微生物培养体系预处理在MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性病原菌的应用价值

目的分析微生物培养仪(HB&L)微生物培养体系预处理在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)快速鉴定血培养阳性样本病原菌的临床应用价值。方法收集2022年1月至2022年12月安阳市人民医院实验室常规方法鉴定的120份血培养报警后单一细菌感染的阳性样本,所有样本均接受HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理,将传统方法的鉴定结果作为“金标准”对照,运用MALDI-TOF MS鉴定。对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定的鉴定率;另外对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法在不同分值下MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定结果。结果HB&L微生物培养体系预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为116例,鉴定率为96.67%;分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为92例,鉴定率为76.67%,两种预处理方法鉴定率对比差异有统计学意义(P<0.05);在3.000~2.300分值下HB&L微生物培养体系MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定率均高于分离胶促凝管法,差异有统计学意义(P<0.05);在2.299~2.000、1.999~1.700、<1.700分值下两种预处理方法菌属鉴定率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论HB&L微生物培养体系是MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性样本病原菌优质的预处理方法,可大幅提升鉴定率,值得应用。

不同血液分离结果的多发性骨髓瘤患者临床特征及预后分析

目的:研究分离胶真空采血管离心后2种不同血液分离结果的多发性骨髓瘤(MM)患者的临床特征,并比较2种分离结果对MM患者预后的价值。方法:回顾性分析本院2009年3月至2017年12月收治的168例初诊MM患者的临床资料,并根据分离胶真空采血管离心后血液分离结果将血液样本分为对照组(自上而下依次为血清、胶体、红细胞)和异常组(自上而下依次为血清、红细胞、胶体、红细胞),比较2组患者的年龄、性别、生化指标(总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血钙、乳酸脱氢酶、肌酐)、血常规指标(血红蛋白、血小板)以及免疫分型和临床分期等临床数据的差异;分析血液分离结果与疗效的关系,并比较2组患者总生存期(OS)的差异。结果:对照组和异常组的总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血红蛋白、免疫分型、临床分期差异明显(P<0.05),而性别、年龄、血钙、乳酸脱氢酶、肌酐、血小板在2组间无明显差异(P>0.05)。异常组治疗后获得完全缓解(CR)和非常好的部分缓解(VGPR)的患者血液分离结果转为正常,部分缓解(PR)的患者血液分离结果部分转为正常、部分未发生变化,而获得PR疗效以下的患者血液分离结果没有变化,对照组患者治疗后获得PR疗效以下的患者血液分离结果部分转为异常;正常血液分离结果患者具有较好的OS,而异常血液分离结果患者的OS明显缩短。结论:MM患者血液离心后存在异常分离现象;异常分离现象与总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β2微球蛋白、血红蛋白、免疫分型及临床分期有关。这提示,异常分离存在更高的肿瘤负荷;正常血液分离结果提示预后较好,而异常血液分离结果提示预后不良。

不同采血管、标本处理过程以及存放时间对NSE检测结果的影响

目的探究不同采血管、标本处理过程以及存放时间对神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测结果的影响。方法随机选取广东省中医院50例住院患者,空腹采静脉血,每份血液标本同时分装于2个试管,试管1为无添加剂干燥管(红管),试管2为促凝剂分离胶管(黄管),用罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪测定两管血清NSE水平。每管标本共测定3次,测定时间分别为标本采集后1、24、48h。其中1h和24h之间,标本经历了4℃保存24h、标本稍混匀和再离心的处理过程;24h和48h之间,标本只经历了4℃保存24h,随后直接上机检测NSE。结果红黄两管血清NSE水平在1h时结果,差异无统计学意义(P>0.05);红管在24h时结果的均差值及阳性率显著高于1h结果的均差值及阳性率,且差异有统计学意义(P<0.05);红管的48h结果的均差值及阳性率与24h相比,差异无统计学差异(P>0.05)。黄管标本的3次(1、24、48h)NSE测定结果的均差值及阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论促凝剂分离胶管(黄管)对NSE血清测定结果的稳定性优于无添加剂干燥管(红管)。

真空采血管内添加物对常见生化项目测定结果的影响

目的评估真空采血管内添加物对常见生化项目测定结果的影响。方法用含不同添加物的6种真空采血管分别采集20位志愿者的静脉血液。测定血清或血浆中常见的21个生化项目。以只含促凝剂的血清管为对照,比较其余5种采血管获得的血清或血浆测定结果与对照管的差异是否有统计学意义。结果与血清管比较,分离胶管21个项目测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。肝素管除AST、TC、TG、HDL-C、Cl外,其余项目测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。EDTA管除GGT、Cre、Glu外,其余项目测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。枸橼酸钠管所有项目测定结果差异均有统计学意义(P<0.05)。氟化钠管除Glu外,其余项目测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论分离胶管和血清管适用于临床常见生化项目的测定,肝素管适于多数生化项目,氟化钠管仅限于血糖的测定,EDTA管和枸橼酸钠管不适用于生化项目的测定。

真空采血管致生化指标异常的原因

目的探讨使用真空采血管所致生化指标异常的原因,提出改进措施。方法利用5种真空采血管分别采集10例健康志愿者空腹血清,在日立7600全自动生化分析仪上检测28项生化指标。同时留取每例志愿者全血500μL,分别加EDTAK2抗凝血2μL、5μL、10μL、20μL、50μL,观察不同剂量的EDTAK2抗凝血对血清钾(K+)、钙(Ca2+)、镁(Mg2+)等离子浓度的影响。结果采用血凝管与分离胶试管相比11项生化指标存在统计学差异(P<0.01)。使用夹层凝血管或血常规管(EDTAK2)将导致部分生化结果异常。结论临床护士应正确选择真空采血管,真空采血管的错误选择以及不恰当的采血顺序均会导致生化结果异常。

血液葡萄糖在分离胶血液真空采集管中的稳定性观察

目的观察用分离胶血液真空采集管采集的血糖标本,按其浓度与放置时间的不同进行分组,观察血糖浓度的变化情况,以评价血液葡萄糖在分离胶血液真空采血管中的变化趋势。方法(1)以葡萄糖氧化酶法对用美国BD公司的SSTⅡ惰性分离胶真实采血管采样的66例血糖标本、实验组按血糖浓度分为小于8mmol/L、8～11mmol/L之间、大于11mmol/L三组,并按采血后1、2、4和6小时分为四组并测定各组血糖浓度。(2)以同样的分离胶管采集血液标本31例,先作取血后的首次血糖测定,然后按采血后72小时再测定其血糖浓度。测定数据分别作方差分析,以观察其变化情况。结果以分离胶真空采血管采样、保存的血液标本中的葡萄糖浓度在6小时内的变化不明显,72小时内的血糖浓度变化也不大,表明3天内血液葡萄糖在分离胶真空采血管中的稳定性良好。结论分离胶血液真空采血管可在72小时内用于对血液葡萄糖的分离保存。

分离胶促凝管对10项生化检测项目影响的比对研究

目的通过与无抗凝管做比对,观察分离胶促凝管对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总蛋白(TP)等10项生化检测项目的影响,判断两种管在10项生化检测项目上是否实质等同。方法按照美国临床和实验室标准协会的EP9-A2文件要求,以无抗凝管为参比方法(X),以分离胶促凝管为待比方法(Y),用随机抽取的血清样本对上述10项生化项目分别进行检测,计算相关系数及直线回归方程,以CLIA′88规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的偏差临床是否可以接受性。结果在所检测的项目中,两种管子检测结果的偏差均在临床可接受范围内。结论在ALT等10项生化检测项目上,分离胶促凝管和无抗凝管可以实质等同。

用分离胶真空采血管保存血清对ALT测定结果的影响

观察用分离胶真空采血管保存血清对谷丙转氨酶(ALT)测定结果的影响。采集静脉血,分别置于两管分离胶真空采血管中,分离血清,立即测定ALT后,用原管保存血清,一管放室温,一管放4℃冰箱保存,连续4天测定两管血清ALT,对两组下降率进行比较。表明第2、3、4、5天测定结果表明,分离真空胶采血管室温保存血清ALT明显下降,下降率平均为16.2%、32.2%、47.0%、57.6%;将第1天和第2、3、4、5天的结果进行配对t检验.结果有显著性差异(P<0.05);同时测定4℃冰箱保存血清AST,平均每天下降率为6.9%、7.7%、10.2%、12.2%,下降率无显著性差异。这表明这种分离胶真空采血管室温保存血清,不能用于第2天以后检查及复查ALT。

含添加剂真空采血管对生化结果的影响分析

目的观察两种含添加剂的真空采血管和普通真空采血管对临床生化分析结果的差异,评价其在临床生化检验中的应用价值。方法采集同一供血者肘前正中静脉血,分别置于普通真空采血管(无任何添加剂)、含促凝剂的真空采血管和含分离胶的真空采血管中,采用日立7180生化分析仪在2 h内进行30项常规生化项目测定,并对结果进行比较分析。结果含促凝剂的真空采血管血清钾、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶与普通真空采血管比较差异有统计学意义(P<0.05);含分离胶的真空采血管白蛋白与普通真空采血管比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论含添加剂的真空采血管对于某些生化项目结果有影响,使用前应对真空采血管进行评估,采用影响较小的真空采血管,以保证实验结果的准确性。

惰性分离胶管采集保存样品对血糖结果的影响

目的:观察用惰性分离胶管采集保存样品对血糖结果的影响。方法:选择糖尿病及非糖尿病患者共80例,采用惰性分离胶真空管采集血标本,离心后吸取部分样品另行分装并做血糖的即时测定,放置24小时后再测定原始管与分装管的血糖结果。结果:即时测定与放置24小时的分装管和原始管之间的血糖结果差异无显著性(P>0.05)。结论:惰性分离胶试管可防止糖酵解,血糖测定时可在离心后用原始管保存待测样品。

制膜塑料分离胶促凝管对8项肿瘤标志物检测的影响

目的观察制膜塑料分离胶促凝管对8项肿瘤标志物检测值的影响。方法通过电化学发光免疫分析仪,对阳普制膜分离胶促凝管采集的血清标本进行CA125、CA153、CEA、CA199、CA72-4、AFP、CyFra21-1、NSE8项肿瘤标志物检测分析,以无抗凝管做对照。结果制膜分离胶促凝管与无抗凝管对比,制膜分离胶促凝管对8项肿瘤标志物的检测结果差异无统计学意义(P>0.05);阳普采血管正常值和异常值的相关系数也都在0.95以上,说明阳普分离胶促凝管和无抗凝管具有实质等同性。结论制膜塑料分离胶促凝管对8项肿瘤标志物检测值的影响不显著。

多发性骨髓瘤患者血液异常分离结果的临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血液异常分离结果的临床意义。方法选择河北省沧州中西医结合医院2008年3月—2019年10月收治的282例MM患者(IgG型152例、IgA型92例、IgD型6例、轻链型32例)以及同期200例自身免疫性疾病患者和200名健康体检者为研究对象。采用分离胶真空采血管采集空腹静脉血,离心后观察血液分离结果。根据血液分离结果将其分为对照组和异常组,比较两组检验免疫球蛋白(Ig)、总蛋白(TP)、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(Fig)水平的差异。结果自身免疫病患者、健康体检者及部分MM患者血液分离正常,分3层,自上而下依次为:血清、分离胶、红细胞,血清和红细胞比例适当;血液分离异常者均为MM患者,异常血液分离为4层,自上而下依次为:血清、红细胞、分离胶、红细胞,上层有少量血清,其下红细胞增多,底层有少量红细胞。282例MM患者中血液异常分离有46例(16.31%)。异常分离现象仅见于IgG型(28例)和IgA型(18例),所占比例分别为60.87%和29.13%。异常组TP、Ig水平高于对照组,Hb、Hct水平低于对照组(均P<0.05)。结论MM患者分离胶真空采血管可能存在血液分离异常现象。日常工作中遇到血液分离异常现象时,应及时与临床医师沟通并进一步进行确诊试验。

离心温度对惰性分离胶真空促凝管的影响

目的观察离心温度对惰性分离胶促凝管分离血清的影响。方法分别使用普通离心机和低温离心机对惰性分离胶促凝管进行离心分离血清,观察两种离心方式分离管中血清出现油珠的比率,并应用追溯性方法观察两种离心方式对仪器的影响及对一些生化项目结果的影响。结果室温应用普通离心机分离的惰性分离胶促凝管血清清晰,但有15%～20%的样品中出现了大小不一的油性小珠,而用低温离心机离心的试管分离出的血清,未发现油性小珠。仪器在受到分离胶干扰时及排除干扰后血清部分生化结果的对比,显示总蛋白、白蛋白受到的影响较大。结论离心温度对惰性分离胶促凝管分离血清有显著的影响,温度超过分离胶管要求的贮存温度时,惰性分离胶将溶解在血清中,不但对生化仪样品针及反应杯产生堵塞及污染,而且将对一些生化测定结果产生比较大的影响。

4种真空采血管对生化检测项目结果影响的评估

目的:利用肝素锂分离胶试管采集临床血液标本,克服常规生化试管,如分离胶促凝试管血液凝固不完全,肝素锂抗凝试管葡萄糖(GLU)降解,钾离子(K+)从红细胞释放等不利于标本保存的缺点。比较4种真空采血管对生化检测项目结果的影响。方法:分别利用无添加剂真空试管、分离胶促凝试管、肝素锂抗凝试管和肝素锂分离胶试管收集100名志愿者早晨空腹静脉血液,1 hr内采用西门子自动生化仪进行常规17项生化指标检测。检测完毕将标本4℃保存6 hr,12 hr,24 hr,48 hr和72 hr后测定GLU、K^+和乳酸脱氢酶(LDH)。结果:1 hr内四种采血管的17项生化检验项目的结果比较,除总蛋白(TP)和K+之外无显著差异(P>0.05)。24 hr肝素锂分离胶管GLU和K^+与其1 hr测得结果无显著差异。肝素锂抗凝管和无添加剂真空管结果发生明显变化。48 hr后肝素锂分离胶管GLU和K^+值与其1 hr结果发生变化,但变化幅度小于肝素锂抗凝管和无添加剂真空管。LDH 24 hr后除分离胶促凝管外其余三种均发生变化。结论:肝素锂分离胶试管在保存GLU和K^+标本方面比肝素锂抗凝管和无添加剂真空试管具有优势,但与分离胶促凝试管相比仍有不足。但在一定范围内可克服分离胶促凝试管存在的因红细胞凝集而导致的一些问题,可以在临床急诊检测中酌情使用。

两种品牌的分离胶促凝管对甲状腺功能五项检测值影响的比对研究

目的探索两种品牌的分离胶促凝管对甲状腺功能五项(T3、T4、FT3、FT4、TSH)检测值的影响。方法用Centaur发光分析仪对两种品牌的分离胶促凝管采集的标本进行甲状腺功能五项的检测,以空白管做对照。结果两种品牌的分离胶促凝管对甲状腺功能五项的检测值差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种品牌的分离胶促凝管在甲状腺功能五项的检测结果上,差异无统计学意义,可以认为二者实质等同。

分离胶促凝管和氟化钠抗凝管对血液葡萄糖检测稳定性的影响

目的比较分离胶促凝管、氟化钠抗凝管在不同的保存方法和保存时间下测定血液葡萄糖值的变化。方法对100例门诊患者采取早晨空腹静脉血,所用试管为分离胶促凝管、氟化钠抗凝管,10min内离心,分离血清和血细胞,分别对当天即时结果与放置不同时间下加盖和未加盖的分离胶促凝管和氟化钠抗凝管在2~8℃冰箱中保存的血液葡萄糖值以及把即时的血清吸到eppendorf管中保存在2~8℃冰箱中保存不同时间下进行比较。结果分离胶促凝管即时血糖值结果与加盖放置6 h,12 h,24 h,48 h,72 h的结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),与96 h,120 h,144 h至1周的血糖值结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);分离胶促凝管即时结果与未加盖2~8℃放置6 h,12 h,24 h的结果差异无统计学意义(P>0.05),而放置48 h,72 h,96 h,120 h,144 h至1周的血糖值均较即时的结果偏高,差异有统计学意义(P<0.05);将血清标本吸到eppendorf管中放置6 h,12 h,24 h,48 h,72 h,96 h,120 h,144 h所测得的血糖值与即时血糖值比较,差异均无统计学意义(P>0.05),放置至1周结果与即时的差异有统计学意义(P<0.05);氟化钠抗凝管即时结果与加盖放置各时间段结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论分离胶促凝管具有很好的分离血细胞和血清的作用,标本放置72 h血糖值与即时血糖值差异不明显,但前提是要即时离心及冷藏加盖保存。

无添加剂管、普通促凝管、分离胶促凝管在临床生化检验中对比分析

目的观察无添加剂管、普通促凝管、分离胶促凝管对多项临床化学检验结果的影响,分析它们在临床检验中所能发挥的作用。方法随机选取20例受检人员抽血检验,将无添加剂管、普通促凝管和分离胶促凝管3种真空采血管的血清进行常规的临床生化项目检验,并分析血清的生化指标。结果无添加剂管的血液凝固需时间30~45 min,促凝管需5~10 min,分离胶促凝管需30~45 min。分离胶促凝管的HBDH为（118.4±7.5）U/L,CK-MB为（36.3±3.7）U/L,LDH为（191.2±19.9）U/L,与无添加剂管及普通抗凝管的差异明显（P〈0.05）,其他多数的项目差异无统计学意义。结论各临床生化室可根据自身条件及所检测生化指标不同,选择合适于临床的采血管。

血清分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系预处理在MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性样本病原菌的方法研究

目的评价血清分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系两种MALDI-TOF-MS预处理方法的鉴定率,为临床快速准确鉴定血流感染病原菌提供新思路。方法收集2020年1—12月北京解放军总医院第六医学中心实验室常规方法鉴定的149份血培养报警后单一细菌感染的阳性样本,分别采用分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系预处理后,并且以传统方法结果为标准,直接MALDI-TOF MS细菌鉴定,比较两种方法的鉴定率。结果在149份血培养阳性样本中,革兰阴性(G^(-))菌占47.0%(70/149)、革兰阳性(G^(+))菌占53.0%(79/149)。对G^(-)菌种水平鉴定率,血清分离胶促凝管法为78.6%(55/70),HB&L微生物培养体系为91.4%(64/70),差异有统计学意义(P=0.033);对G^(+)菌种水平鉴定率,二者分别为73.4%(58/79)和87.3%(69/79),差异有统计学意义(P=0.028)。在3.000~2.300分值段,G^(-)菌鉴定率血清分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系分别为22.9%(16/70)和38.6%(27/70),差异有统计学意义(P=0.044);G^(+)菌鉴定率两种方法分别为19.0%(15/79)和34.2%(27/79),差异有统计学意义(P=0.031)。结论HB&L微生物培养体系种水平鉴定率要高于血清分离胶促凝管法,经过预处理直接MALDI-TOF MS鉴定血培养阳性样本病原菌有一定临床应用价值。

分离胶采血管对部分临床生化检验测定结果的影响

目的观察用肝素锂分离胶真空采血管分离血浆对部分临床生化检验项目测定结果的影响。方法采集同一供血者的空腹肘前正中静脉血,一针三管,分别置于无任何添加剂的干燥真空采血管、肝素钠抗凝的真空采血管和肝素锂分离胶真空采血管中,分离血清和血浆,2h内在全自动生化分析仪上测定部分临床生化检验项目,对3组测定结果进行分析比较。结果白蛋白(ALB)测定值,肝素锂分离胶管低于血清管(P=0.016<0.05);血糖(GLU)测定值,肝素锂分离胶管高于血清管(P=0.020<0.05),其余指标3组间差异均无统计学意义(P(0.05)。结论肝素锂分离胶真空采血管分离血浆可能会使ALB的测定值略偏低,而使GLU的测定值略偏高,但对TP、T-BIL、D-BIL、GGT、UA、URE-A、HDL、LDL、CHO无明显影响。

分离胶法与十二烷基硫酸钠法在血培养阳性瓶基质辅助激光解析电离飞行时间质谱病原菌直接鉴定中的应用

目的评估分离胶促凝管法和十二烷基硫酸钠(SDS)法两种阳性血培养瓶前处理方法联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴定病原菌的临床应用。方法收集2016年11月至2017年5月首都医科大学宣武医院微生物室阳性血培养需氧瓶120例和厌氧瓶80例(经革兰染色镜检确认为单一菌),利用分离胶促凝管和0.5%SDS前处理后与转种纯培养菌落MALDITOFMS鉴定比较,评价两种方法的鉴定准确率。结果分离胶法和SDS法质谱鉴定与培养鉴定的符合率为86.0%和87.0%;分离胶法鉴定需氧瓶和厌氧瓶中病原菌的准确率为86.7%和85.0%,SDS法为85.0%和90.0%,两者鉴定需氧瓶中病原菌的鉴定率差异无统计学意义,SDS法鉴定厌氧瓶中细菌的准确率显著高于分离胶法(χ~2=11.13、P<0.05);分离胶法和SDS法对革兰阴性杆菌的鉴定准确率(94.3%和94.3%)显著高于革兰阳性球菌(80.6%和83.3%)和真菌(50.0%和63.6%),差异均有统计学意义(χ~2=24.7、40.3、15.1,P均<0.01);分离胶法和SDS法鉴定革兰阴性菌和阳性菌的准确率差异无统计学意义,而SDS法鉴定真菌和厌氧菌的准确率显著高于分离胶法(χ~2=11.05、P <0.01,χ~2=14.05、P <0.05);分离胶法和SDS法鉴定分值> 2.0分者分别占37.5%和45.0%(χ~2=20.48、P <0.05),1.6~2.0分者分别占33.0%和25.0%(χ~2=11.14、P <0.05),差异均具有统计学意义;而<1.6分者分别占15.5%和17.0%,差异无统计学意义(χ~2=5.9、P> 0.05)。结论分离胶法和SDS法均可快速直接鉴定阳性血培养瓶中常见病原菌,显著缩短鉴定时间,在真菌和厌氧菌鉴定时以SDS法前处理MS鉴定效果较好。