注射用单磷酸阿糖腺苷细菌内毒素检查方法研究

目的:建立注射用单磷酸阿糖腺苷的细菌内毒素检测方法并进行方法学验证,以期对该品种的质量控制标准进行统一规范。方法:按照《中国药典》2020年版四部通则1143“细菌内毒素检查法”,确定细菌内毒素的限值,进行干扰试验,并进行内毒素检查。结果:按经验拟定的限值标准(每1mg单磷酸阿糖腺苷中含内毒素的量应小于0.06EU)对15个厂家提供的25个批次的供试品进行细菌内毒素检查,结果均符合规定。结论:本文建立的细菌内毒素检查法检查,可用于注射用单磷酸阿糖腺苷的质量控制。

氟维司群注射液前处理及细菌内毒素检查方法研究

目的建立氟维司群注射液细菌内毒素的检查方法。方法取样品0.5 mL,加细菌内毒素检查用水(BET用水)5 mL,2000 r/min振荡5 min后,3000 r/min离心5 min,取水相,用BET用水稀释至所需倍数系列溶液。按2020年版《中国药典(四部)》通则1143细菌内毒素检查法,分别采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法检测样品中的内毒素,考察水萃取液(水相溶液)的干扰及内毒素回收比。结果水相溶液稀释至2倍及以上时对鲎试剂均无干扰;外加20 EU/mL内毒素时回收比均在50%~200%范围内。结论氟维司群注射液经水萃取后,采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法进行细菌内毒素检查均可行。

双价人乳头瘤病毒疫苗(毕赤酵母)细菌内毒素检查方法的建立

目的建立双价人乳头瘤病毒疫苗(毕赤酵母)的细菌内毒素检查方法。方法按《中国药典》2020年版三部通则1143细菌内毒素检查法及四部指导原则9251“细菌内毒素检查法应用指导原则”中的相关规定进行凝胶法、光度法(动态浊度法和动态显色法)测定细菌内毒素方法学研究。结果双价人乳头瘤病毒疫苗(毕赤酵母)经40倍及以上稀释,对凝胶法反应无干扰,同时动态浊度法及动态显色法回收率也可达到要求。结论建立双价人乳头瘤病毒疫苗(毕赤酵母)的凝胶法、动态浊度法及动态显色法进行细菌内毒素检查可行。

唑来膦酸细菌内毒素质量控制及rFC方法学研究

目的:统一唑来膦酸注射液细菌内毒素检测标准,并建立重组C因子(rFC)检测方法。方法:用凝胶法(BET)对13批次国家监督抽验唑来膦酸注射液进行检测;用2个厂家rFC试剂盒,对3个厂家不同浓度(500、100、50、25μg·mL-1)的唑来膦酸注射液测进行干扰试验。结果:规格100 mL:5 mg的,按1 mL<0.50 EU进行检测,其他规格的按1 mg<5.0 EU进行检测,结果均符合规定。25μg·mL^(-1)两个厂家rFC试剂盒回收率均在50%~200%之间。rFc法验证:对8批次唑来膦酸注射液,按25μg·mL^(-1)进行验证,对5批次唑来膦酸注射(100 mL:5 mg),按0.5 EU·mL^(-1)进行验证,回收率均在50%~200%之间。结论:唑来膦酸注射液的细菌内毒素检查法可拟定为:取本品,依法检查(通则1143),每1 mL中含内毒素的量应小于0.50 EU(100 mL及以上规格大输液);取本品,依法检查(通则1143),每1 mg唑来膦酸中含内毒素的量应小于10.0 EU。细菌内毒素重组C因子试剂盒检测方法:取本品,用细菌内毒素检查用水稀释为每1 mL含唑来膦酸25μg、或1倍稀释(规格100 mL:5.0 mg大输液),按试剂盒的说明书进行检测,回收率应在50%~200%之间。

氢氧化铝佐剂细菌内毒素凝胶法检测方法验证

目的:建立氢氧化铝佐剂的鲎试剂凝胶法检测方法。方法:按《中国药典》2020版通则1143细菌内毒素检查法,采用3种缓冲液、钙镁离子添加剂正交设计进行干扰预试验;2个厂家的鲎试剂对不同批号氢氧化铝佐剂进行干扰试验、样品处理的有效性验证。结果:通过干扰预试验,筛选到排除干扰条件。在验证条件下,氢氧化铝佐剂以PBS缓冲液、钙镁离子添加剂排除干扰,对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论:建立的凝胶法检测方法用于检查氢氧化铝佐剂的细菌内毒素可行。

丹红注射液凝胶法和动态浊度法细菌内毒素检查

目的应用凝胶法和动态浊度法检查丹红注射液中的细菌内毒素含量。方法按《中国药典》2010年版方法,确定丹红注射液细菌内毒素限值,分别进行凝胶法和动态浊度法细菌内毒素检查的干扰试验。结果凝胶法结果表明,本品稀释40倍后对试验无干扰作用;动态浊度法结果表明,本品在稀释40倍时外加内毒素回收率在50%～200%之间。结论凝胶法和动态浊度法可用于丹红注射液中的细菌内毒素检查。

细菌内毒素检测法用于蔗糖铁注射液检测的可行性研究

目的:建立蔗糖铁注射液的细菌内毒素检查方法。方法:采用细菌内毒素凝胶法,用不同厂家的鲎试剂对提供的蔗糖铁注射液连续3批样品进行了干扰试验。结果:蔗糖铁注射液稀释至0.5mg·mL-1,用灵敏度分别为0.25EU·mL-1和0.125 EU·mL-1的鲎试剂检测细菌内毒素,无干扰因素影响。结论:蔗糖铁注射液细菌内毒素限值确定为1.5 EU·mg-1,可应用鲎试剂进行细菌内毒素法检查。

盐酸克林霉素注射液细菌内毒素检查法的改进

按《中国药典》2015年版四部进行盐酸克林霉素注射液细菌内毒检查,发现盐酸克林霉素注射液对细菌内毒素与鲎试剂反应存在抑制干扰作用.用稀释剂Ⅰ代替BET水进行样品的稀释,干扰试验结果表明,样品在15倍以上稀释质量浓度时可排除干扰.对3批盐酸克林霉素注射液进行检查,结果均符合规定.所建立的细菌内毒素检查法可用于盐酸克林霉素注射液的细菌内毒素检查.

注射用复方甘草酸苷细菌内毒素检查方法的研究

目的研究注射用复方甘草酸苷对细菌内毒素检查试验的干扰情况,建立其细菌内毒素限量检查的方法。方法采用细菌内毒素凝胶法,用不同厂家的鲎试剂对3批注射用复方甘草酸苷进行干扰试验。结果注射用盐酸赖氨酸最大非干扰浓度为0.25mg/ml。结论注射用复方甘草酸苷细菌内毒素限值确定为1.5EU/mg,可应用鲎试剂进行细菌内毒素检查。

添加表面活性剂检测西罗莫司原料药细菌内毒素的含量

目的:采用添加表面活性剂建立难溶性西罗莫司原料药细菌内毒素的检测方法。方法:以0.1%(W/V)聚山梨酯-80溶解西罗莫司原料药,用细菌内毒素检查用水(BET水)稀释后进行凝胶法细菌内毒素检查的方法学研究。结果:西罗莫司原料药用0.1%(W/V)聚山梨酯-80溶解并用BET水稀释至0.4 mg·mL^(-1)浓度及以下时对鲎试剂凝集反应无干扰作用。结论:通过添加聚山梨酯-80的凝胶法可检测西罗莫司原料药细菌内毒素的含量,操作简便。

冠心宁注射液中细菌内毒素含量的微量动态显色法定量检测研究

目的:探讨微量动态显色法用于冠心宁注射液类复方中药制剂中细菌内毒素定量检测的可行性。方法:应用微量动态显色法对冠心宁注射液中细菌内毒素进行定量检测,并与家兔热原法及凝胶法试验结果进行比较。结果:应用微量动态显色法试剂对冠心宁注射液稀释80倍及以下浓度时,微量动态显色法鲎试剂与细菌内毒素凝集反应无干扰作用,回收率50%~200%,该检测结果与凝胶法一致,家兔法检查热原均符合规定。结论:微量动态显色法可用于冠心宁注射液细菌内毒素定量检测,结果准确,灵敏度高,过程可监控。

高浓度维生素B6注射液细菌内毒素检查方法学验证

目的建立高浓度维生素B6注射液的细菌内毒素检查方法。方法采用《中国药典》2015年版四部通则1143细菌内毒素检查法进行检测。结果用pH6.5~7.5的缓冲液将高浓度维生素B6注射液稀释至1.04 mg/ml,用λ为0.06 EU/ml的鲎试剂可以有效去除干扰。结论该方法可行,可用于高浓度维生素B6注射液的细菌内毒素检查。细菌内毒素的限值确定为0.06 EU/mg。

凝胶法和动态浊度法检测注射用重组人睫状神经营养因子中细菌内毒素含量

目的采用凝胶法和动态浊度法检测注射用重组人睫状神经营养因子(CNTF)中细菌内毒素含量,控制制品质量,消除临床热原反应的发生。方法供试品参照《中华人民共和国药典》(2010年版)三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法和动态浊度法要求进行检查。结果注射用重组人睫状神经营养因子溶液在100μg/mL质量浓度下,确定内毒素限值为10 EU/mL。凝胶法和动态浊度法检查后,注射用重组人睫状神经营养因子内毒素含量均符合规定。结论凝胶法和动态浊度法可用于注射用重组人睫状神经营养因子的细菌内毒素检查。

注射用硫酸头孢匹罗细菌内毒素检查的方法学研究

参照2002年版《中国药典(二部)》细菌内毒素检查法及应用指导原则,建立用凝胶法检测注射用硫酸头孢匹罗细菌内毒素的方法。采用灵敏度为0．125 EU／mL的鲎试剂,将样品浓度稀释为1．25 mg／mL,即可消除样品对鲎试剂与内毒素凝集反应的干扰。

注射用顺铂细菌内毒素检查法的建立

目的 :建立注射用顺铂的细菌内毒素检查法。方法 :参照中国药典 2 0 0 0年版检测细菌内毒素的凝胶法。结果 :以氯化钠注射液溶解的注射用顺铂经细菌内毒素检查用水稀释 4倍后对鲎试剂无干扰作用。结论 :用灵敏度为 0 .5Eu/ml的鲎试剂检测注射用顺铂的细菌内毒素是可行的 。

注射用头孢哌酮钠细菌内毒素检查法的应用研究

目的:探讨注射用头孢呱酮钠细菌内毒素的检查法。方法:同时采用凝胶法和终点显色基质法。结果:当样品浓度大于2.5mg/ml时,对两法均显示不同程度的抑制作用,当样品浓度小等于2.5mg/ml时,对两法均无干扰。结论:在注射用头孢哌酮钠细菌内毒素的检查中,最佳浓度≤2.5mg/ml,而采用终点显色基质法能定量测定内毒素的含量。

葛根素注射液细菌内毒素的测定

目的:研究葛根素注射液进行细菌内毒素检查的干扰情况,建立其细菌内毒素的定性和定量分析法。方法:采用2005年版中国药典凝胶法和动态浊度法检测供试品中的细菌内毒素。结果:供试品稀释50倍(凝胶法)和200倍(动态浊度法)后对细菌内毒素的检查无干扰作用。结论:用凝胶法和动态浊度法测定葛根素注射液中细菌内毒素的含量是可行的。

动态浊度法和凝胶法检测甘露醇注射液中细菌内毒素的含量

目的:采用动态浊度法和凝胶法检测甘露醇注射液中细菌内毒素的含量,以控制药品质量,减少临床热原反应的发生。方法:按《中华人民共和国药典》2000年版附录中细菌内毒素检测法及其指导原则的规定,系统考察甘露醇注射液对鲎试剂与细菌内毒素凝集反应的干扰,确定采用动态浊度法和凝胶法检测细菌内毒素的不干扰浓度。结果:甘露醇注射液经4倍稀释后可应用动态浊度法定量检测。凝胶法最佳检测条件为供试品1:8稀释,鲎试剂灵敏度(λ)=0.06 EU·mL-1;供试品(冷藏)1:4稀释,鲎试剂灵敏度(λ)=0.125 EU·mL-1。结论:应用动态浊度法定量检测甘露醇注射液细菌内毒素含量,结果准确;凝胶法可用于日常检测。以上两法均可替代家兔法用于甘露醇注射液的热原检查。

动态浊度法检测三种自制注射液中的细菌内毒素

目的:通过考察含糖平衡盐、替硝唑葡萄糖和氧氟沙星葡萄糖注射液对鲎试剂的干扰作用。探讨以细菌内毒素检查法中的凝胶法取代热原检查法检查含糖平衡盐等3种自制注射液细菌内毒素限值的可行性。方法:采用动态浊度法,用EDS-99细菌内毒素测定仪对含糖平衡盐、替硝唑葡萄糖和氧氟沙星葡萄糖注射液进行干扰试验并用凝胶法进行验证。结果:用两个厂家生产的鲎试剂以动态浊度法检测3个不同批号的含糖平衡盐和替硝唑葡萄糖注射液,样品不经稀释,其细菌内毒素回收率均在50%-200%范围内,标准曲线的相关系数绝对值大于0.980,表明含糖平衡盐、替硝唑葡萄糖注射液对鲎试剂反应无干扰作用,3批样品同时用凝胶法检查,其结果均为阴性;氧氟沙星葡萄糖注射液对鲎试剂有干扰,稀释4倍可消除干扰。结论:含糖平衡盐、替硝唑葡萄糖注射液对鲎试剂反应无干扰作用,凝胶法可作为生产含糖平衡盐和替硝唑葡萄糖注射液时日常检查其细菌内毒素限值的方法;氧氟沙星葡萄糖注射液稀释4倍后可用凝胶法检查。

20AA复方氨基酸注射液细菌内毒素检查法的研究

目的研究20AA复方氨基酸注射液对细菌内毒素检查试验的干扰情况,建立其细菌内毒素的限量检查方法。方法参照《中国药典》2005年版二部附录细菌内毒素凝胶限量检查法进行实验,以不同生产厂家、不同批号的鲎试剂对多批供试品进行干扰试验。结果20AA复方氨基酸注射液经4倍稀释后对检测无干扰作用。结论该制剂可用细菌内毒素检查法替代家兔热原检查法控制产品质量,其内毒素限值为含内毒素量应<1.2EU·ml-1。