测γH2AX的表达。结果生物信息学分析发现CTPS在人胃癌组织中高表达,CTPS基因高表达的胃癌患者总生存期短。向MKN-45细胞中分别转染Sh-ctrl空载体和Sh-CTPS干扰载体,qRT-PCR和Western blot检测显示,与转染Sh-ctrl空载体相比,转染Sh-CTPS干扰载体的MKN-45细胞中CTPS mRNA和蛋白表达均降低,其中转染ShCTPS-3干扰效果最显著,分别降低了85.21%和53%(P<0.001)。检测细胞存活率及形态变化显示,与Sh-ctrl组相比,ShCTPS-3组细胞存活率降低(P<0.01),细胞皱缩,形态不规则,呈现凋亡特征,细胞凋亡率升高(P<0.05);在此基础上用80 nmol/L的川楝素处理转染Sh-ctrl和ShCTPS-3的MKN-45细胞48 h,与Sh-ctrl+川楝素组相比,ShCTPS-3+川楝素组细胞存活率降低(P<0.001),细胞出现凋亡小体,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论干扰CTPS基因促进川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡。 展开更多
关键词 CTPS基因 川楝素 胃癌 mkn-45细胞
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归芪白术方含药血清对胃癌MKN-45细胞增殖和IL-17、NF-κB表达的影响 被引量:9
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作者 苏韫 李春波 +3 位作者 龚红霞 薛轩 李婷婷 牛世伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1824-1829,共6页
目的:探讨归芪白术方含药血清通过IL-17/NF-κB信号通路对胃癌MKN-45细胞增殖的影响。方法:制备生药质量浓度6.12 g/ml的归芪白术方药液,将SD大鼠随机分为空白组(蒸馏水),阳性药组(奥沙利铂),归芪白术方高、中、低剂量组(6.12 g/ml、3.0... 目的:探讨归芪白术方含药血清通过IL-17/NF-κB信号通路对胃癌MKN-45细胞增殖的影响。方法:制备生药质量浓度6.12 g/ml的归芪白术方药液,将SD大鼠随机分为空白组(蒸馏水),阳性药组(奥沙利铂),归芪白术方高、中、低剂量组(6.12 g/ml、3.06 g/ml、1.53 g/ml),灌胃后制备归芪白术方含药血清,用10%含药血清干预MKN-45细胞,通过细胞增殖及细胞毒性实验(CCK-8)检测归芪白术方含药血清对MKN-45细胞增殖的影响;通过Western blot检测IL-17、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKK-β和IL-6蛋白的表达情况;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IL-17、NF-κBp65、IKK-β和IL-6 mRNA表达的情况。结果:CCK-8实验显示,与空白组比较,归芪白术方含药血清抑制MKN-45细胞增殖,且呈时间与剂量依赖性(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组比较,阳性药组和归芪白术方高、中、低剂量含药血清组IL-17、NF-κBp65、p-NF-κBp65、IKK-β和IL-6蛋白表达下降(P<0.05);Real-time PCR实验表明,与空白组比较,阳性药组和归芪白术方高、中、低剂量含药血清组IL-17、NF-κBp65、IKK-β和IL-6 mRNA表达减少(P<0.05)。结论:归芪白术方含药血清可以抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,可能与IL-17/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 归芪白术方 含药血清 胃癌mkn-45细胞 IL-17/NF-κB信号通路
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敲低膜联蛋白A5对人胃癌细胞系MKN-45增殖的作用 被引量:4
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作者 赵依纳 王小杰 +3 位作者 吴雪艳 代雅蕊 张佳璐 李欣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2018年第10期734-738,共5页
目的探讨膜联蛋白A5低表达对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响。方法将胃癌MKN-45细胞分为siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向膜联蛋白A5的siRNA和阴性对照siRNA脂质体转染法转染细胞,转染48 h后采用qRT-PCR... 目的探讨膜联蛋白A5低表达对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响。方法将胃癌MKN-45细胞分为siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向膜联蛋白A5的siRNA和阴性对照siRNA脂质体转染法转染细胞,转染48 h后采用qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平进行抑制效率的鉴定,空白对照组不予任何处理。应用MTT、平板克隆形成法检测膜联蛋白A5低表达对胃癌MKN-45细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot法检测增殖核抗原PCNA和周期相关蛋白CyclinD1的表达。结果靶向膜联蛋白A5的siRNA转染后,胃癌MKN-45细胞中膜联蛋白A5的表达较阴性对照和空白对照组明显降低(P<0.05)。MTT和克隆形成实验可见siRNA干扰组细胞增殖活力和集落形成能力较阴性对照和空白对照组显著增高(P<0.05);流式细胞术显示细胞凋亡率无明显改变;PCNA和Cyclin D1的表达显著上调。结论膜联蛋白A5低表达能促进胃癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 胃癌 膜联蛋白A5 mkn-45细胞 增殖 凋亡
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Molecular targeting therapy using bevacizumab for peritoneal metastasis from gastric cancer 被引量:12
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作者 Keishiro Aoyagi Kikuo Kouhuji +4 位作者 Motoshi Miyagi Junya Kizaki Taro Isobe Kousuke Hashimoto Kazuo Shirouzu 《World Journal of Critical Care Medicine》 2013年第4期48-55,共8页
AIM: To clarify the significance of vascular endothelial growth factor(VEGF) in peritoneal metastasis from gastric cancer, using the gastric cancer cell line MKN-45 compared with the high potential peritoneal dissemin... AIM: To clarify the significance of vascular endothelial growth factor(VEGF) in peritoneal metastasis from gastric cancer, using the gastric cancer cell line MKN-45 compared with the high potential peritoneal dissemination gastric cancer cell line MKN-45 P. METHODS: The supernatant of culture medium of MKN-45 cells or MKN-45 P cells was collected and the concentrations were measured of various cytokines, matrix metalloproteinases, growth factor and angiogenic factors, including VEGF. We performed an initial pilot study to explore whether bevacizumab, a humanized monoclonal antibody against VEGF, had any suppressive effect on the peritoneal dissemination from gastric cancer in an experimental nude mouse modelof peritoneal metastasis. RESULTS: The concentrations of interleukin-6(IL-6), IL-8, VEGF and matrix metalloproteinase-2 protein in the culture supernatant were each significantly higher than each of those for MKN-45. In the in vivo study, the volume of ascites and the mitotic index were significantly lower in the therapy group than in the nontherapy group. The survival curve of the therapy group was significantly higher than that of the non-therapy group. These results suggested that VEGF was correlated with peritoneal metastasis from gastric cancer. CONCLUSION: Findings suggested that bevacizumab for inhibiting VEGF could suppress peritoneal dissemination from gastric cancer. 展开更多
关键词 gastric cancer PERITONEAL metastasis VASCULAR ENDOTHELIAL growth factor mkn-45P BEVACIZUMAB
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泮托拉唑对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡的影响
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作者 王凤记 卢艳君 程相钦 《癌症进展》 2018年第2期171-174,共4页
目的探讨泮托拉唑对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡的影响及相关机制。方法采用0、10、20、40μg/ml的泮托拉唑处理MKN-45细胞48 h;MTT法检测细胞活力;Hoechst染色检测细胞形态;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(... 目的探讨泮托拉唑对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡的影响及相关机制。方法采用0、10、20、40μg/ml的泮托拉唑处理MKN-45细胞48 h;MTT法检测细胞活力;Hoechst染色检测细胞形态;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及Cyclin E表达。结果与0μg/ml比较,10、20、40μg/ml的泮托拉唑能明显降低MKN-45细胞活力(P﹤0.01),使细胞核发白,皱染,使细胞周期阻滞在G1期(P﹤0.01),下调Cyclin D1及Cyclin E的表达(P﹤0.01);与0μg/ml比较,20、40μg/ml的泮托拉唑能明显下调MKN-45细胞中Bcl-2的表达(P﹤0.01),上调Bax的表达(P﹤0.01)。结论泮托拉唑通过调控细胞周期蛋白及细胞凋亡相关蛋白表达抑制胃癌细胞MKN-45的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 泮托拉唑 胃癌细胞 mkn-45 增殖 凋亡
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白花蛇舌草对人胃癌细胞MNK-45线粒体膜电位及凋亡相关基因表达的影响 被引量:16
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作者 杜洋 邵淑丽 +3 位作者 焦凯贺 刘祥露 冯元 张伟伟 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期171-175,共5页
目的:探讨白花蛇舌草(注射液)对人胃癌细胞MNK-45线粒体膜电位及凋亡相关基因表达的影响。方法:将人胃癌细胞MNK-45分成4组,每组设置3个复孔,对照组为未加入白花蛇舌草的MNK-45细胞,3组实验组分别加入终浓度为20、30、40μg/ml白花蛇舌... 目的:探讨白花蛇舌草(注射液)对人胃癌细胞MNK-45线粒体膜电位及凋亡相关基因表达的影响。方法:将人胃癌细胞MNK-45分成4组,每组设置3个复孔,对照组为未加入白花蛇舌草的MNK-45细胞,3组实验组分别加入终浓度为20、30、40μg/ml白花蛇舌草的MNK-45细胞,各组在5%的CO2培养箱中孵育48 h后,利用激光共聚焦显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测线粒体膜电位,qRT-PCR检测Cytochrome C(Cyt c)、caspase3和caspase9基因的表达变化,Western blot检测Cytochrome C(Cyt c)、caspase3和caspase9蛋白的表达变化。结果:与对照组相比,终浓度为20、30、40μg/ml的各白花蛇舌草处理组,其MNK-45细胞的线粒体膜电位均明显降低(P<0.01),Cyt c、caspase3和caspase9的基因表达均明显上调(P<0.01)、蛋白表达也均显著升高(P<0.05或P<0.01),40μg/ml的白花蛇舌草处理组的表现最佳。结论:在终浓度为20~40μg/ml的范围内,白花蛇舌草能够降低人胃癌MNK-45细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡,并可上调Cyt c、caspase3和caspase9基因表达。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 线粒体膜电位 人胃癌MNK-45细胞 细胞色素C CASPASE3 CASPASE9
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HSV-TK/GCV系统在体外对胃癌MNK-45细胞株的增殖抑制作用研究
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作者 李娅 张赟 +3 位作者 刘红莉 皇海 苏明权 屈慧 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第2期19-23,65,共6页
目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统对胃癌MNK-45细胞增殖、侵袭和迁移的抑制效应。方法分别采用MTS试验、CCK8试验、Transwell试验、Western blot试验和RT-PCR方法检测HSV-TK/GCV系统对胃癌MNK-45细胞... 目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统对胃癌MNK-45细胞增殖、侵袭和迁移的抑制效应。方法分别采用MTS试验、CCK8试验、Transwell试验、Western blot试验和RT-PCR方法检测HSV-TK/GCV系统对胃癌MNK-45细胞在24,48,72和96h的增殖、侵袭和迁移的改变;对MNK-45细胞凋亡相关蛋白mRNA水平的变化。结果HSV-TK/GCV系统能够有效抑制胃癌MNK-45细胞的增殖效应,并能够减弱胃癌MNK-45细胞的侵袭和迁移能力,诱导MNK-45细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bax蛋白水平和mRNA的表达增加,抑制Bcl-2蛋白表达水平的降低,促进凋亡的发生。结论HSV-TK/GCV系统能够有效抑制胃癌MNK-45细胞增殖、侵袭和迁移,诱导MNK-45细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 胃癌 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷系统 MNK-45细胞 细胞增殖
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